雙氧水微生物限度檢查方法驗證方案20121112

1、5%雙氧水溶液微生物限度檢查方法驗證方案編碼： VP/QBV-12-T090-00頁碼：7/7項目人員 ItemPersonnel部門/崗位Dept./Position簽名Signature日期Date方案起草Prepared byQC/檢驗員年 月 日 (Y) (M) (D) 方案審核Reviewed byQC/經(jīng)理助理 年 月 日 (Y) (M) (D)QA/副經(jīng)理 年 月 日 (Y) (M) (D)QA/經(jīng)理年 月 日 (Y) (M) (D)方案批準(zhǔn)Approved by質(zhì)量受權(quán)人 年 月 日 (Y) (M) (D)頒發(fā)部門Issued byQA生效日期Effective Date 年

2、月 日 (Y) (M) (D)分發(fā)部門Distributed to QC制作備份：1份Copies prepared: 1pcs目 錄1.概述32.目的33.依據(jù)及參考文件34.驗證小組和各部門職責(zé)35.驗證時間安排46.驗證內(nèi)容47.偏差情況68.變更79.驗證結(jié)果評價內(nèi)容7附件1：培訓(xùn)確認(rèn)表1附件2：文件檢查確認(rèn)表2附件3：設(shè)備確認(rèn)結(jié)果2附件4：試驗器材確認(rèn)結(jié)果4附件5：試驗用菌種確認(rèn)結(jié)果4附件6：培養(yǎng)基確認(rèn)結(jié)果5附件7：試劑確認(rèn)結(jié)果5附件8：器皿確認(rèn)結(jié)果6附件9：細(xì)菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結(jié)果記錄71.概述5%雙氧水溶液是本公司車間使用的消毒劑種類之一。因需建立5%雙氧水的微生物檢驗方法

3、，所以需對其微生物限度檢查方法進(jìn)行驗證。按中國藥典2010年版二部附錄XI J“微生物限度檢查法”要求，結(jié)合5%雙氧水溶液本身的性質(zhì)，本次確認(rèn)將采用以下微生物檢驗方法進(jìn)行確認(rèn)試驗取2ml 5%雙氧水溶液置100ml pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液中，用封閉式薄膜過濾器濾干，平行制備2張膜，將濾膜菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，置規(guī)定溫度，檢測細(xì)菌平皿培養(yǎng)72小時，檢測霉菌及酵母菌平皿培養(yǎng)120小時，測定菌數(shù)。2.目的根據(jù)中國藥典2010年版的要求確定本公司使用的5%雙氧水溶液微生物限度檢查方法。 3.依據(jù)及參考文件3.1中國藥典2010年版二部附錄XI J“微生物限度檢

4、查法”3.2中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范2010年版“微生物限度檢查法”3.3藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）3.4 微生物限度檢查法 SOP-QC-0213-V013.5 驗證管理規(guī)程 SOP-QA-017-V023.6QC消毒液配制使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-216-V004.驗證小組和各部門職責(zé)4.1驗證小組及對應(yīng)職責(zé)職位姓名部門具體職責(zé)組長代珊QC確認(rèn)總協(xié)調(diào)工作，并審核確認(rèn)的數(shù)據(jù)組員許維雅QC負(fù)責(zé)確認(rèn)方案和確認(rèn)報告的起草，負(fù)責(zé)檢品的檢測與確認(rèn)記錄的填寫，負(fù)責(zé)確認(rèn)數(shù)據(jù)的收集。辛海安黃微QC負(fù)責(zé)檢品的檢測與確認(rèn)記錄的填寫。林明鳳吳東丹劉利袁碧芳彭艷妃QC監(jiān)督確認(rèn)過程實施及確認(rèn)過程中的偏

5、差及OOS處理。吳東琴Q(mào)A負(fù)責(zé)確認(rèn)方案和確認(rèn)報告的歸檔保存。監(jiān)督確認(rèn)過程實施及確認(rèn)過程中的偏差及OOS處理。4.2驗證委員會姓名職務(wù)職責(zé)顏杰質(zhì)量受權(quán)人1.負(fù)責(zé)確認(rèn)方案及報告的批準(zhǔn)；2.負(fù)責(zé)確認(rèn)過程中出現(xiàn)的偏差/OOS的批準(zhǔn)放行。馬立如QA經(jīng)理1.負(fù)責(zé)確認(rèn)方案及報告的審核；2.負(fù)責(zé)確認(rèn)過程中出現(xiàn)的偏差/OOS的評估。張德志QA副經(jīng)理5.驗證時間安排時 間工作內(nèi)容2012年11月方案起草、審批2012年11月12月標(biāo)準(zhǔn)確認(rèn)、檢驗方法確認(rèn)2012年12月完成報告6.驗證內(nèi)容6.1驗證前準(zhǔn)備6.1.1培訓(xùn)確認(rèn)本次驗證內(nèi)容是否已對相關(guān)人員進(jìn)行培訓(xùn)，檢查確認(rèn)結(jié)果記錄在附件1培訓(xùn)確認(rèn)表。6.1.2文件確認(rèn)本

6、次驗證前驗證方案及相關(guān)指導(dǎo)的SOP是否已經(jīng)批準(zhǔn)。檢查確認(rèn)結(jié)果記錄在附件2文件檢查確認(rèn)表。如無相關(guān)文件，則需要增加發(fā)放。6.1.3儀器設(shè)備確認(rèn)檢查所涉及的設(shè)備是否符合實驗要求，確認(rèn)結(jié)果填寫在附件3 設(shè)備確認(rèn)結(jié)果中。可接受標(biāo)準(zhǔn)：設(shè)備應(yīng)經(jīng)驗證，在校準(zhǔn)有效期內(nèi)。6.1.4試驗器材確認(rèn)檢查所涉用試驗器材，確認(rèn)結(jié)果填寫在附件4試驗器材確認(rèn)結(jié)果中，可接受標(biāo)準(zhǔn)：試驗器材各配件應(yīng)齊全，無損壞。6.1.5試驗用菌種確認(rèn)檢查所涉及的試驗用菌種是否符合實驗要求，確認(rèn)結(jié)果填寫在附件5 試驗用菌種確認(rèn)結(jié)果中?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：菌種形態(tài)特征應(yīng)良好、菌種代數(shù)不得超過第五代。6.1.6培養(yǎng)基確認(rèn)檢查所涉及的培養(yǎng)基是否符合實驗要求，確

7、認(rèn)結(jié)果填寫在附件6 培養(yǎng)基確認(rèn)結(jié)果?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)在有效期內(nèi)，應(yīng)做培養(yǎng)基適應(yīng)性檢查。6.1.7試劑確認(rèn)檢查所涉用試劑是否符合實驗要求，確認(rèn)結(jié)果填寫在附件7試劑確認(rèn)結(jié)果中。可接受標(biāo)準(zhǔn)：試劑應(yīng)在有效期內(nèi)。6.1.8器皿確認(rèn)檢查所涉用器皿是否符合實驗要求。確認(rèn)結(jié)果填寫在附件8器皿確認(rèn)記錄中。可接受標(biāo)準(zhǔn)：一般玻璃器皿要求潔凈，無破損，量筒要進(jìn)行校準(zhǔn)。6.1.9驗證用培養(yǎng)基、緩沖液應(yīng)置121濕熱滅菌30分鐘，平皿、刻度吸管應(yīng)置200干熱滅菌2小時。6.2驗證方法6.2.1 菌液制備：接種金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，3035培養(yǎng)1

8、824小時；接種白色念珠菌新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基上， 2328培養(yǎng)2448小時。上述培養(yǎng)物分別用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)為50100cfu 的菌懸液。取黑曲霉菌經(jīng)2328培養(yǎng)57天新鮮改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)物，加入含0.05%（ml/ml）聚山梨酯的0.9%無菌氯化鈉溶液洗下孢子吸出，轉(zhuǎn)移至空試管中作為菌懸液原液，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯的0.9%無菌氯化鈉溶液進(jìn)行10倍梯度稀釋至含孢子數(shù)50100cfu/ml的孢子懸液。6.2.2菌液計數(shù)：分別取上述3種細(xì)菌菌液1ml加入培養(yǎng)皿，注入不超過45營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基1520ml，每種試驗菌平行制備2個平板，于3

9、035倒置培養(yǎng)48小時。分別取上述2種真菌菌液1ml加入培養(yǎng)皿，注入不超過45玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基1520ml，每種試驗菌平行制備2個平板，于2328倒置培養(yǎng)72小時。6.2.3 5%雙氧水的配制：按照QC消毒液配制使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-216-V00配制上述5%雙氧水。6.2.4細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)回收率測定：驗證試驗每種5%雙氧水應(yīng)進(jìn)行3次獨(dú)立的平行試驗，并計算各試驗菌每次試驗的回收率。要求回收率不低于70%。用薄膜過濾進(jìn)行驗證，具體擬定方法如下：6.2.4.1試驗組：取2ml5%雙氧水和1ml驗證用菌液（含50100CFU試驗菌）置100ml pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液中，

10、用封閉式薄膜過濾器濾干，平行制備2張膜，將濾膜菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，置規(guī)定溫度培養(yǎng)4872小時，測定菌數(shù)。6.2.4.2供試品組：按試驗組檢驗方法（不加試驗菌）測定供試品本底細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)，檢測細(xì)菌平皿培養(yǎng)72小時，檢測霉菌及酵母菌平皿培養(yǎng)120小時，測定菌數(shù)。6.2.4.3菌液組：測定所加的試驗菌數(shù)。6.2.4.4稀釋劑對照組：用相應(yīng)的稀釋液替代5%雙氧水，按試驗組的制備方法和菌落計數(shù)法測定菌數(shù)。6.2.4.5試驗結(jié)果：結(jié)果見附件9細(xì)菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結(jié)果記錄6.2.4.6結(jié)果判斷：稀釋劑對照組的菌回收率均應(yīng)不低于70%。若試驗組的菌回收率均不低

11、于70%，則可按該供試液制備方法和計數(shù)法測定供試品的細(xì)菌、霉菌或酵母菌數(shù)；若任一次試驗中試驗組的菌回收率低于70%，需分析原因，采取適當(dāng)方法重新驗證。注：試驗組回收率（%）=（試驗組平均菌落數(shù)-供試品對照組平均菌落數(shù)）÷菌液組平均菌落數(shù)×100%稀釋劑對照組回收率（%）= 稀釋劑對照組平均菌落數(shù)÷菌液組平均菌落數(shù)×100%6.2.4.7結(jié)果統(tǒng)計 實驗結(jié)果統(tǒng)計填寫在附件9細(xì)菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結(jié)果記錄7.偏差情況驗證過程中如果有任何偏差應(yīng)及時記錄，分析原因，評價是否是關(guān)鍵偏差，并提出整改措施，并將偏差附于驗證報告中。8.變更驗證過程中是否有變更，如有變

12、更在再驗證報告中進(jìn)行說明。9.驗證結(jié)果評價內(nèi)容對驗證結(jié)果進(jìn)行綜合評價，內(nèi)容包括但不限于：確認(rèn)實驗是否有遺漏；確認(rèn)驗證過程中是否有偏差，偏差是否已經(jīng)采取糾偏措施和預(yù)防措施；確認(rèn)記錄是否完整；是否需要進(jìn)一步補(bǔ)充實驗。評價必須以書面形式寫出報告。附件1：培訓(xùn)確認(rèn)表培訓(xùn)確認(rèn)表培訓(xùn)人/培訓(xùn)日期培訓(xùn)對象部門職責(zé)簽名代珊QC確認(rèn)總協(xié)調(diào)工作，并審核確認(rèn)的數(shù)據(jù)彭艷妃QC監(jiān)督確認(rèn)過程實施及確認(rèn)過程中的偏差及OOS處理。辛海安QC負(fù)責(zé)確認(rèn)方案和確認(rèn)報告的起草，負(fù)責(zé)檢品的檢測與確認(rèn)記錄的填寫，負(fù)責(zé)確認(rèn)數(shù)據(jù)的收集。黃微QC負(fù)責(zé)檢品的檢測與確認(rèn)記錄的填寫。吳東丹QC劉利QC袁碧芳QC林明鳳QC吳東琴Q(mào)A負(fù)責(zé)確認(rèn)方案和確認(rèn)

13、報告的歸檔保存。監(jiān)督確認(rèn)過程實施及確認(rèn)過程中的偏差及OOS處理。確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期： 3硫酸氫氯吡格雷片微生物限度檢查方法確認(rèn)編碼：R/QBV-11-T008-00頁碼：3/8附件2：文件檢查確認(rèn)表文件檢查確認(rèn)表SOP名稱SOP編號是否已批準(zhǔn)消毒劑管理規(guī)程SOP-PR-007-V02是 否驗證管理規(guī)程SOP-QA-017-V02是 否生測室管理規(guī)程SOP-QC-005-V01是 否微生物限度檢查法SOP-QC-0213-V01是 否培養(yǎng)基管理規(guī)程SOP-QC-017-V01是 否菌種管理規(guī)程SOP-QC-012-V02是 否XG1.D型脈動真空滅菌柜使用保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-Q

14、C-0343-V01是 否培養(yǎng)箱使用操作規(guī)程SOP-QC-303-V00是 否電子天平使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-317-V01是 否潔凈工作臺使用保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-304-V00是 否生物安全柜使用保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-0386-V00是 否Haier 藥品保存箱使用及保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-0395-V00是 否評價：確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期： 25%雙氧水溶液微生物限度檢查方法驗證編碼：R/QBV-11-T016-00 頁碼：3/7附件3：設(shè)備確認(rèn)結(jié)果 設(shè)備確認(rèn)結(jié)果設(shè)備名稱型 號生產(chǎn)廠家及出廠編號校準(zhǔn)有效期至驗證編號霉菌培養(yǎng)箱MJ-300BS-II上海

15、新苗醫(yī)療器械制造有限公司(0812240005)霉菌培養(yǎng)箱MJ-300BS-II上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司(1005240001)生化培養(yǎng)箱SPX-300BS- II上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司(0405011)電熱恒溫培養(yǎng)箱DHP-9162上海一恒科技有限公司（035184）脈動真空滅菌柜XG1.DTX-0.24山東新華醫(yī)療器械股份有限公司（20122024）脈動真空滅菌柜XG1.DTX-0.36B山東新華醫(yī)療器械股份有限公司（20100953）生物安全柜BSC-1600A2蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司（J10060420）生物安全柜BSC-1600A2蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司（J100604

16、21）生物安全柜BSC-1300A2蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司（J10050341）電子天平GF-200日本AND(14678558)電子天平HF-200日本AND(12850048)評價：確認(rèn)人/日期： QA 復(fù)核人/日期：75%雙氧水溶液微生物限度檢查方法驗證編碼：R/QBV-11-T016-00頁碼：7/7附件4：試驗器材確認(rèn)結(jié)果試驗器材確認(rèn)結(jié)果名稱型 號來 源檢查項目及標(biāo)準(zhǔn)檢查結(jié)果光學(xué)顯微鏡YS100Nikon各配件應(yīng)齊全，無損壞封閉式無菌檢查薄膜過濾器STV2、STV3型浙江寧海白石藥檢儀器廠完整，潔凈，無破損微孔濾膜孔徑0.45m，直徑50mm杭州高得泰林有限公司完整，無破損評價：確

17、認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期：附件5：試驗用菌種確認(rèn)結(jié)果試驗用菌種確認(rèn)結(jié)果菌種名稱及編號來 源保存方法及條件菌種代數(shù)（不得超過第五代）/形態(tài)特征金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003中國藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面28大腸埃希菌CMCC（B）44102中國藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面28枯草芽孢桿菌CMCC（B）63501中國藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面28白色念珠菌CMCC（F）98001中國藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面28黑曲霉CMCC（F）98003廣州市藥品檢驗所培養(yǎng)基斜面28評價：確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期：附件6：培養(yǎng)基確認(rèn)結(jié)果培養(yǎng)基確認(rèn)結(jié)果培養(yǎng)基名稱來 源檢查項目及標(biāo)準(zhǔn)批

18、號/有效期至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基北京三藥科技開發(fā)公司1.應(yīng)在有效期內(nèi)2.應(yīng)做適應(yīng)性檢查玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基北京三藥科技開發(fā)公司1.應(yīng)在有效期內(nèi)2.應(yīng)做適應(yīng)性檢查評價：確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期：附件7：試劑確認(rèn)結(jié)果試劑確認(rèn)結(jié)果試劑名稱規(guī)格來 源檢查項目及標(biāo)準(zhǔn)批號/有效期至pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液250g/瓶北京三藥科技開發(fā)公司應(yīng)在有效期內(nèi)氯化鈉500g/瓶廣州化學(xué)試劑廠應(yīng)在有效期內(nèi)苯扎溴銨溶液（新潔爾滅溶液）500ml/瓶廣東恒健制藥有限公司應(yīng)在有效期內(nèi)洗必泰5kg/箱錦州九泰制藥有限責(zé)任公司應(yīng)在有效期內(nèi)吐溫80500ml/瓶天津市大茂化學(xué)試劑廠應(yīng)在有效期內(nèi)雙氧水應(yīng)在有效期內(nèi)評價：確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期：附件8：器皿確認(rèn)結(jié)果器皿確認(rèn)結(jié)果容器名稱規(guī)格型號檢查項目及標(biāo)準(zhǔn)檢查結(jié)果培養(yǎng)皿90mm潔凈，無破損燒杯1000ml、500ml潔凈，無破損試管18mm×180mm、30 mm×200mm潔凈，無破損刻度吸管10 ml 、5 ml2 ml、1ml潔凈，無破損量筒500ml、100ml潔凈，無破損應(yīng)校準(zhǔn)評價：確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期：885%雙氧水溶液微生物限度檢查方法驗證編碼：R/QBV-11-T016-00頁碼：8/7附件9：細(xì)菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結(jié)果記錄細(xì)菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結(jié)果記錄檢品名稱