促進消化功能評價方法(征求意見稿)及修訂說明

1、附件9：國家食品藥品監(jiān)督管理局許可司： 根據(jù)2012年8月1日保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范修訂研討會議專家提出的意見，我們對“有助于促進消化功能檢驗方法”進行了再次修改，形成第二稿?，F(xiàn)提交“有助于促進消化功能檢驗方法（征求意見稿）”（附件一）“保健食品評價試驗項目、試驗原則及結(jié)果判定”（附件二）；“人體試食原始記錄格式、動物試驗原始記錄格式”（附件三）；“編制說明”（附件四）；“專家意見匯總表”（附件五）。北京市疾病預防控制中心2012年8月29日促進消化功能評價方法（征求意見稿）保健食品評價保健食品評價試驗項目、試驗原則及結(jié)果試驗項目、試驗原則及結(jié)果判定判定Items, Principles

2、and Result Assessment1 試驗項目1.1 動物實驗1.1.1 體重、體重增重、攝食量和食物利用率1.1.2 小腸運動實驗1.1.3 消化酶測定1.2 人體試食試驗1. 2.1 臨床癥狀觀察1. 2.2 胃/腸運動實驗 2 試驗原則2.1 動物實驗和人體試食試驗所列指標均為必做項目。2.2 在進行人體試食試驗時，應對受試樣品的食用安全性作進一步的觀察。3 結(jié)果判定3.1 動物實驗：動物體重、體重增重、攝食量、食物利用率，小腸運動實驗和消化酶測定三方面中任二方面實驗結(jié)果陽性，可判定該受試樣品有助于促進消化功能動物實驗結(jié)果陽性。3.2 人體試食試驗：臨床癥狀積分結(jié)果和胃/腸運動實

3、驗結(jié)果陽性，可判定該受試樣品有助于促進消化功能人體試食試驗結(jié)果陽性。3.3動物實驗和人體試食試驗均為陽性結(jié)果，可判斷受試樣品具有有助于促進消化功能的作用。21促進消化功能檢驗方法Method for the Assessment of Facilitating Digestion Function1 動物實驗1.1 實驗原理胃腸道是營養(yǎng)物質(zhì)的攝取、消化與吸收的器官，對食物的消化作用主要是依靠其運動、消化酶的分泌來完成的。如果某一保健食品能對這一環(huán)節(jié)或幾環(huán)節(jié)有調(diào)節(jié)作用，那它就有可能有促進消化功能的作用。1.2 實驗項目促進消化功能動物實驗包括大鼠體重、體重增重、攝食量和食物利用率實驗；小腸運動實

4、驗；消化酶的測定等三部分。1.3 實驗動物根據(jù)實驗項目可選用單一性別成年小鼠或大鼠。小鼠18g22g，每組10只15只，大鼠120g150g，每組8只12只。1.4 劑量分組及受試樣品給予時間實驗設三個劑量組和一個陰性對照組，以人體推薦量的10倍（小鼠）或5倍（大鼠）為其中的一個劑量組，另設二個劑量組，必要時設陽性對照組和模型對照組。受試樣品給予時間30d（小腸運動實驗受試樣品給予時間7d15d），必要時可延長至45d。1.5 實驗內(nèi)容1.5.1 體重、體重增重、攝食量和食物利用率選用同一性別的大鼠。實驗開始時動物體重的差異應不超過平均體重的10。分不同劑量實驗組和陰性對照組，經(jīng)口給予受試樣品

5、，每周測2次體重和食物攝入量。實驗結(jié)束時計算體重、體重增重、攝食量和食物利用率。1.5.2 小腸運動實驗選用同一性別的小鼠，分不同劑量實驗組、空白對照組和模型對照組，模型對照組用復方地芬諾酯或洛哌丁胺造模。可用墨汁或炭末加阿拉伯樹膠作為指示劑。經(jīng)口給予受試樣品。實驗結(jié)束前禁食不禁水20h，于測定當天各實驗組和空白及模型對照組再給予一次受試樣品或蒸餾水，30min后各實驗組和模型對照組給予復方地芬諾酯5mg/kgbw 6mg/kgbw或洛哌丁胺5mg/kgbw 6mg/kgbw(依據(jù)復方地芬諾酯或洛哌丁胺的實用劑量取用，用研缽研碎呈粉末后按實驗所需濃度配制，注意要待溶質(zhì)完全溶解、充分搖勻后使用。

6、)，空白對照組給予蒸餾水，30min后各組再給予指示劑(精確稱取阿拉伯樹膠100g，加水800ml，煮沸至溶液透明，稱取活性碳粉100g加至上述溶液中煮沸三次，待溶液涼后定容到1000ml，于冰箱中4保存，用前搖勻)，25min后斷頸處死動物，計算墨汁推進率。按下式計算墨汁推進率：墨汁推進率（%） 墨汁推進長度（cm）/ 小腸總長度（cm） ×100%。 1.5.3 消化酶的測定選用同一性別的大鼠。分不同劑量實驗組和陰性對照組，實驗開始時動物體重的差異應不超過平均體重的10。經(jīng)口給予受試樣品。實驗結(jié)束前各組動物禁食不禁水24h，采用乙醚麻醉大鼠幽門結(jié)扎法收集一定時間內(nèi)排出的胃液，測定

7、單位時間內(nèi)胃液量。取胃液1mL放入50mL的三角燒瓶中，加入0.05mol/L鹽酸溶液15mL搖勻，放入新鮮制作的蛋白管兩根。塞好瓶口，在37恒溫箱中孵育24h，取出蛋白管，用尺測量蛋白管兩端透明部分的長度（mm），以四端之值求其平均值。計算胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量。胃蛋白酶活性單位（/mL）四端蛋白管透明部分長度均值2×16胃蛋白酶排出量（/h）胃蛋白酶活性×每h胃液量1.6 數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定 計量資料可用方差分析，但需按方差分析的程序先進行方差齊性檢驗，方差齊，計算F值，F(xiàn)值< F0.05，結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性；F值F0.05，P0.05，用多個實驗

8、組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進行統(tǒng)計；對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗進行統(tǒng)計。食物利用率和墨汁推進率資料需進行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換，XSin-1，式中P為食物利用率和墨汁推進率，用小數(shù)表示，然后再進行方差分析。1.6.1 體重、體重增重、攝食量和食物利用率實驗組與陰性對照組比較，體重、體重增重、攝食量三項指標中任一指標增加，經(jīng)統(tǒng)計處理差異有顯著性，且食物利用率與陰性對照組比較不明顯降低，可判定該實驗結(jié)果陽性。1.6.2 小腸運動實驗在模型成立的前提下，實驗組與模型對照組比較，墨汁推進率

9、增加，經(jīng)統(tǒng)計處理差異有顯著性，可判定該實驗結(jié)果陽性。1.6.3 消化酶的測定實驗組與陰性對照組比較，胃液量、胃蛋白酶活性，胃蛋白酶排出量三項指標中任一指標增加，經(jīng)統(tǒng)計處理差異有顯著性，可判定該實驗結(jié)果陽性。結(jié)果判定動物體重、體重增重、攝食量、食物利用率，小腸運動實驗和消化酶測定三方面中任二方面實驗結(jié)果陽性，可判定該受試樣品有助于促進消化功能動物實驗結(jié)果陽性。動物體重、體重增重、攝食量、食物利用率，小腸運動實驗和消化酶測定三方面中任二方面實驗結(jié)果陽性，可判定該受試樣品動物實驗結(jié)果陽性。 2. 人體試食試驗2.1受試者納入標準選擇功能性消化不良，伴有長期胃腸不適，主訴食欲不振，早飽、氣多，胃腸脹滿

10、，嘔吐，不明原因慢性腹瀉或大便秘結(jié)等18至65歲的自愿受試者。2.2 受試者排除標準：2.2.1 急性腹瀉者。2.2.2 嚴重器質(zhì)性病變引起的消化不良者。2.2.3 體質(zhì)虛弱無法接受試驗者。2.2.4 合并有心血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴重全身性疾病患者。2.2.5 短期內(nèi)服用與受試功能有關的物品，影響到對結(jié)果的判斷者。2.2.6 未按要求服用受試樣品，無法判斷試食結(jié)果者。2.3 試驗設計及分組要求采用自身和組間兩種對照設計。按受試者的消化癥狀輕重隨機分為試食組和對照組，盡可能考慮影響結(jié)果的主要因素如年齡、性別、病程等，進行均衡性檢驗，以保證組間的可比性。每組受試者有效例數(shù)不少于50例。2.4

11、受試樣品的劑量和使用方法試食組按推薦服用方法、服用量服用受試產(chǎn)品，對照組用安慰劑或空白對照，也可用具有同樣作用的陽性物。受試樣品給予時間30d，必要時可延長至45d。試驗期間不改變原來的飲食習慣，正常飲食。2.5 觀察指標2.5.1 安全性指標2.5.1.1 一般狀況 包括精神、睡眠、飲食、大小便、血壓等2.5.1.2 血、尿便常規(guī)檢查2.5.1.3 肝、腎功能檢查 2.5.1.4 胸透、心電圖、腹部B超檢查（在試驗開始前檢查一次）2.5.2 功效性指標：2.5.2.1 臨床癥狀觀察：準確記錄受試者試驗前后的臨床癥狀，按下表給予量化評分，比較試驗前后癥狀積分的變化。2.5.2.2 胃腸運動試驗

12、：所有受試者在試驗前、試驗結(jié)束時均進行胃腸運動檢查，推薦用鋇條透視法（在進食的條件下檢查）。2.6 數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定試驗數(shù)據(jù)為計量資料，可用t檢驗進行分析。凡自身對照資料可以采用配對t檢驗，兩組均數(shù)比較采用成組t檢驗，后者需進行方差齊性檢驗，對非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)方差齊后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進行t檢驗；若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差齊要求，改用t檢驗或秩和檢驗；但變異系數(shù)太大（如CV>50）的資料應用秩和檢驗。表 臨床癥狀積分癥狀 輕（1分）中（2分）重（3分）食欲食欲較差食欲差食欲很差腹痛持續(xù)時間短，不需服藥經(jīng)常發(fā)作，引發(fā)兩脅不適頻繁發(fā)作，引發(fā)兩脅疼痛腹脹

13、腹脹有時發(fā)作腹脹較頻繁，在較長時間內(nèi)不緩解腹脹頻繁噯氣 泛酸 燒心間有發(fā)作，偶有噯氣、泛酸、燒心飲食不適即泛酸、燒心引起兩脅不適較頻繁發(fā)作，泛酸、燒心可有兩脅疼痛失眠 疲乏偶有發(fā)作飲食不適即發(fā)作較頻繁發(fā)作2.6.1 臨床癥狀結(jié)果判定2.6.1.1試食前后試食組自身比較及試食后試食組與空白對照組組間比較， 臨床癥狀積分明顯減少，經(jīng)統(tǒng)計處理差異有顯著性，可判定該指標陽性。（適用于選用空白對照組）2.6.1.2試食前后試食組自身比較臨床癥狀積分明顯減少，經(jīng)統(tǒng)計處理差異有顯著性，且試食后試食組與陽性對照組組間比較，臨床癥狀積分無明顯增加，可判定該指標陽性。（適用于選用陽性對照組） 2.6.2 胃腸運動

14、試驗結(jié)果判定試食前后試食組自身比較及試食后試食組與對照組組間比較，胃腸運動試驗指標明顯改善，且鋇條排出率大于等于30%為有效，經(jīng)統(tǒng)計處理差異有顯著性，可判斷該指標陽性。2.6.3人體試食試驗結(jié)果判定x. 臨床癥狀積分結(jié)果和胃/腸運動實驗結(jié)果陽性，可判定該受試樣品有助于促進消化功能人體試食試驗結(jié)果陽性。臨床癥狀積分結(jié)果和胃腸運動實驗結(jié)果均為陽性，可判定該受試樣品人體試食試驗結(jié)果陽性。附件：人體試食原始記錄格式、動物試驗原始記錄人體試食原始記錄格式、動物試驗原始記錄格式格式有助于促進消化功能保健食品人體試食觀察表產(chǎn)品名稱_ 編號_姓名_ 性別_ 年齡_ 職業(yè)_ 民族_住址或電話_既往史_家族史_胃

15、鏡檢查結(jié)果：_誘因： 情志不暢 飲食不節(jié) 勞累 受寒吸煙史： 年 支/日 飲酒史： 年 兩/日發(fā)病時間_ 病程_年工作性質(zhì): 腦力 輕體力 重體力癥狀變化觀察項目 試 食 前 年 月 日 試 食 中年 月 日試 食 后年 月 日食欲不振早飽餐后飽脹不適上腹痛反酸 燒心噯氣惡心便秘 便溏 小 結(jié)注：癥狀 重度3分；中度2分；輕度1分；無癥狀0分體格檢查 項 目試食前試食后項 目試食前 試食后發(fā)育營養(yǎng)狀況脊柱四肢五官及頸部胸部：心，肺腹部檢查：壓痛 （肝脾）心率（次/分）血壓（mmHg）精 神小 便臨床檢測項 目結(jié) 果項 目結(jié) 果項 目結(jié) 果EKGB超胸 透化驗檢查 項 目試食前試食后項 目試食前

16、試食后HGB g/LCREumol/LRBC*1012/LBUNmmol/LWBC*109/LTC mmol/LALT u/LTG mmol/LAST u/LTP G/LGLUmmol/LALB G/L胃動力檢查項 目試 食 前試 食 后胃腸運動試驗鋇條試驗報告：試食前_試食后_診 斷： 療效判斷： 有效 無效并發(fā)癥： 不良反應：觀 察 者： 年 月 日 有助于促進消化功能保健食品動物試驗原始記錄格式1劑量設計：推薦量 /人·日( /kgBW)樣品前處理及配制： 1.1 墨汁配制：準確稱取阿拉伯樹膠100g，加去離子水800ml,煮沸至溶液透明，稱取活性炭50g加入上述溶液混勻，煮沸

17、3次，冷卻至室溫加去離子水定容至1000ml。于4冰箱中存放，用前搖勻。1.2 0.5mg/ml復方地芬諾酯懸液配制：取復方地芬諾片20片(2.5mg/片)，用乳缽研磨后，加去離子水至100ml，臨用前配制。1.3 0.05mol/L鹽酸：取12N濃鹽酸1.25ml加去離子水至300ml。2 操作步驟:2.1 小腸運動實驗： 動物檢疫 年 月 日- 年 月 日，未見異常，可用于試驗。于 年 月 日選健康小鼠 只，雌性，隨機分為5組，每組 只。分別按推薦日攝入量( /kgBW)即 、 、 10、 倍即 、 、 /kgBW為三個劑量組。以 為溶劑，按 ml/10gBW經(jīng)口灌胃。陰性對照組按 ml/

18、10gBW經(jīng)口灌胃給予溶劑。模型對照組按 ml/10gBW經(jīng)口灌胃給予溶劑。各組每天灌胃一次，連續(xù) 天。于 月 日，隔夜禁食16h，不限水。于 月 日進行檢測小腸運動實驗。小腸運動實驗以復方地芬諾酯（5mg/kgBW）按10mL/kgBW對劑量組及模型對照組動物經(jīng)口灌胃。陰性對照組給予等量去離子水經(jīng)口灌胃。30min后，各劑量組動物按10mL/kgBW經(jīng)口給予以含不同劑量受試物的墨汁，對照組動物給予墨汁，按10mL/kgBW經(jīng)口灌胃。25min后處死，剖腹測量小腸全長及墨汁前沿與幽門的距離，按下式計算墨汁推進率。2.2測定：體重、體重增長、攝食量、食物利用率：動物檢疫 年 月 日- 年 月 日

19、，未見異常，可用于試驗。 月 日選健康 雄性 種大鼠 只，按體重隨機分為 組，每組 只。動物單籠飼養(yǎng)。 分別按推薦日攝入量( /kgBW) 、5、 倍，即 /kgBW為三個劑量組。以 為溶劑，按 ml/100gBW經(jīng)口灌胃。陰性對照組按 ml/100gBW經(jīng)口灌胃給予溶劑。各組每天灌胃一次，連續(xù) d。每w稱體重 次,記錄進食量。于 月 日，隔夜禁食24h，不限水。于 月 日各組動物測定胃液量和消化酶。2.3消化酶的測定：受試動物逐只用戊巴比妥鈉(50mg/kgBW)麻醉，固定于解剖臺，無菌條件下，于腹腔做一小切口，小心找到胃幽門結(jié)扎，常規(guī)縫合。動物繼續(xù)禁食，不禁水。 h后，打開腹腔，結(jié)扎噴門，

20、取出全胃，用試管取出全部胃液，計算單位時間內(nèi)胃液分泌量，取胃液1 ml放入帶蓋平皿中，加入0.05mol/L鹽酸溶液15ml，搖勻，放入新鮮制作蛋白管2支，封蓋，置37溫箱孵育24h，取出蛋白管，測量透明部分長度(mm)，求四端均值。測定胃蛋白酶活性。蛋白管制作方法：采用麥特(Mett)的毛細管法，將內(nèi)徑1-2mm粗細均勻的毛細血管截成10cm ,洗凈烤干。取適量蛋清充分打勻后，用紗布過濾，將上述毛細血管利用虹吸作用，灌滿蛋清(管內(nèi)應無氣泡混入)。放置于85熱蒸汽使蛋白凝固。待冷卻后，取出石蠟將蛋白管兩端封固，貯冰箱中備用。單位時間胃液量計算：單位時間胃液量(ml/h)=胃液總量/ h消化酶計

21、算：胃蛋白酶活性單位(m/ml)=四端蛋白管透明帶長度均值2*16胃蛋白酶排出量(m/h)=胃蛋白酶活性*單位時間胃液量2.4統(tǒng)計：數(shù)據(jù)采用SPSS 11.0 for windows 軟件進行方差分析。小腸運動實驗測定數(shù)據(jù)經(jīng) 轉(zhuǎn)換，并經(jīng)方差齊性檢驗再進行方差分析。若變量轉(zhuǎn)換后仍未達到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗進行統(tǒng)計。食物利用率及胃蛋白酶測定試驗動物一般情況原始記錄日期溫度()()濕度(RH%)RH)中毒體征、死亡情況（以下空白）檢測者： 復核者： 年 月 日 年 月 日食物利用率組別總增重總耗食量第四端 總利用率總利用率轉(zhuǎn)換后胃蛋白酶組別第一端()第二端第三端第四端胃Pr酶活性4h胃液

22、量1h胃液量胃Pr酶排出量（以下空白）檢測者： 復核者： 年 月 日 年 月 日胃液和胃蛋白酶含量測定記錄 編號對照組低劑量組中劑量組高劑量組h胃液(ml)蛋白消化(mm)h胃液(ml)蛋白消化(mm)h胃液(ml)蛋白消化(mm)h胃液(ml)蛋白消化(mm)第1端第2端第3端第4端第1端第2端第3端第4端第1端第2端第3端第4端第1端第2端第3端第4端12345678910（以下空白）檢測者： 復核者： 年 月 日 年 月 日 墨汁推進率記錄 單位：cm編號 陰性對照組 植物油組 低劑量組 中劑量組 高劑量組 模型對照組 墨汁推進 小腸總長 墨汁推進 小腸總長 墨汁推進 小腸總長 墨汁推進

23、 小腸總長 墨汁推進 小腸總長 墨汁推進 小腸總長1 2345678910 （以下空白）檢測者： 復核者： 年 月 日 年 月 日 體重增長記錄 單位：g編號 初始重 第一周 第二周 第三周 1 2345678910（以下空白）檢測者： 復核者： 年 月 日 年 月 日 促進消化功能評價方法修訂說明一、承擔單位北京市疾病預防控制中心為本項目的牽頭單位。本單位是國家標準“食品安全性毒理學評價程序和方法”GB15193.X-2003修訂版、化妝品衛(wèi)生規(guī)范-2007年版等多項國家標準和技術(shù)規(guī)范的起草單位之一，是保健食品功能檢驗單位，在保健食品功能學方法應用、國家標準、規(guī)范的起草和方法的驗證方面積累了

24、較豐富的經(jīng)驗。因此在保健食品功能檢驗方法的制定中有很好的基礎和經(jīng)驗。二、主要工作過程本項目于2009年11月啟動。由北京市疾病預防控制中心衛(wèi)生毒理所牽頭成立項目協(xié)作組，中國中醫(yī)科學院西苑醫(yī)院、衛(wèi)生部北京醫(yī)院和天津市疾病預防控制中心三家為本項目的協(xié)作單位。2010年1月到3月進行了廣泛的意見征詢及文獻調(diào)研工作，于2010年3月召開了“關于促消化人體試食修訂工作方案研討”課題協(xié)作組第一次工作會議，對“有助于促消化人體試食檢驗方法修訂”原則和具體指標作了充分的討論，制定了工作計劃和修訂方案，協(xié)作單位進行了明確分工，形成了“有助于促消化功能檢驗方法”人體試食試驗方案初稿。會后又分別征求了相關專家意見，

25、對初稿再次進行了修改。2010年5月召開了第二次研討會，確定了試食樣品，細化試驗方案，對試食人群的篩選、提高試食人群依從性等具體質(zhì)量控制方案進行了討論，形成了“有助于促消化功能檢驗方法”人體試食試驗方案和統(tǒng)一的原始記錄表格。中國中醫(yī)科學院西苑醫(yī)院、衛(wèi)生部北京醫(yī)院和天津市疾病預防控制中心三家協(xié)作單位按照統(tǒng)一要求于2010年5月2011年6月進行“有助于促消化功能檢驗方法”人體試食試驗方法驗證，并進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，最終形成了有助于促消化功能檢驗方法（征求意見稿）。三、編制原則1合法性原則：修訂工作符合國家相關法律法規(guī)并遵循相關管理部門的政策要求。2. 科學性原則：修訂工作遵循科學性的原則，廣泛征求相關

26、領域?qū)＜业囊庖姴⑦M行文獻調(diào)研，各項技術(shù)指標應具有科學依據(jù)并經(jīng)科學驗證。3. 先進性原則：注意國內(nèi)管理部門發(fā)布的新管理措施，兼顧了技術(shù)發(fā)展的前瞻性。4. 實用性原則：從保護公眾身體健康的角度出發(fā)，充分考慮國情，兼顧我國保健食品功能檢測機構(gòu)的水平，對內(nèi)容進行客觀量化和具體明確化，盡量提高可操作性。5協(xié)調(diào)性原則：盡可能與本規(guī)范的其他部分一致，注意合理性與有效性、通俗性和規(guī)范性之間的關系。四、確定相關技術(shù)內(nèi)容及新舊規(guī)范的對比本部分的主要內(nèi)容涉及有助于促消化功能檢驗人體試食試驗的基本原則、方法和要求，適用于檢測保健食品的有助于促消化功能檢驗。新規(guī)范的本部分內(nèi)容包括受試者納入標準、受試者排除標準、試驗設計

27、及分組要求、受試物的劑量和使用方法、觀察指標、功效判定標準、數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析、結(jié)果判定。與原檢驗方法比較，在受試者納入標準、受試者排除標準、觀察指標及結(jié)果判定四方面進行了修改。對試食試驗原始記錄及報告所需要的基本信息也作了要求。與原檢驗方法相比，試驗內(nèi)容更詳盡，更具有可操作性，語言編寫及描述更科學。具體修改部分見下表。序號原方法現(xiàn)方法修訂理由序號內(nèi)容序號內(nèi)容1名稱“促進消化功能”有助于促進消化功能更科學21.3實驗動物 小鼠1822克，每組1015只，大鼠120150克，每組812只。1.3實驗動物 小鼠18g22g，每組10只15只，大鼠120g150g，每組8只12只。更科學31.4劑量

28、分組及受試樣品給予時間 受試樣品給予時間30天（小腸運動實驗受試樣品給予時間1530天），必要時可延長至45天。1.4劑量分組及受試樣品給予時間 受試樣品給予時間30d（小腸運動實驗受試樣品給予時間7d15d），必要時可延長至45d。更科學，與“通便功能”一致41.5.2“小時”、“分鐘”1.5.2改為“h”、“min”更科學51.5.3“小時”1.5.3改為“h”更科學61.5.2 小腸運動實驗原方法：1.5.2 小腸運動實驗選用同一性別的小鼠，分不同劑量實驗組、空白對照組和模型對照組，模型對照組用復方地芬諾酯造模?？捎媚蛱磕┘影⒗畼淠z作為指示劑。經(jīng)口給予受試樣品。實驗結(jié)束前禁食不禁水

29、16小時，于測定當天各實驗組和空白及模型對照組再給予一次受試樣品或蒸餾水，30分鐘后各實驗組和模型對照組給予復方地芬諾酯（0.0250.05），空白對照組給予蒸餾水，30分鐘后各組再給予指示劑，25分鐘后斷頸處死動物，計算墨汁推進率。按下式計算墨汁推進率： 墨汁推進長度（cm） 墨汁推進率×100%小腸總長度（cm） 1.5.2 小腸運動實驗 與“通便功能”做一致修改。改為1.5.2 小腸運動實驗選用同一性別的小鼠，分不同劑量實驗組、空白對照組和模型對照組，模型對照組用復方地芬諾酯或洛哌丁胺造模。可用墨汁或炭末加阿拉伯樹膠作為指示劑。經(jīng)口給予受試樣品。實驗結(jié)束前禁食不禁水20h，于測

30、定當天各實驗組和空白及模型對照組再給予一次受試樣品或蒸餾水，30min后各實驗組和模型對照組給予復方地芬諾酯5mg/kgbw 6mg/kgbw或洛哌丁胺5mg/kgbw 6mg/kgbw(依據(jù)復方地芬諾酯或洛哌丁胺的實用劑量取用，用研缽研碎呈粉末后按實驗所需濃度配制，注意要待溶質(zhì)完全溶解、充分搖勻后使用。)，空白對照組給予蒸餾水，30min后各組再給予指示劑(精確稱取阿拉伯樹膠100g，加水800ml，煮沸至溶液透明，稱取活性碳粉100g加至上述溶液中煮沸三次，待溶液涼后定容到1000ml，于冰箱中4保存，用前搖勻)，25min后斷頸處死動物，計算墨汁推進率。按下式計算墨汁推進率：墨汁推進率（

31、%） 墨汁推進長度（cm）/ 小腸總長度（cm） ×100%。與“通便功能”一致，更合理72人體試食試驗 根據(jù)不同受試樣品適應人群的區(qū)別，促進消化功能人體試食試驗建立兩套試食試驗方案，即針對適應人群主要為兒童的兒童方案和適應人群主要為成人的成人方案。刪除本段描述新方法僅保留成人方案822.1 兒童方案取消。保護兒童、青少年等脆弱人群92.2.1受試者納入標準 選擇功能性消化不良，伴有長期胃腸不適，主訴食欲不振，早飽、氣多，胃腸脹滿，嘔吐，不明原因慢性腹瀉或大便秘結(jié)等自愿受試者。2.1受試者納入標準 增加年齡范圍。改為“選擇功能性消化不良，伴有長期胃腸不適，主訴食欲不振，早飽、氣多，胃腸脹滿，等18至65歲的自愿受試者?！北Ｗo兒童、