探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化PPT課件

1、基 礎 回 扣1、酵母菌酵母菌是單細胞真核生物。生長周期短，增殖速度快，還可以用酵母菌作為實驗材料研究（探究酵母菌的呼吸方式，判斷細胞的死活探究膜的透性）第1頁/共30頁2、種群數(shù)量的變化 種群數(shù)量的變化包括增長、波動、穩(wěn)定、下降等 “S”型曲線有一個K值，即環(huán)境容納量。 種群數(shù)量的增長也受到許多環(huán)境因素（如溫度、培養(yǎng)液的pH、培養(yǎng)液的養(yǎng)分種類和濃度、代謝產物等）的影響。第2頁/共30頁探究過程探究過程 1 1提出問題：提出問題： 2 2作出假設：作出假設： 3 3設計實驗：設計實驗： 4 4進行實驗：進行實驗： 5 5分析結果和分析結果和 表達交流：表達交流： 6 6得出結論：得出結論：培養(yǎng)

2、液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時間變化的？培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時間變化的？酵母菌在開始一段時間呈酵母菌在開始一段時間呈“J J”型增長，隨著時間型增長，隨著時間的推移，由于資源和空間有限，呈的推移，由于資源和空間有限，呈“S S”型增長。型增長。 連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)5 5天，每天用顯微鏡和血球計數(shù)天，每天用顯微鏡和血球計數(shù)板計數(shù)出酵母菌種群密度板計數(shù)出酵母菌種群密度各小組匯報實驗結果，結合前各小組匯報實驗結果，結合前4 4天的結果，天的結果，畫出酵母種群增長的畫出酵母種群增長的曲線圖曲線圖并進行分析。并進行分析。 酵母菌在開始一段時間呈酵母菌在開始一段時間呈“J J”型增長，但型增長，

3、但隨著時間的推移，由于資源和空間有限，隨著時間的推移，由于資源和空間有限，將呈將呈“S S”型增長，并最終將全部死亡。型增長，并最終將全部死亡。 第3頁/共30頁3 3設計實驗：設計實驗： 將將10mL10mL無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液加入試管中；無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液加入試管中； 將酵母菌接種入試管中的培養(yǎng)液中混合均勻；將酵母菌接種入試管中的培養(yǎng)液中混合均勻； 將試管在將試管在2828條件下連續(xù)培養(yǎng)條件下連續(xù)培養(yǎng)5d5d； 每天取樣計數(shù)酵母菌數(shù)量；每天取樣計數(shù)酵母菌數(shù)量； 分析結果，得出結論。分析結果，得出結論。是否設置對照組和多組重復實驗？是否設置對照組和多組重復實驗？為什么要連續(xù)

4、培養(yǎng)？為什么要連續(xù)培養(yǎng)？如何取樣計數(shù)如何取樣計數(shù)？記錄表怎樣設計記錄表怎樣設計？計數(shù)時有哪些注意事項計數(shù)時有哪些注意事項？第4頁/共30頁計數(shù)室計數(shù)室計數(shù)室（中間大方格）的長和寬各為計數(shù)室（中間大方格）的長和寬各為1mm1mm，深度為，深度為0.1mm0.1mm，其體積為，其體積為_mm_mm3 3 ，合，合_mL_mL。1mm0.1110-4血球計數(shù)板血球計數(shù)板:一種專門計數(shù)較大單細胞微生物的儀器一種專門計數(shù)較大單細胞微生物的儀器第5頁/共30頁計數(shù)室計數(shù)室計數(shù)室分為計數(shù)室分為25中格中格（雙線邊雙線邊）每一中格又分為每一中格又分為16小格小格計數(shù)室是由計數(shù)室是由_個小格組成個小格組成251

5、6=400第6頁/共30頁如何計數(shù)？如何計數(shù)？五點取樣法五點取樣法樣方法樣方法每每mL培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量= =A ( (平均每個中格酵母細胞數(shù)平均每個中格酵母細胞數(shù)) )25104稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)A1A2A5A3A4第7頁/共30頁第第 1 1 天天第8頁/共30頁第第 4 4 天天第第 6 6 天天第9頁/共30頁第第 7 7 天天死亡死亡第10頁/共30頁酵母菌數(shù)量變化記錄表酵母菌數(shù)量變化記錄表第11頁/共30頁計數(shù)時有哪些注意事項？計數(shù)時有哪些注意事項？從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，要將試管從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾次輕輕震蕩幾次； 如果酵母菌

6、濃度過大，應先如果酵母菌濃度過大，應先稀釋稀釋。對于壓在中格界線上的酵母菌，一般只取對于壓在中格界線上的酵母菌，一般只取相鄰兩邊及夾角相鄰兩邊及夾角計數(shù)；計數(shù)；對于已經出芽的酵母菌，對于已經出芽的酵母菌，芽體達到母細胞大小一半芽體達到母細胞大小一半時，即可時，即可作為兩個菌體計算；作為兩個菌體計算；已死亡的酵母菌不計數(shù)已死亡的酵母菌不計數(shù)。每個樣品一般計數(shù)三次，取其每個樣品一般計數(shù)三次，取其平均值平均值。第12頁/共30頁培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化 第13頁/共30頁第14頁/共30頁死亡死亡第15頁/共30頁在計數(shù)前，還應有哪些步驟？需注意些什在計數(shù)前，還應有哪

7、些步驟？需注意些什么？么？ 培養(yǎng)液配制培養(yǎng)液配制 滅菌滅菌 接種接種 培養(yǎng)培養(yǎng)第16頁/共30頁試管試管編號編號培養(yǎng)液培養(yǎng)液/mL/mL無菌水無菌水/mL/mL酵母菌母酵母菌母液液/mL/mL溫度溫度（）A A10100.10.12828B B10100.10.15 5C C10100.10.12828 針對針對“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化化”，有人提出了新的問題，某同學按下表完，有人提出了新的問題，某同學按下表完成了有關實驗。成了有關實驗。 第17頁/共30頁溫度、營養(yǎng)物質對酵母菌生長的影響溫度、營養(yǎng)物質對酵母菌生長的影響 第18頁/共30頁試管試管編號編

8、號培養(yǎng)液培養(yǎng)液/mL/mL無菌水無菌水/mL/mL酵母菌母酵母菌母液液/mL/mL溫度溫度（）A A10100.10.12828B B10100.10.15 5C C10100.10.12828第19頁/共30頁以計數(shù)酵母菌為例(1)用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個數(shù).(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計數(shù),以每小方格內含有4-5個酵母細胞為宜,一般稀釋10倍即可. (3)將血球計數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計數(shù)室上加蓋專用的厚玻片.(4)將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室內.血球計數(shù)板的使

9、用第20頁/共30頁第21頁/共30頁(5)計數(shù)時,如果使用16格25格規(guī)格的計數(shù)室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數(shù).如果規(guī)格為25格16格的計數(shù)板,除了取其4個對角方位外,還需再數(shù)中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數(shù). (6)當遇到位于大格線上的酵母菌,一般只計數(shù)大方格的上方和左方線上的酵母細胞 (7)對每個樣品計數(shù)三次,取其平均值,按下列公式計算每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù). 第22頁/共30頁3.計算公式(1)16格25格的血球計數(shù)板計算公式:酵母細胞數(shù)/ml=100小格內酵母細胞個數(shù)/100400104稀釋倍數(shù)(2)25格x16格的血

10、球計數(shù)板計算公式:酵母細胞數(shù)/ml=80小格內酵母細胞個數(shù)/80400104稀釋倍數(shù)第23頁/共30頁1 1 怎樣進行酵母菌的計數(shù)？怎樣進行酵母菌的計數(shù)？ 對一支試管中的培養(yǎng)液對一支試管中的培養(yǎng)液( (可定為可定為10ml)10ml)中的酵母菌中的酵母菌逐個計數(shù)是非常困難的，可以采用抽樣檢測的方法：逐個計數(shù)是非常困難的，可以采用抽樣檢測的方法：先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，稍待片刻，待酵母菌細胞全部沉降到計數(shù)室底吸去，稍待片刻，待酵母菌

11、細胞全部沉降到計數(shù)室底部，將計數(shù)板放在載物臺的中央，計數(shù)一個小方格內部，將計數(shù)板放在載物臺的中央，計數(shù)一個小方格內的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算計算中的酵母菌的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算計算中的酵母菌總數(shù)，蓋玻片下，培養(yǎng)液厚度為總數(shù)，蓋玻片下，培養(yǎng)液厚度為0.1mm0.1mm，可算出，可算出10ml10ml培培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)的公式：養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)的公式：2.52.510104 4x(xx(x為小方格內酵為小方格內酵母菌數(shù)母菌數(shù)) )第24頁/共30頁2 2 從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，建議你將試管輕輕從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，建議你將試管輕輕振蕩幾次。這是為什么？振蕩幾次。

12、這是為什么？3 3 本探究需要設置對照嗎？如果需要請討論對照組應怎樣本探究需要設置對照嗎？如果需要請討論對照組應怎樣設計和操作；如果不需要，請說明理由。設計和操作；如果不需要，請說明理由。4 4 需要做重復實驗嗎？需要做重復實驗嗎？ 目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，以保目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，以保證估算的準確性，減少誤差證估算的準確性，減少誤差。 不需要，本實驗旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定不需要，本實驗旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數(shù)量變化，只要分組實驗，獲得平均數(shù)條件下的種群數(shù)量變化，只要分組實驗，獲得平均數(shù)值即可。值即可。 不用重復，只要分組實驗獲得平均值即可。不用重

13、復，只要分組實驗獲得平均值即可。第25頁/共30頁5 5、怎樣記錄結果？記錄表怎樣設計？怎樣記錄結果？記錄表怎樣設計？6 6 如果一個小方格內酵母菌過多，難以計數(shù)，應采取怎樣如果一個小方格內酵母菌過多，難以計數(shù)，應采取怎樣的措施？的措施？第第1 1天天第第2 2天天第第3 3天天第第4 4天天第第5 5天天第第6 6天天第第7 7天天第第1 1組組第第2 2組組第第3 3組組-第第n n組組平均值平均值 搖勻試管取搖勻試管取1mL1mL酵母菌培養(yǎng)液稀釋酵母菌培養(yǎng)液稀釋n n倍后，倍后，再用血球計數(shù)板計數(shù)，再用血球計數(shù)板計數(shù)，所得數(shù)值所得數(shù)值乘以乘以n n2.52.510104 4，即為即為10mL10mL酵母菌液中酵母菌個數(shù)。酵母菌液中酵母菌個數(shù)。只計數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數(shù)。只計數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數(shù)。7 7 對于壓在小方格界線上的酵母菌，應當怎樣計數(shù)？對于壓在小方格界線上的酵母菌，應當怎樣計數(shù)？第26頁/共30頁 設計實驗：A組為實驗組，裝培養(yǎng)液10 mL，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度28。B組裝培養(yǎng)液10 mL，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度5，與A組形成溫度條件對照。C組不裝培養(yǎng)液，只裝無菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度28，與A組形成營養(yǎng)條件對照。第27頁/共30頁 計數(shù)計數(shù)：首先取樣，每 天取樣時間大體一致，并要遵守無菌操作