蛋白質(zhì)連接技術(shù)

1、蛋白質(zhì)連接技術(shù)蛋白質(zhì)連接技術(shù)蛋白質(zhì)交聯(lián)系指將小分子物質(zhì)（如藥物、半抗原等）或大分子大分子物質(zhì)(如酶、蛋白毒素等)以共價(jià)鍵的方式連接于蛋白質(zhì)分子，以制備人工抗原、酶標(biāo)抗體、載體釋放藥物、抗體導(dǎo)向藥物和免疫毒素等。交聯(lián)交聯(lián)方法方法游離游離氨基氨基 游離羧基游離羧基 苯基苯基 酚基酚基巰巰基基 羥基羥基 咪唑基咪唑基 吲哚基吲哚基 胍胍基基重氮化重氮化法法： 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接分子連接分子酚羥基的鄰位、咪唑環(huán)、吲哚環(huán) 含芳香胺的化合物副反應(yīng)多，故一般限于人工抗原的制備副反應(yīng)多，故一般限于人工抗原的制備戊二醛法：戊二醛法：連接兩個(gè)伯胺連接兩個(gè)伯胺最溫和的交聯(lián)反應(yīng)之一，可在440溫度范圍，pH6.08.

2、0的緩沖水溶液中進(jìn)行，但是緩沖組份中不得含有氨基化合物，本交聯(lián)方法易形成相同蛋白間的連接；產(chǎn)物的均二性較差。因此，多用于酶標(biāo)抗體的制備。過碘酸鹽氧化過碘酸鹽氧化法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 氨基 鄰二醇比較溫和，可在常溫和中性比較溫和，可在常溫和中性pH的條件下進(jìn)行的條件下進(jìn)行混合酸酐混合酸酐法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 羧基碳二亞胺碳二亞胺法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 羧基由于碳二亞胺的縮合反應(yīng)沒有選擇性；易形成蛋白分子間的自身聚合，產(chǎn)生非均一性產(chǎn)物；先將含羧基的藥物或半抗原分子與EDC反應(yīng)，活化羧基后，再加入蛋白反應(yīng)物，可以減少蛋白分子交聯(lián)活潑酯活潑

3、酯法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 羧基多元酸酐多元酸酐法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 氨基、羥基二異氰酸酯二異氰酸酯法法： 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 氨基偶氮苯甲酸偶氮苯甲酸法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 苯基O羧甲基羥胺羧甲基羥胺法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 酮基對對-肼基苯甲酸肼基苯甲酸法法：疊氮化疊氮化法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 羧酸甲酯衍生物氯乙酸鈉氯乙酸鈉法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 羥基亞胺酸酯亞胺酸酯法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 氨基鹵代硝基苯鹵代硝基苯法法：

4、 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 氨基、羥基、巰基 氨基、羥基、巰基Mannich反應(yīng)反應(yīng)法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 酮、酚類苯醌苯醌法法： 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 氨基、羥基、巰基 氨基、羥基、巰基E11man試劑試劑法法：兩分子蛋白的連接E11man試劑即55二硫2，2雙硝基苯甲酸(DTNB)，該試劑可以與巰基作用馬來酰亞胺基類活潑酯馬來酰亞胺基類活潑酯法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 巰基SPDP試劑試劑法法：異型雙功能交聯(lián)劑N-羥基琥珀亞胺基-3(2-吡啶基二硫)丙酸酯(SPDP)蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 巰基、氨基苯丁酸氮芥衍生物苯丁酸氮芥衍生物法法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 連接連接分子分子 伯氨基 氨基鹵代乙酰衍生物鹵代乙酰衍生物法法：連接基團(tuán)：氨基、巰基雙馬來酰亞胺試劑雙馬來酰亞胺試劑法法：連接兩個(gè)巰基三氯三嗪試劑三氯三