RA培養(yǎng)基適用性檢查方案

1、題目計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案方 案 號版 本 號01批準(zhǔn)頁起草人審核人簽字日期QC經(jīng)理批準(zhǔn)人簽字日期QA經(jīng)理目錄1. 驗(yàn)證目的2. 參照標(biāo)準(zhǔn)3. 驗(yàn)證項(xiàng)目4. 驗(yàn)證人員及職責(zé)5. 判定標(biāo)準(zhǔn)6. 實(shí)驗(yàn)材料7. 菌液制備8. 菌液計(jì)數(shù)9. 適用性檢查10. 陰性對照附件 1. 檢測記錄1. 驗(yàn)證目的純化水微生物計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗(yàn)證的目的是確認(rèn)R2A培養(yǎng)基適合純化水中總需氧菌總數(shù)測定。2. 參照標(biāo)準(zhǔn)2015版中國藥典二部1105 微生物限度檢查法。3. 驗(yàn)證項(xiàng)目R2A培養(yǎng)基的適用性檢查。4. 驗(yàn)證小組人員及職責(zé) ：4.1驗(yàn)證小組人員 :4.2驗(yàn)小組人員職務(wù)姓 名所在部門證

2、人員職責(zé) 及 要求組 長質(zhì)量部4.3驗(yàn)證中各部門 的 職組 員質(zhì)量部責(zé)組 員質(zhì)量部4.3.1.4 負(fù)責(zé)驗(yàn)證資料及結(jié)果的審核工作。4.3.1.5負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的批準(zhǔn)工作。4.3.2驗(yàn)證工作小組職責(zé)4.3.2.1負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起草工作。4.3.2.2參與驗(yàn)證方案的討論、確認(rèn)工作。4.3.2.3負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的實(shí)施。4.3.2.4負(fù)責(zé)驗(yàn)證結(jié)果的分析、統(tǒng)計(jì)、報(bào)告工作。4.3.2.5參與驗(yàn)證結(jié)果的評價(jià)工作。4.3.3質(zhì)量部職責(zé)4.3.3.1負(fù)責(zé)公司驗(yàn)證日常管理工作。4.3.3.2負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審核工作。4.3.3.3負(fù)責(zé)驗(yàn)證過程中儀器、儀表、計(jì)量器具的校驗(yàn)工作。證過程中的各項(xiàng)檢驗(yàn)工作負(fù)責(zé)。5. 判定標(biāo)準(zhǔn)被檢

3、培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比值應(yīng)在0.5-2 的范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致。6. 試驗(yàn)材料6.1被驗(yàn)證產(chǎn)品：R2A瓊脂培養(yǎng)基6.2儀器設(shè)備6.2.1壓力蒸汽滅菌器6.2.2 HF1200LC型生物安全柜6.2.3 DNP-9160BS型培養(yǎng)箱6.2.4 DHG90型鼓風(fēng)干燥箱6.2.5微波爐6.3.驗(yàn)證用培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)廠家批號R2A瓊脂培養(yǎng)基6.4.驗(yàn)證用菌株： ( 第代)試驗(yàn)菌株增菌培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間枯草芽孢桿菌胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基303518-24h銅綠假單胞菌胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基232818-24h7. 菌液制備分別取銅綠假胞桿菌、與枯草芽孢

4、桿菌的新鮮培養(yǎng)物至胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，于3035培養(yǎng)不超過 18-24h 。取經(jīng) 3035培養(yǎng) 18-24h 的銅綠假單胞菌、與枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物1ml 加入到 9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，倍稀釋獲得約為50100cfu ml 的菌懸液備用。8. 菌液計(jì)數(shù)：（每種菌液接種 2 個(gè)平皿）分別取銅綠假單胞菌與枯草芽孢桿菌菌懸液 1ml 分別注入無菌平皿中，立即傾注 R2A 瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備 2 個(gè)平皿，置 30 35培養(yǎng)不少于 5 天；菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（ 2 個(gè)平皿計(jì)數(shù)取平均值）見下表菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（ cfu ml）10-5 稀釋10-6 稀釋10-7 稀釋試驗(yàn)次數(shù)12平均值

5、12平均值12平均值枯草芽孢桿菌銅綠假單胞菌9. 適用性檢查分別取銅綠假單胞菌與枯草芽孢桿菌菌懸液1ml 分別注入無菌平皿中， 立即傾注 R2A瓊脂對照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2 個(gè)平皿，置3035培養(yǎng)不不少于5 天；菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（ 2 個(gè)平皿計(jì)數(shù)取平均值）見下表菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（ cfu ml）10-5 稀釋10-6 稀釋10-7 稀釋試驗(yàn)次數(shù)12平均值12平均值12平均值枯草芽孢桿菌銅綠假單胞菌10. 陰性對照為確認(rèn)試驗(yàn)條件是否符合要求，應(yīng)進(jìn)行陰性對照試驗(yàn)，陰性對照試驗(yàn)應(yīng)無菌生長。如陰性對照有菌生長，應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。附表 1：計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證記錄試驗(yàn)時(shí)間年月日完成時(shí)間年月日檢驗(yàn)者 / 日期：復(fù)核者 /日期：驗(yàn)證菌株平皿號供試品組對照培養(yǎng)基組