油樟葉揮發(fā)油β—環(huán)糊精包合物制備工藝探究和穩(wěn)定性考察

1、油樟葉揮發(fā)油b環(huán)糊精包合物制備工藝探究和穩(wěn)定性考察摘要研究油樟葉揮發(fā)油b-環(huán)糊精包合物的最 佳制備工藝并考察其穩(wěn)定性。采用飽和水溶法制備包合物， 進行正交試驗，以包合產率和包合率為篩選指標，優(yōu)選包合 工藝。使用紅外分光光度法和薄層色譜法對包合效果進行評 價，并考察包合物在強光、高溫、高濕環(huán)境下的穩(wěn)定性。最 佳包合條件為1 ml油樟葉揮發(fā)油與8 g 3 -環(huán)糊精進行包合, 包合時間3 h,包合物溫度40 °c, b-環(huán)糊精和水的體積比 1 : 15o經紅外分光光度法和薄層色譜法鑒定，形成了油樟 葉揮發(fā)油b-環(huán)糊精包合物，并具有一定的抗光照性、熱穩(wěn) 定性、濕穩(wěn)定性。試驗得出的最佳包合工藝

2、操作簡便，包合 物穩(wěn)定。關鍵詞油樟葉揮發(fā)油；b-環(huán)糊精；表征；穩(wěn)定性 油樟 cinnamomum longepaniculatum (gamble) n. chao 是樟科樟屬植物，其葉、枝、根、莖、花、果富含揮發(fā)油， 其中油樟葉含油量達3. 8%4. 5%,粗提取樟油中含1, 8-樓 葉油素為58. 55%。近年的研究表明，油樟葉揮發(fā)油具有抑菌、 抗炎、抗癌、殺蟲等作用1-7,在香料、日化、醫(yī)藥、食 品等工業(yè)具有廣泛的應用前景。但油樟葉揮發(fā)油不穩(wěn)定易揮 發(fā)，而且具有較強的氣味，為了提高油樟葉揮發(fā)油的穩(wěn)定性, 掩蔽油樟油的氣味，可將其制成b-環(huán)糊精包合物。本試驗 采用飽和水溶法制備油樟葉揮發(fā)油

3、b-環(huán)糊精包合物，通過 正交試驗篩選最佳制備工藝，采用紅外分光光度法和薄層色 譜法對包合物進行結構表征，并對其穩(wěn)定性進行考察。1材料油樟葉揮發(fā)油（宜賓學院提供）；b-環(huán)糊精（成都市科 龍化工試劑廠）；硅膠g-cmc薄層板（實驗室自制）；其他試 劑均為分析純。2方法2. 1油樟葉揮發(fā)油包合物制備工藝的研究2. 1. 1正交試驗選擇油樟葉揮發(fā)油與b-環(huán)糊精的配 比、包合時間、包合溫度、水與包合物的比例4個因素進行 l9 （34）正交試驗，因素水平見表lo取b -環(huán)糊精適量， 用蒸館水配置成飽和溶液，將其放在恒溫磁力攪拌器上，在 攪拌的同時滴加入用聚乙二醇400溶解的油樟葉揮發(fā)油溶 液，設定一定的攪

4、拌時間，攪拌結束后，將形成的包合物混 懸液置于冰箱冷藏24 h后，抽濾，棄去濾液，用蒸館水洗 滌包合物，抽干后50 °c干燥，最后得到白色粉末狀包合物。 對其進行各項指標的考察，最后進行綜合評分，篩選出最佳 的制備工藝。2. 1.2包合物中實際含油量測定 定量稱取油樟葉揮發(fā) 油包合物，置于500 ml圓底燒瓶中，加入蒸館水300 ml, 按揮發(fā)油測定法（2010年版中國藥典一部附錄xd甲法） 8測定，至油量不再增加時停止加熱，放置1 h,讀取油量 即可。2. 1.3空白回收試驗 精密量取3份揮發(fā)油1 ml,分別 置于500 ml圓底燒瓶中，按2. 1.2項下方法測定，讀取油 量，計算

5、空白回收率。揮發(fā)油空白回收率二收集揮發(fā)油量/加 入揮發(fā)油量x100%o2. 1.4考察指標 包合率（%）=（包合物中實際含油量） / （揮發(fā)油加入量x空白回收率）。包合產率（%）二w包合物/ （w油樟葉油+wb-環(huán)糊精）綜合評分二包合率x80%+包合產率x20%因包合率為衡量包合效果的主要指標，包合率越高，揮 發(fā)油包合效果越好9-10l權重系數定為0.8,包合物產率 在實際生產中也具有重要意義，權重系數定為0.2。2. 1.5驗證試驗取油樟葉揮發(fā)油3批，按篩選出的最 佳包合工藝制備油樟葉揮發(fā)油與0-環(huán)糊精包合物，對其制 備工藝進行驗證。2.2油樟葉揮發(fā)油b-環(huán)糊精包合物表征的研究2. 2. 1

6、紅外光譜法取油樟葉揮發(fā)油1 ml, b-環(huán)糊精、 包合物、油樟葉揮發(fā)油與b-環(huán)糊精混合物各2 g,分別用 20 ml聚乙二醇400溶解制成4種樣品，采用澡化鉀壓片法 11,進行紅外光譜測定，比較包合前后紅外區(qū)吸收峰的變 化。2.2.2薄層色譜法取油樟葉揮發(fā)油1 ml,作為樣品1； 取包合物適量按藥典法提取揮發(fā)油，作為樣品2；取包合物 和b-環(huán)糊精各1 g,用無水乙醇溶液20 ml溶解，作為樣 品3和4；將樣品點于硅膠g薄層板上，用甲苯-乙酸乙酯 （9 : 1）為展開劑展開，以5%香草醛硫酸溶液為顯色劑，烘 干顯色。2. 3油樟葉揮發(fā)油包合物的穩(wěn)定性考察2. 3. 1光穩(wěn)定試驗分別稱取油樟葉揮發(fā)

7、油b-環(huán)糊精 包合物和按照制備投料比混勻所得的油樟葉揮發(fā)油與b-環(huán) 糊精的混合物各3份，每份30g,密封于玻璃瓶中，均照射 10 d （強度 4 000 lx）,于第 0, 5, 10 d 時取樣，按 2. 1.2 項下方法測定揮發(fā)油相對含量。2. 3.2高溫試驗 分別稱取油樟葉揮發(fā)油b-環(huán)糊精包 合物和按照制備投料比混勻所得的油樟葉揮發(fā)油與b-環(huán)糊 精的混合物各3份，每份30 g,密封于玻璃瓶中，于60 °c 恒溫干燥箱內放置10 d,于第0, 5, 10 d時取樣，測定揮 發(fā)油相對含量。2. 3.3高濕試驗 分別稱取油樟葉揮發(fā)油b-環(huán)糊精包 合物和按照制備投料比混勻所得的油樟葉揮

8、發(fā)油與b-環(huán)糊 精的混合物各6份，每份30g,密封于玻璃瓶中，每3份于 25 °c置于相對濕度分別為75% （氯化鈉）和90% （硝酸鉀） 的2個密閉容器中。于第0, 5, 10 d時取樣，測定揮發(fā)油 相對含量。3結果3. 1油樟葉揮發(fā)油包合物制備工藝的研究3. 1. 1正交試驗各因素影響作用的大小為a>c>d>bo b 的影響作用最小，因此將b作為誤差項進行方差分析，見表 2o b-環(huán)糊精與油樟葉油的比例、攪拌時間對包合效果有顯 著影響。最終選出a3b1c3d2為最佳工藝，即lml油樟葉揮 發(fā)油與8 g b-環(huán)糊精進行包合，包合時間3 h,包合物溫 度40

9、76;c , b-環(huán)糊精和水的體積比1：15,見表3o 3. 1.2空白回收試驗 取3份揮發(fā)油1 ml,分別置于500 ml 圓底燒瓶中，按2. 1.2項下方法測定，讀取油量分別為0. 88, 0.91, 0.91ml,揮發(fā)油空白回收率為90. 0%o揮發(fā)油空白回 收率二收集揮發(fā)油量/加入揮發(fā)油量x 100%o3. 1.3驗證試驗取油樟葉揮發(fā)油3批，按最佳包合工 藝a3b1c3d2進行驗證試驗。包合產率分別為73. 33%,78. 76%, 76. 54%,包合率分別為78. 89%, 80. 00%, 77. 78%,結果表明， 該揮發(fā)油的包合工藝條件穩(wěn)定，具有重現性和可操作性。3.2油樟葉

10、揮發(fā)油b-環(huán)糊精包合物的表征3. 2. 1紅外光譜法如果包合效果好，則揮發(fā)油分子的 紅外振動將受到限制，整個包合物主要呈現，b-環(huán)糊精的 紅外光譜圖形；若包合效果不好，則基本為二者的混合物紅 外光譜圖形，主要呈現兩者光譜的疊加。因此，可以根據紅 外光譜圖形的差異來判斷b-環(huán)糊精包合揮發(fā)油的效果及包 合程度11。結果表明，油樟葉揮發(fā)油在2 967. 1, 2 925.5,1 465.7, 1 375.6, 1 214.9, 1 079.8, 985.8 nm 的特征峰 在b-環(huán)糊精包合物中已經消失或者明顯減弱，而在混合物 中仍然存在，說明包合物已經形成。3. 2.2薄層色譜法 通過觀察色譜展開后

11、斑點的存在、 斑點的位置來判斷包合物的形成。在相同的色譜條件下，由 于被包合藥物物理性質發(fā)生改變，導致薄層色譜帶位置的位 移，甚至出現無展開斑點。樣品1, 2的層析點分別有4個, 并且位置一致；而樣品3, 4未見層析點，說明油樟葉揮發(fā) 油包合前后的主要成分基本一致，油樟葉揮發(fā)油環(huán)糊精 包合物已經形成，見圖lo3. 3穩(wěn)定性考察3. 3. 1光穩(wěn)定試驗 在強度為4 000 lx的光照下，包合 物在第5天和第10天的相對含油量有所下降，但下降速度 緩慢，而混合物的相對含油量下降明顯，由此可見，油樟葉 揮發(fā)油b-環(huán)糊精包合物較混合物具有良好的光穩(wěn)定性，在 強光下不易分解，見表4。3. 3.2高溫試驗

12、 在60 °c的高溫下，包合物在第5天和 第10天的相對含油量分別為85.7%, 81.0%,呈逐漸下降的 趨勢，但下降速度緩慢，而混合物的相對含油量下降非常明 顯，可見油樟葉揮發(fā)油b-環(huán)糊精包合物的熱穩(wěn)定性優(yōu)于混 合物，在60 £的高溫下分解緩慢，見表5。3. 3.3高濕試驗在濕度為75%, 95%的條件下，包合物 在第5天和第10天的相對含油量下降緩慢，可見油樟葉揮 發(fā)油b-環(huán)糊精包合物受高濕條件的影響小，而混合物的相 對含油量明顯下降，說明在潮濕的條件下包合物的穩(wěn)定性高 于混合物，見表6。4結論油樟葉揮發(fā)油屬于植物精油，具有一定的揮發(fā)性，直接 將其混合于固體物料中容易

13、造成有效成分的散失。為此，本 試驗利用現代包合技術將油樟葉揮發(fā)油包合在b-環(huán)糊精分 子之中，獲得穩(wěn)定的包合物。本試驗采用飽和水溶液法制備 油樟葉揮發(fā)油b-環(huán)糊精包合物，以包合率和包合物產率為 衡量包合效果的指標進行正交試驗，篩選出最佳制備工藝， 通過綜合評分法選出a3b1c3d2為最佳工藝，即1 ml油樟葉 揮發(fā)油與8 g環(huán)糊精進行包合，包合時間3 h,包合物溫度40 °c, b-環(huán)糊精和水的體積比1 : 15o驗證試驗結果 證明了此綜合評分法篩選出的工藝條件為最佳條件，也表明 了本評價方法的正確性。本試驗采用紅外光譜法和薄層色譜法對油樟葉揮發(fā)油 b-環(huán)糊精包合物進行鑒定，紅外光譜顯

14、示油樟葉揮發(fā)油的 特征峰在b-環(huán)糊精包合物中已經消失或者明顯減弱，而在混合物中仍然存在；薄層色譜法顯示油樟葉揮發(fā)油包合前后 的層析點一致，結果表明油樟葉揮發(fā)油包合前后的主要成分 基本一致，包合物已經形成。本試驗最后還考察了包合物在 強光、高溫、高濕、正常環(huán)境下的穩(wěn)定性，結果顯示油樟葉 揮發(fā)油b-環(huán)糊精包合物具有一定的抗光照性、熱穩(wěn)定性、 濕穩(wěn)定性。該工藝操作方便，實用性強，有利于工業(yè)化生產。參考文獻1 魏琴，李群，羅揚，等.油樟油對植物病原真菌活 性的抑制作用j.中國油料作物學報，2006 (1)： 63.2 陶翠，魏琴，殷中瓊，等.油樟葉揮發(fā)油對三種真菌的抗菌效果j中國獸醫(yī)科學，2011 (

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17、ongepaniculatum leavesliu yul, 3, yin zhong-qiongl*, wei qin2*, jia ren-yongl, fan jingl, zhou li-jun2, du yong-hua2(1. college of veterinary medicine, sichuan agricultural university, ya' an 625014, chi rm；2. key laboratory of fermentation resource and application of higher education institutio

18、ns in sichuan, yibin 644000, china；3. luxian county bureau of animal husbandry of sichuan province, luzhou 646100, china)abstract to study the optimum preparationprocess and stability of p -cyclodextrin inelusion compound in volatile oil of cinnamomum longepaniculatum leaves the saturated aqueous so

19、lution method was adopted to prepare inelusion compounds for an orthogonal test. the inclusion compound productivity and the inclusion rate were takenas indexes for screening the inclusion processes theinclusion effect wasevaluated with the infraredspectrophotometry and tlc,and the stability underconditions of high temperature ,high humidity andstrong light was detected.under optimum preparationconditions for inclusion, the ratio between v