人教版高中生物選修1生物技術實踐全套學案

1、專題 1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用第 1 課時果酒和果醋的制作一、果酒和果醋的制作原理1果酒制作的原理(1) 酵母菌類型： _ ，具有成形的細胞核。繁殖方式： 出芽生殖和孢子生殖。溫度低時形成孢子，進入休眠狀態(tài)； 溫度適宜時， 進行 _，繁殖速度快。代謝類型：異養(yǎng)兼性厭氧微生物。(2) 制作原理在有氧條件下，酵母菌進行_，大量 _，反應式為：c6h12o6 6o2 6co2 6h2o 在無氧條件下，酵母菌進行_，反應式為：c6h12o6 2c2h5oh 2co2 (3) 影響酒精發(fā)酵的環(huán)境條件有_。發(fā)酵溫度控制在 _范圍內。在 _的發(fā)酵液中， 酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物無法適應這一環(huán)境

2、而受到抑制。酵母菌生長的最適ph為_。2果醋制作的原理(1) 醋酸菌：又名醋酸桿菌。類型： _ 。繁殖方式：_。代謝類型：_。(2) 果醋制作的原理在氧氣充足時，能分別把_ 兩種反應物轉化為_。當缺少 _時可將乙醇轉變成乙醛，并進一步轉變成醋酸。反應式： c2h5oh o2 ch3cooh h2o (3) 影響醋酸菌發(fā)酵的條件醋酸菌最適生長溫度為_。醋酸菌屬于需氧型微生物，發(fā)酵過程中需要_。最適 ph為_。二、果酒與果醋制作的操作流程1實驗流程挑選葡萄 沖洗 榨汁 酒精發(fā)酵 醋酸發(fā)酵果酒果醋2實驗裝置充氣口：在果醋發(fā)酵時連接充氣泵，輸入氧氣。因為酵母菌產(chǎn)生酒精時是厭氧的，所以充氣口設開關。排氣

3、口：排出果酒發(fā)酵時產(chǎn)生的二氧化碳。排氣口和一個長而彎曲的膠管連接：防止空氣中的雜菌進入。出料口：取樣檢查和放出發(fā)酵液。使用方法：在進行果酒發(fā)酵時要關閉充氣口；在進行果醋發(fā)酵時，充氣口要連續(xù)充入氧氣。3實驗操作(1) 材料的選擇與處理：選擇_的葡萄，榨汁前要先_，再除 _。滅菌： a. 榨汁機要清洗干凈，并晾干。b發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用_消毒。c裝入葡萄汁后，封閉充氣口。榨汁將葡萄放入榨汁機中榨取葡萄汁，避免將果核壓破；若葡萄未充分成熟，葡萄汁內可加糖。發(fā)酵a裝置：將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶，留大約_的空間。b制葡萄酒：_充氣口；溫度應控制在_；時間控制在1012 d 左右。c制葡萄醋： 溫度應控制在

4、_；時間控制在78 d 左右； 適時通過充氣口充入_ 。4結果分析與評價(1) 實驗現(xiàn)象發(fā)酵酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵氣味和味道酒香味食醋味氣泡和泡沫有泡沫無泡沫發(fā)酵液顏色混濁混濁，液面形成白色菌膜(2) 檢驗果酒的制作是否成功檢驗方法：發(fā)酵是否有酒精產(chǎn)生，可用_溶液來檢驗。檢驗原理：酸性條件下，重鉻酸鉀和酒精反應呈現(xiàn)_。檢驗步驟：先在試管中加入_2 ml，再滴入物質的量濃度為3 mol/l的_3 滴，振蕩均勻，最后滴加常溫下飽和的_溶液 3 滴，振蕩試管，觀察_。(3) 檢驗果醋的制作是否成功可通過 _進行初步鑒定，再通過檢測和比較醋酸發(fā)酵前后的_做進一步的鑒定。知識點一果酒和果醋制作的原理1請根據(jù)某

5、同學嘗試使用罐頭瓶在常溫(213) 下制作果酒的過程，回答下列問題：(1) 開 始 時 向 消 過 毒 的 罐 頭 瓶 中 加 入 了 新 鮮 的 葡 萄 汁 和 酵 母 菌 ， 添 加 酵 母 菌 的 目 的 是_ _，添加葡萄汁的目的是為酵母菌的生長發(fā)育提供_。(2) 葡萄汁裝入瓶中時要留出大約1/3 的空間，這樣做的主要目的是_。在以后的過程中 ， 每 隔12 h 左 右 將 瓶 蓋 擰 松 一 次 ( 不 是 打 開 瓶 蓋 ) ， 此 后 再 擰 緊 ， 這 樣 做 的 主 要 目 的 是_。(3) 加入的新鮮葡萄汁沒有進行過滅菌處理，但是在制出的果酒中基本檢測不出酵母菌以外的雜菌，

6、從生態(tài)學角度分析：一是酵母菌與雜菌之間存在的_關系有利于酵母的生長繁殖；二是由于果酒中的_ 。(4) 在制作果酒時，可以將果酒進一步發(fā)酵，獲得果醋。在工業(yè)生產(chǎn)制作蘋果醋時常常先將蘋果發(fā)酵成酒，再放入醋酸菌發(fā)酵成果醋，請寫出相關的反應式_ _。(5) 制葡萄醋時，需要適時地通過充氣口向容器內充氣，原因是_ _。(6) 若酵母菌分解葡萄汁中的葡萄糖36 g ，則可生成酒精_mol 。2下列產(chǎn)醋最多的措施是( ) a在果酒中加入食醋，并通氣b在果酒中加入變酸的酒表面的菌膜，并通氣c將果酒暴露在空氣中d在果酒中加入沖洗葡萄的水，并通氣知識點二果酒與果醋的制作過程3如圖是果酒和果醋制作的實驗流程和某同學

7、設計的果酒和果醋的發(fā)酵裝置。根據(jù)圖示回答下列問題：(1) 完成圖 1 中的實驗流程。(2) 沖洗的主要目的是_，沖洗應特別注意不能_，以防止菌種的流失。(3) 圖 2 裝置中的充氣口在_時關閉，在_ 時連接充氣泵，并連續(xù)不斷地向內_ 。(4) 排 氣 口 在 果 酒 發(fā) 酵 時 排 出 的 氣 體 是 由 _ 產(chǎn) 生 的 _ ， 在 果 醋 發(fā) 酵 時 排 出 的 是_ _ 。(5) 若在果汁中就含有醋酸菌，在果酒發(fā)酵旺盛時，醋酸菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸？說明原因。_ _。(6) 在酒精發(fā)酵時瓶內溫度一般應控制為_。醋酸發(fā)酵時溫度一般應控制為_。4關于用塑料瓶制果酒和果醋的敘述，正確的是(

8、 ) a為了提高果酒的產(chǎn)出量，果汁應盡量裝滿發(fā)酵瓶b醋酸發(fā)酵階段應封閉瓶口，防止雜菌污染c制果酒過程中每天需適時打開瓶蓋d果酒制成后，可將裝置轉移至溫度較高的環(huán)境中制果醋第 2 課時腐乳的制作一、腐乳的制作原理1主要微生物毛霉(1) 毛霉的生物學特征：腐乳制作過程中發(fā)揮作用的微生物主要是_，屬于 _，同化作用類型是 _。(2) 毛霉的作用：毛霉等微生物產(chǎn)生的_酶等能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的_ 和_；產(chǎn)生的 _酶能將豆腐中的脂肪水解為_和_。2腐乳制作的發(fā)酵機理制作腐乳的過程主要是豆腐所含的蛋白質發(fā)生生物化學反應的過程。釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進行_和_。(1) 前期發(fā)酵主要變化：毛

9、霉在豆腐( 白坯 ) 上的生長。條件：發(fā)酵溫度為_。作用： a. 使豆腐表面由一層菌膜包住，形成_。b. 毛霉分泌以 _為主的各種酶，有利于將豆腐所含有的蛋白質水解為小分子的_ 。(2) 后期發(fā)酵實質：酶與微生物協(xié)同參與生化反應的過程。主要變化二、腐乳的制作過程1實驗流程讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制2具體操作(1) 讓豆腐上長出毛霉選材：所用豆腐的含水量為_左右最適宜，水分過多腐乳不易成形，過少則不利于毛霉的生長。切塊：將所選擇的豆腐切成3 cm3 cm1 cm的小塊，若切的過小_，過大則中間部分很難形成腐乳。接種：將切好的豆腐塊等距離排放，周圍留有一定空隙，并將溫度控制在_。該

10、溫度下 _生長迅速， _等其他微生物生長較緩慢。為了提高毛霉的純度，也可以將優(yōu)良毛霉菌種直接接種在豆腐上。(2) 加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層加鹽，加鹽量要隨著層數(shù)的加高而_，近瓶口的表層要_。加鹽的目的是使_，利于后期制作時成形；同時鹽也能 _的生長，避免豆腐塊腐敗變質。長滿毛霉的豆腐塊與鹽的質量分數(shù)比為_。(3) 加鹵湯裝瓶：鹵湯中酒精的含量應控制在_左右，它能 _微生物的生長，同時與腐乳獨特的 _形成有關。香辛料可以調制腐乳的_，也具有 _的作用。(4) 密封腌制：將用鹽腌制好的豆腐塊迅速小心地裝入洗刷干凈并用沸水消毒的玻璃瓶中，并整齊擺放，然后加入鹵湯。將瓶口通過酒精燈的火焰后，用

11、膠條將瓶口密封。在此過程中時刻注意防止雜菌污染。3影響腐乳品質的因素(1) 鹵湯直接關系到腐乳的色、香、味鹵湯是由 _和_配制而成的。鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在 _。加酒可以 _，同時能使腐乳具有獨特的香味。香辛料種類很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等，香辛料可以調制腐乳的_，也具有 _的作用。(2) 控制好材料的用量用鹽腌制時， 若鹽的濃度過低，不足以抑制微生物生長，可能導致 _ ；若鹽的濃度過高，會影響 _。鹵湯中酒的含量應控制在12% 左右。酒精含量過高，腐乳成熟的時間會延長；酒精含量過低，不足以抑制微生物生長，可能導致豆腐腐敗。(3) 掌握好發(fā)

12、酵溫度和時間毛霉的最適生長溫度為1518，保持其生長適宜溫度，可縮短發(fā)酵時間。溫度過低或過高會影響毛霉的 _和_，從而影響發(fā)酵的進程和發(fā)酵質量；時間過短，發(fā)酵不充分；時間過長，豆腐會軟化不易成形，從而影響_。知識點一腐乳的制作原理1腐乳是通過微生物發(fā)酵制成的食品，其制作流程如下，請回答有關問題：讓豆腐上長出毛霉 加鹽腌制 加鹵湯裝瓶 密封腌制(1) 民間制作腐乳時，豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的毛霉孢子，現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴格的無菌條件下， 將優(yōu)良的毛霉 菌種直接接種 在豆腐上，這 樣做的目的是什么？_ _。(2) 制作腐乳的原料中哪種有機物含量比較高？_；毛霉可利用體內的酶將其分解成哪些小分

13、子有機物？ _ 。(3) 在用鹽腌制腐乳的過程中，若鹽的濃度過低會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？_ _。(4) 鹵湯中酒的含量為什么要控制在12% 左右？ _ _ _。2毛霉的新陳代謝類型為異養(yǎng)需氧型，下列哪項措施與其需氧有關( ) a豆腐含水量控制在70% 左右b控制溫度為1518c用塑料袋罩住發(fā)酵盤時不要太嚴d與上述a、c項措施有關知識點二腐乳的制作過程3請回答下列有關腐乳制作的問題：(1) 腐乳制作過程中有多種微生物的參與，其中起主要作用的是_，其菌落特征是_?，F(xiàn)代的 腐 乳 生 產(chǎn) 是 在 嚴 格 無 菌 的 條 件 下 ， 將 優(yōu) 良 的 菌 種 直 接 接 種 到 豆 腐 上 ， 優(yōu) 點 是_ _

14、。(2) 腐乳制作的流程中需要嚴格消毒的階段是_、_。(3) 加鹽腌制的過程中，要注意的是_ _。(4) 配制鹵湯時加酒的作用是_ _。其中酒的含量應控制在_ 左右，酒精含量過高，_ ，酒精含量過低則_ _ 。香辛料的作用是_ _。(5) 用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要_ ，加入鹵湯后，要用膠條密封，密封時最好將瓶口通過酒精燈火焰，防止_ 。4下列關于腐乳制作過程中食鹽和酒精用量的說法，正確的是( ) a食鹽不能抑制微生物生長，只會影響腐乳口味b酒精含量過高促進微生物生長c酒精含量過低可能導致豆腐腐敗d以上說法均不對第 3 課時制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量一、泡菜的制作1乳酸菌(1) 生物學

15、特征乳酸菌是由原核細胞構成的_；繁殖方式是分裂生殖；新陳代謝類型是_，有氧時發(fā)酵 ( 無氧呼吸 ) 受到抑制。(2) 乳酸菌的作用在_條件下，乳酸菌可將_分解成 _。反應式： c6h12o6 2c3h6o3( 乳酸) 2泡菜壇的選擇標準是_、_、_、_、 _，否則容易引起蔬菜腐爛。3實驗流程4操作步驟(1) 將新鮮蔬菜預先處理成_。(2) 泡菜鹽水按清水和鹽的質量比為_的比例配制，_備用。(3) 預處理的新鮮蔬菜裝至半壇時放入蒜瓣、生姜、香辛料等佐料，并繼續(xù)裝至八成滿。(4) 倒入配制好的_，使鹽水浸沒全部菜料。(5) 蓋上泡菜壇蓋子，并用水_。發(fā)酵時間長短受室內溫度的影響。5腌制的條件(1)

16、 在泡菜的腌制過程中，需要控制的條件包括腌制的_、_和_的用量。(2) 溫度過高、食鹽用量不足10% 、腌制時間過短，容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。6泡菜腌制過程中乳酸菌和乳酸的變化泡菜發(fā)酵可分為三個階段：(1) 發(fā)酵初期：以不產(chǎn)酸的_和_活動為主，同時還有一部分_活動。該時期利用了氧氣，產(chǎn)生了缺氧環(huán)境，乳酸菌才開始活動。乳酸菌和乳酸的量都比較少。(2) 發(fā)酵中期： 由于乳酸菌產(chǎn)生了大量乳酸，其他細菌活動受到抑制，只有乳酸菌活動強烈。此時期 _數(shù)量達到高峰，_的量繼續(xù)積累。(3) 發(fā)酵后期：由于乳酸的積累，酸度繼續(xù)增長，乳酸菌活動也受到抑制，乳酸菌數(shù)量下降。乳酸菌和乳酸在整個發(fā)酵過程

17、中的含量變化趨勢為：二、測定泡菜中亞硝酸鹽的含量1亞硝酸鹽(1) 亞硝酸鹽為 _色粉末，易溶于_，在食品加工中用作_。(2) 分布：亞硝酸鹽在蔬菜中平均含量約為_ mg/kg ；咸菜中平均含量為_ mg/kg 以上；而豆粉中的平均含量可達_ mg/kg 。(3) 危害：膳食中的亞硝酸鹽一般不會危害人體健康，但是，當人體攝入的亞硝酸鹽總量達到_ g時，會引起中毒；當攝入總量達到_ g 時會引起死亡。(4) 在人體內的代謝特點：正常情況下亞硝酸鹽可以_；只有在特定條件下( 適宜的 _、_和 _作用 ) ，才會轉變?yōu)橹掳┪颻。(5) 衛(wèi)生標準：我國衛(wèi)生標準規(guī)定，亞硝酸鹽的殘留量在肉制品中不得超過_

18、mg/kg ，醬腌菜中不超過 _ mg/kg ，而嬰兒奶粉中不得超過_ mg/kg 。2實驗原理在 _ 條 件 下 ， 亞 硝 酸 鹽 與 _ 發(fā) 生 _ 后 ， 與_ 結合形成 _ 。將顯色反應后的樣品與已知濃度的_進行 _，可大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。3操作過程(1) 配制 _ (2) 制備 _ (3) 制備 _ (4) 比色：觀察樣品顏色的變化，并與標準顯色液比較，找出與_最相近的顏色，記錄對應的亞硝酸鈉含量，并按照下面的公式進行計算。亞硝酸鹽含量樣品中亞硝酸鹽含量取樣量濾液的質量，4結果記錄每隔 2 天測一次，將結果記錄在下表。泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化(mg/kg) 腌制天

19、數(shù)1 號壇2 號壇3 號壇封壇前2 天4 天6 天8 天5. 結論分析泡菜發(fā)酵可分為三個階段：發(fā)酵初期，由于硝酸鹽還原菌的活動，亞硝酸鹽含量_。發(fā)酵中期：由于硝酸鹽還原菌受抑制；同時形成的亞硝酸鹽又被分解，因而亞硝酸鹽_ 。發(fā)酵后期，硝酸鹽還原菌完全受抑制因而亞硝酸鹽含量_ 。亞硝酸鹽在整個發(fā)酵過程中的含量變化趨勢如圖所示。知識點一泡菜的制作1據(jù)所學泡菜的制作過程，回答下面的問題：(1) 制作泡菜所利用的乳酸菌，從其結構上分析，屬于哪類生物？_ 。(2) 請用反應式表示出乳酸菌發(fā)酵的原理。_。(3) 制作泡菜的壇子必須密封，試說明其道理。_。(4) 試討論制作泡菜的過程中應注意的問題及原因。_

20、 _。2在泡菜的制作過程中，不正確的是( ) a按照清水與鹽的質量比為41 的比例配制鹽水b按照清水與鹽的質量比為51 的比例配制鹽水c鹽水入壇前要煮沸冷卻，以防污染d在壇蓋邊沿的水槽中要注滿水，以保證壇內的無氧環(huán)境知識點二泡菜制作過程中亞硝酸鹽含量的測定3如圖是泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的實驗流程示意圖，請據(jù)圖回答：(1) 制作泡菜宜選用新鮮蔬菜的原因是_ 。(2) 制備泡菜的鹽水中清水與鹽的質量比約為_ ， 鹽水需煮沸并冷卻后才可使用， 原因是 _ 試說明鹽在泡菜制作中的作用：_ 。(3) 泡菜風味形成的關鍵在于_的加入。(4) 泡 菜 的 制 作 方 法 不 當 ， 很 容 易 造 成

21、 泡 菜 變 質 ， 甚 至 發(fā) 霉 變 味 ， 試 分 析 可 能 的 原 因 ：_ _ _。(5) 發(fā)酵過程中應定期測定亞硝酸鹽的含量，原因是_ _。(6) 測定亞硝酸鹽含量的方法是_ 。4下列關于亞硝酸鹽的敘述，錯誤的是( ) a亞硝酸鹽為白色粉末，易溶于水b亞硝酸鹽分布廣泛，其中蔬菜中亞硝酸鹽的平均含量約為4 mg/kg c咸菜中亞硝酸鹽的平均含量在7 mg/kg 以上，所以盡量少吃咸菜d亞硝酸鹽不會危害人體健康，并且還具有防腐作用，所以在食品中應多加些以延長食品的保質期專題 2 微生物的培養(yǎng)與應用第 1 課時微生物的實驗室培養(yǎng)一、培養(yǎng)基與無菌技術1培養(yǎng)基(1) 概 念 ： 人 們 按

22、 照 微 生 物 對 _ 的 不 同 需 求 ， 配 制 出 供 其 _ 的_。(2)成分：一般含有 _、 _、 _、 _， 此外還要滿足微生物對_(即生長因子 )、_以及氧氣的需求。拓展深化營養(yǎng)物質定義作用主要來源碳源能提供所需_的物質構成生物體的_和一些 _，有些是異養(yǎng)生物的_ 無 機 化 合 物 ： co2 、nahco3等；有機化合物：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等氮源能提供所需_的物質合成蛋白質、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物無機化合物： n2、nh3、銨鹽、硝酸鹽等；有機化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等特 殊 營 養(yǎng) 物質(生長因子 ) 生長必 不可 少的_ 酶和核酸的組成成分維生素、氨基酸

23、、堿基等水在生物體內含量很高，在低等生物體內含量更高不僅是優(yōu)良的溶劑，而且可維持生物大分子結構的穩(wěn)定無機鹽為微生物提供除碳、氮以外的各種重要元素細胞內的組成成分，生理調節(jié)物質，某些化能自養(yǎng)菌的能源，酶的激活劑(3)培養(yǎng)基的種類劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途物理性質_培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂_ 半固體培養(yǎng)基觀察微生物的運動、分類、鑒定_培養(yǎng)基微生物 _、_、活菌計數(shù)、保藏菌種化學成分_培養(yǎng)基含化學成分不明確的天然物質工業(yè)生產(chǎn)_培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確(用化學成分已知的化學物質配成) 分類、鑒定用途_培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學物質，以_不需要的微生物的生長，_培養(yǎng)、 _出特定微生物(如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在

24、培養(yǎng)基中加入青霉素或鏈霉素；培養(yǎng)固氮菌可用所需要的微生物的生長無氮培養(yǎng)基，如阿須貝培養(yǎng)基) _培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品_不同種類的微生物，如可用伊紅美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤) 注意病毒目前不能利用人工培養(yǎng)基來培養(yǎng)，需接種在動、植物組織細胞中才能繁殖。常用于培養(yǎng)病毒的是活雞胚。2無菌技術(1)概念：防止一切外來雜菌的侵入，并保持滅菌物品及無菌區(qū)域不再被污染的方法，稱為無菌技術。注意在微生物的實驗室培養(yǎng)中，無菌技術的核心是_，_。(2)無菌技術的具體內容對實驗操作的_、操作者的 _進行清潔和消毒。將用于微

25、生物培養(yǎng)的_、接種用具和培養(yǎng)基等進行_。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在_進行。實驗操作時應避免已_處理的材料用具與周圍的物品相接觸。(3)消毒和滅菌的概念消毒：消毒是指使用_的物理或化學方法殺死物體表面或內部的_(不包括芽孢和孢子 )。滅菌：滅菌是指使用_的理化因素殺死物體內外_，包括 _。消毒與滅菌的區(qū)別：兩者最大的區(qū)別是_。拓展深化某些細菌在其生長發(fā)育后期，可在細胞內形成一個圓形的抗逆性休眠體，稱為芽孢。每個細菌細胞僅形成一個芽孢，故它無繁殖功能。芽孢有極強的抗熱、抗輻射、抗化學藥物和抗靜水壓的能力。芽孢的休眠能力十分驚人，可保持幾年到幾十年的生活力。孢子是微生物產(chǎn)生的一種有繁

26、殖或休眠作用的細胞。一般是單細胞，個體微小，通常是適應于從不利環(huán)境條件中存活下來，并在條件改變時產(chǎn)生新的營養(yǎng)體，能直接發(fā)育成新個體。(4)消毒與滅菌的常用方法方法條件作用對象消毒_ _ 100，煮沸56 min 殺死微生物的營養(yǎng)細胞和一部分芽孢_ _ _ 7075煮 30 min 或 80煮 15 min 不耐高溫的液體_ _ _ 70% 的酒精對雙手消毒50% 的石炭酸、來蘇水對空氣消毒一定濃度的乳酸、食醋通過熏蒸對空氣進行消毒紫外線法紫外線照射30 min 物體表面或空氣中的微生物滅菌_ _ 在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒對接種環(huán)、接種針或其他金屬工具滅菌，也可以對試管口、瓶口滅菌_ _ 在

27、干熱滅菌箱內，160170條件下，加熱 1 2 h 耐高溫且需保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬用具等_ _ _ 在高壓蒸汽滅菌鍋內，121， 100 kpa，滅菌 1530 min _ _ _ 30 w 照射 30 min 小型接種室、接種箱等二、實驗操作(一)配制培養(yǎng)基1配制原則(1)_( 根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等)，如培養(yǎng)基可由簡單的無機物組成；生產(chǎn)用培養(yǎng)基內可加入化學成分不明確的天然物質，而分類鑒定用培養(yǎng)基內必須加入已知化學成分的物質。(2)_，注意各種營養(yǎng)物質的濃度和比例。(3)_，各種微生物適宜生長的ph 范圍不同，細菌6.57.5、放線菌7.58.5、真菌 5.06.0。注意不

28、同微生物對營養(yǎng)需求不同，因此，首先根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強的培養(yǎng)基。營養(yǎng)物質濃度過低不能滿足微生物營養(yǎng)需要，過高對微生物的生長有抑制作用，另外，培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質濃度比直接影響微生物的生長繁殖和代謝產(chǎn)物的形成和積累，其中碳氮比(c/n) 的影響較大。例如，在谷氨酸生產(chǎn)中，當培養(yǎng)基中的碳源與氮源的比為41 時，菌體大量繁殖，而產(chǎn)生的谷氨酸少；當碳源與氮源的比為3 1 時，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸合成量大增。2配制方法 (以制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基為例) (1)培養(yǎng)異養(yǎng)菌的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的營養(yǎng)構成培養(yǎng)基組分提供的主要營養(yǎng)物質牛肉膏 5.0 g 碳源、磷酸鹽和維生素蛋白胨 10

29、.0 g 氮源和維生素nacl 5.0 g 無機鹽h2o 定容至 1 000 ml 氫元素、氧元素(2)實驗流程提醒合格的培養(yǎng)基必須滅菌效果好。培養(yǎng)基配制好后，要放在恒溫箱中保溫1 2 d，若無菌落生長則說明制備的培養(yǎng)基是合格的。(二)純化大腸桿菌純化大腸桿菌就是為了獲得大腸桿菌的純種菌落，這需在培養(yǎng)時，盡量使菌落中的菌體來自于一個大腸桿菌的分裂，即這個菌落的細菌群體由一個大腸桿菌繁殖而來，這就需接種時盡量接種單個的大腸桿菌。1微生物接種的方法微生物接種的方法最常用的是_和 _兩種。(1)_通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。將 _放在酒精燈火

30、焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開盛有菌液的試管的_。將試管口通過酒精燈的_。將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中，_一環(huán)菌液。將試管口通過酒精燈的火焰，并迅速塞上棉塞。_將培養(yǎng)皿皿蓋打開一條縫隙，_將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入_，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)基。灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內劃線。重復以上操作，在三、四、五區(qū)域內劃線。注意不要將_的劃線與 _相連。將 _，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(2)_ 則是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。系列稀釋操作a取盛有9 ml 水的 6支試管滅菌

31、，并按101106 的順序編號。b用 _吸取 1 ml 培養(yǎng)的菌液，注入101 倍稀釋的試管中。用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混勻。c從 101 倍稀釋的試管中吸取1 ml 稀釋液，注入102 倍稀釋的試管內吹吸均勻，獲得102倍液。依此類推。涂布平板操作a將 _浸在盛有酒精的燒杯中。b取不超過0.1 ml 的_，滴加到培養(yǎng)基表面。c將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻810 s。d用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時可轉動培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻。2注意事項(1)平板劃線法操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要進行_，劃線操作結束時，仍需灼燒

32、_。從第二次以后的劃線操作總是從_開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加逐漸減少，最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落。(2)稀釋涂布平板法稀釋涂布平板的操作比較復雜，且各個細節(jié)均需保證“_” ，應特別注意：酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適。吸管頭不要接觸任何其他物體。吸管要在酒精燈火焰周圍使用。3微生物分離純化培養(yǎng)的結果作出分析與評價(1)培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是對照，若有菌落形成，說明培養(yǎng)基滅菌不徹底。(2)在肉湯培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落呈白色，為圓形，光滑有光澤，邊緣整齊。(3)培養(yǎng) 12 h 和 24 h 后的菌落大小不同，菌落分布位置相同。原因是時間越長，菌落中細菌繁殖越多，菌落體積越大，而菌落

33、的位置不動，只是菌落數(shù)增多。(4)頻繁使用的菌種利用臨時保藏法保存，長期保存菌種的方法是甘油管藏法。前者利用固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)后，保存在4冰箱中，第36 個月轉種培養(yǎng)一次，缺點是保存時間較短，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異；后者將菌種與無菌甘油等量混合后保存在20的冷凍箱中。4菌種的保存為了保持菌種的純凈，需對菌種進行保藏。對于頻繁使用的菌種，我們可以采用_法；對于 需 要 長 期 保 存 的 菌 種 ， 可 以 采 用 _ 法 。 將 菌 種 放 在 低 溫 環(huán) 境 中 保 藏 的 目 的 是_，但時間長了菌種還是要老化的，因此對臨時保存的菌種_個月后需重新接種。知識點一培養(yǎng)基與無菌技術1不同的微

34、生物對營養(yǎng)物質的需要各不相同。下列有關一種以co2 為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營養(yǎng)的描述中，不正確的是() a氮源物質為該微生物提供必要的氮素b碳源物質也是該微生物的能源物質c無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質d水是該微生物的營養(yǎng)要素之一2下列說法正確的是() a培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質b培養(yǎng)基只有兩類：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基c除水以外的無機物只能提供無機鹽d無機氮源不可能提供能量知識點二大腸桿菌的純化培養(yǎng)3有關平板劃線操作的敘述，不正確的是() a第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物b每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結束后，接種環(huán)上的菌種c在第二區(qū)

35、域內劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液d劃線結束后，灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者4下列為某同學在培養(yǎng)金黃色葡萄球菌實驗中的部分操作步驟，其中正確的是() a培養(yǎng)基中蛋白胨、牛肉膏溶化后，直接補充蒸餾水至100 ml b培養(yǎng)基配制完畢可直接使用c加壓至100 kpa 之前，要徹底排出鍋內的冷空氣d將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒，滅菌后立即伸入菌液試管內挑取少量菌種第 2 課時土壤中分解尿素細菌的分離與計數(shù)一、研究思路1篩選菌株(1)實驗室中微生物篩選的原理人為提供有利于_生長的條件 (包括營養(yǎng)、 溫度、 ph 等)，同時 _或_其他微生物生長。(2)選擇培養(yǎng)

36、基在微生物學中，將允許_種類的微生物生長，同時_或_其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。(3)分離分解尿素的細菌的選擇培養(yǎng)基在該培養(yǎng)基配方中，為微生物的生長提供碳源的是_，提供氮源的是_，瓊脂的作用是凝固劑。該培養(yǎng)基對微生物具有選擇作用。其選擇機制是_ 才能在該培養(yǎng)基上生長。 土 壤 中 的 細 菌 之 所 以 能 分 解 尿 素 ， 是 因 為 它 們 體 內 能 合 成 _ ， 將 尿 素 分 解 的 反 應 式 是_ 。taq 細菌能忍受93左右的高溫，是在美國黃石國家公園的一個熱泉中發(fā)現(xiàn)的，這說明， 在尋找目的菌株時，要根據(jù) _ 。2統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法(1)稀釋涂布平板法(也叫

37、活菌計數(shù)法) 原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的_，通過統(tǒng)計平板上的_，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。操作第一，設置重復組，增強實驗的說服力與準確性。將待測樣品經(jīng)一系列10 倍稀釋，然后選擇_稀釋度的菌液，分別取0.1 ml 接種到已制備好的平板上，然后用無菌涂布器將菌液涂布整個平板表面，放在適宜的溫度下培養(yǎng)并計算菌落數(shù)。為使結果接近真實值，可將同一稀釋度涂布到三個或三個以上的平板上，培養(yǎng)并計算出_。第二，為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)在_的平板進行計數(shù)， 若設置的重復組中結果相差太遠，意味著操作有誤，需重新實驗。計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)cv

38、 m ，其中c代表 _ ， v代表_(ml) ，m 代表 _。(2)顯微鏡直接計數(shù)法原理：此法利用特定的_或_，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量，但不能區(qū)分細菌的死活。計數(shù)板是一塊特制的載玻片，上面有一個特定的面積1 mm2 和高 0.1 mm 的計數(shù)室， 在 1 mm2 的面積里又被劃分成25 個(或 16 個)中格，每個中格進一步劃分成16 個(或 25 個)小格，計數(shù)室由 _個小格組成。操作：將稀釋的樣品滴在計數(shù)板上，蓋上蓋玻片，然后在顯微鏡下計數(shù)4 5 個中格中的細菌數(shù)，并求出每個小格所含細菌的平均數(shù)，再按公式求出每毫升樣品中所含的細菌數(shù)。計數(shù)公式：每毫升原液所含細菌數(shù)每小格

39、平均細菌數(shù) 400 10 000 稀釋倍數(shù)。(3)設置重復和對照設置重復：培養(yǎng)過程中應設置重復組，同一稀釋度下應涂布_個平板，才能增強實驗的說服力與準確性。設置對照：實驗中應設置對照，主要目的是_對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度。如_對照組，觀察培養(yǎng)物中是否有雜菌污染；設置_培養(yǎng)基，觀察選擇培養(yǎng)基是否具有 _作用。二、實驗設計實驗步驟1 土壤取樣：從肥沃、濕潤的土壤中， 用無菌小鐵鏟鏟去表層土3 cm 左右，迅速取土壤并裝入_密封或事先準備好的_中。2制備培養(yǎng)基：制備_培養(yǎng)基作為對照組，尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基作為_，用來判斷選擇培養(yǎng)基是否具有_。放寬稀釋范圍，如稀釋倍數(shù)為103107 范

40、圍內的要分別涂布，而每個稀釋度下需要_個選擇培養(yǎng)基、 _個牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，因此需要15 個選擇培養(yǎng)基和5 個牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。兩種培養(yǎng)基應各有一個作為_對照，此外還需準備8 個滅菌的試管和1 個滅菌的移液管。3樣品的稀釋與涂布平板：參考下面的實驗流程示意圖，將10 g 土樣加入盛有90 ml 無菌生理鹽水的錐形瓶中 (錐形瓶體積為250 ml) ，充分搖勻，吸取上清液1 ml，轉移至盛有_ ml 生理鹽水的無菌大試管依次等比稀釋至107 稀釋度，并按照由 107103 稀釋度的順序分別吸取_ml 進行平板涂布操作。按照濃度從低到高的順序涂布平板，不必更換移液管。說明：圖中的1、 2、3

41、平板是 _，4 為_作對照，判斷選擇培養(yǎng)基是否具篩選作用，還有兩個空白對照，即不涂布稀釋后菌液的選擇培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，驗證培養(yǎng)基中是否 _。4將涂布好的培養(yǎng)皿放在30溫度下培養(yǎng)，及時觀察和記錄。5挑選選擇培養(yǎng)基上不同形態(tài)的菌落接入含_培養(yǎng)基的斜面中，觀察能否產(chǎn)生顏色反應。6細菌的計數(shù)當菌落數(shù)目穩(wěn)定時，選取菌落數(shù)在_的平板進行計數(shù)。在同一稀釋度下，至少對3 個平板進行重復計數(shù)，然后求出_，并根據(jù)平板所對應的稀釋度計算出樣品中細菌的數(shù)目。同時仔細觀察所分離到的菌落，并記錄菌落特征。7統(tǒng)計表格表一平板上的菌落數(shù)記錄表稀釋倍數(shù)103 104 105 106 107 1 2 3 4 1 2 3

42、 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 ?表二菌落特征記錄表菌落種類形狀大小隆起程度顏色1 2 3 ?注：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間)，_表現(xiàn)出 _的菌落特征。三、操作提示1取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都要_。2應在 _旁稱取土壤。在火焰附近將稱好的土樣倒入_中，塞好棉塞。3在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在_旁操作。4實驗時要對_做好標記。注明_ 等。5為了提高效率，在操作時更加有條不紊，應當_。四、結果分析與評價內容結論分析有無雜菌污染的判斷對照的培養(yǎng)皿中_菌落生長 未被雜菌污染培養(yǎng)物中菌落數(shù)_ 被雜菌污染菌落形態(tài)多樣，

43、菌落數(shù)偏高培養(yǎng)物中混入_ 選擇培養(yǎng)基的篩選作用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)目_選擇培養(yǎng)基的數(shù)目 選擇培養(yǎng)基具篩選作用，已篩選出一些菌落樣品的稀釋操作得到 2 個或 2 個以上菌落數(shù)目在_的平板 操作成功，能進行菌落的計數(shù)重復組的結果若選取同一種土樣，統(tǒng)計結果應_；如果結果相差太遠，說明實驗操作過程中出現(xiàn)操作失誤，需要找出產(chǎn)生差異的原因五、課題延伸在細菌分解尿素的化學反應中，細菌合成的 _將尿素分解成了_。 氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，_升高。因此，我們可以通過檢測培養(yǎng)基_來判斷該化學反應是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_指示劑，培養(yǎng)某種細菌后， 如果 ph 升高， 指示劑將 _，這樣，我們

44、就可以準確地鑒定該種細菌能夠分解尿素。知識點一研究思路1下表為本課題使用的培養(yǎng)基，分析培養(yǎng)基配方，回答下面的問題。kh2po4 1.4 g na2hpo4 2.1 g mgso4 7h2o 0.2 g 葡萄糖10.0 g 尿素1.0 g 瓊脂15.0 g 用蒸餾水定容到1 000 ml (1)在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是_。(2)按物理性質劃分該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基， 理由是培養(yǎng)基中含有_；該類培養(yǎng)基常用于微生物的_等。(3)由于 _ ，所以該培養(yǎng)基只能用于能夠合成_的微生物的培養(yǎng)。 用此培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤浸出液能夠從土壤中篩選出 _的細菌。(4)在微生物學中，將_ _的

45、培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。2廣東省是我國甘蔗生產(chǎn)區(qū)之一。甘蔗是一種高光效的c4 植物，單位面積產(chǎn)量很高，種植面積日益擴大，目前已成為南方地區(qū)燃料酒精生產(chǎn)的重要原料。利用甘蔗生產(chǎn)燃料酒精的一般工藝流程為：甘蔗 榨汁 (蔗糖 ) 酵母發(fā)酵 蒸餾 成品 (燃料酒精 )。(1)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精發(fā)酵菌種，對野生酵母菌進行誘變后通過篩選可以得到具有這些特性的突變菌，誘變及篩選過程如下：步驟 1：野生菌液體培養(yǎng)一段時間后接受紫外線照射誘變處理。步驟 2：制備選擇培養(yǎng)基。在基本培養(yǎng)基的基礎上，注意_和_，加瓊脂后滅菌，制成固體平板。步驟 3：將紫外線照射后的菌液稀釋涂布平板。步驟 4：根

46、據(jù) _ ，篩選出突變菌。(2)上述步驟2、 3 和 4 的依據(jù)分別是_ _ _ 。知識點二實驗設計3用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)，在對應稀釋倍數(shù)為106 的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結果，正確的是() a涂布了1 個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230 b涂布了2 個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是215 和 260，取平均值238 c涂布了3 個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、212 和 256，取平均值163 d涂布了3 個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、240 和 250，取平均值233 4在本實驗操作中對使用的平板和試管要進行標記，以下說法正確的是() a對培養(yǎng)皿僅需注明培養(yǎng)基的種類即可b一般在

47、使用之后進行標記c由于試管用的較多，只需對試管進行標記即可d標記的目的主要是為了防止實驗中平板、試管等的混淆專題 3 植物的組織培養(yǎng)技術第 1 課時菊花的組織培養(yǎng)一、基礎知識1植物組織培養(yǎng)的基本過程(1) 細 胞 全 能 性 的 表 達 ： _ 的 植 物 組 織 或 細 胞 ， 在 一 定 的 _ 、 _ 和_ 的作用下，發(fā)育成完整植株的過程。(2) 細胞分化： 在植物的 _過程中，細胞在 _、 _和_上都會出現(xiàn) _的差異，形成這些差異的過程叫做細胞分化。(3) 植物組織培養(yǎng)的基本過程離體的植物器官、組織或細胞 ( 又叫 _)愈傷組織胚狀體、 叢芽等生長新個體愈傷組織的特點： 細胞 _， 是

48、一群 _的呈 _ 的薄壁細胞。脫分化 ( 去分化 ) ：由 _的植物組織或細胞產(chǎn)生_的過程。再分化：由_重新分化成根或芽等器官的過程。(4) 條件： _的植物組織或細胞，在一定的_、_和其他外界條件的作用下就可能表現(xiàn)出全能性，發(fā)育成完整植株。離體的植物組織或細胞叫做_。2影響植物組織培養(yǎng)的因素(1) 培養(yǎng)材料的影響：不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度_。對于同一種植物材料，材料的_、 _等也會影響實驗結果。因此菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇_的莖 _部_的側枝。(2) 營養(yǎng)物質的影響：常用的_培養(yǎng)基，主要成分包括_、_、_以及蔗糖等。其中_和_提供植物細胞所必需的無機鹽；_提供碳源，維持細胞滲透壓。(3

49、) 植物激素的影響：ms培養(yǎng)基常需添加植物激素。其中_和_是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素，這兩種激素的_、_以及 _等，都會影響實驗結果。下表是關于兩種植物激素在組織培養(yǎng)過程中的作用。使用順序或用量比實驗結果先使用生長素，后使用細胞分裂素有利于 _，但細胞 _ 先使用細胞分裂素，后使用生長素細胞 _ 同時使用分化頻率 _ 生長素用量 / 細胞分裂素用量，比值高有利于 _的分化、抑制_的形成生長素用量 / 細胞分裂素用量，比值低有利于 _的分化、抑制_的形成生長素用量 / 細胞分裂素用量，比值適中促進 _的形成(4) 環(huán)境因素的影響：_、_、_等條件也能影響植物組織培養(yǎng)。二、植物組織

50、培養(yǎng)的操作流程1制備 ms固體培養(yǎng)基：將各種營養(yǎng)成分按比例配制成_。利用母液配制菊花組織培養(yǎng)所需要的培養(yǎng)基，菊花的組織培養(yǎng)比較容易，因此可以不加激素，而如果是其他植物的組織培養(yǎng)，則要配制成三種培養(yǎng)基，即_、_和_。配制菊花的組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基時先將稱好的瓊脂加入800 ml 蒸餾水中，加熱使_熔化；然后加入_30 g ，加入一定量的 _，充分混勻后加蒸餾水定容至1 000 ml ，調節(jié) _；最后分裝到錐形瓶中，每瓶分裝 50 ml或100 ml 。用包在紗布中的棉塞封嚴瓶口，外面包一層牛皮紙。將配制好的培養(yǎng)基放入_ 鍋，在 121下滅菌15 min 。2外植物體消毒：選取生長旺盛的菊花的嫩枝，先

51、用清水洗凈，再用體積分數(shù)為_浸泡67 s 后，立即取出并用無菌水清洗，取出后吸干水分再放入質量分數(shù)為_中浸泡 1 2 min。取出后，在無菌水中至少清洗3 次，漂凈消毒液。3接種：在超凈工作臺上鋪上無菌濾紙，將已消毒的菊花莖段切成小段( 長 0.5 1.0 cm) ，迅速接種到培養(yǎng)基上。插入時應注意方向，使嫩莖的形態(tài)學下端接觸培養(yǎng)基，不要_。每瓶接種68 塊嫩莖。接種后，將錐形瓶的瓶口在酒精燈火焰上轉動灼燒一遍，將封口膜重新扎好，貼上標簽，做好記錄。4培養(yǎng)：接種后的錐形瓶放在_中培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度應控制在1822，并且每日用日光燈光照12 h ，并定期進行_，保持適宜的 _和_。5移栽：當小苗長到

52、56 cm，基部形成根原基的時候，即可進行移栽。試管苗是在無菌、充分營養(yǎng)供給、適宜的光照和溫度以及100% 相對濕度環(huán)境中生長的。剛出瓶的試管苗對外界環(huán)境不太適應。將試管苗培養(yǎng)瓶的瓶口敞開一半，放置在2025的遮陰環(huán)境中，適應714 d。若試管苗不萎蔫、有新生長的趨勢，便可將試管苗取出，小心洗凈粘在根上的培養(yǎng)基，植入盛有_等材料的花盆中，澆足水分，罩上帶孔的塑料薄膜，將花盆放置在2025的陰涼處35 d 。待幼苗長出新葉時，揭去塑料薄膜，再過710 d ，幼苗即可移栽到土壤里。6栽培：將幼苗移載后，每天觀察并記錄幼菌生長情況，適時澆水、施肥，直至開花。提醒(1) 植物組織培養(yǎng)一定要采用無菌技術

53、。(2) 實驗選材是實驗成功的關鍵。知識點一植物組織培養(yǎng)的基本過程及影響因素1請回答下列有關植物組織培養(yǎng)的幾個問題。(1) 離 體 植 物 組 織 和 細 胞 培 養(yǎng) 常 用 的 一 種 培 養(yǎng) 基 是 _ ， 其 主 要 成 分 中 的 大 量 元 素 有_ ，培養(yǎng)基中常用的兩種植物激素是_和_，兩者使用時的_、_、 _等，都會影響實驗的結果。(2) 下圖表示植物組織培養(yǎng)的部分過程：離體的器官、組織或細胞a 植物體過程是 _，過程是 _，a是_。(3) 組織培養(yǎng)過程中還需要維持一定的外界條件，一是要有適宜的_，二是 _。2下列關于影響植物組織培養(yǎng)因素的說法，正確的是( ) a不同植物組織培養(yǎng)

54、的難易程度不同，同一種植物材料培養(yǎng)的難易程度相同b在植物組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)基中必須添加植物激素c植物激素中，生長素和細胞分裂素的作用是相互獨立的dph、溫度、光照條件等對植物組織培養(yǎng)也特別重要知識點二植物組織培養(yǎng)操作過程3下列哪組符合菊花組織培養(yǎng)的基本步驟( ) a制備 ms培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培b制備 ms培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)栽培移栽c制備 ms培養(yǎng)基外植體消毒接種栽培培養(yǎng)移栽d制備 ms培養(yǎng)基外植體消毒接種移栽培養(yǎng)栽培4關于植物組織培養(yǎng)的內容，以下說法錯誤的是( ) a一般來說容易進行無性繁殖的植物，也容易進行組織培養(yǎng)b對菊花莖段進行組織培養(yǎng)，不加植物激素也能成功c接種后的錐形

55、瓶放入無菌箱中，給予適宜的溫度和光照即可d移栽生根的試管苗之前，先打開瓶口，讓試管苗在培養(yǎng)間生長幾日第 2 課時月季的花藥培養(yǎng)一、月季花藥培養(yǎng)的基礎知識1被子植物的花粉發(fā)育過程(1) 被子植物的花粉是在花藥中由花粉母細胞經(jīng)過_形成的，是 _的生殖細胞。(2) 發(fā)育歷程：被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷_、_和_等階段。提醒(1) 花粉萌發(fā)進行受精作用時，每個花粉?？舍尫懦鰞蓚€_，從而完成被子植物的_。(2) 被子植物的花粉發(fā)育要經(jīng)過小孢子四分體時期、單核期、雙核期三個階段，其中單核期又分單核居中期和單核靠邊期兩個時期，雙核期包括花粉管細胞核和生殖細胞核兩個核。(3) 被子植物花粉發(fā)育過程中的“四分體”

56、是指由一個花粉母細胞經(jīng)過減數(shù)分裂產(chǎn)生的連在一起的4 個_(4 個小孢子 ) ；而減數(shù)分裂中的“四分體”是指在聯(lián)會狀態(tài)下的一對同源染色體，因為含有四條染色單體，所以叫做“四分體”。2產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑(1) 通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑一種是花粉通過_階段發(fā)育成植株；另一種是花粉在誘導培養(yǎng)基上先形成_，再將其誘導分化成植株。花藥中的花粉脫分化胚狀體分化叢芽花藥中的花粉脫分化愈傷組織再分化叢芽誘導生根移栽通 過 花 藥 培 養(yǎng) 產(chǎn) 生 花 粉 植 株 的 兩 種 途 徑 并 沒 有 絕 對 的 界 限 ， 主 要 取 決 于 培 養(yǎng) 基 中_ 。(2) 單倍體育種的過程在花藥培養(yǎng)的基礎上

57、，用_繼續(xù)處理單倍體幼苗，染色體加倍，重新恢復為二倍數(shù)。因為它們的二倍數(shù)染色體是由單倍數(shù)染色體本身加倍而來的，所以都是純系，不會發(fā)生性狀分離。詳見下圖：單倍體育種的優(yōu)點后代都是 _，自交產(chǎn)生的后代不會發(fā)生性狀分離；明顯地縮短了_；另外為新品種的培育開辟了新途徑。3影響花藥培養(yǎng)的因素(1) 誘導花粉植株能否成功及誘導成功率的高低，受多種因素影響， 其中 _和_是主要的影響因素。(2) 不同植物的誘導成功率_。同一種植物_ 對誘導成功率也有直 接 影 響 。 選 擇 適 宜 的 _ 也 是 提 高 誘 導 成 功 率 的 重 要 因 素 ； 不 同 生 物 的 適 宜 的_ 不同，但對絕大多數(shù)植物

58、而言，適宜花藥培養(yǎng)的時期是_期。二、花藥培養(yǎng)的實驗操作流程1材料的選取確定花粉發(fā)育時期的最常用的方法是_ 法，對一些花粉細胞核不易著色的植物，需采用_法。2材料的消毒通常將選取的材料先用_ 浸泡約 _ s，在無菌水中清洗，然后用質量分數(shù)為_溶液消毒24 min，最后用無菌水沖洗_次。3接種和培養(yǎng)先在 _條件下除去萼片和花瓣，并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上?；ㄋ幣囵B(yǎng)的第一步是接種的花藥開裂， 長出 _或釋放出 _。 下一步將 _及時轉移到 _培養(yǎng)基上培養(yǎng)，或將大量的幼小植株分開，分別移植到新的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度控制在25左右，不需要_。_形成后才需要光照。4鑒定和篩選在花藥培養(yǎng)中，特別是通過愈傷

59、組織形成的花粉植株，常常會出現(xiàn)染色體組的數(shù)目的變化。因此還需要對培養(yǎng)出來的植株作進一步的鑒定和篩選。提醒(1) 花藥培養(yǎng)的第一步成功的標志是接種的花藥長出愈傷組織或釋放胚狀體。下一步將愈傷組織及時轉移到分化培養(yǎng)基上，以便愈傷組織或胚狀體進一步分化成再生植株。(2) 選材是否成功是花藥培養(yǎng)成功的關鍵，因此學生應學會通過顯微鏡觀察處于適宜發(fā)育期的花粉。(3) 花蕾的選擇要符合實驗的要求，過早過晚都是不利的。(4) 培養(yǎng)基滅菌、花蕾消毒或接種等都應嚴格按無菌技術的要求進行操作，否則會導致培養(yǎng)對象被污染。知識點一月季花藥培養(yǎng)的基礎知識1回答下列有關花藥培養(yǎng)的問題：(1) 通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體植株一般

60、有兩種途徑：一種是花粉通過_階段發(fā)育為植株；另一種是在誘導培養(yǎng)基上先形成_ ，再將其誘導分化成植株。這兩種途徑主要取決于培養(yǎng)基中_的種類及濃度配比。(2) 通 過 上 述 兩 種 途 徑 得 到 的 單 倍 體 植 株 具 有 的 特 點 是 _ 。 應 如 何 解 決 ？_。2如圖表示某植物的花藥培養(yǎng)過程，請據(jù)圖判斷下列說法中錯誤的是( ) aaf 不能體現(xiàn)細胞的全能性bc中是高度液泡化的薄壁細胞c植株 a和 f中的染色體組數(shù)不同d植株 f 一般不能直接應用于生產(chǎn)知識點二月季花藥培養(yǎng)的實驗流程3下列關于花藥培養(yǎng)過程的說法，正確的是( ) a花藥中的花粉在培養(yǎng)基上發(fā)育成胚狀體還是愈傷組織是隨機