基于丙肝病毒檢測(cè)方法的分析探討

1、    基于丙肝病毒檢測(cè)方法的分析探討    侯艷【摘要】 丙肝主要是一種由于丙肝病毒感染所導(dǎo)致的一種肝炎。感染的傳播途徑主要由輸血性傳播、由吸毒導(dǎo)致、針刺性傳播等造成。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，在現(xiàn)階段我國(guó)已經(jīng)有超過(guò)四千一百萬(wàn)丙肝患者，但是在現(xiàn)階段對(duì)于丙肝病毒檢測(cè)方法較為有限，本文主要針對(duì)丙肝病毒檢測(cè)方法進(jìn)行分析和探討?！娟P(guān)鍵字】 丙肝病毒 檢測(cè)方法 分析 探討一、丙肝病毒檢測(cè)方法的臨床意義丙肝主要是一種由于丙肝病毒感染所導(dǎo)致的一種肝炎。丙肝病毒（hcv），主要是一種rna病毒，這種病毒具有以下特點(diǎn)不僅僅在傳播過(guò)程中途徑較為廣泛，同時(shí)在具有較強(qiáng)的“生命力”。主要通

2、過(guò)血液傳播、母嬰傳播、性傳播等途徑。丙肝病毒（hcv）較強(qiáng)的生命力來(lái)自于其強(qiáng)大的變異能力，丙肝病毒（hcv）能夠根據(jù)環(huán)境的 變化進(jìn)行相應(yīng)的變異，從而能夠更好地適應(yīng)環(huán)境。此外更加重要的是這種病毒能夠?qū)⒆陨磉M(jìn)行隱藏，因此丙肝病毒（hcv）在發(fā)病初期是很難被發(fā)現(xiàn)和具有相應(yīng)的臨床表現(xiàn)的。因此 而言，對(duì)于丙肝病毒（hcv）找到一種快速有效的檢測(cè)方法是我們分析的關(guān)鍵。二、丙肝病毒檢測(cè)方法的探究在現(xiàn)階段常見(jiàn)的丙肝病毒檢測(cè)方法主要由以下幾個(gè)方面：丙型肝炎病毒抗-hcv的檢測(cè)技術(shù)、丙型肝炎病毒核酸rna的檢測(cè)、血清中hcv核心抗原檢測(cè)。1、丙型肝炎病毒抗-hcv的檢測(cè)技術(shù)丙型肝炎病毒抗-hcv的檢測(cè)技術(shù)主要是基

3、于丙型肝炎病毒的間接酶聯(lián)免疫法。主要通過(guò)我們常見(jiàn)的生物學(xué)知識(shí)進(jìn)行。其實(shí)驗(yàn)步驟如下：（1）包被：選取相應(yīng)的碳酸緩沖液，此時(shí)對(duì)應(yīng)的濃度大約為0.1mol/l，酸堿性為ph 9.6。直接進(jìn)行抗原的測(cè)定，此時(shí)對(duì)應(yīng)的200l/孔；選取bpo4-cy成為我們所選取的參考系數(shù)，同時(shí)設(shè)置對(duì)應(yīng)的參照為兩組，一組為包被抗原不加抗bpo血清，另一組參考系數(shù)為不包被抗原但加抗bpo血清。在此基礎(chǔ)上，選取抗原-bsa抗血清作為其中陰性的參考系數(shù)；在溫度為4的冰箱中過(guò)夜。（2）選取的洗滌液濃度大約為bps 0.01mol/l，酸堿性為ph 7.2，進(jìn)行多次的洗滌，一般情況下每三分鐘洗滌一次，共洗滌3次。（3）與特異性抗體

4、反應(yīng)：在此洗滌結(jié)束之后，在提前準(zhǔn)備好的酶案板上，在此基礎(chǔ)上加入適量的抗bpo血清，在三十七攝氏度的恒溫中保持兩個(gè)小時(shí)。（4）每三分鐘洗滌一次，共洗滌3次。（5）與酶聯(lián)抗抗體反應(yīng)：再加入150稀釋的gar-igg-hrp 200l/孔，37保溫1h。（6）洗滌三次。（7）顯色：加入opd底物液，200l/孔，37顯色。（8）采取用硫酸進(jìn)行反應(yīng)的終止，此時(shí)選取 50l/孔，用測(cè)量其中的光的吸收值。（9）結(jié)果判斷：當(dāng)呈現(xiàn)出的結(jié)果 與實(shí)際結(jié)果一致時(shí)結(jié)果成立。若大于（x+2sd），判為陽(yáng)性；若小于x+sd，判為陰性3。2、丙型肝炎病毒核酸rna的檢測(cè)國(guó)際和國(guó)內(nèi)流行的hcv rna定量檢測(cè)方法有：coba

5、s taqman hcv rna和pcr法。但是此時(shí)的hcv載量的高低與實(shí)際情況中患者所對(duì)應(yīng)的丙型肝炎病毒的基本情況沒(méi)有必然的聯(lián)系，與患者的實(shí)際病情也具有一定的差異。但是丙型肝炎病毒核酸rna的檢測(cè)方式，是一種對(duì)于患者基本抗病毒療效狀況的關(guān)鍵參照依據(jù)。在患者處于急性感染期，患者身體中所對(duì)應(yīng)的丙型肝炎病毒核酸rna一般情況下可能 達(dá)到相應(yīng)的105107kb/ml。然而在患者處于在一般感染的時(shí)期，丙型肝炎病毒核酸rna水平基本上保持在在5×1045×106kb/ml之間。3、血清中hcv核心抗原檢測(cè)血清中hcv核心抗原檢測(cè)主要是通過(guò)分析alt、ast水平變化，然后可以對(duì)實(shí)際的患

6、者的基本情況進(jìn)行判斷。但是這種情況的判斷不能分析出患者肝炎的狀況和患者所處于的病情等級(jí)。對(duì)于慢性丙型肝炎患者和急性丙型肝炎患者其體內(nèi)的alt和ast水平具有明顯的不同，患者所處于的狀況情況與自身的身體狀況具有一定的關(guān)系。在慢性丙型肝炎患者中，大多數(shù)檢測(cè)處于30%alt正常狀態(tài)，約40%alt水平低于2倍正常值。急性丙型肝炎患者體內(nèi)的血清白蛋白一般情況下處于正常的狀態(tài)。凝血酶原活動(dòng)度和膽堿酯酶活性也基本上保持在 正常的水平2。三、丙肝病毒檢測(cè)方法的對(duì)比分析從表中可以看出三種分析方法的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)，利用各種分析方法可以為治療、確診、評(píng)估、預(yù)測(cè)實(shí)現(xiàn)多對(duì)應(yīng)的技術(shù)依據(jù)和技術(shù)職稱。通過(guò)及時(shí)的清楚病毒，并及時(shí)的處理并阻止病情的惡化，從而最大限度的降低患者出現(xiàn)肝硬化的現(xiàn)象，為丙肝病毒的防治打下基礎(chǔ)。參 考 文 獻(xiàn)1 杜慧.丙肝病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)進(jìn)展j. 中國(guó)醫(yī)療前沿. 2012（11