T細(xì)胞活化和CTL制備

1、1會計學(xué)T細(xì)胞活化和細(xì)胞活化和CTL制備制備前體前體T細(xì)胞淋巴瘤（細(xì)胞淋巴瘤（Precursor T-cell neoplasm) 前體前體T淋巴母細(xì)胞淋巴瘤淋巴母細(xì)胞淋巴瘤/白血病白血病成熟（外周）成熟（外周）T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤u白血病白血病/播散型（播散型（Predominantly Leukemic/Disseminated）u結(jié)內(nèi)型（結(jié)內(nèi)型（ Predominantly Nodal）u結(jié)外型（結(jié)外型（Predominantly Extranodal）T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤WHO 分類分類Rudiger T, et al. Ann Oncol. 2002;13:140-149.T細(xì)胞

2、前淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞前淋巴細(xì)胞白血病T-cell prolymphocytic leukemiaT細(xì)胞粒淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞粒淋巴細(xì)胞白血病T-cell granular lymphocytic leukemiaNK細(xì)胞白血病細(xì)胞白血病NK-cell leukemia成人成人T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤/白血病白血病(HTLV1+)Adult T-cell lymphoma/leukemia (ATL)白血病白血病/ /播散型播散型T T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤 血管免疫母血管免疫母T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤Angioimmunoblastic T-cell lymphoma （AITL） 外周外周T細(xì)胞淋巴

3、瘤細(xì)胞淋巴瘤,非特異性非特異性Peripheral T-cell lymphoma, unspecified （PTCL-u） 間變大細(xì)胞淋巴瘤，間變大細(xì)胞淋巴瘤，T/裸細(xì)胞，原發(fā)全身型裸細(xì)胞，原發(fā)全身型 Anaplastic large-cell lymphoma（ALCL） T/null cell, primary systemic type結(jié)內(nèi)型結(jié)內(nèi)型T T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤蕈樣霉菌病蕈樣霉菌病/ / Szary綜合癥綜合癥 Mycosis fungoides/Szary syndrome(MF/SS)間變大細(xì)胞淋巴瘤，間變大細(xì)胞淋巴瘤，T/裸細(xì)胞，原發(fā)皮膚型裸細(xì)胞，原發(fā)皮膚型Anap

4、lastic large-cell lymphoma（ALCL），）， T/null cell, primary cutaneous type結(jié)外結(jié)外NK/T細(xì)胞淋巴瘤，鼻型細(xì)胞淋巴瘤，鼻型 Extranodal NK/T-cell lymphoma, nasal type腸病型腸病型T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤 Enteropathy-type T-cell lymphoma (ETCL)肝脾肝脾T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤 Hepatosplenic gamma-delta T-cell lymphoma (HSTCL)皮下脂膜炎樣皮下脂膜炎樣T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤 Subcutaneous pann

5、iculitis-like T-cell lymphoma (SCPTCL) 結(jié)外型結(jié)外型T T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤外周外周T T細(xì)胞淋巴瘤概述細(xì)胞淋巴瘤概述起源：成熟T淋巴細(xì)胞，不表達(dá)脫氧核苷酰轉(zhuǎn)移酶（TdT)流行病學(xué)u發(fā)病率低：約占所有淋巴瘤12%u 明顯地域特征：亞洲高發(fā)，歐美低病因： 不詳，部分與HTLV-1和EBV感染有關(guān)臨床表現(xiàn)：結(jié)外病變合并淋巴結(jié)病變，前者更多見臨床分期：多為/期病變，侵襲性臨床過程病理類型：一組異質(zhì)性疾病臨床預(yù)后：不良，5y-OS約30%概概 述述年齡：好發(fā)于老年人（50歲），ALCL除外性別比例：男女臨床表現(xiàn)： u淋巴結(jié)腫大和B癥狀多見u結(jié)外病變常見：皮膚、軟

6、組織、胃腸道、肝、脾、鼻咽部、骨和神經(jīng)系統(tǒng)臨床特點臨床特點亞型亞型ORR（CR）%5y-OS %原發(fā)皮膚型原發(fā)皮膚型 間變大細(xì)胞淋巴瘤間變大細(xì)胞淋巴瘤100（89）78原發(fā)全身型原發(fā)全身型間變大細(xì)胞淋巴瘤間變大細(xì)胞淋巴瘤血管免疫母血管免疫母T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤76（55）90（70）4336非特異性外周非特異性外周T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤84（64）35鼻型鼻型T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤腸病型腸腸病型腸T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤80（73）78（33）2522生存情況生存情況Savage KJ, et al.Ann Oncol. 2004 Oct;15(10):1467-75 成人成人T細(xì)胞白血病細(xì)胞

7、白血病/淋巴瘤淋巴瘤 (ATL) 病因：HTLV-1感染患病年齡：中位55歲臨床表現(xiàn)：淋巴結(jié)腫大（72%） 皮膚病變（53%） 肝腫大（47%） 脾腫大（25%） 高鈣血癥（28%）ATL 亞亞 型型急性型 ：表現(xiàn)為高鈣血癥、白血病表現(xiàn)和淋巴結(jié)腫大 預(yù)后最差，MST 6 月淋巴瘤型：表現(xiàn)為淋巴結(jié)、肝、脾、CNS、骨和胃腸道病變， 循環(huán)中異常的淋巴細(xì)胞少 ( 5%，MST 24月冒煙型：MST 尚未取得ATL 分子遺傳學(xué)改變分子遺傳學(xué)改變表達(dá)抗原：CD3、 CD4、 CD25和CD52多染色體斷裂（6）和非整倍體：多見于急性型和淋巴瘤型染色體異常：1p, 1p22, 2q, 3q, 14q和 1

8、4q32異常，總生存較差侵襲性病變：1q 和4q 更常見， 7q預(yù)后好TCR基因重排和HLTV-1整合的證據(jù)ATL治療治療聯(lián)合化療：MST 8月CHOP減瘤后使用抗核苷、 IFN-和口服VP16IFN- 聯(lián)合As2O3治療 全反式維甲酸ATRA IFN-疊氮胸苷：RR 70%-90%，MST 11-18月新藥治療：denileukin diftitox 和阿侖單抗ATL治療治療血管免疫母血管免疫母T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤 (AITL)流行病學(xué)：占所有NHL的4%-6%患病年齡：中位64歲臨床表現(xiàn)u結(jié)內(nèi)表現(xiàn)：廣泛淋巴結(jié)腫大u全身表現(xiàn)：高熱、肝脾腫大、皮疹、胸腹水、蛋白尿高球蛋白血癥、關(guān)節(jié)炎、嗜酸性

9、粒細(xì)胞增多癥臨床分期：多為III/IV期病變AITL 分子遺傳學(xué)改變分子遺傳學(xué)改變表達(dá)抗原：CD10、廣泛濾泡樹突細(xì)胞表達(dá)CD21CD3+,CD4+,CD5+,CD45+染色體異常：3號、5號和X染色體三體性異常最常見與預(yù)后關(guān)系：uTCR 鏈基因和Ig基因重排預(yù)后較差u復(fù)雜的染色體組型與生存降低有關(guān)u受累的淋巴結(jié)均可檢測到EBV基因組AITL 治療治療治療：含蒽環(huán)類的聯(lián)合化療，CHOP方案療效和預(yù)后：CR 50-70%，5年OS 10-30%，MST 3年復(fù)發(fā)患者對免疫抑制劑有效：低劑量MTX/強(qiáng)的松、環(huán)胞霉素、 嘌呤類似物、denileukin diftitox治療方法治療方法CR率率穩(wěn)定型

10、穩(wěn)定型危及生命型危及生命型復(fù)發(fā)復(fù)發(fā)/難治型難治型強(qiáng)的松29%-聯(lián)合化療-56%64%AITL前瞻性非隨機(jī)的多中心研究前瞻性非隨機(jī)的多中心研究中位隨訪OSDFS中位OS28月40.5%32.3%15月非特異性外周非特異性外周T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤 (PTCL-u)流行病學(xué)；占所有NHL的5%-7%患病年齡：中位61歲臨床分期：I/II期 27%,III期12%,IV期 61%不良預(yù)后特征： B癥狀、LDH、巨塊（10cm)、PS1和結(jié)外病變最近研究表明：IPI也是確定PTCL-u預(yù)后的較好指標(biāo)PTCL-u 分子遺傳學(xué)改變分子遺傳學(xué)改變表達(dá)抗原：CD3、 CD4、 CD5、CD7、CD8TCR基因

11、重排(位點的重排最常見）基因突變：P53、k-ras、c-kit和beta-cateninP53基因突變： 與治療失敗、OS和DFS降低有關(guān)PTCL-u 治療治療 標(biāo)準(zhǔn)方案化療，5年總生存30%-35% 核苷類似物：Pentostatin（RR 15%-100%） 氟達(dá)拉濱和克拉屈濱 （2-chlorodeoxyadenosine，2-CdA) 吉西他濱：單藥對于復(fù)發(fā)/難治的T細(xì)胞淋巴瘤 RR 60%PTCL-u 治療治療Denileukin diftitox (Ontak)： u白喉毒素/ IL-2基因重組融合蛋白u(yù)復(fù)發(fā)/難治PTCL-u，單藥RR 40%Campath-1H（Alemtuz

12、umab)阿倫單抗：w針對CD52人源化單克隆抗體w復(fù)治PTCL-u， RR 36%間變性大細(xì)胞淋巴瘤間變性大細(xì)胞淋巴瘤 (ALCL) T/null cell, primary systemic type流行病學(xué)；原發(fā)全身型占所有NHL的2%-3%臨床表現(xiàn)：可有結(jié)外病變，但主要累及淋巴結(jié)間變性淋巴瘤激酶（ALK）是預(yù)后特征性標(biāo)志間變性大細(xì)胞淋巴瘤間變性大細(xì)胞淋巴瘤 (ALCL) T/null cell, primary systemic type原發(fā)全身型中，ALK陽性占50%-60%原發(fā)全身型（尤其ALK+)是T細(xì)胞淋巴瘤中預(yù)后最好的亞型ALCL(ALK+/-)中，CD56(神經(jīng)細(xì)胞粘附分子

13、）陽性預(yù)后較差變量變量ALK+ALK-中位年齡3561男女比例3:10.9:1全身癥狀常見-結(jié)外病變常見較少見晚期病變常見-5年總生存79%46%根據(jù)根據(jù)ALK的原發(fā)全身型的原發(fā)全身型ALCL臨床特征臨床特征Survival of T-cell/null cell anaplastic large cell lymphoma (ALCL) patients by anaplastic lymphoma kinase (ALK) expressionGascoyne RD, et al. Blood.1999;93(11):3913-3921.特點特點原發(fā)全身型原發(fā)全身型原發(fā)皮膚型原發(fā)皮膚型AL

14、CLALK+ ALCLALK-ALCLT細(xì)胞表型CD4+CD4+CD4+ALK蛋白+CD30ClusterinEMA/細(xì)胞毒素蛋白+(80%)+(50%)+(70%)中位年齡5050性別男女男女男女5年生存率65%-90%30%-40%90%原發(fā)全身型和原發(fā)皮膚型原發(fā)全身型和原發(fā)皮膚型ALCL臨床病理特征臨床病理特征細(xì)胞毒素蛋白：粒酶B、穿孔素、TIA-1(T細(xì)胞胞漿內(nèi)抗原）ALCL 分子遺傳學(xué)改變分子遺傳學(xué)改變表達(dá)抗原：CD30（Ki-1）+、T細(xì)胞抗原或裸細(xì)胞抗原TCR 基因重排,染色體易位，產(chǎn)生融合蛋白其它：bcl-2增高、高甲基化、c-myc表達(dá)基因異?；虍惓ｎl率頻率融合蛋白融合蛋白

15、分子量分子量染色部位染色部位t(2;5)(p23;q35)73%NPM-ALK80KD細(xì)胞漿、胞核t(1;2)(q21;p23) 18%TPM3-ALK104KD細(xì)胞漿、胞核t(2;3)(p23;q21) 3%TFG-ALK97KD細(xì)胞漿t(2;22)(p23;q11) 3%CLTCL-ALK250KD粒細(xì)胞漿inv(2)(p23;q35) 3%ATIC-ALK96KD細(xì)胞漿NPM:核磷蛋白基因ALK陽性的陽性的ALCL的的融合蛋白特征融合蛋白特征NPM-ALK 融合基因的作用機(jī)制融合基因的作用機(jī)制NPM編碼穿梭于核和胞漿間的核糖體成分并廣泛表達(dá)，ALK編碼酪氨酸激酶受體NPM-ALK融合蛋白

16、能使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化ALCL 治療治療兒童ALCL:根據(jù)預(yù)后因素,按照高度惡性B細(xì)胞 淋巴瘤治療,減瘤治療后，短程多藥強(qiáng)化治療成人ALCL：全身型，采用含蒽環(huán)方案化療首次CR后，采用自體造血干細(xì)胞移植（HSCT)Survival of patients with peripheral T-cell lymphoma (PTCL) compared with anaplastic large cell lymphoma (ALCL) and diffuse large B-cell lymphoma (DLBC).Armitage JO, et al. Ann Oncol.2004;15(10)

17、:1447-1449.蕈樣霉菌病蕈樣霉菌病/ /Szary綜合癥( MF/SS )( MF/SS )流行病學(xué)：約占所有NHL0.5%，占皮膚T細(xì)胞淋巴瘤80%病因：可能與化學(xué)物質(zhì)接觸有關(guān)，與HTLV-1有關(guān)患病年齡：中位55-60歲病變部位：表皮真皮皮下組織MF皮膚病變：斑點期、斑塊期和腫瘤期Szary綜合癥：MF的白血病改變 Szary綜合癥典型特征：u彌漫性紅皮病u廣泛性淋巴結(jié)腫大u皮膚、淋巴結(jié)和外周血存在高度超螺旋的瘤細(xì)胞(CD4+CD7-) MF/SS 臨 床 表 現(xiàn)分子遺傳學(xué)改變分子遺傳學(xué)改變表達(dá)抗原：記憶輔助性T細(xì)胞CD3+CD4+CD45RO+CD2、CD3和CD5 TCR基因重

18、排MF/SS 治療及預(yù)后局部化療：激素，HN2，BCNU早期病變或緩解癥狀，CR 50%-60%光化學(xué)治療：PUVA 長期治愈率15%-20%皮膚全層電子束治療（TSEBT ）u早期病變IA期 10y-RFS 33-52; IB期以上10y-RFS 16%u晚期病變T3、T4和N3的ORR分別是81%、61%和70% T3、T4和N3的5y-OS分別是37%、44%和32%MF/SS 治療及預(yù)后體外光分離置換：增強(qiáng)腫瘤的免疫原性u紅皮?。═4）：ORR 83%, CR 20%u難治MF/SS：ORR 73%全身治療：難治性MF細(xì)胞毒藥物、INF-、維甲酸類、融合毒素、單抗MF/SS 治療及預(yù)后

19、細(xì)胞毒藥物u單藥治療：CR30%，ORR 60%-70% 激素、烷化劑、甲氨喋呤、吉西他濱Pentostatin(脫氧助間霉素) u聯(lián)合治療：強(qiáng)的松和苯丁酸氮芥 平均緩解期 16.5月EPOCH方案 ORR 80%, CR 27%MF/SS 治療及預(yù)后INF-： 晚期難治ORR 45% , CR15% 早期初治ORR 80% 與化療聯(lián)合 ORR 40%-50%維甲酸類: ORR 44%-68%u Bexarotene早期病變vs.晚期病變中位緩解期 15月 vs.5月Denileukin diftitox(ONTAK)：ORR 37%,CR14% 中位緩解期 7月Campath-1H結(jié)外結(jié)外N

20、K/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤, 鼻型鼻型流行病學(xué)：多流行于亞洲和中南美洲，西方少見形態(tài)學(xué)：血管中心性浸潤、血管破壞和壞死病因：與EBV感染有關(guān)患病年齡：中位43歲臨床表現(xiàn)：通常結(jié)外病變和局限性I/II期u好發(fā)于鼻腔和鼻竇，很少累及眼眶/眼u結(jié)外病變：皮膚、軟組織、胃腸道、睪丸、腎、上呼吸道、病理特征：血管破壞性增殖、侵襲性的臨床過程預(yù)后較差：5y-OS20%-35%結(jié)外結(jié)外NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤, 鼻型鼻型分子遺傳學(xué)改變分子遺傳學(xué)改變表達(dá)抗原：NK細(xì)胞來源（ CD2+, CD56+, 胞漿CD3,EBV+)細(xì)胞毒顆粒（粒酶B和TIA-1)TCR 基因重排：-基因重排最常見分子遺傳學(xué)改變分子

21、遺傳學(xué)改變?nèi)旧w異常: del 6（q16-27)、del 13(q14-34)最常見基因改變：P53過表達(dá)K-ras突變P14、P15、P16純合性缺失EBV（EBER-1RNA、LMP-1) 的證據(jù)綜合治療：含阿霉素化療、受累野放療局限期的患者：放療，放療化療的療效還未確證放療后療效uRR85%、CR66%；u復(fù)發(fā)率：局部50%、全身25%結(jié)外結(jié)外 NK/T細(xì)胞細(xì)胞淋巴瘤治療淋巴瘤治療結(jié)外結(jié)外 NK/T細(xì)胞細(xì)胞淋巴瘤治療淋巴瘤治療各種治療手段的長期療效治療手段5y-OS化/放療59%單放療50%化療15%P值0.015y-OS：I/II期40%,全組 36%腸病型腸病型T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴

22、瘤 （ETCL）流行病學(xué)：腸上皮內(nèi)的T細(xì)胞淋巴瘤，占所有淋巴瘤1%既往史：有麩質(zhì)過敏史，也可表現(xiàn)為無腹腔疾病史臨床表現(xiàn)：老年男性，癥狀為腹痛、腹瀉、體重下降并發(fā)癥：小腸穿孔、梗阻、胃腸道出血腸病型腸病型T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤 (ETCL)高危因素：腹腔病變血清學(xué)標(biāo)志陽性抗麩朊抗體陽性HLA表型：DQA1*0501DQB1*0201DRB1*0304預(yù)后不良：5y-OS20%； 5年DFS3%部分原因是由于患者一般狀況差ETCL分子遺傳學(xué)改變分子遺傳學(xué)改變表達(dá)抗原：CD103（粘膜淋巴抗原）+,CD3+,CD7+, CD4，CD8TCR 基因重排：基因重排常見染色體異常： 9p21雜合性缺失基因

23、改變：P53過表達(dá)、EBV陽性的證據(jù)ETCL治療治療積極營養(yǎng)治療：胃腸外或腸道營養(yǎng)含阿霉素方案聯(lián)合化療明確有腹腔疾病的患者，堅持無麩質(zhì)飲食肝脾肝脾 T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤 (HSTCL)患病：年輕男性，中位年齡35歲臨床表現(xiàn)：B癥狀、肝脾腫大、骨髓受累外周血淋巴細(xì)胞增多、淋巴結(jié)腫大預(yù)后：侵襲性的臨床病程，MST 16月分子遺傳學(xué)改變分子遺傳學(xué)改變表達(dá)抗原：CD3、CD7、CD56，CD4、CD5、CD8TCR 基因重排:-基因或-基因染色體異常: 7qHSTCL治療治療初治患者：多藥聯(lián)合化療復(fù)發(fā)患者：核苷類似物（Pentostatin）、嘌呤類似物臨床研究：單克隆抗體（阿侖單抗）治療后干細(xì)胞移

24、植流行病學(xué)：最少見亞型發(fā)病部位：皮下脂肪，未累及真皮和表皮臨床表現(xiàn)：皮下紫紅色結(jié)節(jié)和/或斑塊SCPTCL（型）：惰性的臨床過程，較少并發(fā)全身性 血液吞噬細(xì)胞綜合癥分子遺傳學(xué)改變：CD8，TIA（T細(xì)胞內(nèi)抗原） 單克隆TCR基因重排和EBV陽性治療：聯(lián)合化療或局部放療有效預(yù)后：MST 2年（型5y-OS 80%） 原發(fā)皮膚T細(xì)胞淋巴瘤 型 vs. 型 MST 166月 vs. 15月皮膚皮膚 T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤 (CGD-TCL)更具侵襲性，先前曾作為SCPTCL的的表型臨床表現(xiàn)：皮下病變，表皮、真皮、肌肉也可出現(xiàn)病變， 可并發(fā)血液吞噬細(xì)胞綜合征分子遺傳學(xué)改變：TCR基因重排CGD-TCL治

25、療及預(yù)后治療及預(yù)后積極治療：采用局部治療加全身治療u 局部治療 類固醇、補(bǔ)骨脂素、放療u 全身治療 INF-、INF- 、CHOP、放療、HSCT 預(yù)后：皮下病變 MST 13月表皮和真皮病變MST 29月外周外周T細(xì)胞淋巴瘤臨床預(yù)后因素細(xì)胞淋巴瘤臨床預(yù)后因素Overall survival of peripheral T-cell lymphoma, unspecified (PTCL-u) according to the International Prognostic IndexLow risk: 0, 1 ; 5 y OS 59%;low-intermediate risk: 2 ; 5 y OS 46%; high-intermediate risk: 3 ; 5 y OS 40%; high-risk: 4,5 ; 5 y OS 18%; P 60, performance status 2, elevated LDH, bone marr