展開劑極性大小

1、有機(jī)合成中展開劑的選擇常用 展開齊I組合：石油酸-乙酸乙酸，二氯甲烷-甲醇。前者極性小，后者極性大o產(chǎn)物為堿，加氨水或三乙胺或二乙胺；產(chǎn)物為酸，加冰醋酸。選極性，點(diǎn)3塊板，按3: 1,1 : 1,1 : 3扔到三個(gè)展缸，一試便知。柱層析：Rf 0.3,柱子中硅膠為樣品 10倍量，展開劑為跳板極性的 1/2-1/4。有機(jī)合成實(shí)驗(yàn)TLC跑板是常有的事，展開劑的選擇就至關(guān)重要了 ，選擇適當(dāng)?shù)?展開劑是首要任務(wù)。一般常用溶劑按照極性從小到大的順序排列大概為：石油迷 己烷苯乙9!thf4酸乙酯 丙酮 乙醇甲醇；使用單一溶劑，往往不能達(dá)到 很好的分離效果，往往使用混合溶劑，通常使用一個(gè)高極性和低級(jí)性溶劑組

2、成的 混合溶劑，高極性的溶劑還有增加區(qū)分度的作用，常用的溶劑組合有：Petroleumether/Ethylacetate,petroleumether/Acetone,Petroleumether/Eth er, Petroleumether/CH2c12, ethylacetate/MeOH,CHCl3/ethylacetate展開劑的比例要靠嘗試，一般根據(jù)文獻(xiàn)中報(bào)道的該類化合物用什么樣的展開 劑，就首先嘗試使用該類展開劑，然后不斷嘗試比例，直到找到一個(gè)分離效果好 的展開劑。展開劑的選擇條件：對(duì)所需成分有良好的溶解性； 可使成分間分 開；待測(cè)組分的Rf在0.20.8之間，定量測(cè)定在0.30

3、.5之間；不與待測(cè) 組分或吸附劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；沸點(diǎn)適中，黏度較小；展開后組分斑點(diǎn)圓且集 中；混合溶劑最好用新鮮配制。一般來(lái)說(shuō)，弱極性溶劑體系的基本兩相由正己烷和水組成，再根據(jù)需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯來(lái)調(diào)節(jié)溶劑系統(tǒng)的極性，以達(dá)到好的分離效果，適合于生物堿、 黃酮、菇類等的分離；中等極性的溶劑體系由氯仿和水基本兩相組成，由甲醇、 乙醇，乙酸乙酯等來(lái)調(diào)節(jié)，適合于蔥釀、香豆素，以及一些極性較大的木脂素和 菇類的分離；強(qiáng)極性溶劑，由正丁醇和水組成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等來(lái) 調(diào)節(jié)，適合于極性很大的生物堿類化合物的分離。很多時(shí)候，展開劑的選擇要靠自己不斷變換展開劑的組成來(lái)達(dá)到最佳效果。我們 在實(shí)驗(yàn)中

4、，為了實(shí)現(xiàn)一個(gè)配體與其他雜質(zhì)有效分離，曾經(jīng)嘗試了很多種的溶劑組合，最后才找到石油醴一EtOAc-HCOOH5.5: 3.5: 0.1）混合溶劑。一般把兩 種溶劑混合時(shí)，采用高極性/低極性的體積比為1/3的混合溶劑，如果有分開的跡 象，再調(diào)整比例（或者加入第三種溶劑），達(dá)到最佳效果；如果沒有分開的跡象（斑 點(diǎn)較“拖”），最好是換溶劑。對(duì)于在硅膠中這種酸性物質(zhì)上易分解的物質(zhì)，在 展開劑里往往加一點(diǎn)點(diǎn)三乙胺，氨水，叱噬等堿性物質(zhì)來(lái)中和硅膠的酸性。（選擇所添加的堿性物質(zhì)，還必須考慮容易從產(chǎn)品中除去，氨水無(wú)疑是較好的選擇。） 分離效果的好壞和所用硅膠和溶劑的質(zhì)量很有關(guān)系：不同廠家生產(chǎn)的硅膠可能含 水量以

5、及顆粒的粗細(xì)程度，酸性強(qiáng)弱不同，從而導(dǎo)致產(chǎn)品在某個(gè)廠家的硅膠中分 離效果很好，但在另一個(gè)廠家的就不行。溶劑的含水量和雜質(zhì)含量對(duì)分離效果都 有明顯的影響。溫度，濕度對(duì)分離效果影響也很明顯，在實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)有時(shí)同 一展開條件，上下午的Rf截然不同。展開劑的選擇，主要根據(jù)樣品的極性、溶解度和吸附劑的活性等因素來(lái)考慮， 在 進(jìn)行薄層層析時(shí)，首先應(yīng)該知道未知化學(xué)成分的類型， 其極性的大致歸屬，從提 取液或從色譜柱的流動(dòng)相極性可知，另外某樣品里含多種化學(xué)成分先按極性不同 大致分，然后細(xì)分，對(duì)于分離未知的化學(xué)物質(zhì)，展開劑的選擇也是一個(gè)摸索的過 程，不應(yīng)該僅僅從展開劑考慮，多因素綜合衡量！溶劑的選擇，層析過程

6、中溶劑的選擇，對(duì)組分分離關(guān)系極大。在柱層析時(shí)所用的 溶劑（單一劑或混合溶劑）習(xí)慣上稱洗脫劑，用于薄層或紙層析時(shí)常稱展開劑。 洗脫劑的選擇，須根據(jù)被分離物質(zhì)與所選用的吸附劑性質(zhì)這兩者結(jié)合起來(lái)加以考 慮在用極性吸附劑進(jìn)行層析時(shí)，當(dāng)被分離物質(zhì)為弱極性物質(zhì)，一般選用弱極性溶 劑為洗脫劑；被分離物質(zhì)為強(qiáng)極性成分，則須選用極性溶劑為洗脫劑。如果對(duì)某 一極性物質(zhì)用吸附性較弱的吸附劑（如以硅藻土或滑石粉代替硅膠），則洗脫劑 的極性亦須相應(yīng)降低。TLC展開劑的：一般是現(xiàn)用現(xiàn)配置，根據(jù)比列不一，分別用不同的試管進(jìn)行配 置就可以了，環(huán)己垸-乙酸乙酯（1: 1）,就是取環(huán)己垸1ML,在取乙酸乙酯1ML, 混合均勻就可

7、以了。對(duì)于大比列的我覺得是應(yīng)該可以用的哈，當(dāng)然為了做到最好， 就用試管哈，如果比較穩(wěn)定配置得很多的話，就可以用哈，這樣節(jié)約時(shí)間哈。因 為TLC也只是屬于定性鑒別，不是定量，所以在沒有特別要求下，用量筒也是 可以的。1 .方法原理薄層色譜是一種微量分析的分離過程， 它將樣品點(diǎn)在以玻璃板或鋁、塑料等片材 為載體的多孔吸附劑薄層的固定相上，利用流動(dòng)相在特定的展開室中將混合物中 的組份推移到不同距離處，在色譜展開整個(gè)過程中，樣品的成份受到正反不同的 力的作用。（1）流動(dòng)相利用毛細(xì)管力帶著樣品穿過固定相。（2）樣品與固定相的相互作用是指組份在移行過程中由于偶極-（誘導(dǎo)）-偶極相互作用，氫鍵和范德華力的作

8、用而產(chǎn)生不同程度的延緩、吸附、分散、離子 交換和絡(luò)合等分離機(jī)理。由于樣品組份與流動(dòng)相和固定相之間的相互作用力程度不同，整個(gè)毛細(xì)管流動(dòng)過程中分離運(yùn)動(dòng)都在進(jìn)行?；谶@點(diǎn)，TLC系統(tǒng)（流動(dòng)相和固定相）必須與樣品 很好地匹配。用顯色試劑處理，許多組份可在日光或紫外燈光下檢視。 色譜可用肉眼或使用光 密度計(jì)和照相機(jī)記錄或影像系統(tǒng)方法來(lái)評(píng)價(jià)。2 .薄層板2.1 手工自制板2.1.1 玻璃板的要求：用于制備薄層板的玻璃板要求表面光潔、平整，最好使用厚 薄12mm的優(yōu)質(zhì)平板玻璃，普通窗玻璃一般不宜用于制作薄層板，玻璃板需洗 凈至不掛水，晾干，貯存于干燥潔凈處備用。玻璃板反復(fù)使用時(shí)，應(yīng)注意經(jīng)常用 洗液及堿液清洗

9、，保持玻璃板面的光潔是保證薄層板質(zhì)量的最基本要求2.1.2 制作方法：除另有規(guī)定外，將1份吸附劑加適量的水（如1份硅膠G一般加 3份水），在研缽中用研杵沿一個(gè)方向小心研磨至成均勻的有適當(dāng)粘稠度的膠漿，立即傾入涂布器中，均勻地向前推進(jìn)涂布在玻璃板上；或按照不同涂布器的規(guī)定操 作涂布;涂布好的薄層板于室溫下在水平臺(tái)上晾干，再在規(guī)定的溫度（一般為105c 110C）下烘約30分鐘活化，貯于干燥器中備用。薄層板的厚度一般為 0.250.5mm.o2.2 商品化供應(yīng)的預(yù)制板和高效板2.2.1 板的尺寸20x20cm 10x20cm 20x10cm 10x10cm圖1不同的板尺寸TLC/HPTLC預(yù)制板有

10、不同的規(guī)格供應(yīng)。常用的尺寸為 20 x 20, 10 x 20, 20 x 10,或10 x 10 cm。使用的規(guī)格取決于TLC或HPTLC的類別和樣品的數(shù)目。2.2.3 TLC/HPTLC板的預(yù)洗及活化一般來(lái)說(shuō)，色譜板應(yīng)用溶劑如氯仿-甲醇（8:2）,甚至用更強(qiáng)的洗脫溶劑的混合物 進(jìn)行預(yù)洗。具體操作可通過空白色譜展開來(lái)實(shí)現(xiàn)。色譜板預(yù)洗完后，應(yīng)在105°C加熱1小時(shí)進(jìn)行干燥，再在室溫下置放至少 2小時(shí) （需采取保護(hù)措施以防止實(shí)驗(yàn)室空氣中的污染物重新附著在其上面，如放置在空的干燥器中）。3 .樣品點(diǎn)樣3 . 1點(diǎn)狀點(diǎn)樣和條帶狀點(diǎn)樣每次點(diǎn)樣前，TLC/HPTLC板應(yīng)在正常光線下和紫外燈下用

11、肉眼檢查薄層的損傷 情況和雜質(zhì)，只有無(wú)損傷、清潔的 TLC/HPTLC板方可使用。樣品可進(jìn)行點(diǎn)狀或條帶狀點(diǎn)樣。要想獲得最佳的薄層分辨率，必須保證移行方向 中的起點(diǎn)要小，常規(guī)的TLC薄層點(diǎn)狀點(diǎn)樣每次點(diǎn)0.5至5微升，相比之下，HP TLC薄層最大點(diǎn)樣量為1微升。點(diǎn)樣量較大的樣品可使用自動(dòng)化裝置點(diǎn)樣，噴 霧成條帶狀是一種可以點(diǎn)樣量大而同時(shí)又能促成最有效分離的點(diǎn)樣方法。在常規(guī)操作過程中，人工點(diǎn)樣一般使用微量毛細(xì)管（0.5/1/2/3和5 M）,點(diǎn)樣時(shí)毛細(xì)管 必須完全充滿和完全排空，要以垂直方向小心接觸TLC/HPTLC板面，不要損傷薄層，受損的薄層會(huì)導(dǎo)致溶劑不規(guī)律地流動(dòng)而在色譜上產(chǎn)生失真的TLC譜帶

12、。人工點(diǎn)樣建議使用Nanomat。它點(diǎn)樣位置精確并安全，使薄層免于受損。用適當(dāng) 的介質(zhì)干燥Nanomat也可用作單個(gè)量的多次點(diǎn)樣。樣品體積大于5通常用如Linomat或Automatic TLC Sampler III的方法用氮?dú)鈬婌F成窄條。若（就是）要求點(diǎn)狀樣品點(diǎn)樣， Linomat和Automatic TLC S ampler III應(yīng)將條長(zhǎng)度設(shè)定在 1至2 mm。3.2樣品點(diǎn)樣位置起點(diǎn)的最佳位置如圖2和3所示。起點(diǎn)下緣的最小距離b取決于溶劑量。兩個(gè)起 點(diǎn)之間的距離c必須令平行移行的主成份不會(huì)相互觸及。點(diǎn)狀點(diǎn)樣時(shí)原點(diǎn)的直徑 應(yīng)小于或等于3mm （高效板原點(diǎn)的直徑應(yīng)更?。?，條帶的長(zhǎng)度d由點(diǎn)樣

13、樣品體積 或樣品的種類和相對(duì)于板的尺寸點(diǎn)樣的數(shù)目來(lái)決定。 到板側(cè)邊的距離a必須足夠 大以避免分離區(qū)失真變形（見圖 2和3）。圖2：斑狀樣品點(diǎn)樣的一般點(diǎn)樣位置（a = 20mm, b = 10mm, c=兩起點(diǎn)之間 的距離。）圖3:條狀樣品點(diǎn)樣的一般點(diǎn)樣位置 （a = 20mm, b = 10mm, c =兩起點(diǎn)之間 的距離，d =條的長(zhǎng)度）。4 .層析4.1 展開室4.1.1 直立式雙槽展開室 具有節(jié)省溶劑、便于預(yù)平衡、可控制展開箱內(nèi)的濕度等 優(yōu)點(diǎn)。4.1.2 水平展開室 可以從薄層板的兩側(cè)向中間水平地展開， 這樣可使一塊薄層板 所承受的樣品個(gè)數(shù)比常規(guī)上行展開的薄層板增加一倍。4.1.3 自動(dòng)展開室（AMD）可使用五種溶劑對(duì)同一薄層進(jìn)行多次展開，自動(dòng)控制預(yù) 飽和、展開方式、展開距離和干燥條件，分離效率比傳統(tǒng)方式提高三倍（可在 8 0mm之內(nèi)分離40種成分），符合GLP/GMP要求。4.2 .溶劑使用的溶劑必須是 分析純“或 色譜純”，溶劑組成采用體積量比（如正丁醇-冰乙酸-水=4: 1: 1, V/V/V ）,或者絕對(duì)量（如18ml甲苯+ 2 ml甲醇