水果及蔬菜組織和自由基中1-甲基環(huán)丙烯的吸收作用1-甲基環(huán)丙烯酶促反應(yīng)的癥狀

1、水果及蔬菜組織和自由基中1甲基環(huán)丙烯的吸收作用:1甲基環(huán)丙烯酶促反應(yīng)的癥狀1 甲基環(huán)丙烯的詳盡吸收都是為了許多水果和蔬菜組織聚集，在實(shí)驗(yàn)測(cè)試中比 較1-mcp空氣的吸附作用(765umoln?, 182ul/l ')和在全部蘋(píng)果類水果的進(jìn) 程，吸收數(shù)據(jù)從完整的水果中的304-0.2ngkg增加到個(gè)別剛切成兩半的楔形水果 屮的13.8±2.4和28.2+1.5ngkgo巨大提高的吸收作用也在所有水果削下的皮當(dāng)屮 被觀測(cè)到，表明吸收屜用在表皮組織中受限制或者在傷口處組織中提高，鮮切蘋(píng) 果在組織加熱后吸收作用降低了接近90%, 1-mcp吸收作用的高溫失活不是一 連串小單元被破環(huán)所

2、致，由于冷凍溶解的組織保留了大約76%的最初吸收數(shù)據(jù)， 95%的吸收量超過(guò)了 6h。強(qiáng)大的1-mcp吸收作用在蘆筍莖尖中也被證實(shí)。蘆筍 莖尖的吸收數(shù)據(jù)和吸收量不被傷口組織影響但極個(gè)別的在冷凍溶解循環(huán)下會(huì)被 抑制50%到54%。就蘋(píng)果的組織而言，蘆筍莖尖對(duì)1-mcp的吸收作用在組織加 熱情況下是不活躍的(>90%)。加熱有很強(qiáng)的抑制想象表明組織消耗的1-mcp 參與了新陳代謝，隨后分析表明來(lái)自蘋(píng)果組織的同類自由單元代謝1-mcp數(shù)據(jù) 接近80ng kg's-1,在緩沖可溶物中的余渣的活力是可忽略的。1mcp的代謝標(biāo) 準(zhǔn)化驗(yàn)是從5.0g組織中提取的10ml同類自由基和10ml 125

3、mom3 ph=5的 na-mes混合，這種解決辦法是在密閉在244ml的廣口瓶中裝入420.5u.mol m3 氣態(tài)1-mcpo蘋(píng)果中同類自由基的1-mcp代謝展示了飽和的動(dòng)力，即160mmolm 3 最大akm和4.12u mol kg1 s'1的最大體積，最佳的發(fā)牛時(shí)間是ph二5時(shí)，在加熱后 被抑制>90%,在4mol m-3抗壞血酸鹽中含83%,缺氧情況下.(0.25kpa氧氣中有 45%),以及硫化鈉(sds,63%在34mol m-3). 1-mcp的代謝也在果皮而非果肉的 cfh中被發(fā)現(xiàn)，無(wú)論各個(gè)組織的容量是大是小,蘆筍莖尖中的大量組織含有物沒(méi)有 在cfh中被顯現(xiàn),

4、這就說(shuō)明沒(méi)有1-mcp代謝.蘆筍中的cfh肥肉1-mcp代謝比 蘋(píng)果類水果減少了 75%,明顯說(shuō)明蘆筍中的化合物抑制了 1-mcp的代謝這一數(shù) 據(jù)提出相關(guān)的薄膜，氧化酶對(duì)于蔬菜和水果組織的構(gòu)成比物理組織構(gòu)成1-mcp主 要框架更實(shí)用.1.簡(jiǎn)介通過(guò)研究1-mcp,發(fā)現(xiàn)了一個(gè)潛在抑制劑乙烯的活動(dòng)，繼續(xù)把主要精力 放在躍變型水果上，發(fā)現(xiàn)它完美的適用于這項(xiàng)技術(shù)的商業(yè)要求。然而，躍變型 水果中1-mcp是十分多種多樣的。對(duì)許多躍變型水果來(lái)說(shuō)，較早的1mcp出現(xiàn) 在成熟初期會(huì)引起不完全成熟或者不同于適當(dāng)?shù)某墒炱诘默F(xiàn)象。蘋(píng)果表現(xiàn)的可能 是較早成熟中優(yōu)先處理的個(gè)別例外是有益于收割期后的堅(jiān)實(shí)保持能力，這是消費(fèi)

5、者對(duì)蘋(píng)果的參數(shù)參考的一個(gè)基木因素。對(duì)于另外的躍變型水果來(lái)說(shuō)，當(dāng)1-mcp 在最初成熟是實(shí)用的吋候，正常的成熟是最好的目標(biāo)。不僅如此，一些水果包括 香蕉和鱷梨在成熟期被提前時(shí)變得對(duì)1-mcp的需求急劇遲鈍。對(duì)于導(dǎo)致這種躍 變型水果的變化的因素，回應(yīng)是1-mcp有未知的殘余。最近的報(bào)告表明成熟四 紅柿對(duì)1-mcp的敏感度是短暫的失效或者提高，這就對(duì)其個(gè)別個(gè)體體內(nèi)乙烯水 平短期的增長(zhǎng)或者減少做出了回應(yīng)，另外的進(jìn)程將會(huì)影響包括1-mcp組織靶子其至乙烯受體在內(nèi)的反應(yīng)。根據(jù)已 經(jīng)在鱷梨、油以及一系列不同的水果和蔬菜中表現(xiàn)出來(lái)的乙烯受體的預(yù)測(cè)水平， 可知道1-mcp的吸收作用在數(shù)量上超出了預(yù)期。choi和

6、huber宣稱一些水果 和蔬菜的特殊組織的吸收作用特性和包括木質(zhì)素、高效甲基果膠酶，和油質(zhì)在內(nèi) 的疏水受體的數(shù)量多少有聯(lián)系，所有這些在試管內(nèi)都呈現(xiàn)出高的吸收作用。雖然 沒(méi)有直接的現(xiàn)象，然而，這些聚合物直接說(shuō)明了水果以及其他園藝產(chǎn)品對(duì)1-mcp 的反應(yīng)。在蘋(píng)果對(duì)1-mcp的吸收試驗(yàn)測(cè)試中，組織被切開(kāi)后吸收顯著提高。但是，組 織加熱后吸收就被消除了，這就提高了全部組織的吸收是導(dǎo)致1-mcp代謝的原 因的可能性。冃前這個(gè)研究的冃的是決定水果和蔬菜組織屮1-mcp的代謝是否 是由1-mcp的吸收引起的。2原料和方法2.1.植物原料從當(dāng)?shù)亓闶鄣昀锞湍塬@得的蘋(píng)果、車(chē)前草和蘆筍莖尖。2.2未處理過(guò)及加工過(guò)的

7、蘋(píng)果和蘆筍莖尖對(duì)1-mcp的吸收2.2.1蘋(píng)果：蘋(píng)果有處理過(guò)的和未處理的，處理的有對(duì)半切和鮮切楔形塊，把水果半切、 切成16小塊分別放在1.76l的玻璃廣口瓶中，并用蓋子隔絕外界。注入濃度 為765umol m-3的氣態(tài)1-mcpo在每個(gè)試驗(yàn)屮，上部氣層應(yīng)優(yōu)先充滿充足的 1-mcpo上層1-mcp的含量水平在23°c下用氣體層析法監(jiān)測(cè)6h。廣口瓶中充滿不 受組織控制的1-mcpo在另外的試驗(yàn)中，未處理過(guò)的水果或者用蔬菜削皮刀 削下3mm厚的水果表皮的組織分別放到1.76l的玻璃廣口瓶中，將其密封并 供給765umol m-3的1-mcpo用在30°c冷凍溶解的蘋(píng)果測(cè)試斷裂組

8、織的 1-mcp吸收作用，以及把小塊在94°c的微波爐中加熱，蘋(píng)果內(nèi)部溫度用配有 直徑為5mm傳感器的數(shù)字溫度計(jì)測(cè)量。在加熱的每段時(shí)間，傳感器要插入組 織小塊的吸收部位。在冷凍溶解或者加熱的組織恢復(fù)到室溫時(shí)，16小塊狀的 要分開(kāi)控制，同吋加熱過(guò)的組織要放入1. 76l的廣口瓶中并注入765umol m-3 的1-mcpo所有對(duì)于蘋(píng)果和組織的每個(gè)處理都是利用三個(gè)重復(fù)，取最接近的 兩個(gè)結(jié)果。2. 2.2蘆筍莖尖新鮮的蘆筍莖尖用小刀切成長(zhǎng)度為6-7cm的小段，把最底端部分丟掉每 35g放在一個(gè)244ml瓦罐中，這就用蘋(píng)果為試驗(yàn)提供了相同容積或比重的材 料，而對(duì)于蘋(píng)果組織無(wú)論是在冷凍溶解循環(huán)

9、下或者大約94°c加熱下的都是相 同的。用鋒利的刀片把蘆筍莖尖切成lcm厚的切片來(lái)表征切面上1-mcp的吸 收面積的影響。把蘆筍的莖尖部分密封到244iiil的廣口瓶中并注入765umol m-3的1-mcp,頂部1-mcp的含量在23°c溫度下用空氣檢測(cè)儀監(jiān)測(cè)6h以 上。把35g蘆筍莖尖密封在244ml的廣口瓶中，用蓋子分生兩個(gè)隔離區(qū)，用 100%的氮?dú)饣蚩諝鈨艋瘜缈诤腿肟?30分鐘，這樣就可以測(cè)試岀缺氧對(duì)蘆筍 吸收1-mcp的影響。以后，瓶子里在缺氧的環(huán)境下注入765umol m-3的1-mcp 用checkmate head space9900測(cè)量氮?dú)鈨艋蟮暮趿?

10、6h內(nèi)從大約0. 06kpa 下降到幾乎為零。蘆筍的試驗(yàn)每個(gè)處理利用了三個(gè)重復(fù)，取兩個(gè)相似值中較小的一個(gè)作為 最終結(jié)果。2.3 自由細(xì)胞勻漿的準(zhǔn)備。新鮮蘋(píng)果、削下的果皮和果肉，以及蘆筍莖尖和同等體積的na-mes混 合,ph調(diào)到5,再用攪拌機(jī)以最大速度攪拌45秒鐘。把混合物放在冰塊里直 到滲透出交替的兩層，在4°c下以15000轉(zhuǎn)每秒的速度離心10分鐘，cfh通 過(guò)過(guò)濾或者15000轉(zhuǎn)每秒下離心來(lái)展示和1-mcp吸收相同的特征。因此，樣 本用過(guò)濾器快速過(guò)濾，設(shè)置大量樣本和重復(fù)。不能溶解的殘?jiān)趶奶O(píng)果組織 中收集cfh時(shí)被排除，研究1-mcp代謝有如下描述。2.4 1-mcp代謝的研究

11、10ml 的 cfh 加入 10ml 125mol 的 na-mes,在 244ml 的瓦罐中把 ph 調(diào) 到5。在沸水中加熱cfh10分鐘,樣品中包含有20ml 125mol nf的na-mes, 每個(gè)實(shí)驗(yàn)都要把pi1控制在5廣口瓶要密封并注入濃度大約為420. 5umol m'3 的氣態(tài)1-mcpo±部1-mcp的含量在23°c下用空氣檢測(cè)儀監(jiān)測(cè)6h以上。1-mcp 代謝總是在混合物過(guò)濾后剩下的殘?jiān)斜粰z測(cè)到，而從5g蘋(píng)果混合物組織中 收集的不溶解殘?jiān)捎?00ml 125mol m-3 ph=5的na-mes沖洗掉，不溶解的 殘?jiān)晦D(zhuǎn)移到244ml裝的廣口瓶中

12、并供給420. 5umol nf的1-mcpo1-mcp代謝中pi1決定于cfi1用250mol m-3 na-mes的準(zhǔn)備或者250mol m-3 的na-mops, 10mlcfh的每一 ph下加入10ml緩沖液并密封在廣口瓶中,注入 420. 5umol m-3的1-mcp0在控制范圍內(nèi)每一 ph值下cfh在沸水里加熱，得到 的ph值和最初的值的偏差不到0. 15個(gè)單位。另外的研究是利用從蘋(píng)果中提 取的lomlcfh和10ml ph二5 125mol m3濃度的na-mes混合，另外補(bǔ)充維生 素c鹽，1%硫化鈉，牛肝臟消化酶，或者馬肝臟消化酶。用4l 125mol nf? 的na-mes

13、層析10ml從蘋(píng)果或者蘆筍中得到的cfh 12小時(shí)，ph為5,在4°c 時(shí)優(yōu)先增加10ml ph為5濃度為125mol nf3的na-mes,用以分析1-mcp的代 謝。用 lonil 蘋(píng)果 cfh 和 lonil ph 為 5,125molm-3 na-mes 的混合物或者 10ml蘋(píng)果cfh、3ml蘆筍cfh和7ml ph為5,125molm-3的na-mes的混合物的反應(yīng)來(lái)測(cè)試蘆筍cfi1中抑制劑的存在。把 10ml 蘋(píng)果 cfh 和 10ml ph 為 5,125molm-3 的 na-mes 放入 244ml 廣口瓶中用磁性棒攪拌并用蓋子密封，這樣一個(gè)設(shè)計(jì)用以研究低氧對(duì)1-

14、mcp 代謝的影響。這一樣木用100%氮?dú)饣蚩諝鈨艋隹诤腿肟谥羔槪?1計(jì)量器， 長(zhǎng)152. 4mm）o把入口指針輕輕的放在溶液表面，而流動(dòng)的空氣能使樣本上避 免出現(xiàn)泡沫。當(dāng)溶液輕微的攪拌后，維持流動(dòng)30分鐘。然后，指針就會(huì)移動(dòng), 在低氧的環(huán)境下提供此樣本420. 5umol曠3的1-mcp,如下文所描述，這就 是100%的氮?dú)鈱?duì)壓強(qiáng)為0. 25kpa的氧氣上層處理的結(jié)果。171cp代謝也是取 決于蘆筍cfh以11000轉(zhuǎn)速下高速離心30分鐘后得到的上清液，所有對(duì)于描 述蘋(píng)果的試驗(yàn)，車(chē)前草和蘆筍cfh的每個(gè)處理都是利用三個(gè)重復(fù)，然后重復(fù)做 最接近的兩次。kinetic分析1-mcp代謝之所以像

15、上述文章中那樣例外的發(fā)生，是因?yàn)?這個(gè)反應(yīng)在130ml的廣口瓶中發(fā)生，其內(nèi)有相當(dāng)于0.5g蘋(píng)果組織的緩沖物。 在上部空間注入1-mcp氣體，濃度集中在4. 0,39. 0,104. 0,192. 0和285. ommol m-3四個(gè)濃度，一定數(shù)量的1-mcp消耗30分鐘以上得到速率數(shù)據(jù),單位為rnnolkg 1 sh. kinetic的試驗(yàn)的每一個(gè)1-mcp濃度點(diǎn)設(shè)置四個(gè)重復(fù)，相似的結(jié)果 執(zhí)行三次。2.5. 1-甲基環(huán)丙烯的制備choi和huber詳細(xì)描述了組織和cf1i吸收作用利用氣態(tài)1t4cp的研究的形 成,暫時(shí)地，增施1. 5gl-mcp粉末到裝有20ml蒸憾水的500ml派熱科斯玻璃制

16、 的厄倫美厄細(xì)凈瓶中形成濃度為67. 3nunol m-3的氣態(tài)1-mcp,此時(shí)立刻用橡皮 塞密封并配備一個(gè)橡膠隔板。在23°c條件下放置4小時(shí)產(chǎn)牛的1-mcp氣體最少 時(shí)分別加入1. 76l或244ml罐裝的濃度為765umol m-3的組織或者420. 5umol m-3 的cfii。所有的試驗(yàn)研究都控制瓶子里包含1-mcp,但沒(méi)有組織或者cfii。準(zhǔn)備 實(shí)驗(yàn)中用層離法分析了 1-mcp確定了組織或者cfh并沒(méi)有產(chǎn)生揮發(fā)物。如上所述，1-mcp被用于低氧實(shí)驗(yàn)是把1-mcp放在密封的長(zhǎng)頸瓶中，用100% 氮?dú)鈨艋隹诤腿肟谥羔槪?1計(jì)量器，長(zhǎng)152.4mm） 30分鐘，最初的實(shí)驗(yàn)證

17、明 了用氮?dú)鈨艋h(huán)糊精t-mcp對(duì)水合作用中釋放的1-mcp的品質(zhì)沒(méi)有影響，水用 來(lái)形成缺氧，把氣態(tài)1-mcp加熱煮沸30分鐘用以去氧。然后，用30ml注射器立 刻抽岀20ml,針管要插入到橡皮塞中，并讓水恢復(fù)到室溫。在抽空上部20ml空 間后，注入去氧水到長(zhǎng)頸瓶中。1008060402000123456time (h)figilsorption by apple fruit. intact fruit, fruit halves (two) and fruit processed into 16 fresh-cut slices (approximately 2647±233g/jar) were placed in 1.76 l glass jars/the jars were sealed and provided with gaseous 1-mcp at around 765 jimol m*3 (18.2 jil l-t). ar indicated intervals, 1 ml of headspace was analyzed for 1-mcp concentration