實(shí)驗(yàn)一革蘭氏染色細(xì)菌接種學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1實(shí)驗(yàn)一革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)一革蘭氏染色(rns)細(xì)菌接種細(xì)菌接種第一頁，共35頁。第1頁/共34頁第二頁，共35頁。第2頁/共34頁第三頁，共35頁。第3頁/共34頁第四頁，共35頁。實(shí)驗(yàn)原理：細(xì)菌實(shí)驗(yàn)原理：細(xì)菌(xjn)對(duì)革蘭氏染色的不同反應(yīng)是對(duì)革蘭氏染色的不同反應(yīng)是由于它們細(xì)胞壁的成分和結(jié)構(gòu)不同而造成的。初染由于它們細(xì)胞壁的成分和結(jié)構(gòu)不同而造成的。初染后，所有細(xì)菌后，所有細(xì)菌(xjn)都被染成初染劑的藍(lán)紫色。碘都被染成初染劑的藍(lán)紫色。碘作為媒染劑，它能與結(jié)晶紫結(jié)合成結(jié)晶紫作為媒染劑，它能與結(jié)晶紫結(jié)合成結(jié)晶紫碘的復(fù)碘的復(fù)合物，增強(qiáng)染料與細(xì)菌合物，增強(qiáng)染料與細(xì)菌(xjn)的結(jié)合力。當(dāng)用脫色的

2、結(jié)合力。當(dāng)用脫色劑處理時(shí)，革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁主要由肽聚糖形劑處理時(shí)，革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁主要由肽聚糖形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成，壁厚、類脂質(zhì)含量低，用乙醇成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成，壁厚、類脂質(zhì)含量低，用乙醇脫色時(shí)細(xì)胞壁脫水，使肽聚糖層的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)孔經(jīng)縮脫色時(shí)細(xì)胞壁脫水，使肽聚糖層的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)孔經(jīng)縮小，透性降低，從而使結(jié)晶紫小，透性降低，從而使結(jié)晶紫碘的復(fù)合物不易被碘的復(fù)合物不易被洗脫而保留在細(xì)胞內(nèi)，經(jīng)脫色和復(fù)染后仍保留初染洗脫而保留在細(xì)胞內(nèi)，經(jīng)脫色和復(fù)染后仍保留初染劑的藍(lán)紫色。革蘭氏陰性菌則不同，由于其細(xì)胞壁劑的藍(lán)紫色。革蘭氏陰性菌則不同，由于其細(xì)胞壁肽聚糖層較薄、類脂質(zhì)含量高，所以當(dāng)脫色處理時(shí)肽聚糖層較薄、類

3、脂質(zhì)含量高，所以當(dāng)脫色處理時(shí)，類脂質(zhì)被乙醇溶解，細(xì)胞壁透性增大，使結(jié)晶紫，類脂質(zhì)被乙醇溶解，細(xì)胞壁透性增大，使結(jié)晶紫碘的復(fù)合物比較容易被洗脫出來，用復(fù)染劑復(fù)染碘的復(fù)合物比較容易被洗脫出來，用復(fù)染劑復(fù)染后，細(xì)胞被染上復(fù)染劑的紅色。后，細(xì)胞被染上復(fù)染劑的紅色。第4頁/共34頁第五頁，共35頁。Structure of a Gram-Negative Cell Wall Structure of a Gram-Positive Cell Wall 第5頁/共34頁第六頁，共35頁。 經(jīng)此法染色后，細(xì)胞保留(boli)初染劑藍(lán)紫色的細(xì)菌為革蘭氏陽性菌；細(xì)胞中初染劑被脫色劑洗脫而染上復(fù)染劑的顏色（紅色）

4、的細(xì)菌為革蘭氏陰性菌。 Gram negative Gram positive第6頁/共34頁第七頁，共35頁。第7頁/共34頁第八頁，共35頁。涂片涂片(t pin)： 第8頁/共34頁第九頁，共35頁。第9頁/共34頁第十頁，共35頁。第10頁/共34頁第十一頁，共35頁。第11頁/共34頁第十二頁，共35頁。第12頁/共34頁第十三頁，共35頁。第13頁/共34頁第十四頁，共35頁。第14頁/共34頁第十五頁，共35頁。第15頁/共34頁第十六頁，共35頁。第16頁/共34頁第十七頁，共35頁。平板分區(qū)平板分區(qū)(fn q)劃線劃線第17頁/共34頁第十八頁，共35頁。平板分區(qū)平板分區(qū)(f

5、n q)劃線劃線第18頁/共34頁第十九頁，共35頁。接種(jizhng)培養(yǎng)長(zhǎng)出單個(gè)菌落第19頁/共34頁第二十頁，共35頁。第20頁/共34頁第二十一頁，共35頁。第21頁/共34頁第二十二頁，共35頁。第22頁/共34頁第二十三頁，共35頁。斜面接種斜面接種(jizhng)(jizhng)時(shí)的無菌操作時(shí)的無菌操作(1)(1)接種接種(jizhng)(jizhng)滅菌滅菌 (2) (2)開啟棉塞開啟棉塞 (3) (3)管口滅菌管口滅菌 (4) (4)挑起菌苔挑起菌苔 (5) (5)接種接種(jizhng) (6)(jizhng) (6)塞好棉塞塞好棉塞 第23頁/共34頁第二十四頁，共3

6、5頁。第24頁/共34頁第二十五頁，共35頁。第25頁/共34頁第二十六頁，共35頁。穿刺穿刺(chunc)接接種法種法第26頁/共34頁第二十七頁，共35頁。第27頁/共34頁第二十八頁，共35頁。第28頁/共34頁第二十九頁，共35頁。第29頁/共34頁第三十頁，共35頁。第30頁/共34頁第三十一頁，共35頁。第31頁/共34頁第三十二頁，共35頁。示教樣本(yngbn)：大腸桿菌痢疾桿菌第32頁/共34頁第三十三頁，共35頁。菌菌膜膜菌菌沉沉淀淀均勻渾均勻渾濁濁對(duì)對(duì)照照顯教(xin jio)樣本：大腸桿菌枯草桿菌乙型鏈球菌第33頁/共34頁第三十四頁，共35頁。NoImage內(nèi)容(nirng)總結(jié)會(huì)計(jì)學(xué)。將桿菌和球菌分別涂片、干燥、固定。適合于細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在PH(7.27.6)條件(tiojin)下配制而成的基質(zhì)。用左手握住菌種管（葡萄球菌或大腸桿菌）和斜面培養(yǎng)基管，右手持接種環(huán)。用右手小指與手掌、小指與無名指分別拔出兩管