《備戰(zhàn)2022年高考生物考點一遍過》2 第34講　高效作業(yè)知能提升

1、1(2020·江蘇徐州考前模擬)下列有關(guān)基因工程技術(shù)的敘述，正確的是()a不同的限制酶切割形成的黏性末端一定不同bpcr中周期性的溫度設(shè)置是特定的，與擴增的目的基因和引物無關(guān)c在構(gòu)建基因表達載體時通常需要大量的目的基因和載體d質(zhì)粒上的目的基因都必須整合到受體細胞的dna上并表達解析：選c。不同的限制酶切割形成的黏性末端可能相同，也可能不同，a錯誤；pcr中周期性的溫度可在一定范圍內(nèi)設(shè)置，不是特定的，b錯誤；在構(gòu)建基因表達載體時通常需要大量的目的基因和載體，這樣獲得基因表達載體的概率更高，c正確；質(zhì)粒本身也是dna，也能自我復制，所以進入受體細胞以后，既可以自己進行表達，也可以整合到體

2、細胞的dna上并表達，d錯誤。2實驗室常用pcr技術(shù)對dna進行體外擴增，下列相關(guān)敘述正確的是()a95 時dna的磷酸二酯鍵斷開b引物與模板結(jié)合后向5方向延伸c反應(yīng)過程包括變性復性延伸d需要解旋酶和耐高溫的dna聚合酶解析：選c。95 時dna的氫鍵斷開，a錯誤；引物與模板結(jié)合后向3方向延伸，b錯誤；反應(yīng)過程包括變性復性延伸，c正確；pcr技術(shù)通過高溫解旋，不需要解旋酶，d錯誤。3在應(yīng)用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得轉(zhuǎn)基因植株的常規(guī)實驗步驟中，不需要的是()a用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細胞b用選擇培養(yǎng)基篩法導入目的基因的細胞c用聚乙二醇誘導轉(zhuǎn)基因細胞的原生質(zhì)體融合d用適當比例的生長素和細胞分裂素

3、誘導愈傷組織生芽解析：選c。農(nóng)桿菌侵染細菌是基因工程中常常用到的把目的基因?qū)胫参锛毎姆椒?，a正確；目的基因是否導入了細胞，需要在選擇培養(yǎng)基上進行篩選，b正確；在植物細胞組織培養(yǎng)的過程中，需要調(diào)整培養(yǎng)基中生長素和細胞分裂素的比例，來達到對其脫分化和再分化的控制，d正確；在農(nóng)桿菌侵染植物細胞的過程中并沒有涉及原生質(zhì)體的融合，c錯誤。4下列關(guān)于核酸分子雜交和抗原抗體雜交的敘述，正確的是()a核酸分子雜交是指兩條脫氧核苷酸鏈的雜交b抗原抗體雜交的原理為堿基互補配對原則c核酸分子雜交可檢測目的基因的存在和轉(zhuǎn)錄d抗原抗體雜交常以目的基因產(chǎn)物作為抗體解析：選c。核酸分子雜交可以是兩條脫氧核苷酸鏈的雜交，

4、也可以是dna單鏈和rna的雜交；抗原抗體雜交的原理是抗體能與對應(yīng)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合；核酸分子雜交可檢測目的基因的存在和轉(zhuǎn)錄；抗原抗體雜交中目的基因的產(chǎn)物常作為抗原。5(不定項)下列關(guān)于基因工程的敘述，錯誤的是()a切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識別6個核苷酸序列bpcr反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了dna聚合酶催化不同的反應(yīng)c載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為標記基因d基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建解析：選abc。限制酶的識別序列多為6個核苷酸，也有少數(shù)限制酶的識別序列由4、5或8個核苷酸組成，a錯誤；pcr反應(yīng)中，起初的9095 高溫是使目的基因解旋，后冷卻至50 左右是使引

5、物結(jié)合到互補dna鏈上，最后再加熱至72 左右是讓dna聚合酶催化dna的子鏈延伸，b錯誤；載體質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因、青霉素抗性基因等抗生素抗性基因常作為標記基因，c錯誤；基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建，d正確。6(不定項)小鼠雜交瘤細胞表達的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應(yīng)，為了克服這個缺陷，可選擇性擴增抗體的可變區(qū)基因(目的基因)后再重組表達。下列相關(guān)敘述正確的是()a設(shè)計擴增目的基因的引物時不必考慮表達載體的序列b用pcr方法擴增目的基因時不必知道基因的全部序列cpcr體系中一定要添加從受體細胞中提取的dna聚合酶d一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細胞解析：

6、選bd。本題主要考查pcr技術(shù)的有關(guān)知識。利用pcr技術(shù)擴增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計引物，但不需知道目的基因的全部序列，需要考慮載體的序列；因pcr反應(yīng)在高溫條件下進行，故反應(yīng)體系中需加入耐高溫的dna聚合酶；因某些目的基因編碼的產(chǎn)物需經(jīng)特殊的加工修飾過程，故一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細胞。7(不定項)(2020·山東威海模擬)下列關(guān)于dna重組技術(shù)基本工具的敘述，正確的是()a天然質(zhì)粒須經(jīng)過人工改造后才能作為載體b限制酶和dna連接酶分別催化磷酸二酯鍵的水解和形成c一個基因表達載體除了有目的基因外，還必須有起始密碼子

7、、終止密碼子以及標記基因等ddna連接酶能將單個脫氧核苷酸結(jié)合到引物鏈上解析：選ab。天然質(zhì)粒不完全符合載體的要求，通常須經(jīng)過人工改造后才能作為載體，a正確；限制酶識別特定的核苷酸序列并在特定的位點切割，使磷酸二酯鍵水解，dna連接酶是通過形成磷酸二酯鍵將兩個dna片段連接起來，不能將單個脫氧核苷酸結(jié)合到某一dna片段上，b正確，d錯誤；基因表達載體需要有復制原點、啟動子、終止子、目的基因和標記基因，c錯誤。8(2020·江西重點中學盟校一模)回答下列與基因工程有關(guān)的問題：(1)基因工程技術(shù)中，_是將目的基因?qū)胫参锛毎畛Ｓ玫姆椒?，其中的ti質(zhì)粒上的t­dna是指_。(2

8、)獲得的目的基因可利用pcr技術(shù)在體外反應(yīng)體系中擴增，該過程利用的原理是_，需要加入的原料是_，dna解旋利用的是_原理。(3)基因工程中使用的載體，除質(zhì)粒外，還有_和_。(4)該技術(shù)可以培育抗病轉(zhuǎn)基因植物，也可用于動物的基因治療。與之相比，單克隆抗體也用于診斷或攜帶藥物治療癌癥，這是利用了它_的優(yōu)點。解析：(1)將目的基因?qū)胫参锛毎畛Ｓ玫姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其中的ti質(zhì)粒上的t­dna是指可轉(zhuǎn)移的dna。(2)pcr技術(shù)利用的原理是dna雙鏈復制，需要的原料是datp、dttp、dctp和dgtp。dna解旋利用的是熱變性原理，即dna受熱變性(或高溫變性)后解旋為單鏈。(3)

9、基因工程中使用的載體，除質(zhì)粒外，還有噬菌體的衍生物、動植物病毒等。(4)單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高的優(yōu)點，可用于診斷或攜帶藥物治療癌癥。答案：(1)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可轉(zhuǎn)移的dna(2)dna雙鏈復制四種脫氧核苷酸(或datp、dttp、dctp和dgtp)熱變性(或高溫變性等類似意思)(3)噬菌體的衍生物動植物病毒(兩空可調(diào)換)(4)特異性強、靈敏度高9(高考全國卷)某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源dna插入ampr或tetr中會導致相應(yīng)的基因失活(ampr表示氨芐青霉素抗性基因，tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用bamh 酶切后，與用bamh 酶切獲得的目的基因混合，加入dna連接

10、酶進行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌。結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。回答下列問題：(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有_(答出兩點即可)，而作為基因表達載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動子和終止子。(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述四種大腸桿菌細胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細胞是不能區(qū)分的，其原因是_；并且_和_的細胞也是不能區(qū)分的，其原因是_。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落，還需使用含有

11、_的固體培養(yǎng)基。(3)基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其dna復制所需的原料來自_。解析：(1)作為運載體的質(zhì)粒上應(yīng)有一個至多個限制酶切割位點，在細胞中能夠自我復制，且含有特殊的標記基因。(2)未被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌和僅含環(huán)狀目的基因的大腸桿菌中均未導入質(zhì)粒載體，而質(zhì)粒上含有氨芐青霉素抗性基因，因此這樣的大腸桿菌在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中不能生長。含有質(zhì)粒載體和含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌中都含有氨芐青霉素抗性基因，二者在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中都能生長，因此無法區(qū)分。據(jù)題圖可知，用bamh 切割質(zhì)粒后將四環(huán)素抗性基因破壞，因此可將經(jīng)氨芐青霉素培養(yǎng)基篩選出的菌落置于含有四環(huán)素

12、的培養(yǎng)基上再次篩選，能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生存的是含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌，不能生存的是含有插入目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。(3)噬菌體為病毒，經(jīng)改造后作為載體時，其dna復制所需原料來自受體細胞。答案：(1)能自我復制、具有標記基因(2)二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長含有質(zhì)粒載體含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒(或含有重組質(zhì)粒)二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長四環(huán)素(3)受體細胞10(2020·廣東肇慶模擬)含有限制酶的細胞中通常還具有相應(yīng)的甲基化酶，這兩種酶對dna分子有相同的作用序列，但具有不同的催化功能。甲基化酶可以對dna序列進行修飾，使限

13、制酶不能對這一序列進行識別和切割?；卮鹣铝袉栴}：(1)目前，基因工程中使用的_主要是從原核生物中分離純化獲得的。構(gòu)建“基因組文庫”和“cdna文庫”的過程中需要使用dna連接酶的是_(填“基因組文庫”“cdna文庫”或“基因組文庫和cdna文庫”)。(2)含有某種限制酶的細胞，可以利用該限制酶切割外源dna，但不破壞細胞自身的dna，其原因可能有_；_。(3)利用pcr擴增目的基因的過程由高溫變性(9095 )、低溫復性(5560 )、適溫延伸(7075 )三個步驟構(gòu)成一個循環(huán)，為使得酶能夠重復利用，選用的酶應(yīng)在9095 處理后仍然具備催化活性，因此應(yīng)選用_酶。(4)在pcr擴增目的基因時，為

14、實現(xiàn)序列中的腺嘌呤被放射性同位素標記，反應(yīng)體系中添加的原料應(yīng)包括堿基已被標記的_(填“腺嘌呤核糖核苷酸”“datp”或“atp”)。解析：(1)基因工程中的限制酶主要是從原核生物中分離純化獲得的。構(gòu)建“基因組文庫”和“cdna文庫”的過程中都需要利用dna連接酶將dna片段與載體連接導入受體菌群儲存，只不過兩者使用的dna片段不同，cdna文庫是利用反轉(zhuǎn)錄法獲得的dna(部分基因)，基因組文庫使用的是某種生物的全部dna(全部基因)。(2)原核細胞自身的dna分子沒有該限制酶的識別序列或者甲基化酶對細胞自身的dna分子進行了修飾，這使含有某種限制酶的原核細胞，可以利用該限制酶切割外源dna，但

15、不破壞細胞自身的dna。(3)pcr擴增目的基因的三個步驟是高溫變性(9095 )、低溫復性(5560 )和適溫延伸(7075 )，該過程使用的dna聚合酶需是熱穩(wěn)定dna聚合酶(taq酶)。(4)在pcr擴增目的基因時，使用的原料是datp、dttp、dctp和dgtp。答案：(1)限制酶(或限制性核酸內(nèi)切酶)基因組文庫和cdna文庫(2)細胞自身的dna分子沒有該限制酶的識別序列甲基化酶對細胞自身的dna分子進行了修飾(3)熱穩(wěn)定dna聚合(taq)(4)datp11(2018·高考全國卷)某種熒光蛋白(gfp)在紫外光或藍光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測細胞中目的基因

16、的表達。某科研團隊將某種病毒的外殼蛋白(l1)基因連接在gfp基因的5末端。獲得了l1­gfp融合基因(簡稱為甲)，并將其插入質(zhì)粒p0，構(gòu)建了真核表達載體p1，其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點的示意圖如下，圖中e1e4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同?；卮鹣铝袉栴}：(1)據(jù)圖推斷，該團隊在將甲插入質(zhì)粒p0時，使用了兩種限制酶，這兩種酶是_，使用這兩種酶進行酶切是為了保證_，也是為了保證_。(2)將p1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細胞后，若在該細胞中觀察到了綠色熒光，則說明l1基因在牛的皮膚細胞中完成了_和_過程。(3)為了獲得含有甲的牛，該團隊需要做的工作包括：將能夠產(chǎn)生綠色熒光細胞的_移入牛的_中、體

17、外培養(yǎng)、胚胎移植等。(4)為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細胞中，某同學用pcr方法進行鑒定，在鑒定時應(yīng)分別以該牛不同組織細胞中的_(填“mrna”“總rna”或“核dna”)作為pcr模板。解析：(1)據(jù)題圖可知，將l1­gfp融合基因(甲)插入質(zhì)粒時使用酶e1和e4進行酶切，既能保證l1­gfp融合基因的完整，又能保證l1­gfp融合基因與載體的正確連接。(2)目的基因在受體細胞中的表達包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個過程。(3)將體外培養(yǎng)的含有目的基因的動物體細胞核移入該動物的去核卵母細胞中，經(jīng)過體外胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)可獲得轉(zhuǎn)基因動物。(4)檢測目的基因是否存在

18、于克隆牛的不同組織細胞中，采用pcr技術(shù)鑒定時，應(yīng)以該牛不同組織細胞中的核dna作為pcr模板。答案：(1)e1和e4甲的完整甲與載體正確連接(2)轉(zhuǎn)錄翻譯(3)細胞核去核卵母細胞(4)核dna12(2020·廣東肇慶一模)2018年10月3日，“不務(wù)正業(yè)”的諾貝爾化學獎又頒給了生物學，授予了格雷戈里·溫特(gregory pwinter)等3位科學家，以表彰他們在酶的定向進化，肽類和噬菌體展示技術(shù)等方面的成績。噬菌體展示技術(shù)是將外源蛋白或多肽的dna序列插入噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當位置，使外源基因隨外殼蛋白的表達而表達，同時，外源蛋白隨噬菌體的重新組裝而展示到噬菌體表面的生物技術(shù)。請根據(jù)材料回答下列問題：(1)t2噬菌體的遺傳物質(zhì)是_，如噬菌體外殼蛋白展示胰島素蛋白原，構(gòu)建基因表達載體時，胰島素基因前還要插入_。(2)將外源蛋白或多肽的dna序列插入噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因中，需要用到的工具酶有_。噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因用ecor 切割后產(chǎn)生的片段如下圖：圖示末端為_，為使外源蛋白dna序列能與其相連，外源蛋白dna除可用ecor 切割外，還可用另一種酶切割，該酶必須具有的特點是_。(3)從