生物分離工程復(fù)習(xí)題一(第1-9章16K含答案)

1、生物分離工程復(fù)習(xí)題一（第13章）一、選擇題1、下列物質(zhì)不屬于凝聚劑的有（c）。a、明礬 b、石灰 c、聚丙烯類 d、硫酸亞鐵2、發(fā)酵液的預(yù)處理方法不包括（c）a. 加熱 b絮凝 c.離心 d. 調(diào)ph3、其他條件均相同時(shí)，優(yōu)先選用哪種固液分離手段（b）a. 離心分離 b過濾 c. 沉降 d.超濾4、那種細(xì)胞破碎方法適用工業(yè)生產(chǎn)（a）a. 高壓勻漿 b超聲波破碎 c. 滲透壓沖擊法 d. 酶解法5、為加快過濾效果通常使用（c）a.電解質(zhì) b高分子聚合物 c.惰性助濾劑 d.活性助濾劑6、不能用于固液分離的手段為（c）a.離心 b過濾 c.超濾 d.雙水相萃取7、下列哪項(xiàng)不屬于發(fā)酵液的預(yù)處理： （

2、d ）a.加熱  b.調(diào)ph c.絮凝和凝聚 d.層析8、能夠除去發(fā)酵液中鈣、鎂、鐵離子的方法是（c） a 過濾 b 萃取 c 離子交換 d 蒸餾9、從四環(huán)素發(fā)酵液中去除鐵離子，可用（b） a 草酸酸化 b 加黃血鹽 c 加硫酸鋅 d 氨水堿化10、鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是（b）a.降低蛋白質(zhì)溶液的介電常數(shù) b.中和電荷，破壞水膜c.與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶性蛋白 d.調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)溶液ph到等電點(diǎn)11、使蛋白質(zhì)鹽析可加入試劑（ d）a：氯化鈉；b：硫酸；c：硝酸汞；d：硫酸銨12、鹽析法純化酶類是根據(jù)（b）進(jìn)行純化。a.根據(jù)酶分子電荷性質(zhì)的純化方法 b.調(diào)節(jié)酶溶解度的方法c.根據(jù)酶分子大小、

3、形狀不同的純化方法 d.根據(jù)酶分子專一性結(jié)合的純化方法13、鹽析操作中，硫酸銨在什么樣的情況下不能使用（b）a.酸性條件 b堿性條件 c.中性條件 d.和溶液酸堿度無關(guān)14、有機(jī)溶劑沉淀法中可使用的有機(jī)溶劑為（d）a.乙酸乙酯 b正丁醇 c.苯 d.丙酮15、有機(jī)溶劑為什么能夠沉淀蛋白質(zhì)（b）a.介電常數(shù)大 b介電常數(shù)小 c.中和電荷 d.與蛋白質(zhì)相互反應(yīng)16、蛋白質(zhì)溶液進(jìn)行有機(jī)溶劑沉淀，蛋白質(zhì)的濃度在（ a）范圍內(nèi)適合。a. 0.52 b13 c. 24 d. 3517、生物活性物質(zhì)與金屬離子形成難溶性的復(fù)合物沉析，然后適用（c ）去除金屬離子。a. sds b ctab c. edta d

4、. cpc18、單寧沉析法制備菠蘿蛋白酶實(shí)驗(yàn)中，加入1%的單寧于鮮菠蘿汁中產(chǎn)生沉淀，屬于(d )沉析原理。a鹽析 b有機(jī)溶劑沉析 c等電點(diǎn)沉析 d有機(jī)酸沉析19、當(dāng)向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時(shí)，蛋白質(zhì)溶解度（c ）a、增大 b、減小 c、先增大，后減小 d、先減小，后增大20、將四環(huán)素粗品溶于ph2的水中，用氨水調(diào)ph4.54.6，2830保溫，即有四環(huán)素沉淀結(jié)晶析出 。此沉淀方法稱為（b）a、有機(jī)溶劑結(jié)晶法 b、等電點(diǎn)法 c、透析結(jié)晶法 d、鹽析結(jié)晶法21、將配基與可溶性的載體偶聯(lián)后形成載體-配基復(fù)合物，該復(fù)合物可選擇性地與蛋白質(zhì)結(jié)合，在一定條件下沉淀出來，此方法稱為（a）a、親和沉淀 b、

5、聚合物沉淀 c、金屬離子沉淀 d、鹽析沉淀22、在一定的ph和溫度下改變離子強(qiáng)度（鹽濃度）進(jìn)行鹽析，稱作(a)a、ks鹽析法 b、鹽析法 c、重復(fù)鹽析法 d、分部鹽析法23、某蛋白在硫酸銨飽和度為60%時(shí)可完全沉淀?，F(xiàn)有該蛋白水溶液10ml，欲使該蛋白完全沉淀，應(yīng)加入飽和硫酸銨溶液（b）ml。a、10 b、15 c、20 d、2524、關(guān)于非離子多聚物沉淀蛋白的原理，下列說法錯(cuò)誤的是（b）a、沉淀作用是聚合物與生物大分子發(fā)生共沉淀作用。b、由于聚合物有較強(qiáng)的疏水性，使生物大分子脫水而發(fā)生沉淀。c、聚合物與生物大分子之間以氫鍵相互作用形成復(fù)合物，在重力作用下形成沉淀析出。d、通過空間位置排斥，使

6、液體中生物大分子被迫擠聚在一起而發(fā)生沉淀。25、關(guān)于核酸沉淀，下列說法正確的是（d）。a、在核酸提取液中加入氯仿/異戊醇或氯仿/辛醇，振蕩一段時(shí)間，使核酸在氯仿/水界面上形成凝膠狀沉淀而蛋白質(zhì)留在水溶液中。b、在對(duì)氨基水楊酸等陰離子化合物存在下，核酸的苯酚水溶液提取液中，蛋白質(zhì)進(jìn)入水層，而dna和rna沉淀于苯酚層中被分離除去。c、在dna與rna的混合液中，用異丙醇選擇性地沉淀rna而與留在溶液中的dna分離。 d、由于核酸都不溶于有機(jī)溶劑，所以可在核酸提取液中加入乙醇、異丙醇或2-乙氧基乙醇，使dna或rna沉淀下來。26、過濾的透過推動(dòng)力是（d）。 a.滲透壓 b.電位差 c.自由擴(kuò)散

7、d.壓力差27、在cohn方程中，logs=-ksi中，鹽析常數(shù)ks反映（c）對(duì)蛋白質(zhì)溶解度的影響。 a.操作溫度 b.ph值 c.鹽的種類 d.離子強(qiáng)度28、在cohn方程中，logs=-ksi中，常數(shù)反映（b）對(duì)蛋白質(zhì)溶解度的影響。 a.無機(jī)鹽的種類 b.ph值和溫度 c.ph值和鹽的種類 d.溫度和離子強(qiáng)度29、在相同的離子強(qiáng)度下，不同種類的鹽對(duì)蛋白質(zhì)鹽析的效果不同，一般離子半徑（a）效果好。 a.小且?guī)щ姾奢^多的陰離子 b.大且?guī)щ姾奢^多的陰離子 c.小且?guī)щ姾奢^多的陽離子 d.大且?guī)щ姾奢^多的陽離子30、下列關(guān)于固相析出說法正確的是（ b ）a.沉淀和晶體會(huì)同時(shí)生成 b析出速度慢產(chǎn)生

8、的是結(jié)晶 c.和析出速度無關(guān) d.析出速度慢產(chǎn)生的是沉淀二、填空題1、cohn方程logs=-ksi中，ks越 大 ，值越 小 ，鹽析效果越好。2、固液分離的主要方法有 離心 和 過濾 。3、對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行預(yù)處理方法主要有 加熱法、 調(diào)節(jié)ph值、 凝聚和絮凝、使用惰性助助濾劑、加入反應(yīng)劑 。4、根據(jù)過濾機(jī)理的不同，過濾操作可分為 澄清過濾 和 濾餅過濾 兩種類型5、鹽析的操作方法有 加入固體鹽 、 加入飽和溶液法 、 透析平衡法。6、核酸的沉淀方法主要有 有機(jī)溶劑沉淀法、 等電點(diǎn)沉淀發(fā)、 鈣鹽沉淀法、 溶劑沉淀法。7、蛋白質(zhì)膠體溶液的穩(wěn)定性主要靠 蛋白質(zhì)分子間靜電排斥作用、蛋白質(zhì)周圍的水化層 等

9、因素穩(wěn)定。8、為使過濾進(jìn)行的順利通常要加入 惰性助濾劑。9、典型的工業(yè)過濾設(shè)備有 半框壓濾機(jī) 和 真空轉(zhuǎn)鼓過濾機(jī) 。10、常用的蛋白質(zhì)沉析方法有 鹽析、 等電點(diǎn) 和 有機(jī)溶劑 。三、其他題型1、什么是生物技術(shù)下游加工過程？從發(fā)酵液或酶反應(yīng)液或動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)液中提取、分離、純化、富集生物產(chǎn)品的過程。2、針對(duì)分離對(duì)象而言，生物分離過程有何特點(diǎn)？1）發(fā)酵液或培養(yǎng)液是產(chǎn)物很低的水溶液;2）培養(yǎng)液是多組分的混合物；3）生化產(chǎn)品的穩(wěn)定性差；4）對(duì)最終產(chǎn)品質(zhì)量要求高3、生物分離工程的一般步驟是什么？各步驟中的單元操作主要有哪些？1）發(fā)酵液的預(yù)處理與固-液分離，主要操作有：加熱、調(diào)節(jié)ph、沉降、過濾、錯(cuò)流過濾

10、、均質(zhì)化研磨、溶胞、萃??；2）初步純化，主要步驟：沉淀、吸附、萃取、超濾；3）高度純化，主要步驟：層析、離子交換、親和、疏水、吸附、電泳；4）成品加工，主要步驟：無菌過濾、超濾、冷凍干燥、噴霧干燥、結(jié)晶。4、生物分離過程的選擇準(zhǔn)則是什么？1）采用步驟數(shù)應(yīng)最少，2）步驟的次序要相對(duì)合理，3）適應(yīng)產(chǎn)品的技術(shù)規(guī)格，4）生產(chǎn)規(guī)格，5）進(jìn)料組成，6）產(chǎn)品形成，7）產(chǎn)品的穩(wěn)定性，8）物性，9）環(huán)保和安全要求，10）生產(chǎn)方式5、通過本課程的學(xué)習(xí)，談?wù)勀銓?duì)生物技術(shù)下游加工過程今后發(fā)展動(dòng)向的理解。將會(huì)加強(qiáng)基礎(chǔ)理論研究，傳統(tǒng)分離技術(shù)的提高和完善，新技術(shù)的研究與開發(fā)，生物技術(shù)下游工程與上游工程相結(jié)合，強(qiáng)化物理化學(xué)作

11、用的影響，生物分離過程的高效集成化，清潔生產(chǎn)。隨著商業(yè)競(jìng)爭(zhēng)的增多和生產(chǎn)規(guī)模的擴(kuò)大，產(chǎn)品的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)最終歸結(jié)為低成本和高純度，所以成本的控制盒質(zhì)量控制是生物技術(shù)下游加工過程發(fā)展的動(dòng)力和方向。6、在進(jìn)行產(chǎn)品的分離純化制備之前，為什么要對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行預(yù)處理？由于所需的產(chǎn)品在培養(yǎng)液和菌體中濃度很低，并與許多雜質(zhì)在一起，同時(shí)發(fā)酵液或生物溶液又屬于非牛頓性流體，所以必須進(jìn)行預(yù)處理。7、什么是封頭過濾？什么是錯(cuò)流過濾？一般過濾中，濾液的流動(dòng)方向與濾餅基本垂直，稱為封頭過濾。如果料液給過濾介質(zhì)表面一個(gè)平行的大流量沖刷，則過濾介質(zhì)表面積積累的濾餅就會(huì)減少到可以忽略的程度，而通過過濾介質(zhì)的流速則比較小，這種過濾方式稱

12、作錯(cuò)流過濾。8、發(fā)酵液預(yù)處理中，凝聚和絮凝的作用機(jī)理有何不同？凝聚指在投加化學(xué)物質(zhì)作用下，膠體脫穩(wěn)并使小粒子聚集成1mm大小狀凝聚體的過程，機(jī)理：中和粒子表面電荷、消除雙電層結(jié)構(gòu)、破壞水化膜。絮凝指在某些高分子劑存在下，絮凝劑存在下，基于架橋作用，使膠粒形成較大絮凝團(tuán)的作用，機(jī)理：架橋作用。9、中性鹽沉淀蛋白質(zhì)的基本原理是什么？蛋白質(zhì)和酶均易溶于水，分子中的-cooh、-nh2和-oh等親水基團(tuán)，與極性分子相互作用形成水化層，包圍于蛋白質(zhì)分子周圍形成親水膠體，削弱了蛋白質(zhì)分子之間的作用力，蛋白質(zhì)分子表面極性基團(tuán)越多，水化層越厚，蛋白質(zhì)分子與溶劑分子之間的親和力越大，因而溶解度也越大。10、硫酸

13、銨是蛋白質(zhì)鹽析中最常用的鹽類，為什么？因?yàn)榱蛩徜@溶解度大、分離效果好，不易引起變性，有穩(wěn)定酶和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的作用，價(jià)格便宜，廢液不污染環(huán)境。生物分離工程復(fù)習(xí)題二（第45章）一、選擇題1、以下哪項(xiàng)不是在重力場(chǎng)中，顆粒在靜止的流體中降落時(shí)受到的力（ b ）a.重力 b. 壓力 c.浮力 d. 阻力2、顆粒與流體的密度差越小，顆粒的沉降速度（a ）a.越小 b.越大 c.不變 d.無法確定3、等密度區(qū)帶離心的密度梯度中最大密度（a）待分離的目標(biāo)產(chǎn)物的密度。a.大于 b.小于 c.等于 d.以上均可4、差速區(qū)帶離心的密度梯度中最大密度（b）待分離的目標(biāo)產(chǎn)物的密度。a.大于 b.小于 c.等于 d.以上均

14、可5、以下各物質(zhì)可用于密度梯度離心介質(zhì)的是（d）。a.蔗糖 b.聚蔗糖 c.氯化銫 d.以上均可6、針對(duì)配基的生物學(xué)特異性的蛋白質(zhì)分離方法是（c ）。a.凝膠過濾 b.離子交換層析 c.親和層析 d.紙層析7、用于蛋白質(zhì)分離過程中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是（ c ）a離子交換色譜 b.親和色譜 c.凝膠過濾色譜 d.反相色譜8、蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定可采用（ c ）方法。a離子交換層析 b.親和層析 c.凝膠層析 d.聚酰胺層析9、凝膠色譜分離的依據(jù)是（ b ）。a、固定相對(duì)各物質(zhì)的吸附力不同 b、各物質(zhì)分子大小不同c、各物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中的分配系數(shù)不同 d、各物質(zhì)與專一分子的親和力不同10、

15、下列哪一項(xiàng)是強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂的活性交換基團(tuán)（ a ）a 磺酸基團(tuán)（-so3 h） b 羧基-cooh c 酚羥基c6h5oh d 氧乙酸基-och2cooh11、依離子價(jià)或水化半徑不同，離子交換樹脂對(duì)不同離子親和能力不同。樹脂對(duì)下列離子親和力排列順序正確的有（ a）。a、fe3+ca2+na+ b、na+ca2+fe3+ c、na+rb+cs+ d、rb+cs+na+12、如果要將復(fù)雜原料中分子量大于5000的物質(zhì)與5000分子量以下的物質(zhì)分開選用（d ）。a、sephadex g-200 b、sephadex g-150 c、sephadex g-100 d、sephadex g-501

16、3、離子交換法是應(yīng)用離子交換劑作為吸附劑，通過（a ）將溶液中帶相反電荷的物質(zhì)吸附在離子交換劑上。a、靜電作用 b、疏水作用 c、氫鍵作用 d、范德華力14、陰離子交換劑（ c ）。a、可交換的為陰、陽離子 b、可交換的為蛋白質(zhì) c、可交換的為陰離子 d、可交換的為陽離子15、洗脫體積是（ c ）。a、凝膠顆粒之間空隙的總體積 b、溶質(zhì)進(jìn)入凝膠內(nèi)部的體積c、與該溶質(zhì)保留時(shí)間相對(duì)應(yīng)的流動(dòng)相體積 d、溶質(zhì)從柱中流出時(shí)所用的流動(dòng)相體積16、工業(yè)上強(qiáng)酸型和強(qiáng)堿型離子交換樹脂在使用時(shí)為了減少酸堿用量且避免設(shè)備腐蝕，一般先將其轉(zhuǎn)變?yōu)椋?b）。a、鈉型和磺酸型 b、鈉型和氯型 c、銨型和磺酸型 d、銨型和氯

17、型17、吸附色譜分離的依據(jù)是（ a）。a、固定相對(duì)各物質(zhì)的吸附力不同 b、各物質(zhì)分子大小不同c、各物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相的分配系數(shù)不同 d、各物質(zhì)與專一分子的親和力不同18、下面哪一種是根據(jù)酶分子專一性結(jié)合的純化方法（a ）。a. 親和層析 b. 凝膠層析 c. 離子交換層析 d. 鹽析19、酚型離子交換樹脂則應(yīng)在（ b）的溶液中才能進(jìn)行反應(yīng)a. ph7 b ph9 c. ph9 d. ph720、羧酸型離子交換樹脂必須在（ c）的溶液中才有交換能力a. ph5 b ph7 c. ph7 d. ph521、離子交換樹脂使用（ b ）進(jìn)行溶脹a.水 b乙醇 c.氫氧化鈉 d.鹽酸22、下列關(guān)于離子

18、交換層析洗脫說法錯(cuò)誤的是（d ）a. 對(duì)強(qiáng)酸性樹脂一般選擇氨水、甲醇及甲醇緩沖液等作洗脫劑b弱酸性樹脂用稀硫酸、鹽酸等作洗脫劑 c. 強(qiáng)堿性樹脂用鹽酸-甲醇、醋酸等作洗脫劑 d. 若被交換的物質(zhì)用酸、堿洗不下來，應(yīng)使用更強(qiáng)的酸、堿23、離子交換用的層析柱直徑和柱長(zhǎng)比一般為（ b）之間a. 1：10-1：20 b1：10-1：50 c. 1：10-1：30 d. 1：20-1：5024、通過改變ph值從而使與離子交換劑結(jié)合的各個(gè)組分被洗脫下來，可使用（a ）a. 陽離子交換劑一般是ph值從低到高洗脫 b陽離子交換劑一般是ph值從高到低洗脫c. 陰離子交換劑一般是ph值從低到高 d. 以上都不對(duì)2

19、5、下列哪一種凝膠的孔徑最小（a ）a. sephadex g-25 b sephadex g-50 c. sephadex g-100 d. sephadex g-20026、下列哪一種凝膠的吸水量最大（d ）a. sephadex g-25 b sephadex g-50 c. sephadex g-100 d. sephadex g-20027、疏水親和吸附層析通常在（ d）的條件下進(jìn)行a.酸性 b堿性 c. 低濃度鹽溶液 d. 高濃度鹽溶液28、當(dāng)硅膠吸水量在（ b ）以上時(shí)，就失去其吸附作用a. 13% b 17% c. 10% d. 15%29、關(guān)于疏水柱層析的操作錯(cuò)誤( d )a

20、疏水層析柱裝柱完畢后，通常要用含有高鹽濃度的緩沖液進(jìn)行平衡 b疏水層析是利用蛋白質(zhì)與疏水性吸附劑之間的弱疏水性相互作用的差別進(jìn)行分離純化的層析技術(shù) c洗脫后的層析柱再生處理，可用8mol/l尿素溶液或含8mol/l尿素的緩沖溶液洗滌，然后用平衡緩沖液平衡d疏水柱層析分辨率很高、流速慢、加樣量小30、在凝膠過濾（分離范圍是5000400000）中，下列哪種蛋白質(zhì)最先被洗脫下來（b）a細(xì)胞色素c（13370）b肌球蛋白（400000）c過氧化氫酶（247500）d血清清蛋白（68500）e肌紅蛋白（16900）31、親和層析的洗脫過程中，在流動(dòng)相中減去配基的洗脫方法稱作（ d ）a、 陰性洗脫 b

21、、劇烈洗脫 c、正洗脫 d、負(fù)洗脫32、下列哪一項(xiàng)不是陽離子交換樹脂 （d）a 氫型 b 鈉型 c 銨型 d 羥型33、下列哪項(xiàng)不是常用的樹脂再生劑（ d ）a 110hcl b h2s04、 c nacl、 d 蒸餾水34、親和層析的洗脫過程中，在流動(dòng)相中加入配基的洗脫方法稱作 （c）a、 陰性洗脫 b、 劇烈洗脫 c、競(jìng)爭(zhēng)洗脫 d、非競(jìng)爭(zhēng)洗脫35、凝膠層析中，有時(shí)溶質(zhì)的kd>1，其原因是（ b）a、凝膠排斥 b、凝膠吸附 c、柱床過長(zhǎng) d、流速過低二、填空1、常用離心設(shè)備可分為 離心沉降 和 離心過濾 兩大類；2、在一個(gè)轉(zhuǎn)子中，將粒子沉降下來的效率可以用 k系數(shù) 來描述。3、超離心法

22、是根據(jù)物質(zhì)的 沉降系數(shù)、 質(zhì)量 和 形狀 不同，應(yīng)用強(qiáng)大的離心力，將混合物中各組分分離、濃縮、提純的方法。 4、密度梯度離心中，制備密度梯度的常用方法有 手工法、 梯度混合儀法、 離心形成法。5、陽離子交換樹脂按照活性基團(tuán)分類，可分為 強(qiáng)酸型、 弱酸型 和 中等強(qiáng)度 ；其典型的活性基團(tuán)分別有 磺酸基團(tuán) 、 羧基 和 磷酸基 。7、蛋白質(zhì)分離常用的層析方法有 凝膠層析 、多糖基離子交換 、 親和層析 和 疏水層析 。8、離子交換分離操作中，常用的梯度洗脫方法有 ph梯度 和 離子強(qiáng)度梯度。10、多糖基離子交換劑包括 葡集團(tuán)離子交換劑 和 離子交換纖維素 兩大類。11、離子交換樹脂由 載體 、 活

23、性基團(tuán) 和 可交換離子 組成。12、deae sepharose是 陰 離子交換樹脂，其活性基團(tuán)是 二乙基氨基乙基 。13、cm sepharose是 陽 離子交換樹脂，其活性基團(tuán)是 羧甲基 。14、離子交換操作一般分為 動(dòng)態(tài) 和 靜態(tài) 兩種。15、利用薄層定量測(cè)定時(shí)，一般控制待測(cè)組分的rf在 0.2-0.5 之間。16、疏水層析是根據(jù)被分離組分分子表面的 疏水殘基 與固定相的 疏水配基 之間結(jié)合力差異進(jìn)行的層析分離方法。18、我國化工部規(guī)定離子交換產(chǎn)品的型號(hào)以三位阿拉伯?dāng)?shù)字組成，第一位數(shù)字代表 產(chǎn)品的分類 ，第二位數(shù)字代表 骨架的差異 ，第三位數(shù)字為 順序號(hào) 用以區(qū)別基團(tuán)、交聯(lián)劑等的差異。型

24、號(hào)前加“d”的為 大孔樹脂 。19、親和吸附劑的制備過程包括 基質(zhì)的活化 、 基質(zhì)與配體的偶聯(lián) 和 基質(zhì)與配體的選擇 三個(gè)步驟。三、其他題型1、何為沉降系數(shù)？顆粒在單位離心力場(chǎng)中粒子移動(dòng)的速度。2、差速離心和密度梯度區(qū)帶離心法的原理是什么？差速離心是采用不同的離心速度和離心時(shí)間，是沉淀速度不同的顆粒在不同的離心速度及不同的離心時(shí)間下，分配分離的方法。密度區(qū)帶離心法是樣品在一定惰性梯度介質(zhì)中進(jìn)行離心沉淀或沉降平衡，在一定離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上，形成不同區(qū)帶的離心分離方法。3、工業(yè)離心沉降設(shè)備主要類型有哪些？瓶式離心機(jī)，管式離心機(jī)，多室式離心機(jī)，蝶式離心機(jī)，螺旋卸料沉降離心機(jī)4、

25、差速區(qū)帶離心法和等密度離心法有何區(qū)別？1）在原理上，差速區(qū)帶離心法依據(jù)粒子的沉降速率差異被分離，等密度離心法依據(jù)粒子本身的密度差異被分離；2）在梯度范圍上，差速區(qū)帶離心法介質(zhì)的密度小于樣品中各種粒子的密度，等密度離心法介質(zhì)的密度大于待分離樣品中各種粒子的密度；3）在時(shí)間效應(yīng)上，差速區(qū)帶離心法長(zhǎng)時(shí)間離心，所有待分離粒子都沉淀在管底，等密度離心法長(zhǎng)時(shí)間離心，各粒子停留在等密度形成的區(qū)帶。5、何為內(nèi)水體積？何為外水體積？?jī)?nèi)水體積：指基質(zhì)顆粒內(nèi)部液體體積的總和，即基質(zhì)膨脹是所膨脹的體積。外水體積：指基質(zhì)顆粒之間液體體積的總和。外水體積：指基質(zhì)顆粒之間液體體積的總和。6、列舉五種層析分離技術(shù)，說明其原理

26、。1）吸附層析：組分吸附在吸附劑表面，固定相是固體吸附劑，各組分能力不同。2）分配層析：各組分在流動(dòng)相和靜止相中的分配系數(shù)不同。3）離子交換層析：7、試以蛋白質(zhì)在ph梯度介質(zhì)中的移動(dòng)行為說明聚焦效應(yīng)的形成原理。在流動(dòng)過程中，當(dāng)ph剛高于pi時(shí)，蛋白帶負(fù)電荷，與交換劑結(jié)合，移動(dòng)速度顯著減慢。當(dāng)ph梯度下降至使該處ph低于pi，蛋白帶正電荷，不與交換劑結(jié)合，而隨洗脫液快速移動(dòng)。如此多次重復(fù)而達(dá)聚焦、分離目的。如果一種蛋白質(zhì)加到已經(jīng)形成ph梯度的層析柱上時(shí)，將迅速移動(dòng)到與其等電點(diǎn)相同的ph處。從此位置開始，蛋白質(zhì)以緩慢的速度進(jìn)行吸附、解吸附，直到ph小于pi時(shí)被洗出。若在此蛋白洗出之前再加入第二份同

27、種蛋白樣品時(shí)，后者將在洗脫液的作用下快速向前移動(dòng)，而不被固定相吸附，直到其移動(dòng)到近似本身等電點(diǎn)環(huán)境處。然后兩份樣品以同樣的速度移動(dòng)，最后同時(shí)從柱底流出。8、新型的薄層層析技術(shù)有哪些？1混合薄層：兩種不同吸附劑2酸堿薄層：稀酸或稀堿代替水3絡(luò)合薄層：加入絡(luò)合劑4涂布固定液的薄層：5具有濃縮區(qū)的薄層：不同粒度。高效薄層:極細(xì)均勻的吸附劑9、蛋白質(zhì)疏水層析時(shí)，洗脫的方式有哪三種？1)降低流動(dòng)相中鹽濃度2）往流動(dòng)相中添加有機(jī)溶劑3）往流動(dòng)相中添加去污劑10、例舉兩種新型的疏水層析技術(shù)，說明其原理。1）親硫性疏水層析 該技術(shù)主要在疏水作用的基礎(chǔ)上增加了硫元素的相互作用。利用層析介質(zhì)與含硫蛋白質(zhì)和非硫蛋白

28、質(zhì)的親硫性差異，對(duì)蛋白質(zhì)加以分離。 2）疏水電荷誘導(dǎo)層析(hcic) hcic的配基中含有吡啶環(huán)，中性時(shí)不會(huì)帶有電荷，而隨著ph值的降低，吡啶環(huán)中的氮原子會(huì)帶有正電荷，這樣和帶同樣電荷的蛋白質(zhì)發(fā)生排斥，從而實(shí)現(xiàn)解吸。11、何為樹脂的有效粒徑和均一系數(shù)？1)有效粒徑是指篩分樹脂時(shí)，10%體積的樹脂顆粒通過，而90%體積的樹脂顆粒保留的篩孔直徑。2)均一系數(shù) 是指能通過60%體積樹脂的篩孔直徑與能通過10%體積的樹脂的篩孔直徑之比。12、什么是凝膠的排阻極限？指不能進(jìn)入凝膠顆?？籽▋?nèi)部的最小分子的分子量。排阻極限代表一種凝膠能有效分離的最大分子量，大于這種凝膠的排阻極限的分子用這種凝膠不能得到分離

29、。生物分離工程復(fù)習(xí)題三（第67章）一、選擇題1、當(dāng)兩種高聚物水溶液相互混合時(shí)，二者之間的相互作用不可能產(chǎn)生（d）a. 互不相溶，形成兩個(gè)水相 b. 兩種高聚物都分配于一相，另一相幾乎全部為溶劑水 c. 完全互溶，形成均相的高聚物水溶液 d. 形成沉淀2、超臨界流體萃取中，如何降低溶質(zhì)的溶解度達(dá)到分離的目的（c）a.降溫 b升高壓力 c.升溫 d.加入夾帶劑3、物理萃取即溶質(zhì)根據(jù)（b）的原理進(jìn)行分離的a.吸附 b.相似相溶 c分子篩 d 親和4、超臨界流體萃取法適用于提取（ b ）a、極性大的成分 b、極性小的成分 c、離子型化合物 d、親水性成分5、在萃取液用量相同的條件下， 下列哪種萃取方式

30、的理論收率最高 （c） a.單級(jí)萃取 b.三級(jí)錯(cuò)流萃取 c.三級(jí)逆流萃取 d.二級(jí)逆流萃取 6、關(guān)于萃取下列說法正確的是（c）a. 酸性物質(zhì)在酸性條件下萃取 b堿性物質(zhì)在堿性條件下萃取 c. 兩性電解質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)進(jìn)行提取 d. 兩性電解質(zhì)偏離等電點(diǎn)時(shí)進(jìn)行提取7、液一液萃取時(shí)常發(fā)生乳化作用，如何避免（d）a.劇烈攪拌 b低溫 c.靜止 d.加熱8、在葡聚糖與聚乙二醇形成的雙水相體系中，目標(biāo)蛋白質(zhì)存在于（a）a.上相 b下相 c.葡聚糖相 d.以上都有可能9、超臨界流體萃取中，如何降低溶質(zhì)的溶解度達(dá)到分離的目的（c）a.降溫 b升高壓力 c.升溫 d.加入夾帶劑10、關(guān)于反萃取的概念，下列說法正確

31、的是：（a）。a、溶質(zhì)從萃取劑轉(zhuǎn)移到反萃劑的過程；b、萃取時(shí)，反向加入溶劑的方法；c、萃取時(shí)，反向加入料液的方法；d、以上都不對(duì)。11、萃取劑對(duì)溶質(zhì)分離能力的大小不可用下列哪種參數(shù)表示：（d）。a、分配系數(shù)；b、分離因子；c、活度的比值；d、分離時(shí)間。12、表面活性劑的親水與親油程度的相對(duì)強(qiáng)弱，在工業(yè)上常用hlb數(shù)來表示。下列說法正確的是：（b）。a、hlb數(shù)越小，親水性越強(qiáng)；b、hlb數(shù)越大，親水性越強(qiáng)；c、hlb數(shù)越大，親酯性越強(qiáng)；d、以上說法都不對(duì)。13、在生化工程中得到最廣泛應(yīng)用的雙水相體系主要有：（d）。a、peg-聚乙烯體系和peg-磷酸鹽體系； b、peg-dex體系和聚丙二醇-

32、peg體系；c、peg-聚乙烯體系和peg-磷酸鹽體系； d、peg- dex體系和peg-磷酸鹽體系。14、反膠團(tuán)的微小界面和微小水相具有兩個(gè)特異性功能，除具有分子識(shí)別并允許選擇性透過的半透膜功能之外，另一個(gè)特異性功能是：（d）。a、分離、濃縮可同時(shí)進(jìn)行，過程簡(jiǎn)便； b、有很高的萃取率和反萃取率；c、可直接從完整細(xì)胞中提取具有活性的蛋白質(zhì)和酶；d、在疏水性環(huán)境中具有使親水性大分子如蛋白質(zhì)等保持活性的功能。15、在用反膠團(tuán)萃取技術(shù)分離蛋白質(zhì)的研究中，使用得最多的表面活性劑是：（a）。a、aot； b、ctab； c、tomac； d、ptea。16、對(duì)于小分子蛋白質(zhì)（mr20000）的aot/

33、異辛烷反膠團(tuán)萃取體系，描述正確的有：（a）。a、phpi時(shí)，蛋白質(zhì)不能溶入反膠團(tuán)內(nèi)，但在等電點(diǎn)附近，急速變?yōu)榭扇?；b、當(dāng)phpi時(shí)，即在蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷的ph范圍內(nèi)，它們幾乎完全溶入反膠團(tuán)內(nèi)；c、當(dāng)phpi時(shí)，即在蛋白質(zhì)帶正電荷的ph范圍內(nèi)，它們幾乎不溶入反膠團(tuán)內(nèi)；d、phpi時(shí)，蛋白質(zhì)能溶入反膠團(tuán)內(nèi)，但在等電點(diǎn)附近，急速變?yōu)椴豢扇堋?7、采用丁酯萃取發(fā)酵液中的青霉素（pk=2.75）時(shí)，發(fā)酵液中有一酸性雜質(zhì)（pk=2.05），此時(shí)萃取體系的ph應(yīng)控制在（c）。a.2.05 b2.75 c.2.35 d.5.8018、下列方法中不屬于有泡沫分離技術(shù)的是（d）a. 沉淀浮選 b. 離子浮選 c.

34、吸附膠體浮選 d. 鼓泡分餾19、對(duì)于泡沫分離技術(shù)中的泡沫，下列說法準(zhǔn)確的是（a）a. 泡沫是由被極薄的液膜所隔開的許多氣泡所組成的b. 表面活性劑分子在溶液中的氣泡表面排成雙分子層膜c. 在氣泡表面親油基指向溶液，親水基指向氣泡內(nèi)部d. 泡沫是由許多單分子層的氣泡形成的聚集體20、關(guān)于泡沫的穩(wěn)定性，下列說法錯(cuò)誤的是（b）a. 在臨界膠束濃度時(shí)所形成的泡沫最穩(wěn)定b. 表面積大的氣泡，穩(wěn)定性比表面積小的氣泡要好c. 氣體可以從小氣泡通過液膜向大氣泡擴(kuò)散，導(dǎo)致大氣泡變大，小氣泡變小，以至消失d. 多個(gè)氣泡的膜間夾角為120°時(shí)，壓力差最小，泡沫穩(wěn)定二、填空1、反膠團(tuán)的制備方法有注入法 、

35、相轉(zhuǎn)移法、溶解法。2、工業(yè)萃取所需設(shè)備主要包括 混合器、分離器、溶解法 三部分。3、當(dāng)表面活性劑為非離子型時(shí)，體系的溫度要 加熱到濁點(diǎn)溫度以上 時(shí)才產(chǎn)生濁點(diǎn)分離現(xiàn)象，溫度在（濁點(diǎn)溫度以下）時(shí)為單相；當(dāng)表面活性劑為兩性離子型時(shí)，體系的溫度則要降到下濁點(diǎn)溫度以下時(shí)才產(chǎn)生濁點(diǎn)分離現(xiàn)象，溫度在（濁點(diǎn)溫度以上）時(shí)為單相。4、雙水相萃取工藝流程主要包括 目的產(chǎn)物的萃取、peg的循環(huán)、無機(jī)鹽的循環(huán)。5、超臨界流體用于萃取的主要優(yōu)點(diǎn)在于其既具有液體的 溶解能力 又具有氣體的 擴(kuò)散和傳質(zhì)能力。6、超臨界co2萃取工藝流程主要有 等溫變壓、等壓變溫和吸附萃取過程。7、泡沫分離是以 泡沫 作為分離介質(zhì)，以組分之間的

36、 表面活性差異 作為分離依據(jù)，利用氣體在溶液中的鼓泡來達(dá)到濃集物質(zhì)的一種新型分離技術(shù)。8、泡沫分離過程中，有兩個(gè)主要的傳質(zhì)過程：一個(gè)是在鼓泡區(qū)內(nèi)，傳質(zhì)是在 主題溶液與氣泡界面 進(jìn)行；二是在泡沫區(qū)內(nèi)，傳質(zhì)是在 氣泡表面與氣泡間隙 進(jìn)行。9、泡沫分離技術(shù)中氣泡的產(chǎn)生方法有 布?xì)夥ā⑷軞夥?和電解法。10、泡沫分離過程中主要的設(shè)備是 泡沫塔和破沫塔。三、其他題型1、何為濁點(diǎn)現(xiàn)象？指在一定溫度范圍內(nèi)，表面活性劑易溶于水成為澄清溶液，而當(dāng)溫度升高或降低一定程度時(shí)，溶解度反而減小，會(huì)在水溶液中出現(xiàn)混濁、析出、分層的現(xiàn)象。2、請(qǐng)解釋非離子型表面活性劑產(chǎn)生濁點(diǎn)現(xiàn)象的原因。非離子型表面活性劑溶于水是靠分子內(nèi)的親

37、水基與水分子通過氫鍵結(jié)合而實(shí)現(xiàn)的。形成氫鍵是一放熱過程，因此加熱時(shí)，這種氫鍵的結(jié)合力會(huì)被減弱甚至消失，當(dāng)溫度超過某一定范圍時(shí)，表面活性劑不再水合，而從溶液中析出產(chǎn)生混濁。3、什么是雙水相？某些高聚物之間或高聚物與無機(jī)鹽之間在水中以適當(dāng)?shù)臐舛热芙鈺?huì)形成互不相溶的兩水相或多水相系統(tǒng)。4、雙水相形成原因是什么？由于高聚物之間的不相容性，即高聚物分子的空間阻礙作用，相互無法滲透，不能形成均一相，從而具有分離傾向，在一定條件下即可分為二相。一般認(rèn)為只要兩聚合物水溶液的憎水程度有差異，混合時(shí)就可發(fā)生相分離，且憎水程度相差越大，相分離的傾向越大。5、何為超臨界流體？當(dāng)流體的溫度和壓力都出在臨界溫度和臨界壓力

38、以上時(shí)，則稱該流體處于超臨界狀態(tài)，該流體為超臨界流體。6、雙水相萃取在蛋白質(zhì)的提取分離中具有較好的應(yīng)用潛力。請(qǐng)談?wù)勀銓?duì)雙水相萃取的局限及今后發(fā)展方向的理解。 局限：易乳化，相分離時(shí)間長(zhǎng)，成相聚合物成本高，水溶性高聚物大多數(shù)粘度大，不易定量控制，水溶性高聚物難以揮發(fā)，使反萃劑必不可少，高聚物的回收難；而且，目前對(duì)雙水相體系的雙水動(dòng)力學(xué)研究，雙水相萃取設(shè)備流程研究，成相聚合物的重復(fù)利用以及普通有機(jī)物-無機(jī)物雙水相體系等方面相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道比較少，有待進(jìn)一步研究和開發(fā)。發(fā)展方向：開發(fā)廉價(jià)的新型雙水相體系，雙水相分配與相關(guān)技術(shù)的集成化，雙水相萃取過程的開發(fā)，雙水相萃取相關(guān)理論的發(fā)展，親和雙水相萃取技術(shù)。7

39、、二氧化碳超臨界流體萃取技術(shù)有何優(yōu)勢(shì)？1）臨界條件溫和(tc=31.06 pc=7.2mpa) ，可以在3540的條件下進(jìn)行提取，防止熱敏性物質(zhì)的變質(zhì)和揮發(fā)性物質(zhì)的逸散。2）在co2氣體籠罩下進(jìn)行萃取，萃取過程中不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；又由于完全隔絕了空氣中的氧，因此萃取物不會(huì)因氧化或化學(xué)變化而變質(zhì)。3）由于co2無味、無臭、無毒、不可燃、價(jià)格便宜、純度高、容易獲得，使用相對(duì)安全。4） co2容易提純與分離的，因此萃取物幾乎無溶劑殘留，也避免了溶劑對(duì)人體的毒害和對(duì)環(huán)境的污染。（5）co2擴(kuò)散系數(shù)大而粘度小，大大節(jié)省了萃取時(shí)間，萃取效率高。8、某一弱堿性生化物質(zhì)，在ph9.0時(shí)，用醋酸丁酯萃取，整個(gè)萃取

40、過程包括三級(jí)，前二級(jí)為逆流萃取，將萃余液再經(jīng)第三級(jí)萃取。已知第三級(jí)中新鮮丁酯的加入量是發(fā)酵濾液的1/10，該物質(zhì)在ph9.0時(shí)的表觀分配系數(shù)為15，把最終所得的萃取液合并，測(cè)得濃縮倍數(shù)為3.3。求經(jīng)三級(jí)萃取后的理論收率。二級(jí)逆流:單級(jí):9、青霉素在0和ph2.5時(shí)的分配系數(shù)（醋酸丁酯/水）為35。（1）用1/4體積的醋酸丁酯進(jìn)行二級(jí)逆流萃?。唬?）二級(jí)錯(cuò)流萃取，第一級(jí)用1/4體積的醋酸丁酯，第二級(jí)用1/10體積的醋酸丁酯。計(jì)算上述兩種情況下的理論收率。（1）用1/4體積的醋酸丁酯進(jìn)行二級(jí)逆流萃取萃取因子為：n=2，理論收率為：（2）二級(jí)錯(cuò)流萃取，第一級(jí)用1/4體積的醋酸丁酯，第二級(jí)用1/10體

41、積的醋酸丁酯萃取因子為：n=2，理論收率為：10、設(shè)計(jì)一反膠束萃取和反萃取工藝分離細(xì)胞色素c（mr=12384，pi=10.6）、溶菌酶（mr=14300，pi=11.1）、核糖核酸酶（mr=13683，pi=7.8）三種蛋白質(zhì)混合物，并說明各步驟的理由。用50m/m3aot、異辛烷萃取這三種蛋白質(zhì)，當(dāng)ph<pi蛋白質(zhì)溶解度接近100%，當(dāng)ph>pi是蛋白質(zhì)的溶解率急速下降，直到接近零，粒子強(qiáng)度越大，蛋白質(zhì)溶解度越小。1）當(dāng)kcl=0.1m時(shí)，三種蛋白質(zhì)的溶解率接近100%，ph=9時(shí)，細(xì)胞色素c和溶菌酶的溶解率接近100%，而核糖核酸酶幾乎不溶，所以先分離出核糖核酸酶。2）當(dāng)ph

42、=9，kcl=0.5m時(shí)溶菌酶溶解率接近100%，而細(xì)胞色素c幾乎不容而被分離出。3）在ph=11.5，kcl=2m時(shí)，溶菌酶不溶而被分離出。11、典型連續(xù)式泡沫分離過程有哪些？各自的操作特點(diǎn)是什么？濃縮塔：含有表面活性劑的原料液不斷地加入到塔的鼓泡區(qū)，一定量的濃縮泡沫液可以從塔頂返回，這樣的操作可以達(dá)到很高的泡沫濃度，但去污效果不夠理想。提取塔：料液從泡沫塔的頂部加入，這樣的操作可以達(dá)到很高的去污系數(shù)(原料液中金屬離子濃度/殘留液中金屬離子濃度）常可達(dá)200，此種塔相當(dāng)于提取塔。復(fù)合塔：一部分表面活性劑直接加入到料液中，另一部分則加入到塔的鼓泡區(qū)內(nèi)。這種操作可得到較高的去污系數(shù)。生物分離工程

43、復(fù)習(xí)題四（第89章）一、選擇題1、非對(duì)稱膜的支撐層（c）。a、與分離層材料不同 b、影響膜的分離性能c、只起支撐作用 d、與分離層孔徑相同2、在液膜分離的操作過程中，（b）主要起到穩(wěn)定液膜的作用。a、載體 b、表面活性劑 c、增強(qiáng)劑 d、膜溶劑3、那一種膜孔徑最小（c）a.微濾 b超濾 c.反滲透 d. 納米過濾4、超濾技術(shù)常被用作（c）a. 小分子物質(zhì)的脫鹽和濃縮 b小分子物質(zhì)的分級(jí)分離c. 小分子物質(zhì)的純化 d.固液分離5、超濾膜截留的顆粒直徑為(b)a 0.0210µm b 0.0010.02µm c <2nm d < 1nm6、反滲透膜的孔徑小于(c)a

44、 0.0210µm b 0.0010.02µm c <2nm d < 1nm7、在超濾過程中，主要的推動(dòng)力是（c）a、濃度差 b、 電勢(shì)差 c、壓力 d、重力8、超濾技術(shù)常被用作（c）a. 小分子物質(zhì)的脫鹽和濃縮 b小分子物質(zhì)的分級(jí)分離 c. 小分子物質(zhì)的純化 d.固液分離9、納米過濾的濾膜孔徑（d）a 0.0210µm b 0.0010.02µm c <2nm d < 1nm10、超濾膜通常不以其孔徑大小作為指標(biāo)，而以截留分子量作為指標(biāo)。所謂“分子量截留值”是指阻留率達(dá)（b）的最小被截留物質(zhì)的分子量。a 80-85%以上 b 9

45、0-95%以上 c 70-75%以上 d 100%11、在電滲析過程中，主要的推動(dòng)力是 （b）a、濃度差 b、 電勢(shì)差 c、壓力 d、重力12、在膜分離當(dāng)中，分離精度有小到大的排列正確的是：（a）。a、微濾超濾納濾反滲透 b、反滲透微濾超濾納濾c、納濾反滲透微濾超濾 d、超濾納濾反滲透微濾13、氨基酸的結(jié)晶純化是根據(jù)氨基酸的（a）性質(zhì)。a.溶解度和等電點(diǎn) b.分子量 c.酸堿性 d.生產(chǎn)方式14、結(jié)晶過程中，溶質(zhì)過飽和度大?。╝）。a、不僅會(huì)影響晶核的形成速度，而且會(huì)影響晶體的長(zhǎng)大速度 b、只會(huì)影響晶核的形成速度，但不會(huì)影響晶體的長(zhǎng)大速度c、不會(huì)影響晶核的形成速度，但會(huì)影響晶體的長(zhǎng)大速度 d、

46、不會(huì)影響晶核的形成速度，而且不會(huì)影響晶體的長(zhǎng)大速度15、最常用的干燥方法有（d）a、常壓干燥 b、 減壓干燥 c、噴霧干燥 d、以上都是16、結(jié)晶法對(duì)溶劑選擇的原則是（c）a、對(duì)有效成分溶解度大，對(duì)雜質(zhì)溶解度小 b、對(duì)有效成分溶解度小，對(duì)雜質(zhì)溶解度大 c、對(duì)有效成分熱時(shí)溶解度大冷時(shí)溶解度小，對(duì)雜質(zhì)冷熱都溶或都不溶 d、對(duì)有效成分冷熱時(shí)都溶，對(duì)雜質(zhì)則不溶 e、對(duì)雜質(zhì)熱時(shí)溶解度大，冷時(shí)溶解度小17、下列關(guān)于固相析出說法正確的是（b）a.沉淀和晶體會(huì)同時(shí)生成 b析出速度慢產(chǎn)生的是結(jié)晶 c.和析出速度無關(guān) d.析出速度慢產(chǎn)生的是沉淀18、在什么情況下得到粗大而有規(guī)則的晶體（a）a. 晶體生長(zhǎng)速度大大超過晶核生成速度b晶體生長(zhǎng)速度大大低于過晶核生成速度c. 晶體生長(zhǎng)速度等于晶核生成速度 d.以上都不對(duì)19、恒速干燥階段與降速干燥階段，那一階段先發(fā)生（a）a. 恒速干燥階段 b降速干燥階段 c.同時(shí)發(fā)生 d.只有一種會(huì)發(fā)生20、下列關(guān)于“結(jié)晶”和