免疫球蛋白測(cè)定及應(yīng)用ppt課件

1、免疫球蛋白測(cè)定及運(yùn)用免疫球蛋白測(cè)定及運(yùn)用 谷俊谷俊瑩瑩一、免疫球蛋白定量檢測(cè)方法n一單向瓊脂分散法n1.原理n2.操作方法n3.影響要素 抗血清，溫度，規(guī)范曲線(xiàn)，異常沉淀線(xiàn)n二免疫比濁法n透射比濁法 散射比濁法n1.原理n2.操作方法n3.影響要素 抗血清，緩沖液，待測(cè)血清n三ELISA法n四放射免疫法n五免疫電泳及免疫固定電泳 二、 免疫球蛋白定量方法學(xué)評(píng)價(jià)及運(yùn)用n根據(jù)存在于血清和其他體液內(nèi)的各類(lèi) Ig含量不同，采用不同的方法進(jìn)展測(cè)定。n單相瓊脂分散實(shí)驗(yàn)敏感度不高，30mg/L，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，批內(nèi)變異系數(shù)大，準(zhǔn)確性受諸多要素影響，抗血清用量大，有商品化的檢測(cè)板供應(yīng)，操作簡(jiǎn)便，不需特殊設(shè)備可進(jìn)展

2、血清IgG、A、M定量n火箭電泳敏感度較高，0.3mg/L，操作簡(jiǎn)便省時(shí)，結(jié)果反復(fù)性好可進(jìn)展血清IgG、A、M定量n免疫比濁法簡(jiǎn)便、快速，可自動(dòng)化，敏感度高，0.1mg/L，準(zhǔn)確性好，批內(nèi)變異系數(shù)2%4%可進(jìn)展血清IgG、A、M、D定量n放射免疫測(cè)定主要用于微量分析，敏感度10g/L，試劑保管期短，放射性核素污染用于血清IgE定量n免疫膠乳比濁法操作簡(jiǎn)便，快速、可自動(dòng)化、敏感度0.1mg/L，但膠乳試劑制備較難，目前試劑盒種類(lèi)較少、未廣泛運(yùn)用用于血清IgG、A、M、D定量n酶聯(lián)免疫吸附法 方法簡(jiǎn)便，商品化試劑盒、敏感度0.1mg/L，反復(fù)性好、變異系數(shù)小，定量每次帶規(guī)范檢測(cè)，可定量血漿Ig以外

3、如體液中Ig可用于尿、腦脊液、胸腹水Ig定量及血清IgE定量 三 、免疫球蛋白定量臨床意義n一血清Ig定量臨床意義1.低Ig血癥1先天性低Ig血癥 n 2獲得性低Ig血癥n2.高Ig血癥1非特異型多克隆免疫球蛋白增高癥 n 2特異型單克隆免疫球蛋白增殖癥n3.IgD在疾病中的意義尚不明確。妊娠末期及吸煙者IgD含量升高。IgD型骨髓瘤患者血清中IgD程度比正常人高10000倍，是獨(dú)一明確可作為確診的證據(jù)。n4.血清總IgE寄生蟲(chóng)感染時(shí)IgE升高，特異性哮喘，過(guò)敏性鼻炎等患者血清中IgE含量升高與發(fā)病及緩解呈平行關(guān)系。IgE骨髓瘤。SLE，類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者IgE含量升高。n二尿微量Ig定量臨床意義1、腎功能形狀鑒定n 2、SLE患者腎損傷程度判別n 3、糖尿病患者腎損傷程度判別n三腦脊液微量Ig定量的臨床意義CSF中IgG增高見(jiàn)于：n 中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)源性合成添加 血中IgG增高n 血腦屏障通透性增高。四、M蛋白的檢測(cè)nM蛋白是B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖所產(chǎn)生的一種在氨基酸組成及順序上非常均一的異常單克隆免疫球蛋白monoclonal Ig，多見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤，巨球蛋白血癥和惡性淋巴瘤。n 一血清蛋白區(qū)帶電泳n M區(qū)帶的出現(xiàn)n 二免疫球蛋白定量n 某一類(lèi)