植株氮磷鉀測(cè)定4頁(yè)

1、植物體內(nèi)全氮、磷、鉀的測(cè)定一、 實(shí)驗(yàn)原理 作物體中的氮、磷、鉀通過(guò)硫酸和H2O2消化，使有機(jī)氮化物轉(zhuǎn)化成銨態(tài)氮，各種形態(tài)磷化物轉(zhuǎn)化成磷酸，N、P、K均轉(zhuǎn)變成可測(cè)的離子態(tài)（氮轉(zhuǎn)化為NH4+，磷轉(zhuǎn)化為H3PO4，鉀為K+）。然后采用相應(yīng)的方法分別測(cè)定。磷的測(cè)定原理（釩鉬黃比色法）：在酸性條件下，溶液中的磷酸根與偏釩酸鹽和鉬酸鹽作用形成黃色的釩鉬酸鹽。黃色深淺與溶液中磷濃度呈正比。此法要求酸度0.041.6N（以0.51.0N最好）；測(cè)磷濃度范圍020mg/kg，比色波長(zhǎng)460490nm，磷濃度低時(shí)選用較短的波長(zhǎng)，反之可選較長(zhǎng)的波長(zhǎng)。鉀的測(cè)定原理（火焰光度法）：含鉀溶液霧化后與可

2、燃?xì)怏w（如：汽化的汽油等）混合燃燒，其中的鉀離子（基態(tài)）接受能量后，外層電子發(fā)生能級(jí)躍遷，呈激發(fā)態(tài)，由激發(fā)態(tài)變成基態(tài)過(guò)程中發(fā)射出特定波長(zhǎng)的光線（稱(chēng)特征譜線）。單色器或?yàn)V光片將其分離出來(lái)，由光電池或光電管將特征譜線具有的光能轉(zhuǎn)變?yōu)殡娏?。用檢流計(jì)測(cè)出光電流的強(qiáng)度。光電流大小與溶液中鉀的濃度呈正比，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)溶液光電流強(qiáng)度的比較求出待測(cè)液中鉀的濃度。二、儀器與試劑儀器：分析天平（0.0001）、凱氏定氮儀、分光光度計(jì)、火焰光度計(jì)、消煮管、容量瓶（50ml）移液管（5、10、20ml）消煮及定氮試劑：1濃硫酸230H2O23. 10mol/LNaOH：稱(chēng)400.0NaOH溶解于1L蒸餾水中 4. 顯色

3、劑：稱(chēng)0.099溴甲酚綠和0.066甲基紅，溶于95乙醇且定容至100ml5. 2硼酸：稱(chēng)樣品20.0H3BO2溶于1L蒸餾水中6. 硼酸指示劑：取顯色劑20 ml與1L硼酸溶液混合均勻7.0.02N H2SO4 （0.01 mol/L）標(biāo)準(zhǔn)溶液：量取濃H2SO42.83ml定容至5 L8. 0.01N H2SO4 ：將0.02N H2SO4稀釋1倍（7.8合并： 1.413ml定容到5L）測(cè)P、K試劑：1釩鉬酸試劑：25.0克鉬酸銨（NH4）2Mo7O2 4H2O溶于400ml水中，另取1.25克偏釩酸銨（NH4VO3）溶于300ml沸水中，冷卻后加入250ml濃HNO3，冷卻后，將鉬酸銨溶

4、液慢慢地混入偏釩酸銨溶液中，邊混邊攪拌，用水稀釋至1升。22，4二硝基酚指示劑：0.25克2，4二硝基酚溶于100ml乙醇中。3磷、鉀混合標(biāo)準(zhǔn)液：稱(chēng)取105烘干的KH2PO4（A.R）2.1968克，KCI 0.7030克，定溶于1000ml。此為含磷500mg/l，含鉀1000 mg/l的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上液準(zhǔn)確稀釋10倍得到磷、鉀分別為50 mg/L和100 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)液，用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。三、測(cè)定步驟1  植物樣品的消化：稱(chēng)取磨細(xì)干樣品0.10.2克(精確到0.0001克)放入100毫升消煮管內(nèi),加濃H2SO45毫升,使樣品和濃H2SO4混勻，放入消化爐上加熱，文火微沸5分

5、鐘，取出消煮管，冷卻，加30%H2O25滴，溫度升至200度再煮，30分鐘后取下冷卻再加30% H2O25滴，溫度升至300度繼續(xù)消煮（不能超過(guò)320度），至消化液清亮透明為止。如消化液未清亮，再加2滴H2O2煮沸5分鐘，并除去多余H2O2。消煮完畢后，取出消煮管冷卻，用少量蒸餾水，少量多次地將全部消化液洗入50毫升容量瓶?jī)?nèi)，冷卻后，定容，同時(shí)作二個(gè)空白。此為待測(cè)液。2.氮的測(cè)定：（1）硫酸的標(biāo)定：0.005 mol/L硼砂標(biāo)準(zhǔn)液：準(zhǔn)確稱(chēng)取硼砂(Na2B4O7·10H2O）0.4768克用水定容到250ml；分別吸取硼砂標(biāo)準(zhǔn)液25 ml三份于三角瓶中，加3-5滴甲基紅，用硫酸滴定，黃

6、色紅色為終點(diǎn)。Na2B4O7 +H2SO4+5H2O=4H3BO3+ Na SO4（2）將定氮儀電源打開(kāi)，同時(shí)打開(kāi)冷凝水，預(yù)熱20min左右，按轉(zhuǎn)換鍵，待“硼酸”燈亮后，再按需要量，調(diào)節(jié)加硼酸的時(shí)間為2s，使硼酸的量在15ml左右，同樣調(diào)節(jié)加堿時(shí)間為6s，加堿量約為20ml左右（加堿量根據(jù)加的濃硫酸的量決定，加硼酸的量由稱(chēng)取的樣品的量及其含氮量決定）（3）調(diào)整好儀器后，取待測(cè)液10ml轉(zhuǎn)到凱氏管中，將凱氏管放在儀器上，在硼酸出口處放一150ml三角瓶。按“啟動(dòng)”鍵，待儀器自動(dòng)報(bào)警時(shí)，小心拿下凱氏瓶，將其中的液體倒掉，再將三角瓶取下用0.01N的H2SO4滴定至剛剛呈現(xiàn)紫紅色即可，記下初讀數(shù)和終

7、讀數(shù)。（4）計(jì)算方法N%=N*(V V0)*0.014/W*100N：硫酸的標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)量濃度V：測(cè)定消耗的硫酸的標(biāo)準(zhǔn)體積V0：空白測(cè)定消耗的硫酸體積W：樣品重3 磷的測(cè)定：吸取待測(cè)液20ml，放入50ml容量瓶中，加2，4二硝酚指示劑2滴，用6N NaOH中和至剛現(xiàn)淡黃色，準(zhǔn)確加入釩鉬酸銨試劑10ml，搖勻用水定容，搖勻15分鐘后比色，波長(zhǎng)450nm，以空白液調(diào)節(jié)消光度為零。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：先取7只50毫升容量瓶，用50mg/L磷標(biāo)準(zhǔn)溶液配制工作曲作。按下表吸取標(biāo)準(zhǔn)液，定容到50毫升容量瓶中，按上述步驟顯色，即得 0、1.0、2.5、5.0、7.5、10.0、15.0 mg /L P的標(biāo)準(zhǔn)

8、色階曲線，然后進(jìn)行比色。瓶號(hào)123456750mg/L磷標(biāo)準(zhǔn)液（ml）01.02.55.07.510.015.0磷濃度（mg /L）01.02.55.07.510.015.0式中：待測(cè)液P濃度mg/l：從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得磷濃度mg/l顯色液體積：50ml分取倍數(shù)：消煮液體積/吸取消煮液體積W：植株樣品烘干重（mg）106：由mg/l換算成g4  鉀的測(cè)定：將樣品消煮液稀釋5倍（吸5ml消煮液定25ml容量）。若消煮液中含鉀量低于標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，則可直接用原液測(cè)定。用火焰光度計(jì)測(cè)定K。標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制：取6只50ml容量瓶，用100mg/L鉀標(biāo)準(zhǔn)液分別配制成0、5、10、15、20、40mg/L系列。并各加5ml空白消煮液。瓶號(hào)123456100mg/L鉀標(biāo)準(zhǔn)液（ml）02.557.51020空白消煮液（ml）555555磷濃度（mg /L）0510152040附：只作鉀的標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確稱(chēng)取KCL（110度烘2小時(shí)）1.9115g溶于1000ml水中，即為1000mg/L的標(biāo)準(zhǔn)液吸取10ml置100ml容量瓶中，加入0.1ml濃硫酸，定容，即100mg/L鉀標(biāo)準(zhǔn)液。瓶號(hào)1234567100m