直腸癌組織中CXCR4和VEGFC表達(dá)的臨床意義

1、直腸癌組織中CXCR4和VEGF-C表達(dá)的臨床意義 作者：符煒，李愛娜，徐紅，王玉蘭【摘要】 目的 探討趨化因子受體CXCR4(CXC chemokine receptor 4，CXCR4)和血管內(nèi)皮生長因子-C(vascular endothelial growth factor C，VEGF-C)在人直腸癌組織、癌旁組織和淋巴結(jié)中的表達(dá)及意義。方法 采用免疫組織化學(xué)方法檢測10例癌旁正常黏膜組織、50例癌組織和相關(guān)淋巴結(jié)中CXCR4與VEGF-C的蛋白表達(dá)情況，并分析其與臨床病理特征之間的關(guān)系。結(jié)果 CXCR4與VEGF-C在直腸癌組織中均有高表達(dá)，CXCR4的表達(dá)率為72%，VEGF-C

2、的表達(dá)率為92%，與癌旁正常組織相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中CXCR4表達(dá)的陽性率為95%，VEGF-C表達(dá)的陽性率為93%，與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)CXCR4和VEGF-C的表達(dá)與癌組織的不同侵潤程度、組織分化程度和病理分期之間有密切關(guān)系，且兩者呈正相關(guān)。結(jié)論 CXCR4和VEGF-C在直腸癌組織和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的表達(dá)呈正相關(guān)，提示CXCR4和VEGF-C在直腸癌腫瘤的侵潤、轉(zhuǎn)移過程中起協(xié)同作用，并可作為評估直腸癌組織淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的指標(biāo)之一。 【關(guān)鍵詞】 直腸癌;趨化因子受體CXCR4;血管內(nèi)皮生長因子-C1 / 10Abstract: Objective To in

3、vestigate the expression of CXC chemokine receptor4 (CXCR4) and vascular endothelial growth factor C (VEGF-C) in human rectal tumor tissues, cancer adjacent tissues, lymph node and to explore the clinical significance. Methods The expression of CXCR4 and VEGF-C was determined by immunohistochemistry

4、 in adjacent normal mucosa of 10 cases and in rectal cancer tissues and relevant lymph nodes of 50 cases . The correlation of the 2 kinds of protein and their relationship with clinicopathologic characteristics were analyzed. Results CXCR4 and VEGF-C were highly expressed in rectal tumor tissues. Th

5、e positive expression of CXCR4 in rectal cancer was 72% (P<0.05), and that of VEGF-C was 92% (P<0.01). There was significant statistical difference compared with the normal cancer adjacent tissues. The positive expression of CXCR4 in lymph node metastasis group was 95% (P<0.05),

6、 and that of VEGF-C was 93% (P<0.01). With significant statistical differences compared with no metastasis group. The positive expression of VEGF and CXCR4 were correlated with the tumor of invasion, differentiation and Dukesstage, and the expression of VEGF was positively correlated with CXC

7、R4. Conclusion There is correlation between the expression of VEGF and CXCR4 in the rectal cancer tissues and lymph node (r=1.000,P<0.01), suggesting that they may have synergistic effect in the invasion and metastasis of rectal tumor and they can be considered as an important indicator to th

8、e lymph node metastasis of rectal tumor.Key words: rectal tumor; CXC chemokine receptor 4; vascular endothelial growth factor C淋巴轉(zhuǎn)移是結(jié)直腸癌常見的轉(zhuǎn)移方式，并且是影響患者預(yù)后的重要因素。趨化因子受體CXCR4(CXC chemokine receptor 4，CXCR4)與腫瘤的侵潤、轉(zhuǎn)移有關(guān);血管內(nèi)皮生長因子-C(vascular endothelial growth factor C，VEGF-C)可以誘導(dǎo)腫瘤相關(guān)的淋巴管生成，并與隨之而來的腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移相關(guān)

9、1。CXCR4受體在腫瘤中的作用已成為近年研究的熱點(diǎn)。我們運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法檢測了人直腸癌組織、癌旁正常組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)和未轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中CXCR4與VEGF-C的表達(dá)情況，并分析探討了其在直腸癌中表達(dá)的相關(guān)性和與臨床病理特征之間的關(guān)系。1 資料和方法1.1 臨床資料 收集2005年1月2005年12月于本院普外科住院行直腸腫瘤切除術(shù)、臨床資料完整的存檔蠟塊50例。其中伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移40例，不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移10例。WHO統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行組織學(xué)分級(jí)，其中高中分化腺癌38例，低分化腺癌12例。Dukes分期：A B期14例，CD期36例。另有10例標(biāo)本取自直腸癌距腫塊邊緣1015 cm的癌旁正常黏膜組

10、織作為對照。1.2 試驗(yàn)材料與和方法 兔抗人CXCR4 多克隆抗體購自Abcom公司，VEGF-C多克隆抗體購自博士德公司。免疫組織化學(xué)染色采用ABC法。CXCR4和VEGF-C一抗工作濃度為1200，用PBS 代替一抗作為陰性對照。1.3 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) CXCR4和VEGF-C陽性細(xì)胞均為細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕色或棕黃色顆粒。判定結(jié)果參考Kawasaki等2報(bào)道的方法，根據(jù)染色的強(qiáng)度及陽性細(xì)胞百分率來判定。陽性細(xì)胞的染色強(qiáng)度按無著色、淡黃色、棕黃色和棕褐色分別計(jì)分為0、1、2、3分;陽性細(xì)胞百分率計(jì)算：每張切片在×400鏡下分別取5個(gè)視野，分別計(jì)算陽性細(xì)胞的百分率，取其平均值, 0分

11、為5%，1分為5%25%為，2分為25%50%，3分為50%75%， 4分為>75%。然后根據(jù)兩項(xiàng)打分之和判斷結(jié)果: 0分為陰性(-)，<3分為陽性(+)，36分為中度陽性(+)，>6分為強(qiáng)陽性(+)。1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料采用2檢驗(yàn)，并計(jì)算Spearman相關(guān)系數(shù)，P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2 結(jié) 果2.1 CXCR4和VEGF-C蛋白表達(dá)情況 CXCR4和VEGF-C的陽性表達(dá)主要位于癌旁正常組織、癌組織和淋巴結(jié)細(xì)胞中的胞膜和胞質(zhì)，呈不同程度的棕黃色或棕褐色(圖1、2)。CXC

12、R4和VEGF-C在癌組織的表達(dá)強(qiáng)度均明顯高于癌旁正常組織(P<0.05或P<0.01)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本中CXCR4、VEGF-C陽性表達(dá)率均高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P<0.05或P<0.01)。見表1。表1 不同組織中CXCR4、VEGF-C的表達(dá)與癌旁正常組織比較：*P<0.05，*P<0.01;與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移比較：#P<0.05，#P<0.012.2 CXCR4和VEGF-C的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 CXCR4和VEGF-C在不同侵潤程度、不同組織分化程度和不同病理分期的癌組織中

13、的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表2)。表2 CXCR4和VEGF-C的表達(dá)與直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系2.3 直腸癌中CXCR4與MMP-2蛋白表達(dá)的相關(guān)性 在50例直腸癌組織中CXCR4和VEGF-C呈共陽性表達(dá)者35例，共陰性表達(dá)者3例，CXCR4 陽性而VEGF-C陰性者1例，VEGF-C陽性而CXCR4陰性者11例，Spearman等級(jí)相關(guān)分析得出CXCR4與VEGF-C呈正相關(guān)(r=1.000，P<0.01)。3 討 論腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤重要的生物學(xué)特征之一。其中，淋巴道轉(zhuǎn)移是惡性實(shí)體腫瘤最常見的轉(zhuǎn)移方式之一，趨化因子(chemokines)在某些腫瘤的定向轉(zhuǎn)移中起著重

14、要作用。CXCR4是趨化因子CXCL12專屬受體，在某些腫瘤的轉(zhuǎn)移過程中也發(fā)揮著至關(guān)重要的導(dǎo)向、驅(qū)動(dòng)和定位作用3。目前，SDF-1/CXCR4生物學(xué)軸在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用已分別在乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌和前列腺癌等不同類型腫瘤的研究中得到初步證實(shí)，并與患者的預(yù)后密切相關(guān)4-5。淋巴管內(nèi)皮標(biāo)志物在淋巴管生成中起著重要作用，并參與生理及病理淋巴系統(tǒng)發(fā)生、發(fā)展的過程，在惡性腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移過程中起著重要作用。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)家族是與腫瘤血管生長有關(guān)的最重要因子之一，其成員之一VEGF-C可分別結(jié)合血管內(nèi)皮細(xì)胞受體-2(vascul endotheliar growth factor recept

15、or-2, VEGFR-2)及淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞表面受體VEGFR-3，調(diào)節(jié)血管及淋巴管的生理功能，參與腫瘤血管的生成過程，對腫瘤的侵襲生長及轉(zhuǎn)移有重要意義6。本研究結(jié)果證實(shí)，直腸癌組CXCR4和VEGF-C的表達(dá)明顯高于癌旁正常組織組(P<0.05或P<0.01)，說明它們的表達(dá)促進(jìn)了腫瘤的進(jìn)程。CXCR4和VEGF-C在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)也明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P<0.05或P<0.01)，提示CXCR4和VEGF-C與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān);而且CXCR4和VEGF-C的表達(dá)與癌組織的不同侵潤程度、分化程度和Dukes病理分期有關(guān);

16、進(jìn)一步分析得出CXCR4和VEGF-C在直腸癌組織的表達(dá)呈正相關(guān)，提示CXCR4和VEGF-C的相互作用可能在直腸癌的生成、侵襲和轉(zhuǎn)移中起到協(xié)同作用，因此，我們認(rèn)為CXCR4和VEGF-C可作為評估直腸癌組織淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的指標(biāo)。綜上所述，CXCR4和VEGF-C在直腸癌預(yù)后判斷中有重要價(jià)值。結(jié)合臨床病理檢查對指導(dǎo)直腸癌分期，判定預(yù)后有輔助價(jià)值，并有可能成為將來治療的靶點(diǎn)，值得進(jìn)一步深入研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 1 Su JL, Yang PC, Shih JY, et al. The VEGF-C/Flt-4 axis promotes invasion and metastasis of cance

17、r cells J.Cancer Cell，2006，9(3):209-223.2 Kawasaki H, Altieri DC, Lu CD, et al. Inhibition of apoptosis by survivin predicts shorter survival rates in colorectal cancer J. Cancer Res,1998, 58(22): 5071-5074.3 Balkwill F.The significance of cancer cell expression of the chemokine receptor CXCR4J.Semi

18、n Cancer Biol，2004，14(3):171-179.4 Liu F, Lang R, Wei J, et al. Increased expression of SDF-1/CXCR4 is associated with lymph node metastasis of invasive micropapillary carcinoma of the breast J. Histopathology， 2009，54(6): 741-50.5 Imai H, Sunaga N, Shimizu Y, et al. Clinicopathological and therapeutic significance of CXCL12 express