第14章革蘭氏陽性產(chǎn)芽孢桿菌PPT課件

1、第一節(jié)第一節(jié) 芽胞桿菌屬（芽胞桿菌屬（BacillusBacillus） 芽胞桿菌屬是一群需氧、能形成芽孢的革蘭氏陽性大桿菌。本屬中主要的致病菌為炭疽芽胞桿菌，是引起動(dòng)物和人炭疽的病原菌；蠟狀芽胞桿菌的某些菌株可產(chǎn)生腸毒素，引致食物中毒；其他大多為腐生菌，主要存在于土壤、水和灰塵中，如枯草芽孢桿菌。 第1頁/共32頁炭疽芽胞桿菌（炭疽芽胞桿菌（B. anthracisB. anthracis） 炭疽芽胞桿菌俗稱炭疽桿菌，是引起人類、各種家畜和野生動(dòng)物炭疽（AnthraxAnthrax）的病原 。第2頁/共32頁 一、形態(tài)及染色特性一、形態(tài)及染色特性 革蘭氏陽性大桿菌，菌體平直，兩端平截。在組織

2、和血液中，單在或短鏈，經(jīng)培養(yǎng)后形成長鏈，呈竹節(jié)狀。在組織中或含血液的培養(yǎng)基中可形成莢膜。芽孢在有氧條件下形成，位于菌體中央，不膨出菌體。無鞭毛。第3頁/共32頁 二、培養(yǎng)特性二、培養(yǎng)特性 1.1.需氧菌或兼性厭氧，最適生長溫度30-3730-37，營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基中即能生長良好。n 強(qiáng)毒菌株形成灰白色不透強(qiáng)毒菌株形成灰白色不透 明、大而扁平、表面干燥；明、大而扁平、表面干燥； n 無毒或弱毒菌株形成稍小無毒或弱毒菌株形成稍小 而隆起、表面較為光滑濕而隆起、表面較為光滑濕 潤、邊緣比較整齊的光滑潤、邊緣比較整齊的光滑 型菌落。型菌落。 強(qiáng)毒株菌落強(qiáng)毒株菌落第4頁/共32頁2. 2. 在血

3、瓊脂上一般不溶血，但個(gè)別菌株也可在血瓊脂上一般不溶血，但個(gè)別菌株也可輕微溶血。輕微溶血。第5頁/共32頁3.3.液體培養(yǎng)基中呈絮狀沉淀生長液體培養(yǎng)基中呈絮狀沉淀生長4.4.明膠穿刺培養(yǎng)，呈倒松樹狀，表面液化呈漏斗狀明膠穿刺培養(yǎng)，呈倒松樹狀，表面液化呈漏斗狀第6頁/共32頁5.5.在含青霉素的培養(yǎng)基中，可形成串珠反應(yīng)，與其它需氧芽孢桿菌區(qū)別。 串珠反應(yīng) ：在含青霉素0.5U/ml的培養(yǎng)基中，幼齡炭疽桿菌因細(xì)胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生質(zhì)體相互連接成串 。第7頁/共32頁生化特性糖發(fā)酵：G+ G+ 蔗+ + 麥+ + 菊+ + 蕈糖+ + 果糖+ + 甘油+ + 伯膠糖 木 甘露醇淀粉+ +

4、 硝酸鹽還原+ + 吲哚 H H2 2S S H H2 2O O2 2+ + 第8頁/共32頁三、抵抗力抵抗力 本菌繁殖體的抵抗力不強(qiáng) ，同一般無芽孢桿菌。常用消毒劑均能于短時(shí)間內(nèi)將其殺死。芽孢抵抗力較強(qiáng)，在干燥背光處可存活4040年以上。煮沸1h1h或干熱140 3h140 3h可殺滅芽孢，對(duì)碘敏感。第9頁/共32頁 五、抗原結(jié)構(gòu)抗原結(jié)構(gòu) （一）結(jié)構(gòu)抗原 1.1.莢膜抗原：多肽，僅見于有毒菌株，與毒力和抗吞噬有關(guān) 2.2.菌體抗原：多糖，與細(xì)菌毒力無關(guān)。性質(zhì)穩(wěn)定，經(jīng)加熱煮沸 甚至高壓蒸汽處理，抗原性不被破壞。 在病畜皮毛或腐敗臟器中經(jīng)長時(shí)間煮沸仍能與特異性抗體發(fā)生反應(yīng)形成環(huán)狀沉淀，稱為Asc

5、oli 反應(yīng)。 3. 3. 芽胞抗原：是芽胞的外膜和皮質(zhì)組成，具有免疫原性。（二）保護(hù)性抗原（PA） 炭疽毒素（PAPA、LFLF、EFEF）的組成成分之一，具有免疫原性。 第10頁/共32頁六、致病性六、致病性n此菌毒力主要與此菌毒力主要與莢膜和毒素莢膜和毒素有關(guān)，莢膜可增強(qiáng)細(xì)菌抗吞有關(guān)，莢膜可增強(qiáng)細(xì)菌抗吞噬能力，使之易于擴(kuò)散；炭疽毒素是造成感染、動(dòng)物致病噬能力，使之易于擴(kuò)散；炭疽毒素是造成感染、動(dòng)物致病和死亡的主要原因，三種成分單獨(dú)無毒性，只有和死亡的主要原因，三種成分單獨(dú)無毒性，只有EFEF或或LFLF與與PAPA結(jié)合時(shí)，才有致死或水腫效應(yīng)結(jié)合時(shí)，才有致死或水腫效應(yīng) 。n本菌可引致各種家

6、畜、野獸和人類的炭疽，草食動(dòng)物易本菌可引致各種家畜、野獸和人類的炭疽，草食動(dòng)物易感性最強(qiáng)，此菌主要通過消化道傳染，也可經(jīng)呼吸道及皮感性最強(qiáng)，此菌主要通過消化道傳染，也可經(jīng)呼吸道及皮膚創(chuàng)傷或通過吸血昆蟲傳播。膚創(chuàng)傷或通過吸血昆蟲傳播。 第11頁/共32頁 七、微生物學(xué)診斷七、微生物學(xué)診斷 1.1.細(xì)菌學(xué)檢查細(xì)菌學(xué)檢查 （）鏡檢：（）鏡檢：大桿菌，兩端平截，竹節(jié)狀大桿菌，兩端平截，竹節(jié)狀 （）分離培養(yǎng)：（）分離培養(yǎng)：用普通瓊脂或血瓊脂用普通瓊脂或血瓊脂 （）純培養(yǎng)（）純培養(yǎng): :鏡檢、串珠試驗(yàn)、生化試驗(yàn)鏡檢、串珠試驗(yàn)、生化試驗(yàn) （）動(dòng)物試驗(yàn)：（）動(dòng)物試驗(yàn)：將檢驗(yàn)材料制成懸液或純培養(yǎng)物將檢驗(yàn)材料制成

7、懸液或純培養(yǎng)物 給小鼠注射，給小鼠注射，24-36h,24-36h,小鼠死于敗血癥小鼠死于敗血癥。 第12頁/共32頁 2.2.血清學(xué)檢查 （）AscoliAscoli沉淀反應(yīng) 用加熱抽提待檢炭疽菌體多糖抗原與已知抗體 進(jìn)行的沉淀試驗(yàn)。 （）間接血凝試驗(yàn) （）協(xié)同凝集試驗(yàn) （）串珠熒光抗體檢查 （）瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 第13頁/共32頁 炭疽痊愈動(dòng)物可獲得堅(jiān)強(qiáng)的免疫，再次感染者很少 第號(hào)炭疽芽胞苗、無毒炭疽芽胞苗預(yù)防接種 高免血清進(jìn)行緊急預(yù)防接種 青霉素作為首選藥物進(jìn)行治療八、免疫防治八、免疫防治第14頁/共32頁第二節(jié)第二節(jié) 梭菌屬（梭菌屬（ClostridiumClostridium） 該屬細(xì)菌

8、多數(shù)嚴(yán)格厭氧，革蘭氏染色陽性，能形成芽孢，芽孢直徑往往比菌體粗，使菌體膨脹成梭狀，但并非梭菌屬的細(xì)菌均為梭狀，如破傷風(fēng)梭菌，芽孢位于菌體頂端，菌體呈鼓槌狀。 該屬細(xì)菌能產(chǎn)生多種外毒素和侵襲性酶，致病性強(qiáng)。 產(chǎn)氣莢膜梭菌、腐敗梭菌、諾維梭菌、肉毒梭菌和破傷風(fēng)梭菌等。第15頁/共32頁 該屬細(xì)菌芽孢直徑往往比菌體粗，使菌體膨脹成梭狀，但并非梭菌屬的細(xì)菌均為梭狀，如破傷風(fēng)梭菌，芽孢位于菌體頂端，菌體呈鼓槌狀。第16頁/共32頁 疾病類型疾病類型1 1.氣腫疽與惡性水腫氣腫疽與惡性水腫2.2.快疫與類快疫快疫與類快疫3.3.痢疾與腸炎痢疾與腸炎4.4.食物中毒食物中毒5.5.破傷風(fēng)破傷風(fēng)第17頁/共3

9、2頁產(chǎn)氣莢膜梭菌（產(chǎn)氣莢膜梭菌（Cl. perfringensCl. perfringens）舊名魏氏梭菌，在自然界分布很廣。一定舊名魏氏梭菌，在自然界分布很廣。一定條件下，可引起多種嚴(yán)重疾患，局部組織條件下，可引起多種嚴(yán)重疾患，局部組織出現(xiàn)壞死、水腫、產(chǎn)氣。出現(xiàn)壞死、水腫、產(chǎn)氣。第18頁/共32頁一、形態(tài)及染色特征一、形態(tài)及染色特征 菌體直桿狀 ，革蘭氏染色陽性。一般條件下不形成芽胞，在無糖培養(yǎng)基上可形成。芽胞大而卵圓，位于菌體中央或近端，使菌體膨脹。多數(shù)菌株可形成莢膜，無鞭毛。 無芽孢無芽孢 有芽孢有芽孢 有莢膜有莢膜第19頁/共32頁n 本菌對(duì)厭氧程度的要求并不嚴(yán) ，在普通培養(yǎng)基上可生

10、長，若加葡萄糖、血液，則生長更好。菌落多為圓形、 光滑、隆起、灰白色的圓屋頂樣，也可形成圓盤形、邊 緣成鋸齒狀、表面有輻射狀條紋的大菌落。n 生長非常迅速，快速移植法可幫助此菌的分離。n厭氧肉肝湯中培養(yǎng)，呈均勻渾濁，并產(chǎn)生大量氣體。 二、培養(yǎng)特性二、培養(yǎng)特性第20頁/共32頁n血平板上，多數(shù)菌株有血平板上，多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán)雙層溶血環(huán)，內(nèi)環(huán)，內(nèi)環(huán) 完全溶血，外環(huán)不完全溶血。完全溶血，外環(huán)不完全溶血。第21頁/共32頁 三、生化特性生化特性 肉渣湯培養(yǎng)基肉渣湯培養(yǎng)基牛牛乳乳培培養(yǎng)養(yǎng)基基高高糖糖瓊瓊脂脂培培養(yǎng)養(yǎng)基基接種產(chǎn)氣莢膜桿菌接種產(chǎn)氣莢膜桿菌本菌最突出的生化特性是對(duì)牛乳培養(yǎng)基的“暴烈發(fā)酵”。

11、第22頁/共32頁nA型：人氣性壞疽和食物中毒 nB型：羔羊痢疾 nC型：綿羊猝狙 nD型：牛腸毒血癥 nE型：犢牛、羔羊腸毒血癥 四、致病性致病性 第23頁/共32頁 1. 直接涂片鏡檢：G+大桿菌，并有莢膜 2. 分離培養(yǎng)：接種血平板，有雙層溶血環(huán) 3.3.純培養(yǎng)：引起牛奶暴烈發(fā)酵 4. 動(dòng)物試驗(yàn)：小鼠、家兔或鴿 5. 腸毒素檢查： 取回腸內(nèi)容物加適量滅菌生理鹽水稀釋，經(jīng)離心沉淀后取上清液分成兩份 ，一份不加熱，一份加熱，分別靜脈注射家兔或小鼠。如有毒素存在，不加熱組動(dòng)物常于數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡，而加熱組動(dòng)物不死亡。五、微生物學(xué)診斷微生物學(xué)診斷第24頁/共32頁破傷風(fēng)梭菌（破傷風(fēng)梭菌（Cl

12、.tetaniCl.tetani） 破傷風(fēng)梭菌是引起人畜破傷風(fēng)的病原。具有芽孢，其芽孢廣泛存在于各類土壤中。本病以骨骼肌發(fā)生強(qiáng)直性痙攣的癥狀為特征，此菌也稱為強(qiáng)直梭菌。 第25頁/共32頁 一、形態(tài)形態(tài) G+G+，兩端鈍圓、細(xì)長的桿菌 ，無莢膜，多具周鞭毛 而能運(yùn)動(dòng)。在動(dòng)物體內(nèi)外均能形成圓形芽胞，位于 菌體一端，呈鼓槌狀 。第26頁/共32頁 二、培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性嚴(yán)格厭氧菌嚴(yán)格厭氧菌，接觸氧后很快死，接觸氧后很快死亡。普通培養(yǎng)基上即能生長，亡。普通培養(yǎng)基上即能生長，形成不規(guī)則菌落，中心緊密、形成不規(guī)則菌落，中心緊密、四周疏松似羽毛。四周疏松似羽毛。不易獲得單不易獲得單個(gè)菌落個(gè)菌落，擴(kuò)散成薄膜狀

13、覆蓋整，擴(kuò)散成薄膜狀覆蓋整個(gè)平板表面。用高濃度瓊脂可個(gè)平板表面。用高濃度瓊脂可抑制其擴(kuò)散生長。抑制其擴(kuò)散生長。 第27頁/共32頁此菌產(chǎn)生兩種毒素：1. 破傷風(fēng)痙攣毒素：引起神經(jīng)興奮性的異常增高和骨骼肌痙攣。 2. 破傷風(fēng)溶血素：不耐熱，對(duì)氧敏感，可溶解馬及家兔的紅細(xì)胞，與破傷風(fēng)梭菌的致病性無關(guān)。 三、致病性三、致病性第28頁/共32頁四、微生物學(xué)診斷四、微生物學(xué)診斷 一般不需微生物學(xué)診斷。如有特殊需一般不需微生物學(xué)診斷。如有特殊需要，可采取創(chuàng)傷部的分泌物或壞死組要，可采取創(chuàng)傷部的分泌物或壞死組織進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查?？椷M(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查。第29頁/共32頁n主動(dòng)免疫預(yù)防可用明礬沉淀破傷風(fēng)類毒素 n破傷風(fēng)抗毒素血清可用于緊急預(yù)防 五、免疫防治五、免疫防治第30頁/共32頁復(fù)