植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)_第1頁
植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)_第2頁
植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)_第3頁
植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)_第4頁
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文檔簡介

1、.The Experimental Guide for PHYTOBIOLOGY PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n 上饒師范學(xué)院生命科學(xué)系 植物教研組 二OO五年九月修訂 PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書 目錄 .- 1 - 一、實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)目的與意義. - 1 - 二、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則. - 1 - 三、實(shí)驗(yàn)儀器及

2、工具的管理. - 1 - 四、實(shí)驗(yàn)課進(jìn)行的方式及要求. - 1 - . - 3 - 實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡的構(gòu)造和使用、植物細(xì)胞的觀察及生物繪圖. - 3 - 實(shí)驗(yàn)二 植物細(xì)胞有絲分裂染色體制片及觀察. - 6 - 實(shí)驗(yàn)三 植物組織的觀察. - 9 - 實(shí)驗(yàn)四 根系的分區(qū)和根的解剖結(jié)構(gòu)觀察. - 11 - 實(shí)驗(yàn)五 芽和莖的解剖結(jié)構(gòu)觀察. - 14 - 實(shí)驗(yàn)六 葉的形態(tài)觀察. - 17 - 實(shí)驗(yàn)七 葉的解剖結(jié)構(gòu)觀察. - 19 - 實(shí)驗(yàn)八 花的構(gòu)造、雄蕊及雌蕊結(jié)構(gòu)的觀察. - 21 - 實(shí)驗(yàn)九 果實(shí)的結(jié)構(gòu)觀察. - 23 - 實(shí)驗(yàn)十 藻類植物的觀察. - 26 - 實(shí)驗(yàn)十一 菌類植物的觀察. - 28

3、- 實(shí)驗(yàn)十二 地衣、苔蘚植物的觀察. - 30 - 實(shí)驗(yàn)十三 蕨類植物的觀察. - 32 - 實(shí)驗(yàn)十四 裸子植物的觀察. - 35 - 實(shí)驗(yàn)十五 植物檢索表的編制與使用. - 37 - 實(shí)驗(yàn)十六 雙子葉植物的觀察一. - 39 - 實(shí)驗(yàn)十七 雙子葉植物的觀察二. - 42 - 實(shí)驗(yàn)十八 雙子葉植物的觀察三. - 46 - 實(shí)驗(yàn)十九 單子葉植物的觀察. - 49 - .- 51 - .- 53 - .- 59 - PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n- 1 -第一部分

4、 植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)須知 一、實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)目的與意義 1驗(yàn)證理論知識,把課堂講授的理論應(yīng)用到實(shí)際材料的觀察中,并加深和鞏固所學(xué)的理論知識,開發(fā)學(xué)生的智力,啟發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。 2掌握植物學(xué)實(shí)驗(yàn)和研究的基本技術(shù),培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立工作的能力。 3培養(yǎng)獨(dú)立的思考及唯物辯證的思想方法。 4培養(yǎng)嚴(yán)肅認(rèn)真的科學(xué)態(tài)度與實(shí)事求是的工作作風(fēng)。 二、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則 1學(xué)生應(yīng)按時(shí)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,并保持安靜、不早退、室內(nèi)嚴(yán)禁吸煙。 2按號座位及使用顯微鏡和工具。對顯微鏡,使用前要檢查,使用后要擦試整理,放回原處。如發(fā)生故障或損壞部件,要及時(shí)報(bào)告指導(dǎo)教師。 3愛護(hù)儀器和標(biāo)本,節(jié)約藥品和水電。損壞物品時(shí)應(yīng)主動向教師報(bào)告,并及時(shí)登記,就情

5、節(jié)輕重予以賠償。 4要隨時(shí)保持實(shí)驗(yàn)室整潔,不準(zhǔn)隨地吐痰和亂拋雜物,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,各組清理好自己的工具及桌面。學(xué)生輪流打掃實(shí)驗(yàn)室。 5最后離開實(shí)驗(yàn)室的人要負(fù)責(zé)關(guān)燈、關(guān)水、關(guān)窗及鎖好門。 三、實(shí)驗(yàn)儀器及工具的管理 1顯微鏡:每人一臺,用前領(lǐng)取,用后歸還。 2工具:每人一套(工具盒一個(gè),內(nèi)置解剖針、鑷子、刀片各一),自己保管,期未交回。 3清潔用具:紗布一塊(擦玻片用);小毛巾一塊(擦機(jī)械部分)載玻片和蓋玻片各3 片;吸水紙,鏡頭紙 4公用器皿及藥品:培養(yǎng)皿23 個(gè),試劑藥瓶一套。 5玻片標(biāo)本盒1 個(gè)。 四、實(shí)驗(yàn)課進(jìn)行的方式及要求 1每次實(shí)驗(yàn)前應(yīng)事先閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo),并預(yù)習(xí)教材有關(guān)章節(jié)內(nèi)容。準(zhǔn)備好繪圖用具

6、:鉛筆、軟橡皮、鉛筆刀、小尺、統(tǒng)一規(guī)格的繪圖紙等。實(shí)驗(yàn)開始前,教師必須認(rèn)真講解實(shí)驗(yàn)操作中的重點(diǎn)及難點(diǎn)。 PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n- 2 -2首次實(shí)驗(yàn)開始前,教師必須要向同學(xué)們交代實(shí)驗(yàn)中要注意的安全事項(xiàng),尤其是本實(shí)驗(yàn)室中的一些特殊的、特別應(yīng)該注意的方面,如安全取用顯微鏡等等。以后也要不斷提醒同學(xué)應(yīng)該注意的事項(xiàng)。 3實(shí)驗(yàn)中,同學(xué)應(yīng)根據(jù)教師的講解,獨(dú)立操作。要求仔細(xì)、認(rèn)真分析、比較、記錄和繪圖。遇到困難時(shí),應(yīng)積極思考,分析原因,自己排除障礙,實(shí)在解決不了時(shí),再

7、請教師幫助。 4實(shí)驗(yàn)報(bào)告要當(dāng)堂完成,按時(shí)提交。 5實(shí)驗(yàn)報(bào)告是自己獨(dú)立進(jìn)行觀察記錄的結(jié)果,應(yīng)妥為保存,以備日后參考。 6必須嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)規(guī)則。 PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n- 3 -第二部分 植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡的構(gòu)造和使用、植物細(xì)胞的觀察及生物繪圖 1 、掌握普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造、使用; 2 、學(xué)習(xí)臨時(shí)裝片的方法; 3 、掌握生物繪圖方法。 4 、掌握植物細(xì)胞的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)。 顯微鏡、載玻片、蓋玻片、小燒杯、滴管、尖咀鑷子、刀片、鑷子、解剖針、培養(yǎng)

8、皿、碘碘化鉀染液、吸水紙、洋蔥。 一、顯微鏡的構(gòu)造 顯微鏡的種類很多,我們常用的為普遍光學(xué)顯微鏡。顯微鏡可分為兩個(gè)部分:機(jī)械部分和光學(xué)部分。 (一)機(jī)械部分 1 、鏡座 為顯微鏡最下面的馬蹄形鐵座。其作用是支持顯微鏡的全部重量。使其穩(wěn)立于工作臺上。 2 、鏡柱 鏡座上的直立短柱叫做鏡柱。 3 、鏡臂 鏡柱上方的彎曲的弓形部分叫做鏡臂,是握鏡的地方。鏡臂和鏡柱之間有一個(gè)能活動的傾斜關(guān)節(jié),可使顯微鏡向后傾斜,便于觀察。 4 、鏡筒 安裝在鏡臂上端的圓筒叫做鏡筒。鏡筒長度一般為1 6 0 毫米,上端安裝目鏡,下端連接轉(zhuǎn)換器。 5 、轉(zhuǎn)換器 鏡筒下端的一個(gè)能轉(zhuǎn)動的圓盤叫做轉(zhuǎn)換器。其上可以安裝幾個(gè)接物鏡

9、,觀察時(shí)便于調(diào)換不同倍數(shù)的鏡頭。 6 、載物臺 鏡臂下端安裝的一個(gè)向前伸出的平面臺叫做載物臺。用于放置觀察用的玻片標(biāo)本,載物臺中央有一圓孔,叫通光孔。通光孔左右兩旁一般裝有一對彈簧夾,為固實(shí)玻片之用,有的裝有移片器,可使玻片前后左右移動。 7 、準(zhǔn)焦螺旋 鏡臂上裝有兩種可以轉(zhuǎn)動的螺旋,能使鏡筒上升或下降,稱為準(zhǔn)焦螺旋。大的螺旋轉(zhuǎn)動一圈。鏡筒升降1 0 毫米,用于調(diào)節(jié)低倍鏡,叫做粗準(zhǔn)焦螺旋。小的螺旋圍動一圈,鏡筒升降0 . 1毫米。主要用于調(diào)節(jié)高倍鏡,叫做細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。 (二)光學(xué)部分 PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 w

10、ww. f i n e p r i n t . c n- 4 -1 、反光鏡 位于馬蹄形鏡座之上方。一個(gè)可以轉(zhuǎn)動的圓鏡,叫做反光鏡。反光鏡具兩面,一面為平面鏡,一面為凹面鏡。其用途是收集光線。平面鏡使光線分布較均勻。凹面鏡有聚光作用,反射的光線較強(qiáng),一般在光線較弱時(shí)使用。 2 、集光器 位于載物臺下方。由二、三塊透鏡組成,其作用是聚集來自反光鏡的光線,使光度增強(qiáng),并提高顯微鏡的鑒別力,集光器下面裝有光圈(可變光闌),由十幾張金屬薄片組成,可以調(diào)節(jié)進(jìn)入集光器光量的多少。若光線過強(qiáng),則將光圈孔口縮小,反之則張大,集光器還可以上下移動,以調(diào)節(jié)適宜的光度。 3 、接物鏡 又稱物鏡,由數(shù)組透鏡組成,安裝

11、在轉(zhuǎn)換器上,能將觀察的物體進(jìn)行第一次放大,是顯微鏡性能高低的關(guān)鍵性部件。每臺顯微鏡上常備有幾個(gè)不同倍數(shù)的物鏡,物鏡上所刻8 ×、1 0 ×、4 0 ×等就是放大倍數(shù),習(xí)慣上把1 0 2 0 倍的叫做低倍物鏡;4 0 6 0 倍的叫幫高倍物鏡;9 0 1 0 0倍的叫做油鏡。從形態(tài)上看,接物鏡越長,放大倍數(shù)越高。 4 、接目鏡 又稱目鏡,由二、三片透鏡組成,安裝在鏡筒上端,其作用是把物鏡放大的物體實(shí)像進(jìn)一步放大。在目鏡上方刻有5 ×、1 0 ×、2 0 ×等為放大倍數(shù)。從外表上看,鏡頭越長放大倍數(shù)越低。 顯微鏡的放大倍數(shù),粗略計(jì)算方法為

12、接目鏡放大倍數(shù)與接物鏡放大倍數(shù)的乘積。如觀察時(shí)所用接物鏡為4 0 ×、接目鏡為1 0 ×,則物體放大倍數(shù)為4 0 ×1 0 4 0 0 倍。 二、顯微鏡的成像原理 顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)中,有兩組重要的透鏡,一組是接目鏡。這兩組透鏡雖然結(jié)構(gòu)很復(fù)雜,但它們的作用都相當(dāng)于一個(gè)凸透鏡。凸鏡的成像原理,也就是顯微鏡放大成像的光學(xué)原理。只不過是通過兩次放大而已,其成像原理和光路圖如圖所示。 接物鏡的焦距較短,會聚能力較強(qiáng),接目鏡的焦距較長,會聚能力較弱。物體AB 必須放在物鏡(O1 )的下焦點(diǎn)F 1 之外而小于二倍焦距(2 f )的地方,這樣就在物鏡(O1 )上方形成一個(gè)倒立的放

13、大實(shí)像A1 B1 。這個(gè)實(shí)像正好位于目鏡(O2 )下焦點(diǎn)F2 之內(nèi)。而且距焦點(diǎn)F 2 極近的位置。A1 B1 通過目鏡(O2 )折射放大后形成一個(gè)放大的虛像A2 B2 。這個(gè)虛像A2 B2 相對于原來的物體AB 來說,它是一個(gè)倒立而放大的虛像。 三、顯微鏡的使用步驟進(jìn)行 1 、安放 安放顯微鏡要選擇臨窗或光線充足的地方。桌面要清潔、平穩(wěn),使用時(shí)先從鏡箱中取出顯微鏡。右手握鏡臂,左手托鏡座,輕放桌上,鏡筒向前,鏡臂向后,然后安放目鏡和物鏡。用紗布拭擦鏡身機(jī)械部分。用擦鏡紙或綢布試控光學(xué)部分,不可隨意用手指試擦鏡頭,以免影響觀察效果。 2 、對光 扭轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器,使低倍鏡正對通光也,打開聚光器上的光圈

14、,然后左眼對準(zhǔn)接目鏡注視,右眼睜開,用手翻轉(zhuǎn)反光鏡,對向光源,光強(qiáng)時(shí)用平面鏡,光較弱時(shí)用凹面鏡。這時(shí)從目鏡中可以看到一個(gè)明亮的圓形視野,只要視野中光亮程度適中,光就對好了。 3 、放玻片 將要觀察的玻片標(biāo)本,放在載物臺上,用彈簧夾或移光器將玻片固定。將玻片中的標(biāo)本對準(zhǔn)通光孔的中心。 4 、調(diào)焦 調(diào)焦時(shí),旋轉(zhuǎn)粗焦螺旋,為了防止物鏡與玻片標(biāo)本相撞。先慢慢降低鏡筒,降低時(shí),必須從側(cè)面仔細(xì)觀察,直到物鏡與玻片標(biāo)本相距5 mm 以上,切勿使物鏡與玻片標(biāo)本接觸,然后一面用左眼自目鏡中觀察,一面用右手旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋(切勿弄錯旋轉(zhuǎn)方向),直到看清標(biāo)本物像為止。 5 、觀察 對光、調(diào)焦都是用的低倍物鏡。觀察時(shí),

15、還是先用低倍物鏡,焦距調(diào)準(zhǔn)后,移動玻片標(biāo)本,全面的觀察材料,如果需要重點(diǎn)觀察的部分,將其調(diào)至視野的正中央,再轉(zhuǎn)換高倍鏡進(jìn)行觀察。轉(zhuǎn)換高倍鏡后,只有輕輕扭轉(zhuǎn)細(xì)準(zhǔn)螺旋,就能看到清晰的物像,注意使用高倍鏡時(shí),切勿使用粗準(zhǔn)焦螺旋,否則容易壓碎蓋玻片并損傷鏡頭的透鏡。一般凡是用低倍物鏡能夠觀察清楚的標(biāo)本,就不一定要換用高倍鏡。 觀察完畢,扭轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器,使鏡頭偏于兩旁,降下鏡筒,擦抹干凈,裝入鏡箱。 四、臨時(shí)裝片 PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n- 5 -將要觀察的材料放在載

16、玻片的水滴中,加蓋蓋玻片,以備顯微鏡下觀察,這種方法叫做臨時(shí)裝片,臨時(shí)裝片的優(yōu)點(diǎn)在于,新鮮材料組織不會破壞,可保持原來生活狀態(tài),同時(shí)操作簡便,不受設(shè)備條件限制,隨時(shí)隨地可以進(jìn)行。 制作臨時(shí)裝片時(shí)首先將載玻片,蓋玻片擦拭干凈 注意試擦玻片動作要輕,手指用力要均勻,否則易試破 。在載玻片中央,滴加一、二滴清水。然后用鑷子鑷洋蔥內(nèi)表皮0 . 5 c m×0 . 5 c m,放在載玻片上,再將蓋玻片輕輕蓋上,注意:為了不使其內(nèi)有氣泡,必須將蓋玻片先從一側(cè)放下,使接觸到水,然后慢慢放下,如仍有氣泡,可用鑷子輕輕加壓蓋玻片,或者解剖針對蓋玻片稍為提高,然后再放下,水不能過多,水量過多,則蓋玻片易

17、浮動,這時(shí)可用小濾紙條將水分吸干,如水分過少,水沒有填滿蓋玻片,可以側(cè)面用滴管加水少許。總之,應(yīng)使蓋玻片緊貼載玻片,不能浮動,這樣才利用觀察。 最后試干玻片四周的水分,置顯微鏡下觀察。 臨時(shí)裝片技術(shù),是本課程實(shí)驗(yàn)課最常用的基本技術(shù),要求每個(gè)同學(xué)反復(fù)練習(xí),熟練掌握。 五、生物繪圖法 生物實(shí)驗(yàn)圖不同于一般美術(shù)圖,也不同于機(jī)械制圖。生物繪圖要求將標(biāo)本的外形和內(nèi)部結(jié)構(gòu)準(zhǔn)確的措施下來,然后詳加說明,要求形象自然,比例適當(dāng),線條清晰。 生物繪圖一般用點(diǎn)、線表示,輪廓用線條描繪,明暗程度、物質(zhì)含量多少等則用細(xì)點(diǎn)的蔬密表示之,圖紙應(yīng)選擇能夠用橡皮試擦的上好白紙,繪圖時(shí)先用中軟(EB)銅筆繪出輪廓,然后用較硬(

18、3 H)的鉛筆繪出全圖,圖中各部分應(yīng)注字說明,圖與字之間用水平細(xì)線連系之,圖的標(biāo)題填在圖的下方。 很多細(xì)不生物體或解剖結(jié)構(gòu)是通過顯微鏡觀察認(rèn)識的。因此要逐步訓(xùn)練用左眼觀察,右眼看圖紙。將觀察結(jié)果準(zhǔn)確地描繪出來。 1 、為什么要用蓋玻片蓋著標(biāo)本,才能放在顯微鏡下觀察? 2 、觀察細(xì)胞時(shí),在蓋玻片下滴加碘液有什么作用? 3 、洋蔥表皮細(xì)胞的細(xì)胞膜你看到了嗎? 為什么? 繪一個(gè)洋蔥鱗片葉的表皮細(xì)胞,并注明各部名稱。 PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n- 6 -實(shí)驗(yàn)二 植

19、物細(xì)胞有絲分裂染色體制片及觀察 1 、學(xué)習(xí)和掌握植物根尖細(xì)胞有絲分裂染色體壓片技術(shù); 2 、觀察有絲分裂過程中染色體的形態(tài)特征和動態(tài)變化。 洋蔥或蠶豆根尖、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、解剖針、醋酸洋紅或改良堿性品紅、酒精燈。 一、植物細(xì)胞的有絲分裂過程 取洋蔥或蠶豆根尖壓片(或已制好的洋蔥根尖縱切片)置顯微鏡下觀察。仔細(xì)找出分裂的細(xì)胞或正在分裂中各期細(xì)胞。正在分裂的細(xì)胞內(nèi)部發(fā)生了十分復(fù)雜的變化。在顯微鏡下可以觀察到顯著的變化是細(xì)胞核。所以,平時(shí)著重觀察細(xì)胞核變化中的幾個(gè)階段。變化過程的連續(xù)的,為了便于說明,分為以下幾個(gè)時(shí)期: 間期 即未進(jìn)行細(xì)胞分裂的時(shí)期,又叫靜止期 在切片上這個(gè)時(shí)期的細(xì)胞數(shù)

20、目最多,細(xì)胞核無變化,具純一構(gòu)造核內(nèi)染色質(zhì)分布均勻、核膜、核仁均存在。 前期 染色體形成時(shí)期 細(xì)胞由不分裂狀態(tài)逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榉至褷顟B(tài),最顯著的是細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)。由分散狀態(tài)形成許多小顆粒 染色質(zhì)粒 ,進(jìn)而連成細(xì)絲狀,最后成一條條的棒狀。帶狀物即染色體,前期之未。每一個(gè)染色體縱裂為二,但并不立即分開,仍然互相靠攏,同時(shí)核膜,核仁逐漸消失。 中期 紡錘體形成時(shí)期 染色體在細(xì)胞內(nèi)發(fā)生移動,原來散亂的各個(gè)染色體最后排列在細(xì)胞中央的一個(gè)平面上,這個(gè)平面叫赤道面。這些在赤道面上的染色體合成赤道板。同時(shí),在這個(gè)時(shí)期,一些無色的細(xì)絲從細(xì)胞的兩極仲到赤道板的附近。與縱裂兩半的染色單體聯(lián)系著。這些無色細(xì)絲從細(xì)胞的兩極

21、伸到赤道板的附近,與給裂兩半的染色單位聯(lián)系著。這些無色細(xì)絲叫做紡錘絲。全部紡錘絲合成紡錘體。 紡錘絲在普通顯微鏡下,往往不易見到,要縮小光圈,轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)輪,有時(shí)亦可見到。 后期 染色體分離時(shí)期 縱裂后的兩個(gè)染色單體開始向細(xì)胞的兩極移動,由于紡鍾絲收縮而產(chǎn)生的牽引力,兩組染色單位從赤道板趨赴紡錘體的兩極。從染色體開始移動的兩組染色單體到達(dá)細(xì)胞的兩極,這個(gè)階段是細(xì)胞分裂的后期。 末期 子核成立時(shí)期 到達(dá)細(xì)胞兩極的染色單體逐漸改變形態(tài)。染色體解螺旋、變細(xì)、伸長,逐漸形成染色質(zhì),最后成統(tǒng)一的構(gòu)造。周圍產(chǎn)生核膜。中間出現(xiàn)核仁,這時(shí)紡錘體消失。在原來赤道面的地的的細(xì)胞壁,將細(xì)胞分裂成兩個(gè)部分。這時(shí),一個(gè)母

22、細(xì)胞就分裂成為兩個(gè)子細(xì)胞了。 繪幾個(gè)正在進(jìn)行分裂的細(xì)胞,分別表示細(xì)胞分裂的各個(gè)時(shí)期。 二、植物根尖分生組織壓片法 1 、取材 切取洋蔥根尖0 . 5 厘米進(jìn)行前處理。 一般在上行1 0 1 1 時(shí)取材 2 、前處理 PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n- 7 -將切下的根尖放在0 . 4 0 . 2 %的秋水仙堿溶液處理2 5 小時(shí),然后用水沖幾次,或?qū)⒉牧戏湃胝麴s水中,在0 3 的條件下處理2 4 小時(shí)。 3 、固定 在醋酸純酒精(1 :3 )固定1 5 3 0

23、分鐘,然后用9 5 %酒精洗凈其醋酸移入7 0 %酒精中,在陰涼處保存。 4 、解離 將根從固定液中取出,用流水沖洗1 0 分鐘,放入1 mo l / l 鹽酸中,于6 0 下水解1 0 分鐘,或置鹽酸酒精(鹽酸與9 5 %酒精各半),取出水洗1 2 次。 5 、染色和壓片 取解離后的根尖于載玻片上,滴加幾滴改良堿性品紅或醋酸洋紅染液。放置約1 0 分鐘,待根尖染成暗紅色,加蓋玻片,用吸水紙放在蓋玻片上面,用右手拇指在吸水紙上對準(zhǔn)根尖輕壓,或用解部針柄端輕輕敲擊,將根尖材料壓成一均勻薄層,注意不要移動蓋玻片。 6 、鏡檢 將所做玻片置顯微鏡下觀察,可看到有絲分裂過程中不同分裂時(shí)期的染色體,為了

24、觀察染色體形態(tài)結(jié)構(gòu)和進(jìn)行計(jì)數(shù),應(yīng)找到分裂中期的細(xì)胞,若染色嫌淺,可從蓋玻片一側(cè)加酒液,同時(shí)在另一側(cè)用濾紙片吸染料,又可將載玻片在酒精燈上微微加熱,染色體著色效果更好些。 洋蔥根尖的培養(yǎng) 1 . 培養(yǎng)洋蔥生根時(shí), 避免用新采收的洋蔥, 因它尚在休眠不易生根。培養(yǎng)過程中, 注意每天至少換水一次, 以防爛根。 如果必須用當(dāng)年剛采收的新洋蔥培養(yǎng)生根, 則應(yīng)設(shè)法打破它的休眠。常用的方法是用低濃度的赤霉素溶液浸泡洋蔥底盤, 這樣可以促使其生根。 2 . 對于頭年收下的洋蔥, 可以采用如下方法促使它生根。 ( 1 ) 選擇底盤大的洋蔥作生根材料。 ( 2 ) 剝?nèi)ネ鈱永掀? 用刀削去老根( 從底盤中央向四周

25、削) , 注意不要削掉四周的“根芽”。 ( 3 ) 用燒杯裝滿清水, 放上洋蔥, 放置在光照處。水要保持清潔, 注意每天換水1 2 次。一般2 3 d即可獲得實(shí)驗(yàn)所需材料。如果班級較多, 為了防止后用的班級所需的洋蔥根長得過長 , 也可以放入冰箱里( 1 2 ) 培養(yǎng)。 3 . 固定時(shí)間取材:洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的時(shí)間是有規(guī)律的。通常在每天上午1 0 時(shí)至下午2 時(shí)分裂活躍, 尤其以上午1 1 時(shí)3 0 分時(shí)最活躍, 可在這時(shí)取材。 實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng) 解離時(shí), 也可將剪取的2 3 mm 洋蔥根尖浸入濃鹽酸和酒精的體積分?jǐn)?shù)為9 5 %的溶液各半的混合液中,浸2 0 3 0 mi n 。這樣, 根尖細(xì)

26、胞被殺死 , 細(xì)胞間質(zhì)被溶解, 細(xì)胞容易分離。 PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n- 8 -染色時(shí), 也可用紫藥水取代1 0 %龍膽紫染液, 但濃度不宜過大。可將紫藥水稀釋, 即每2 3 滴水中加入一滴紫藥水。將洋蔥根尖染色3 5 mi n 后再移入中央有一滴清水的載玻片上, 制作裝片。 壓片時(shí), 僅靠用手指輕按, 不易將根尖細(xì)胞分散開??蓪⑷旧蟮难笫[根尖用小刀壓平, 或用鉛筆帶橡皮的一端稍用力壓, 這樣才能使細(xì)胞分散, 并且便于放平蓋玻片。 1 、簡述植物細(xì)胞

27、有絲分裂的主要過程? 2 、如何制作植物細(xì)胞有絲分裂的裝片標(biāo)本? 繪植物細(xì)胞有絲分裂過程圖(典型時(shí)期前、中、后、末),并注明各部分名稱。 PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n- 9 -實(shí)驗(yàn)三 植物組織的觀察 認(rèn)識保護(hù)組織、機(jī)械組織、輸導(dǎo)組織的特征。 新鮮空心蓮子草葉( 龍葵葉) 、鳶尾葉、 南瓜莖(或玉米莖)縱、橫切片 顯微鏡、載玻片、蓋玻片、刀片、鑷子、解剖針、培養(yǎng)皿、染色液 一、保護(hù)組織的觀察:保護(hù)組織分布植物體表,起保護(hù)作用。 1 、初生保護(hù)組織結(jié)構(gòu):取新鮮空

28、心蓮子草葉( 龍葵葉) ,撕取其下表皮制成臨時(shí)裝片,高倍鏡下,可見表皮細(xì)胞形狀不規(guī)則,排列緊密彼此鑲嵌,無細(xì)胞間隙。表皮層上分布有多個(gè)氣孔器,每個(gè)氣孔器由一對腎型的保衛(wèi)細(xì)胞和中間的氣孔組成。保衛(wèi)細(xì)胞中含有葉綠體。有的植物表皮上分布有表皮毛或腺毛。 另取鳶尾葉下表皮制片(示范)觀察單子葉植物表皮結(jié)構(gòu)。高倍鏡下,可見表皮細(xì)胞為狹長形狀,排列整齊,有許多氣孔器分布。 單子葉植物的氣孔器:由一對保衛(wèi)細(xì)胞和一對副衛(wèi)細(xì)胞組成。保衛(wèi)細(xì)胞為啞鈴狀,兩端膨大,壁薄,中部胞壁特別增厚。保衛(wèi)細(xì)胞吸水膨脹時(shí),薄壁的兩端膨大,互相撐開,于是氣孔開放;缺水時(shí),兩端萎軟,氣孔就閉合。 2 、次生保護(hù)組織結(jié)構(gòu):取椴樹莖橫切制

29、片觀察周皮結(jié)構(gòu)。顯微鏡下可見周皮由數(shù)層扁平細(xì)胞組成,包括木栓層(死細(xì)胞)、木栓形成層與栓內(nèi)層。其中木栓層屬于次生保護(hù)組織,木栓形成層屬于側(cè)生分生組織,栓內(nèi)層屬于薄壁組織。在局部區(qū)域木栓形成層向外分裂產(chǎn)生薄壁細(xì)胞,形成次生通氣組織皮孔。 二、觀察機(jī)械組織:機(jī)械組織細(xì)胞特點(diǎn)是細(xì)胞壁部分或全部加厚。 1 、厚角組織:取南瓜莖橫切制片觀察厚角組織。南瓜莖表皮下方具棱角的部分即為厚角組織,其細(xì)胞壁在細(xì)胞的角隅處加厚,是生活細(xì)胞。 2 、厚壁組織:在新鮮梨果肉靠近中部的部分挑取一個(gè)沙粒狀的組織置于載玻片上,用兩片載玻片將其壓碎,滴一滴碘液蓋上蓋玻片,制成臨時(shí)制片觀察。梨果肉細(xì)胞較大、近圓形,包圍著顏色較暗

30、的細(xì)胞群,這些細(xì)胞為多邊形,細(xì)胞壁異常加厚,細(xì)胞腔很小,具有明顯的紋孔溝,稱為石細(xì)胞。 三、觀察輸導(dǎo)組織:取南瓜莖縱切制片觀察。 顯微鏡低倍鏡下可觀察到被染成紅色的、具有各種花紋的成串管狀細(xì)胞,它們是多種類型的導(dǎo)管。每個(gè)導(dǎo)管分子,均以端壁形成的穿孔相互連接,上下貫通。 高倍鏡下可見導(dǎo)管依花紋不同區(qū)分為螺紋導(dǎo)管和網(wǎng)紋導(dǎo)管。前者管徑較小,細(xì)胞壁具有螺旋形加厚并木質(zhì)化的次生壁;后者管徑較大,具有網(wǎng)狀加厚并木質(zhì)化的次生壁。 PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n - 10 -

31、 再在鏡下木質(zhì)部的兩側(cè)找到染成藍(lán)色的韌皮部,在此處可見一些口徑較大的長管狀細(xì)胞,即為篩管細(xì)胞。篩管細(xì)胞也是上下相連,高倍鏡下可見連接的端壁所在處稍微膨大、染色較深,即為篩板,有些還可見到篩板上的篩孔。篩管無細(xì)胞核,其細(xì)胞質(zhì)常收縮成一束,離開側(cè)壁,兩端較寬,中間較窄,這就是通過篩孔的原生質(zhì)絲,比胞間連絲粗大,特稱為聯(lián)絡(luò)索。在篩管旁邊緊貼著一至幾個(gè)染色較深、細(xì)長的伴胞。伴胞細(xì)胞質(zhì)濃,具細(xì)胞核。 附 組織離析法: 用化學(xué)藥品將細(xì)胞與細(xì)胞間的中層物質(zhì)溶解,使細(xì)胞分離這種化學(xué)處理方法叫做離支。根據(jù)植物材料不同,處理方法亦不同,下面介紹兩種: 1 、硝酸 氯酸鉀離析法 將木材或其他較堅(jiān)硬的木質(zhì)化材料切成火

32、柴粗細(xì),長約一厘米的小條,經(jīng)水煮3 0 分鐘后放在試管中,加入濃硝酸水液 用市售濃硝酸加蒸餾水1 份制成 ,浸沒材料,然后投入一小撮氯酸押,在通風(fēng)櫥內(nèi)將試管放在沙浴鍋內(nèi),加熱,一般加熱到6 0 8 0 ,經(jīng)1 5 3 0 分鐘,取出試管,用玻棒輕攪材料,如已能散開時(shí),取出用流水沖洗,直到硝酸洗凈為止。 選取材料少許的表面皿上用番紅溶液染色 也可用苯三酚與鹽酸處理 ,最后將已染色的材料置載玻片上,用解剖針分散,加水及蓋玻片,進(jìn)行鏡檢。 如不加熱,亦可置室溫下離析幾天到半月左右,其他方法同上。 2 、醋酸 過氯化氫離析法 此法可離析一般木質(zhì)化材料,材料經(jīng)水煮 3 0 6 0 分鐘 以后,切成上述大

33、小,投入冰醋酸和6 %過氧化氯各半的離析液中,在6 0 溫箱中處理2 4 4 8 小時(shí),然后按上述步驟,沖洗、染色、鏡檢。 1 繪雙子葉植物( 空心蓮子草或龍葵) 葉表皮細(xì)胞及氣孔器結(jié)構(gòu)圖,并引注各部分名稱。 2 繪南瓜莖導(dǎo)管縱切面結(jié)構(gòu)圖,并引注各部分名稱。 PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n - 11 - 實(shí)驗(yàn)四 根系的分區(qū)和根的解剖結(jié)構(gòu)觀察 1 了解根系不同類型的外部形態(tài)特征,加深理解根的生理功能。 2 了解根的內(nèi)部結(jié)構(gòu)特點(diǎn),側(cè)根發(fā)生及根瘤形態(tài)。 顯微鏡、根的

34、結(jié)構(gòu)模型 直根系、須根系植物標(biāo)本、大豆根瘤永久制片、蠶豆幼根橫切面永久制片(洋蔥根尖縱切面永久制片) 一、 根系的形態(tài) 1 觀察羊蹄的根系,它有明顯的主、側(cè)根之分,屬直根系。 2 觀察蔥或狗尾草根系,它沒有明顯的主、側(cè)根之分,均為不定根,屬須根系。 二、 根尖的分區(qū) 取蔥根尖縱切面永久制片在低倍顯微鏡下觀察。根尖可分為四個(gè)區(qū),由尖端開始: 1 根冠區(qū):在根的最先端,全形如帽遮蓋生長點(diǎn),具有保護(hù)作用。其外層細(xì)胞排列疏松,能分泌粘液,部分外圍細(xì)胞已經(jīng)被破壞,內(nèi)層細(xì)胞小而規(guī)則,排列緊密。 2 分生區(qū)(生長點(diǎn)):細(xì)胞個(gè)小,細(xì)胞壁薄,細(xì)胞排列緊密,都是分裂旺盛的幼期細(xì)胞。生長點(diǎn)細(xì)胞向前分化為根冠,向后分

35、化為根的初生構(gòu)造。 3 伸長區(qū):在生長點(diǎn)之后,細(xì)胞縱向長,并已開始出現(xiàn)導(dǎo)管和篩管的分化。 4 根毛區(qū)(成熟區(qū)):位于伸長區(qū)之后具根毛的部分。其內(nèi)部細(xì)胞已停止生長,分化成熟,故亦稱成熟區(qū)。 三、 雙子葉植物根的內(nèi)部結(jié)構(gòu) 1 根的初生結(jié)構(gòu) 取蠶豆幼根橫切面永久制片置于低倍鏡下觀察,分清表皮、皮層和中柱三部分結(jié)構(gòu),而后轉(zhuǎn)為高倍鏡由外至內(nèi)仔細(xì)觀察。 (1 )表皮:為一層排列緊密的細(xì)胞組成,其中某些細(xì)胞外壁向外突起形成根毛。 (2 )皮層:可分為三個(gè)層次。外皮層細(xì)胞與表皮相鄰,排列緊密,細(xì)胞體積較小。皮層薄壁細(xì)胞層數(shù)較多,細(xì)胞個(gè)大,呈圓形或多邊形,具有發(fā)達(dá)的胞間隙。內(nèi)皮層細(xì)胞一層,細(xì)胞體積也較小,排列緊

36、密,有凱氏帶增厚,橫切面為凱氏點(diǎn)結(jié)構(gòu)。 PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n - 12 - (3 )中柱:指內(nèi)皮層以內(nèi)的中軸部分。由中柱鞘、初生木質(zhì)部、初生韌皮部和薄壁細(xì)胞組成。中柱鞘為緊鄰內(nèi)皮層排列緊密的一層細(xì)胞,具有潛在的分裂能力。初生木質(zhì)部成束存在,共有四束( 即四原型根) ,每束木質(zhì)部橫切面略呈三角形,輻射尖端為原生木質(zhì)部,其導(dǎo)管口徑小,是較早分化成熟的,后生木質(zhì)部靠近軸心,導(dǎo)管口徑大,是較晚分化成熟的。因此,木質(zhì)部的成熟方式為外始式。初生韌皮部也是四束,與

37、木質(zhì)部束相間排列,細(xì)胞小排列緊密,包含篩管和伴胞,但彼此很難區(qū)別。薄壁細(xì)胞包括木質(zhì)部與韌皮部之間的幾列薄壁細(xì)胞和髓部的薄壁細(xì)胞( 不發(fā)達(dá)) ,其中木質(zhì)部與韌皮部之間的薄壁細(xì)胞具有潛在的分裂能力。 2 根的次生構(gòu)造 取棉花老根橫切面永久制片置于低倍鏡下觀察,外為周皮,內(nèi)為維管柱。而后轉(zhuǎn)為高倍鏡由外至內(nèi)仔細(xì)觀察。 (1 )周皮:由三部分組成。最外部為木栓層,2 3 層,細(xì)胞扁平排列整齊,細(xì)胞壁栓質(zhì)化。栓內(nèi)層位于周皮最內(nèi)層,為薄壁細(xì)胞。木栓層與栓內(nèi)層之間有一層具有分裂能力的細(xì)胞,即木栓形成層。木栓形成層分裂產(chǎn)生的細(xì)胞向外分化形成木栓層,向內(nèi)分化形成栓內(nèi)層,三者合稱周皮。 (2 )維管柱:為周皮內(nèi)所有

38、部分的總稱。 由外至內(nèi)為: 初生韌皮部:所占比例較小,位于栓內(nèi)層內(nèi)側(cè),有時(shí)初生韌皮部被壓扁擠毀。 次生韌皮部:居于初生韌皮部以內(nèi),形成層外方, 包括篩管、伴胞、韌皮纖維、韌皮薄壁細(xì)胞,與初生韌皮部不易區(qū)分。 形成層:圍繞在次生木質(zhì)部之外,成一個(gè)圓圈,為幾層排列整齊的扁平細(xì)胞組成,但只有一層細(xì)胞具有分裂能力。形成層細(xì)胞向外分裂、分化形成次生韌皮部,向內(nèi)分裂、分化形成次生木質(zhì)部。 次生木質(zhì)部:位于形成層之內(nèi),所占比例較大,由導(dǎo)管、管胞、木纖維和木薄壁細(xì)胞組成。導(dǎo)管口徑大,細(xì)胞壁較厚,被染成紅色;管胞口徑小,靠近導(dǎo)管;木纖維口徑小,細(xì)胞壁很厚,也呈紅色;木薄壁細(xì)胞染成藍(lán)色分布其間。 在較老的根中,次

39、生木質(zhì)部與次生韌皮部中還產(chǎn)生了一種新組織,其細(xì)胞呈徑向排列,由內(nèi)向外呈放射狀,即維管射線。 初生木質(zhì)部:居維管束中心由一些小導(dǎo)管細(xì)胞組成四束,呈十字形排列。 四、單子葉植物根的內(nèi)部構(gòu)造 1 蔥根:與棉幼根結(jié)構(gòu)基本相似,但具有如下特點(diǎn): (1 )皮層較發(fā)達(dá),內(nèi)皮層有明顯的五面增厚,橫切面上呈馬蹄形加厚,外切向壁不加厚。在木質(zhì)部放射角處有通道細(xì)胞。 (2 )初生木質(zhì)部具有5 或6 個(gè)放射角,即5 或6 束。導(dǎo)管被染成紅色,十分明顯。根的最中央被大導(dǎo)管占據(jù),所以無髓部。 2 玉米根:取玉米根橫切面制片觀察,其特點(diǎn)如下: (1 )近表皮1 3 層的皮層細(xì)胞形小壁厚,為機(jī)械組織,在老根中可替代已脫落的表皮起保護(hù)作用。 (2 )皮層薄壁組織在幼根中細(xì)胞排列整齊,呈同心輻射狀排列,由內(nèi)向外細(xì)胞逐漸增大,胞間隙發(fā)PDF 文件使用 " p d f F a c t o r y Pr o " 試用版本創(chuàng)建 www. f i n e p r i n t . c n - 13 - 達(dá)。在

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