超臨界CO2萃取

1、預破碎細胞壁超臨界CO萃取滿山紅揮發(fā)油工藝研究摘要： 目的 研究預破碎細胞壁超臨界二氧化碳萃取滿山紅揮發(fā)油的工藝。方法 采用正交實驗確定預破碎細胞壁超臨界二氧化碳萃取的最佳條件。以收油率為指標，將預破碎細胞壁超臨界二氧化碳萃取法與傳統(tǒng)水蒸氣蒸餾法比較；以收油量為指標，將改進后的水蒸氣蒸餾裝置與傳統(tǒng)裝置比較。結果 預破碎細胞壁超臨界二氧化碳萃取的最佳工藝為萃取壓力14MPa,萃取溫度40C,粒度80目，分離器I的壓力4MPa。提取率為3.330%,收油率為 0.26%。 結論 預破碎細胞壁超臨界二氧化碳萃取法提取滿山紅揮發(fā)油與傳統(tǒng)水蒸氣蒸餾法差別不大；改進后的水蒸氣蒸餾裝置在揮發(fā)油的提取方面比傳

2、統(tǒng)裝置有了很大的提高。關鍵詞 ：預破碎細胞壁；超臨界二氧化碳；滿山紅；揮發(fā)油；GC_MS。The Technology Research of breaking the cell wall and Extracting Volatile Oils from Rhododendron Dauricum by Supercritical CO2ABSTRACT: Objective Research of breaking the cell wall and extraction (SFE-CO2)technology of voatitle oil of Folium Rhododendron

3、dauricum by the supercritical CO2.Methods The optimum conditions for SFE-CO2 were selected by orthogonal design test .With extraction yield as index,the supercritical CO2 extraction was compared with traditional steam distillatian(SD); Take the oil mass received as the target, the steam distillation

4、(SD) installment that had been improved compared with to compare the traditional installment comparison .Results The optimum conditions were as follows, extracting pressure 14MPa, selector pressure 4MPa,granulsrity is 80 at40 . The rate of extraction is 3.330%, the oil yield is 0.26%.Conclusin Break

5、ing the cell wall and Extracting V olatile Oils from Rhododendron Dauricum by Supercritical CO 2 and the traditional steam distillatian(SD) difference is not big ； steam distillation installment after the improvement comparing to the traditional installment in the distilling volatile oil have the ve

6、ry big enhancement.KEY WORDS: breaking the cell wall ; Rhododendron Dauricum ; voatitle oil ; SupercriticalCO2extraction;GC-MS.、兒 前言滿山紅， 又名達子香，為興安杜鵑(Rhodondron dauricum) 春季開紫紅色花，藥用其葉，分布于小興安嶺，長白山，完達山，資源豐富，對滿山紅的進一步研究，將其葉分為揮發(fā)油，酒提，水提3 部分，分別進行篩選，表現(xiàn)出不同的鎮(zhèn)咳，祛痰和平喘作用，再將其分離發(fā)現(xiàn)， 揮發(fā)油含薄荷醇( menthol) , 松樟腦 ( juniper

7、 campho) , 大牦兒酮 ( germaerone) ，桉油素(eineol ) ，創(chuàng)木烯(earyophyllene )等。超臨界流體萃取的基本原理及特點：超臨界流體是處于臨界溫度和臨界壓力以上的非凝固性的高密度流體。超臨界流體沒有明顯的氣液分界面，既不是氣體，也不是液體，是一種氣液不分的狀態(tài)，性質(zhì)介于氣體和液體之間，具有優(yōu)異的溶解性，黏度大，密度大，有較好的流動性，傳質(zhì)，傳熱和溶解性能。流體在臨界狀態(tài)時，其密度接近于液體密度，并且隨流體壓力和溫度的改變發(fā)生十分明顯的變化。而溶質(zhì)在超臨界流體中的溶解度隨超臨界流體增大而增大。超臨界流體萃取正是利用這種性質(zhì)，在較高的壓力下，將溶質(zhì)溶解于流

8、體中，然后降低流體溶液的壓力或升高流體的溫度，使溶解于超臨界流體中的溶質(zhì)因其密度下降，溶解度降低而析出，從而實現(xiàn)特定溶質(zhì)的萃取1 。由于超臨界技術具有優(yōu)于傳統(tǒng)提取分離技術的特點，提取物中不存在有害健康的殘留溶劑，同時具有操作條件溫和與不導致是生物活性物質(zhì)失活變性的優(yōu)點而被受關注。目前從動植物中提取有效成分仍然是超臨界二氧化碳萃取技術在醫(yī)藥工業(yè)中的重點，也包括藥用成分的分析及粗品的濃縮精制等。用超臨界萃取技術能直接從單味藥材或復方藥材中提取不同部位的有效成分，也可以直接提取中藥浸膏以篩選有成分，能大大提高篩選速度，可提取許多傳統(tǒng)提取提取方法提取不出來的成分，有利于新藥的開發(fā)，具有抗氧化，滅菌等作

9、用，有利于保證和提高產(chǎn)品質(zhì)量2 。超臨界萃取技術有較好的應用前景，我國資源豐富，許多物質(zhì)都可以用超臨界流體技術進行加工，如銀杏葉，魚油。卵磷脂。大力開發(fā)這方面的研究，能獲得很高的經(jīng)濟效益。超臨界萃取技術的應用也為我國中藥材化學成分的提取和分離提供了一種有效的方法。相信隨著人們對環(huán)境保護和綠色時代的要求，超臨界流體技術將促進其進一步的開發(fā)和利用3。從植物中提取揮發(fā)油，傳統(tǒng)提取方法是水蒸氣蒸餾法。這種方法存在明顯的有效成分損失多，提取效率低，成本高等缺點。而采用超臨界二氧化碳萃取法能夠彌補這些不足。預破碎細胞壁不但可以提高中藥有效成分的提取量而且可以降低提取條件，甚至經(jīng)過預破碎細胞加工的水果，蔬菜

10、中的營養(yǎng)物質(zhì)更容易為人體所吸收。破碎細胞壁有溫差法，壓差法，酶解法等等， 本次實驗通過對最佳破碎細胞壁壓差的考察，期望能夠得到最佳的破壁壓差；在通過對破碎細胞壁超臨界二氧化碳萃取滿山紅揮發(fā)油的工藝研究，確定了萃取壓力、萃取溫度、粒度、分離器I 的壓力，以期能為滿山紅揮發(fā)油的進一步開發(fā)研究提供參考。1 儀器與材料1.1 儀器HA-221-50-06 型 超 臨 界 萃 取 裝 置 （ 江 蘇 南 通 華 安 超 臨 界 萃 取 有 限 公 司 ） ； Agilent6890-5973N氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國安潔倫）；KQ-500D型數(shù)控超聲波清洗器（昆 山市超聲儀器有限公司）；FA2004N

11、電子分析天平（上海恒平科學儀器有限公司）；YXYCS 循環(huán)水真空泵（山東鄭城華魯電熱儀器有限公司）；RE-SZA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀 器廠）；架盤藥物天平（上海精密儀器有限公司）；DW-2®調(diào)溫電熱器（南通市長江光學儀 器有限公司）；WZAM貝折射儀（長春時代光電有限公司）；HG101-ZA電熱鼓風干燥箱（南 京儀器廠）；FW-117型中草藥粉碎機（24000r/min ）（天津泰斯特儀器有限公司）；顯微鏡 （ OLYMPUS.CH.JAP）A。 N 1.2 藥品與材料滿山紅（原產(chǎn)地黑龍江省伊春）；正己烷（天津市瑞金特化學品有限公司分析純） ；乙酸乙酯 （天津化學試劑二廠分析純

12、） ； 濃硫酸 （哈爾濱新達化工廠分析純） ； 乙醚 （天津市凱通化學試劑有限公司分析純） ；無水乙醇（天津市凱通化學試劑有限公司分析純）；丙酮（天津市瑞金特化學品有限公司分析純）；二氧化碳（浩良河化肥廠 純度99.5% 食品級） 。2 實驗方法4超臨界萃取法1.1.1 破碎細胞壁的壓力差對破壁率的影響5稱取已粉碎至100目的滿山紅藥材50g。按2.1.2的流程進行破碎細胞壁，得到不同 壓力差的已破碎細胞壁的滿山紅。用顯微鏡觀察，觀察方法：在五個不同的視野分別找到1。一塊區(qū)域，計算每個區(qū)域的破碎細胞率，得到平均值，見表表1破碎細胞壁的壓力差對破壁率的影響破壁壓力差（MPa0102030破壁率（

13、%25.8737.2141.3441.86由表1可見，當壓力差在20MP或大于20MPa寸，破壁率差別不大。因此，出于對節(jié) 約能源以及降低機器損耗的考慮，最佳的破碎細胞壁的壓力差為20MPa1.1.2 預破碎細胞壁超臨界 CO2萃取的流程按如下流程走向CO氣瓶一冷卻系統(tǒng)一高壓系統(tǒng)一萃取罐一分離器I 一分離器II 一循環(huán)。將已經(jīng)粉碎到所需要粒度的滿山紅葉投入到萃取罐中，對萃取罐，分離器 I,分離器 II進行加熱，并對冷機制冷，當溫度達到預定溫度時，打開CO氣瓶及泵，當壓力達到預定破碎細胞壁的上限壓力時，迅速將萃取罐兩端的閥門關閉，保持恒壓一段時間，再迅速 將與萃取罐相連的閥門迅速打開，使之以最快

14、的速度降至大氣壓。然后，再當壓力達到設 定的萃取壓力時，開始循環(huán)萃取，并且保持恒溫恒壓，每隔一段時間分別從分離器I和分離器II集中收產(chǎn)品，直到?jīng)]有產(chǎn)品出現(xiàn)為止。1.1.3 正交實驗6采用正交實驗來摸索超臨界 CO2萃取法提取滿山紅葉中的揮發(fā)油的最佳工藝。 稱取粉 碎至所需要粒度的滿山紅葉16份，每份120g,以提取率、收油率（提取率=浸膏量/投藥 量；收油率=揮發(fā)油體積/投藥量）為指標，以萃取壓力、萃取溫度、藥材粒度及分離器 I的壓力為因素，見表2表2 因素水平表水平A萃取壓力（MPa） B萃取溫度（0C） C粒度（）DI的壓力（MPa）1835504211406053144580641750

15、1007另外，設定的其它分離條件，見表 3表3分離條件壓力(MPa)溫度（C）分離器I*50分離器II420萃取時間為1.5小時，*為變化的條件2.2 水蒸氣蒸儲法提取滿山紅藥材中的揮發(fā)油的傳統(tǒng)方法為水蒸氣蒸儲法。稱取滿山紅藥材3份每份50g加入12倍的蒸儲水提取揮發(fā)油，提取時間為 6h,收集 到的揮發(fā)油分別為0.07ml、0.08 ml、0.08 ml ,收率較小。經(jīng)過分析和改進，在揮發(fā)油提 取器中接收揮發(fā)油的部分安裝一個水冷凝裝置（見圖1）,可以達到增加揮發(fā)油提取量的目的。將6份滿山紅每份50g分成兩組，分別裝入兩種提取裝置中（圖 1、圖2）,投入12倍 的蒸儲水，提取6h,記錄收油量，見

16、表4。表4冷凝效果的考察普通提取器收油量（ml）改進裝置的提取器收油量 （ml）10.080.1520.090.1630.080.16R由表4可見，在安裝了冷凝裝置以后，揮發(fā)油的提取量大約是普通提取裝置的兩倍, 效果比較好。2.3 定性鑒別滿山紅葉中含有糅質(zhì)，黃酮類，中性樹脂，酸性樹脂，油脂和揮發(fā)油等。其中含有揮 發(fā)油0.3%-5.0%,其中主要成分為杜鵑酮（大耗牛兒酮、耗牛兒酮、吉馬酮），屬于倍平菇 化合物，占總揮發(fā)油的40%折光率為1.500-1.520，熔點56-57 C ,相對密度0.935-0.950水蒸氣蒸儲提取法和破碎細胞壁超臨界 CO2萃取法所得的揮發(fā)油有很大的差異。前者 為淡

17、黃色液體，而破碎細胞壁超臨界 CO2萃取法所得的為淺黃棕色的浸膏狀固體，但二者 均為辛辣氣味?，F(xiàn)將破碎細胞壁超臨界 CO2萃取法所得的為淺黃棕色的膏狀固體再次經(jīng)過 水蒸氣蒸儲提取可以得到黃色油狀的液體，下面就三者的基本性質(zhì)進行分析。2.3.1 折光率的考察72.3.1.1 水蒸氣蒸儲法所得揮發(fā)油折光率的考察吸取少量水蒸氣蒸儲法所得的揮發(fā)油，用阿貝折光儀測得折光率為1.500-1.520之間c2.3.1.2 預破碎細胞壁超臨界CO2萃取法所得浸膏折光率的考察由于它是浸膏狀固體，可以加熱至70 C使之溶解，在此情況下測得的折光率在1.510-1.530 之間。2.3.1.3 預破碎細胞壁超臨界 C

18、O2萃取法所得浸膏再經(jīng)過水蒸氣蒸儲所得揮發(fā)油折光率的考察吸取少量所得揮發(fā)油，用阿貝折光儀測得折光率在1.500-1.520 之間。2.3.2 溶解性的考察72.3.2.1 水蒸氣蒸餾法所得揮發(fā)油溶解性的考察吸取少量所得揮發(fā)油于4 個小試管中，分別加入適量的無水乙醇，丙酮，乙醚，正己烷，均溶解。2.3.2.2 預破碎細胞壁超臨界CO 2萃取法所得浸膏溶解性的考察用玻璃棒蘸取少量所得的浸膏同樣放入4 個小試管中，加入適量的無水乙醇，丙酮，乙醚，正己烷，經(jīng)過充分的振蕩，仍然有少量的不溶物，再經(jīng)過適當?shù)募訜岷蠓娇赏耆芙狻?.3.2.3 預破碎細胞壁超臨界CO2法所得浸膏再經(jīng)過水蒸氣蒸儲所得揮發(fā)油溶解

19、性的考察吸取少量所得揮發(fā)油于4 個小試管中，分別加入適量的無水乙醇，丙酮，乙醚，正己烷，均溶解。2.3.3 顯色反應的考察62.3.3.1 水蒸氣蒸餾所得揮發(fā)油顯色反應的考察吸取少量所得揮發(fā)油0.1ml 于試管中加入乙醇0.5ml ，搖勻，再加入1%香草醛濃硫酸1-2 滴，振蕩，觀察顏色，顯紫紅色。2.3.3.2 預破碎細胞壁超臨界CO 2萃取法所得浸膏顯色反應的考察用玻璃棒蘸取少量所得的浸膏放入試管中，加入適量的乙醇使之溶解，然后加入1%香草醛濃硫酸1-2 滴，振蕩，觀察顏色，顯紫紅色，最后變?yōu)楹谧仙?.3.3.3 預破碎細胞壁超臨界CO2 萃取法所得浸膏再經(jīng)過水蒸氣蒸餾所得揮發(fā)油顯色反應

20、的考察吸取少量所得揮發(fā)油0.1ml 于試管中加入乙醇0.5ml ，搖勻，再加入1%香草醛濃硫酸1-2 滴，振蕩，觀察顏色，顯紫紅色，最后變?yōu)楹谧仙?.3.4 薄層分析薄層層析是一種微量，快速，簡便的層析法，它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點。一方面適用于小量樣品（幾到幾十微克，甚至 0.01的分離；另一方面若在制作薄層板時，把吸附層加厚，將樣品點成一條線，則可分離多達500mg的樣品。因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。2.3.4.1 配制0.3%的羧甲基纖維素鈉溶液用電子天平精密稱取竣甲基纖維素鈉固體粉末3.0g,置于大燒杯中，加入1

21、000ml蒸餾水。由于羧甲基纖維素鈉不容易溶解，可微加熱使其溶解。溶解后靜置24 小時，然后取上清液用脫脂棉過濾。如有必要，需要進行二次過濾。2.3.4.2 制作硅膠板用電子天平稱取硅膠1.0g,置于燒杯中，加入已經(jīng)配置好的0.3%的竣甲基纖維素鈉溶液3.0ml,調(diào)成糊狀，將調(diào)成糊狀的吸附劑懸液倒在清潔的玻璃板上，輕敲玻璃板的底 部，使其均勻流布在玻璃板上從而獲得均勻的液層，將玻璃板平放晾干，然后于105 活化 30 分鐘。2.3.4.3 薄層層析點樣，展開，顯色取分別經(jīng)過精制的水蒸氣蒸餾法所得的揮發(fā)油和破碎細胞壁超臨界CO2 萃取法所得的淺黃棕色的膏狀固體再次經(jīng)過水蒸氣蒸儲提取得到的揮發(fā)油0

22、.1ml，加入同樣少量的乙醴，振蕩，溶解。取硅膠板，在距離一端1cm處用鉛筆輕畫一條直線作為起始線，于起始線分別點上兩種揮發(fā)油。將硅膠板置于裝有正己烷- 乙酸乙酯（14： 1）的層析缸中，經(jīng)過展開，取出，晾干后，用2%香草醛濃硫酸顯色，晾干后，斑點則顯現(xiàn)出來，結果見圖3。2.3.5 預破碎細胞壁超臨界CO 2所得浸膏的粗分析8將破碎細胞壁超臨界CO2 萃取得到的揮發(fā)油再次經(jīng)過水蒸汽蒸餾提取后，圓底燒瓶中有不溶解于水的深棕色的油狀液體，漂浮于水之上，冷卻即凝固，但是溶解于無水乙醇。為確定它是否是蠟質(zhì)，做了以下實驗進行分析。將水蒸氣蒸餾提取后剩下的固體置于燒杯中，將2 倍量的無水乙醇加入其中，超聲

23、處理使其完全溶解。加入5的無水乙醇洗滌數(shù)次。濾渣為白色固體，濾液為深褐色。濾渣在室溫條件下干燥后測定熔點，熔點在140左右，可以確定雜質(zhì)中含有蠟質(zhì)成分。由于滿山紅葉中主要含有揮發(fā)油和黃酮類物質(zhì)，所以需要確定雜質(zhì)中是否含有黃酮類物質(zhì)。鑒別總黃酮用鹽酸-鎂粉反應，取少量濾液于試管中，加1.0ml 乙醇，再加入少許鎂粉振搖后，滴加幾滴濃鹽酸，1-2 分鐘內(nèi)無任何反應，所以濾液內(nèi)不含有黃酮類物質(zhì)，為了進一步證實破碎細胞壁超臨界CO2 萃取法萃取物中是否有黃酮類物質(zhì)，取適量破碎細胞壁超臨界CO2萃取法萃取物于試管中，加入鹽酸、鎂粉，也無變化。所以破碎細胞壁超臨界CO2萃取法萃取物中不含有黃酮類物質(zhì)。2.

24、4 氣相色譜-質(zhì)譜分析2.4.1 揮發(fā)油的精制將破碎細胞壁超臨界CO2萃取法所得的淺黃棕色的膏狀固體再次經(jīng)過水蒸氣蒸儲提取 得到黃色油狀的液體取出置入尖底燒瓶中，放入無水硫酸鈉直到無晶體生成(水已被脫去)， 再倒入適當量的乙醴輕輕振蕩，靜置，將上清夜取出放置另一個尖底燒瓶中，如此 3-5次, 直到將晶體上的揮發(fā)油全部清洗下來。將盛有乙醴及揮發(fā)油混合物的尖底燒瓶裝在旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)儀上，在沒有真空度的情況下 35c旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，直到乙醴揮發(fā)完為止。將尖底燒瓶中殘留 的揮發(fā)油取出，放在容器中，密封好，送往黑龍江大學分析測試中心檢測。2.4.2 色譜條件儀器型號：Agilent6890-5973N氣相色譜-質(zhì)

25、譜聯(lián)用儀。氣相色譜條件：色譜柱：HP-5(50m*0.32mm*0.52用)程序升溫：60°C, 5OC/min 至U 150OC(5min), 3OC/min到220OC(20min);汽化室溫度：280七；分流進樣：分流比400: 1;進樣量：0.5 質(zhì)譜條件：離子源溫度：230OC;離子源電壓：70ev;離子掃描范圍：12-500;質(zhì)量分析器 (四極桿)；溫度：1500c3實驗結果3.1 最佳工藝優(yōu)化預破碎細胞壁超臨界 CO萃取滿山紅揮發(fā)油，以提取率為指標，以萃取壓力、萃取溫 度、藥材粒度及分離器I的壓力為因素，見表5。表5正交實驗結果及分析ABCD提取率(%111110.57

26、77212221.140313331.349414440.8739521230.5933622143.050723412.783824321.890931344.1591032433.0081133123.0911234213.6671341422.0991442315.5821543242.9381644131.255K13.9417.4297.97412.61K28.31612.788.3388.220K313.9310.1612.986.205K411.877.6868.76411.02k10.98521.8581.9933.152k22.0793.1952.0852.055k33.48

27、12.5403.2451.551k42.9691.9212.1912.755由表5分析比較各個因素對萃取工藝的影響的主次關系為：(A)萃取壓力(D)分離器I壓力 (B)萃取溫度(C)粒度。最佳萃取條件為 A3B2CD。由于采用超臨界CO2萃取法所得到的揮發(fā)油為浸膏狀， 現(xiàn)在采用水蒸氣蒸儲法進行二 次提取，以收油率為指標，以萃取壓力、萃取溫度、藥材粒度及分離器 I的壓力為因素， 見表6。表6正交實驗結果及分析ABCD收油率(%111110.08212220.08313330.10414440.10521230.11622140.21723410.21824320.15931340.2810324

28、30.221133120.201234210.251341420.121442310.381543240.201644130.10K10.360.590.590.92K20.850.890.640.55K30.950.710.910.53K40.800.600.650.79k10.090.150.150.23k20.210.220.160.14k30.240.180.230.13k40.200.150.160.20由表6將破碎細胞壁超臨界CO2萃取法所得的為淺黃棕色的膏狀固體再次經(jīng)過水蒸氣 蒸儲提取得到揮發(fā)油的收油率的實驗結果及分析，各個因素對萃取工藝的影響的主次關系 為：(A)萃取壓力(D)

29、分離器I壓力(C)粒度(B)萃取溫度，最佳萃取條件為 A3B2GD。由表5、6的正交實驗及結果分析綜合確定最佳的萃取條件是ARGD即萃取壓力14MPa粒度80目、萃取溫度40C、分離器I壓力4MPa確定最佳工藝的條件后，按照最佳工藝的條件進行實驗，稱取已粉碎至80目的滿山紅藥材120g,設定的萃取壓力為14MPa萃取溫度是40C,分離器I壓力是4MPa重復3 次，記錄每次得到的產(chǎn)品的量，浸膏的平均收率為3.330%,浸膏再次水蒸氣蒸儲提取得到的揮發(fā)油收率為0.26%。3.2 定性鑒別結果12圖3兩種滿山紅提取物的薄層層析圖1 破碎細胞壁超臨界 CO2萃取法再次經(jīng)過水蒸氣蒸儲提取所得揮發(fā)油2 水

30、蒸氣蒸儲提取法直接所得的揮發(fā)油表7定性實驗結果分析及對比水蒸氣蒸儲提取破碎細胞壁超臨界CO2萃取再次水蒸汽蒸儲提取提取時間（h）61.56油的狀態(tài)淺黃色油狀液體淺黃色浸膏狀固體黃色油狀液體油的氣味的的的收率0.23.300.26六率1.500-1.5201.510-1.5301.500-1.520溶于乙醍等后機溶劑溶解溶解溶解顯色反應紫紅色紫紅色-暗紫紅色紫紅色-暗紫紅色薄層層析（斑點）6*6由表5、6的實驗及結果不難發(fā)現(xiàn)，破碎細胞壁超臨界CO2萃取法所得的浸膏的量與破碎細胞壁超臨界CO2 萃取得到的浸膏再次經(jīng)過水蒸氣蒸餾提取后得到的揮發(fā)油的量成正比，即：浸膏與揮發(fā)油的量成正比。由表 7 可知

31、三者相比較，其在油的氣味、折光率、溶解性、顯色反應、薄層層析幾個方面大體一致。但是在提取的時間上破碎細胞壁超臨界CO2萃取法有很大的優(yōu)勢；在收率方面破碎細胞壁超臨界 CO2萃取法的浸膏有優(yōu)勢，但其還需要后處理，處理后的收率與傳 統(tǒng)水蒸氣蒸儲法基本相同：在揮發(fā)油的狀態(tài)方面破碎細胞壁超臨界CO2萃取法所得到的浸膏含有大量的蠟質(zhì)和其它雜質(zhì)，而傳統(tǒng)的水蒸氣蒸餾提取法所得到的揮發(fā)油較純。由此可見：破碎細胞壁超臨界 CO2萃取法在某些方面有一定的優(yōu)勢；然而在純度方面還有很大的 弊端有待于改進。3.3 氣相色譜 -質(zhì)譜結果分析由表8、 9 分析可知兩種提取方法所得物質(zhì)含量在2%以上的十種化合物的種類和含量基

32、本相同。水蒸氣蒸餾法所得揮發(fā)油其主要成分為石竹烯；石竹烯氧化物；1,1,4,8-四甲基-4,7,10,-環(huán)H一碳三烯；7-甲基-4-乙基乙烯基-1,2,3,4,4a,5,6,8a八氫蔡；4a,8-二甲基-2（1-甲基乙烯基乙基）-1,2,3,4,4a,5,6,8a，l氫蔡；4甲基-1-甲基乙烯基-7- （1-甲基乙烯基乙基）-十氫萘，它們約占57.1%。超臨界二氧化碳提取法所得揮發(fā)油主要成分也是以上幾種化合物含量約59.3%。另外，兩種提取方法所得的揮發(fā)油相比較：雖然兩者的成分總數(shù)差別不大，但是破碎細胞壁超臨界二氧化碳萃取法所得揮發(fā)油有九種化合物是水蒸氣蒸餾法沒有提取出來的，甚至有幾個是數(shù)據(jù)庫

33、沒有的化合物。揮發(fā)油中還有很多萜醇類化合物在1%-0.1%之間，此外還有少量的酯類、烴類化合物。與沒有破碎細胞壁的超臨界二氧化碳比較：萃取壓力升高所得到的化合物的種類增多。表8水蒸氣蒸儲提取的揮發(fā)油的氣相色譜-質(zhì)譜結果及分析峰號r.t時間化合物名稱分子式分子量相對含量（）12.721*0.63128.603alpha -兼烯C10H16136.131.99539.042茨烯C10H16136.130.36249.807beta-兼烯C10H16136.130.48959.960beta-月桂烯C10H14134.110.132610.8321-甲基-4異丙基-1,3-環(huán)己二烯C10H16136

34、.130.047711.0521-甲基-2-異丙基苯C10H14134.110.325811.185D-芝烯C10H16136.130.960911.2653,7-二甲基-1,3,6-辛三烯C10H16136.130.1361012.0231-甲基-4異丙基-1,4-環(huán)己二烯C10H16136.130.4451112.915(+)-4-曹烯C10H16136.130.1021213.001*0.3161313.1013,7-二甲基-1,6-二辛烯-3-醇C10H18O154.140.2831413.208壬醛C9H18O142.140.0781513.560*0.8381615.5904-甲基

35、-1-異丙基-3-環(huán)己烯-1-醇C10H18O154.140.1881715.949(+)-.alpha.Terpineol (p-menth-1-en-8-ol)C10H18O154.140.7101817.107*0.1131918.6711,7,7-三甲基-雙環(huán)2.2.1庚-2-醇乙酸酯C12H20O196.152.5942021.751依蘭烯C15H24204.190.5032121.931柯巴烯C15H24204.191.0122222.011*0.1662322.3773a-甲基-6-亞甲基-1-（1-異丙基）-環(huán)1,2:3,4-十氫雙環(huán)戊烯C15H24204.190.128242

36、3.222Di-epi-alpha-雪松烯C15H24204.190.7142523.342異石竹烯C15H24204.190.4872623.7011S,2S,5R-1,4,4-三甲基C15H24204.190.1892724.014石竹烯C15H24204.1924.0812824.2933,7,11-三甲基-1,3,6,10-十二碳四烯C15H24204.190.5752924.7856,10-二甲基-5,9-H一碳二烯-2-酮C15H24204.191.4903024.9397,11-二甲基-3-甲基乙烯基-1,6,10-十二碳三烯C13H22O204.190.5163125.178蛇

37、麻烯C15H24194.170.5053225.4711,1,4,8-四甲基-4,7,10-環(huán)H一碳三烯C15H24204.1913.2693326.063土青木香烯C15H24204.190.1193426.2637-甲基-4-甲基乙烯基-1,2,3,4,4a,5,6,8a- /I氫紊C15H24204.195.2143526.4224,7-二甲基-1-異丙基-1,2,4a,5,6,8a-六氫茶C15H24204.190.1823626.8684a-甲基-1-甲基乙烯基-7-（1-甲基乙烯基乙基）十氫茶C15H24204.194.3583727.0687-甲基-4-甲基乙烯基-1,2,3,4

38、,4a,5,6,8a- /I氫紊C15H24204.190.7013827.2214a,8-二甲基-2-（1-甲基乙烯基乙基）-1,2,3,4,4a,5,6,8a- /I氫紊Ci5H24204.196.3053927.5472,3,4,7,8,8a,-六氫-3,6,8,8a-四甲基-1H-3a,7-亞甲基C15H24204.190.4994027.9201-異丙基-7-甲基-4-甲基乙烯基-1,2,3,4a,5,6,8a-八氫茶C15H24204.191.5704128.2264, 7-二甲基-1-異丙基-1,2,3,5,6,8a-六氫茶Ci5H24204.193.1364228.4194,4

39、,8-三甲基-9-亞甲基-1, 4-亞甲基十氫奧Ci5H24204.190.3924328.6711,6-二甲基-4-異丙基-1,2,3,4,4a,7-六氫茶C15H24204.190.2164428.898表圓線藻烯Ci5H24204.190.5024529.177*0.6254629.6701,2,3,6-四甲基雙環(huán)2.2.2辛-2-烯C15H24164.161.3794730.495*1.1014830.8671,5-二甲基-6-甲基乙烯基螺2.4庚烷C10H16136.130.7654931.054石竹烯氧化物Ci5H24O220.185.8365031.652檀紫三烯C10H1613

40、6.131.5705132.1183,7-二烯-1,5,5,8-四甲基-氧環(huán)9,1,0-十二烷Ci5H24O220.184.2185232.458*0.5755332.7101,1,7,7a-四甲基-1a,2,4,5,6,7,7a,7b-八氫-1-環(huán)丙秦-4-醇C15H24O220.180.5795432.923*1.3825533.2561,7a-甲基-4-1-丙烯基卜1,4-亞甲基-1H-苛Ci5H24204.190.6205633.4365-甲基-2-異丙基-9-甲基乙烯基雙環(huán)4.4.0癸-1-烯C15H24204.190.1735733.748alpha alpha .4a-三甲基-8

41、-甲基乙烯基十氫茶-2-甲醇C15H26O222.200.6685833.835alpha . alpha,4a,8-四甲基-1,2,3,4,4a,5,6,8a-八氫紊-2-甲醇Ci5H26。222.202.1075934.267*0.2006034.5931,6-二甲基-4-異丙基茶C15H18198.140.1206137.528*0.3236242.824*0.189表9預破碎細胞壁超臨界 CO萃取滿山紅揮發(fā)油的氣相色譜 -質(zhì)譜結果及分析r.t(%)18.603alpha -兼烯CioH 16136.130.062211.178D-芝烯C10H 16136.130.115312.0171

42、-甲基-4異丙基-1,4-環(huán)己二烯CioH 16136.130.048413.001*0.127513.560*0.337615.5974-甲基-1-異丙基-3-環(huán)己烯-1-醇C10H18O154.140.062715.949(+)-.alpha.Terpineol (p-menth-1-en-8-ol)C10H18O154.140.291817.107*0.067918.6711,7,7-三甲基-雙環(huán)2.2.1庚-2-醇乙酸酯Ci2H20O2196.151.5781021.758依蘭烯C15H 24204.190.4031121.938柯巴烯C15H24204.190.9641222.384

43、*0.1141323.222Di-epi-a-雪松烯C15H 24204.190.5451423.342異石竹烯C15H 24204.190.4741523.581丁香醇C15H 24204.190.1041623.7081S,2S,5R-1,4,4-三甲基C15H 24204.190.2321724.014石竹烯C15H 24204.1920.4101824.2933,7,11-三甲基-1,3,6,10-十二碳四烯C15H 24204.190.5241924.7866,10-二甲基-5,9-H一碳二烯-2-酮C13H22O194.171.4382024.9457,11-二甲基-3-甲基乙烯基

44、-1,6,10-十二碳三烯C15H 24204.190.4942125.185蛇麻烯C15H24204.190.5682225.4711,1,4,8-四甲基-4,7,10-環(huán)H一碳三烯C15H24204.1911.6132326.070土青木香烯C15H 24204.190.2142426.2697-甲基-4-甲基乙烯基-1,2,3,4,4a,5,6,8a- /I氫紊C15H 24204.195.7872526.4294,7-二甲基-1-異丙基-1,2,4a,5,6,8a-六氫茶C15H24204.190.2592626.8224a-甲基-1-甲基乙烯基-7-（1-甲基乙烯基乙基）十氫茶C15

45、H24204.196.5182727.0817-甲基-4-甲基乙烯基-1,2,3,4,4a,5,6,8a- /I氫紊C15H 24204.190.7112827.2414a,8-二甲基-2-（1-甲基乙烯基乙基）-1,2,3,4,4a,5,6,8a- /I氫茶C15H24204.198.9762927.554*0.3083027.9331-異丙基-7-甲基-4-甲基乙烯基-1,2,3,4a,5,6,8a-八氫茶C15H 24204.192.1523128.1196-甲基乙烯基-3-（1,5-二甲基-4-己烯）環(huán)己烯C15H 24204.190.1133228.2324, 7-二甲基-1-異丙基

46、-1,2,3,5,6,8a-六氫茶C15H24204.193.9393328.425*0.4203428.6781,6-二甲基-4-異丙基-1,2,3,4,4a,7-六氫茶C15H 24204.190.1903528.904*0.6013629.184*0.7153729.6761,2,3,6-四甲基雙環(huán)2.2.2辛-2-烯C12H20164.161.9913829.976*0.1703930.501*1.5124030.7541,1,7-三甲基-4-亞甲基-1-環(huán)丙十氫奧CioH 16136.130.1984130.8811,5-二甲基-6-甲基乙烯基螺2.4庚烷C10H 16136.130

47、.9794231.060石竹烯氧化物Ci5 H24。220.185.9334331.420*0.1834431.659檀紫三烯C10H 16136.132.0154532.1253,7-二烯-1,5,5,8-四甲基-氧環(huán)9,1,0-十二烷C15H24O220.184.2924632.464*0.7984732.7241,1,7,7a-四甲基-1a,2,4,5,6,7,7a,7b-八氫-1-環(huán)丙秦-4-醇C15 H24。220.180.6674832.930*1.9384933.243*0.4005033.2631,7a-甲基-4-1-丙烯基卜1,4-亞甲基-1H-苛C15H 24204.190.6055133.4495-甲基-2-異丙基-9-甲基乙烯基雙環(huán)4.4.0癸-1-烯C15H24204.190.3585233.762alpha alpha .4a-三甲基-8-甲基乙烯基十氫茶-2-甲醇C15 H26。222.201.2955333.848alpha . alpha,4a,8-四甲基-1,2,3,4,4a,5,6,8a-八氫紊-2-甲醇C15 H26。222.203.3035434.281*0.4385534.6001