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文檔簡介
1、選修一專題一微生物的利用一、選擇題 1.在釀酒生產(chǎn)上,常向發(fā)酵罐中加少量尿素,其目的是 ()A.作為碳源,為酵母菌提供能源物質(zhì) B作為碳源,用于酵母菌合成代謝產(chǎn)物C.作為氮源,用于酵母菌合成蛋白質(zhì)和核酸 D作為氮源,用于酵母菌合成代謝產(chǎn)物解析:在釀酒生產(chǎn)上,向發(fā)酵罐中加入少量尿素是為酵母菌提供氮源,用于酵母菌繁殖過程中合成蛋白質(zhì)和核酸。釀酒生產(chǎn)上所得到的酵母菌的代謝產(chǎn)物是酒精,酒精的產(chǎn)生不需要氮。答案:C2.關(guān)于滅菌和消毒的不正確理解是 ()A.滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B.消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是完全相同的C.接種環(huán)用灼燒法滅菌D.常用滅菌方法有灼燒法、干熱滅菌法、高壓蒸汽滅
2、菌法解析:消毒是使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子),滅菌則是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。答案:B3.用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的對照是 () A.未接種的選擇培養(yǎng)基 B未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C.接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 D接種了的選擇培養(yǎng)基解析:將菌液稀釋相同的倍數(shù),在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目,因此,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照。對照遵循的原則是單一變量,所以與選擇培養(yǎng)基一樣接種、培養(yǎng)。答案:C,4.現(xiàn)有兩種固體培養(yǎng)基,已知其配制時(shí)所加的成分和含
3、量如下表,用這兩種培養(yǎng)基分別去分離土壤中的兩種微生物,你認(rèn)為它們適于分離 ()成分KH2PO4MgSO4·7H2ONaClCaSO4·2H2OCaCO3葡萄糖純淀粉甲培養(yǎng)基0.02 %0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培養(yǎng)基0.02 %0.02%0.02%0.01%0.5%A.甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌;乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌B.甲培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌;乙培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌C.甲培養(yǎng)基適于分離酵母菌;乙培養(yǎng)基適于分離真菌D.甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型共生細(xì)菌;乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型共生固氮菌解析:固氮菌中能獨(dú)立生存的是自生
4、固氮菌, 甲培養(yǎng)基中含有的葡萄糖和淀粉是有機(jī)物,由此推出該培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型的自生固氮菌;乙培養(yǎng)基中不含有機(jī)碳源,所以可用來分離培養(yǎng)自養(yǎng)型的自生固氮菌。答案:B5.分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過程中操作有誤的是 ()A.經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上B.富集培養(yǎng)這一步可省略,但培養(yǎng)的纖維素分解菌少C.經(jīng)稀釋培養(yǎng)后,用剛果紅染色D.對照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上解析:經(jīng)選擇培養(yǎng)后,再經(jīng)稀釋,才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上;富集培養(yǎng)可省略;經(jīng)稀釋培養(yǎng)后,用剛果紅染色;設(shè)置對照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的微生物。答案:A,6.在加入剛果紅的培養(yǎng)基
5、中出現(xiàn)透明圈的菌落是 () A.分解尿素的細(xì)菌 B硝化細(xì)菌 C.分解纖維素的細(xì)菌 D乳酸菌解析:分解纖維素的細(xì)菌能將纖維素分解,剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。答案:C二、非選擇題,7.某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計(jì)數(shù)。請回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題:(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了_和_。除此之外,培養(yǎng)基還必須含有基本成分是_和_。(2)對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,應(yīng)該采用的方法是_。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于_中培養(yǎng),培養(yǎng)的溫度設(shè)
6、定在37。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠,還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種_作為對照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(4)培養(yǎng)20小時(shí)后,觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落,這說明湖水樣品中有_種細(xì)菌。一般說來,菌落總數(shù)越多,湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_。(5)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度,可以用于篩選耐_細(xì)菌,這種培養(yǎng)基被稱為_。解析:考查微生物培養(yǎng)的有關(guān)知識。微生物生長繁殖過程中需要氮源、碳源、水分、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì),有些微生物還需要特殊營養(yǎng)物質(zhì);培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌,該過程一般在高壓蒸汽滅菌鍋中進(jìn)行;影響微生物生長繁殖的因素主要是營養(yǎng)和溫度,因此培養(yǎng)微生物時(shí)除提供適宜的營養(yǎng)外,還要提供合適的溫度;為排除無關(guān)變量
7、的影響,該實(shí)驗(yàn)要設(shè)立空白對照,可以用無菌水代替樣品來進(jìn)行對照;在培養(yǎng)基中加入食鹽可以選擇耐鹽菌,如金黃色葡萄球菌等,這種培養(yǎng)基叫做選擇培養(yǎng)基。答案:(1)氮源(碳源不作要求)碳源無機(jī)鹽水,(2)高壓蒸汽滅菌(3)恒溫培養(yǎng)箱無菌水(4)多高(5)鹽(或NaCl)選擇培養(yǎng)基8.科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白。這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力,受到研究者重視。(1)分離該抗菌蛋白可用電泳法,其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的_、大小及形狀不同,在電場中的_不同而實(shí)現(xiàn)分離。(2)可用金黃色葡萄球菌來檢驗(yàn)該蛋白的體外抗菌特性??咕鷮?shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長提供_和_。(3)分別在加入和未加
8、入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時(shí)間后,比較兩種培養(yǎng)基中菌落的_,確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。(4)細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有_和_。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,對使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行_處理。解析:本題考查生物技術(shù)實(shí)踐中的基礎(chǔ)知識,知識點(diǎn)覆蓋面大,答案容易組織。有關(guān)物質(zhì)的分離與提取方法,涉及分離蛋白質(zhì)的電泳法電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。有關(guān)微生物培養(yǎng)基的成分、種類與作用,涉及牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中的牛肉膏與蛋白胨分別為微生物提供碳源、氮源和維生素。有關(guān)微生物的接種和培養(yǎng)方法,常采用平板劃線法和稀釋涂
9、布平板法對細(xì)菌進(jìn)行接種。為防止細(xì)菌的污染,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后要對用過的培養(yǎng)基作滅菌處理。答案:(1)電荷(帶電情況)遷移速度(2)碳源氮源(3)數(shù)量(4)平板劃線法稀釋涂布平板法(稀釋混合平板法)滅菌9.某學(xué)校打算開辟一塊食用菌栽培基地,以豐富學(xué)生的勞動(dòng)技術(shù)課內(nèi)容。首先對食用菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清掃和消毒處理,準(zhǔn)備食用菌栽培所需的各種原料和用具,然后從菌種站購來各種食用菌菌種。請回答下列問題:(1)對買回來的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),首先制備試管培養(yǎng)基,寫出制備固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需的原料:_、_、_、_、_。其中提供氮源的是_;提供碳源的主要物質(zhì)是_。(2)微生物在生長過程中對各種成分所需量不同,配制培養(yǎng)基時(shí)各
10、成分要有合適的_。在燒杯中加入瓊脂后要不停地_,防止_。(3)將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中,加棉塞后若干個(gè)試管一捆,包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入_中滅菌,壓力_kPa,溫度_,時(shí)間_。滅菌完畢拔掉電源,待鍋內(nèi)壓力自然降到0時(shí),將試管取出。如果棉塞上沾有培養(yǎng)基,此試管應(yīng)_。(4)使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)注意,先向鍋內(nèi)倒入_。把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉。(5)從一支試管向另一支試管接種時(shí)注意,接種環(huán)要在酒精燈_(“內(nèi)”或“外”)焰滅菌,并且待接種環(huán)_后蘸取菌種,試管口不能離開酒精燈火焰附近,將接種的試管在適溫下培養(yǎng),長成菌落后放入_冰箱中保藏。解析:本題主要考查對食用菌菌種擴(kuò)大
11、培養(yǎng)并保存的過程中涉及到的培養(yǎng)基配制、滅菌及菌種轉(zhuǎn)移和保藏的一些基礎(chǔ)知識。,(1)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方,牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂蒸餾水5.0 g10.0 g5.0 g20.0 g定容至1 000 mL由配方可知所需的原料;凡能提供所需氮元素的物質(zhì)為氮源,牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。(2)在配制培養(yǎng)基時(shí)營養(yǎng)要協(xié)調(diào),按所培養(yǎng)微生物對各種成分的需求確定;在加入瓊脂后,要不斷攪拌,防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。(3)玻璃器皿的滅菌應(yīng)用高壓蒸汽滅菌鍋,在壓力為100 kPa、溫度為121條件下,滅菌1530 min。若棉塞上沾有培養(yǎng)基,易被雜菌污染,應(yīng)作廢。(4)不加水,無從談起高壓蒸汽,還有可能損壞
12、設(shè)備。(5)酒精燈外焰溫度高,滅菌效果好。灼燒后待冷卻再蘸取菌種,否則會(huì)燙死菌種造成實(shí)驗(yàn)失敗。答案:(1)牛肉膏蛋白胨水無機(jī)鹽瓊脂蛋白胨、牛肉膏牛肉膏(2)比例攪拌瓊脂糊底引起燒杯破裂(3)高壓蒸汽滅菌鍋1001211530 min廢棄(4)適量水(5)外冷卻410.富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一。主要是指利用不同微生物間生命活動(dòng)特點(diǎn)的不同,制定環(huán)境條件使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長,從而使其在群落中的數(shù)量大大增加,人們能夠更容易地從自然界中分離到所需的特定微生物。富集條件可根據(jù)所需分離的微生物的特點(diǎn),從物理、化學(xué)、生物及綜合多個(gè)方面進(jìn)行選擇,如溫度、pH、紫外線、高壓、光照、氧氣
13、、營養(yǎng)等許多方面。下圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解對羥基苯甲酸的微生物的實(shí)驗(yàn)過程。(1)本實(shí)驗(yàn)所需培養(yǎng)基為_,碳源為_。(2)實(shí)驗(yàn)原理是_。(3)重復(fù)培養(yǎng)的目的是_。(4)的菌落中大部分是降解_的微生物。(5)為_組,為_組,設(shè)置的目的是_。(6)采用_法,接種到的培養(yǎng)基中,在操作過程中為防止污染應(yīng)注意的事項(xiàng)是_。 解析:富集培養(yǎng)的培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基,可用于具有某種代謝特點(diǎn)的微生物,本題就是為了選擇出能分解對羥基苯甲酸的微生物。該實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)基的碳源為對羥基苯甲酸;全 過程包括篩選擴(kuò)大培養(yǎng)純化鑒定。答案:(1)選擇培養(yǎng)基對羥基苯甲酸(2)利用以對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,經(jīng)富
14、集培養(yǎng),選擇出能降解對羥基苯甲酸的微生物(3)增大分解對羥基苯甲酸微生物的比例(4)對羥基苯甲酸(5)對照實(shí)驗(yàn)說明通過富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物(6)單細(xì)胞挑取接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌,燒紅的接種環(huán)在空氣中冷卻,同時(shí)打開皿蓋挑取菌種接種到試管中,并塞好棉塞,接種環(huán)在火焰上灼燒,殺滅殘留物11.(2010·廣東廣州六中月考)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究上,常常需要進(jìn)行微生物的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)。 (1)如圖是利用_法進(jìn)行微生物接種,把聚集的菌種逐步_分散到培養(yǎng)基的表面。(2)分析下面培養(yǎng)基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、H2O。若此培養(yǎng)基用于
15、培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌,則應(yīng)除去上述_成分,并加入_物質(zhì),以補(bǔ)充_源。如果要鑒別自來水中的大腸桿菌是否超標(biāo),至少要加入_和_。(3)三位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細(xì)菌數(shù)量。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中,得到以下統(tǒng)計(jì)結(jié)果:,甲同學(xué)涂布了兩個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是236和260,取平均值248;,乙同學(xué)涂布了三個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是210、240和250,取平均值233;,丙同學(xué)涂布了三個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是21、212和256,取平均值163;,在三位同學(xué)的統(tǒng)計(jì)中,只有一位同學(xué)的統(tǒng)計(jì)是正確的,指出另兩位同學(xué)的統(tǒng)計(jì)為什么不正確。(4)若在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值
16、為233,那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.2 mL)_。答案;(1)平板劃線稀釋(2)NaNO3尿素和葡萄糖氮、碳伊紅美藍(lán)(3)甲同學(xué)只涂布了兩個(gè)平板,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說服力不夠;丙同學(xué)雖然涂布了三個(gè)平板,但其中一個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn),說明操作過程出現(xiàn)錯(cuò)誤,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)缺乏正確性。(4)1.17×10912.有些微生物能合成纖維素酶,通過對這些微生物的研究和應(yīng)用,使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精,用纖維素酶處理服裝面料等。纖維素酶可以通過微生物發(fā)酵生產(chǎn),為了提高酶的產(chǎn)量,請你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn),利用誘變育種的方法,獲得產(chǎn)生纖維素酶較多的菌株。(1)寫出實(shí)驗(yàn)步驟
17、:將培養(yǎng)好的生產(chǎn)菌株分成兩組,_。制備含有_的固體培養(yǎng)基。_。_。,(2)預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論:誘變組中菌落周圍的透明圈比對照組_,說明_。誘變組中菌落周圍的透明圈與對照組_,說明_。誘變組中菌落周圍的透明圈比對照組小,說明_。 (3)若獲得純凈的高產(chǎn)菌株,需進(jìn)行_或_操作。解析:本題主要考查了學(xué)生設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的能力和剛果紅染色法。,(1)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)要遵循對照原則和單一變量原則,且要得到高產(chǎn)纖維素酶的菌株,先進(jìn)行誘變處理,由于突變是不定向的,所以要經(jīng)過篩選。實(shí)驗(yàn)分兩組,實(shí)驗(yàn)組用誘變劑處理,對照組不進(jìn)行處理。要檢測纖維素分解菌產(chǎn)生纖維素酶的能力,應(yīng)用含纖維素的鑒別培養(yǎng)基,根據(jù)形成的透明圈的大小,來判斷產(chǎn)酶能力的高低。整個(gè)過程中,注意對照組和實(shí)驗(yàn)組的其他條件完全相同。,(2)預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果,誘變組和對照組相比,透明圈大小可能相同,可能較大,可能較小,所以需要分情況討論,當(dāng)然,真
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