10金免疫技術(shù)

1、金免疫技術(shù)（一）單項選擇題（A型題）1、免疫技術(shù)由Faulk和Taylor始創(chuàng)，最初用丁A .金免疫電鏡染色B.金（銀）免疫光鏡染色C.斑點免疫滲濾試驗D.斑點金免疫層析試驗E.金免疫定量檢測2、有關(guān)膠體金顆粒大小特性的正確描述A.膠體金顆粒越大，入max越小B.膠體金溶液呈色與膠體金顆粒大小無關(guān)C.膠體金顆粒越大，呈色越深D.膠體金顆粒大小與制備時檸檬酸三鈉加入量無關(guān)E.膠體金顆粒大小與制備時檸檬酸三鈉加入量呈正比3、同時檢定膠體金顆粒大小和均一度的方法是A .觀察膠體金溶液的顏色B.分光光度計掃描入mnxC.掃描電鏡D.對流免疫電泳E.免疫電泳4、在免疫金的制備原理中，膠體金與蛋白質(zhì)結(jié)合力

2、為A.肽鍵結(jié)合力B.二硫鍵結(jié)合力C.氫鍵結(jié)合力D .靜電引力E.疏水作用5、關(guān)丁膠體金保存的描述，正確是A.置丁潔凈的玻璃器也B.加防腐劑不利丁保存C.使用時為提高標(biāo)記效率不必低速率心去除凝集顆粒D保存過程產(chǎn)生少量膠體金凝集顆粒就會影響以后膠體金的標(biāo)記E.應(yīng)丁干燥處避光保存6、當(dāng)前免疫電鏡技術(shù)中應(yīng)用量廣的記物A.辣根過氧化物酶B.硝酸銀C.膠體金D.鐵蛋白E. FITC7、斑點金免疫滲濾試驗間接法測血活標(biāo)本中抗體，導(dǎo)致假陽性結(jié)果的主要原因A .血活標(biāo)本中非目的IgF的干擾B.血活標(biāo)本中非目的抗原的干擾C.洗滌不充分D.反應(yīng)時間過長E.反應(yīng)時間過短8、斑點金免疫層析試驗競爭法測小分子抗原（a）,

3、層析條的待測樣品結(jié)果判讀處應(yīng)包被A.膠體金標(biāo)記抗a抗B.標(biāo)準(zhǔn)抗原（a）C.抗免疫金抗體E.小鼠9、 免疫層析試驗乂抗體夾心法測大分子抗原（b）層析條的待測樣品結(jié)果判訊處應(yīng)包被A.膠體金標(biāo)記抗b抗B.抗b抗體C.抗免疫金抗體體D.標(biāo)準(zhǔn)抗原（b）E.人血活I(lǐng)gG10、用丁包被斑點金免疫層析試驗載體膜質(zhì)控條（線）的物質(zhì)是A .抗免疫金抗體B.人白蛋白C.待測抗原標(biāo)準(zhǔn)品D.膠體金標(biāo)記抗體E.膠體金顆粒11、關(guān)丁斑點金免疫析試驗雙抗體夾心法結(jié)果正確的判讀A.僅出現(xiàn)一條棕紅色質(zhì)控條帶者為試驗結(jié)果陽性B.出現(xiàn)兩條棕紅色條帶者為試驗結(jié)果陽性C.出現(xiàn)棕紅色質(zhì)控條帶者為試劑失效D.必須在5min內(nèi)觀察結(jié)果E.僅在

4、實驗區(qū)出現(xiàn)一條棕紅色條帶者為試驗結(jié)果陽性12、關(guān)丁斑點金免疫層析試驗競爭法結(jié)果正確的判讀A .僅出現(xiàn)一條棕紅色質(zhì)控條帶為陰性B.出現(xiàn)兩條棕紅色條帶為陽性C.無棕紅色質(zhì)控條帶出現(xiàn)為試劑失效D.都無棕紅色條帶出現(xiàn)即為陽性E.出現(xiàn)一條棕紅色條帶即為陽性13、膠體金間接免疫層析法測血活抗體，常設(shè)計成反流免疫層析法的主要目的A .縮短反應(yīng)時間B.減少樣品用量C.提高靈敏度D.提高特異性E.減少血活中非特異性免疫球蛋白對實驗結(jié)果的干攏14、關(guān)丁斑點金免疫滲濾和免疫層析實驗操作，二者相同的是A.二者均需要膠體金標(biāo)記物、洗滌液等深液試劑B.所有反應(yīng)都是在固相膜的一個固定區(qū)域完成C.反應(yīng)結(jié)果的判斷，二者均不需酶

5、促底物反應(yīng)呈色D.所有試劑均預(yù)制在膜上E.兩者結(jié)果判讀模式一樣15、斑點金免疫滲濾試驗來源丁A . RILB . dot-ELISAC.免疫層析實驗D.免疫印跡實驗E.熒光免疫組化染色16、關(guān)丁斑點金免疫層析實驗原理正確的描述A.其實驗的基本原理與dot-EISA相似B.其實驗所用的試劑均被預(yù)先固相化在濾膜上C.樣品以橫流層析通過濾紙條不同區(qū)域時，完成酶促反應(yīng)D.實驗過程須洗滌E.其競爭法試驗結(jié)果判斷以出現(xiàn)兩條沉淀線為陽性17、關(guān)丁斑點金固相膜免疫測定，下列錯誤的是A.可以適用丁定性和半定量試驗B.其示蹤物是膠體金顆粒C.免疫滲濾實驗是利用了微孔膜的毛細(xì)管作用D.免疫層析實驗是利用了微孔膜的穿

6、流性E.方法具有簡便、快速、靈敏度較高的特點18、 免疫金（銀）光鏡染色技術(shù)中，常用的金離子（Au+）還原劑為A.對苯二酚B.苯酚C.甲醇D.草酸鹽E.白磷19、關(guān)丁免疫金銀染色的描述，錯誤的是A .敏感度較單純免疫金染色高B.多用丁組織化學(xué)檢測C.利用金顆粒對銀離子的還原性D.具有定位精確的優(yōu)點E.陽性結(jié)果為橘紅色顆粒沉積20、免疫電鏡技術(shù)中，最常用的免疫染色技術(shù)A.酶標(biāo)記抗原免疫組化技術(shù)B.金免疫技術(shù)C.熒光免疫組化技術(shù)D .非標(biāo)記抗體酶免疫組化技術(shù)E.鐵蛋白標(biāo)記免疫技術(shù)21、應(yīng)用膠體金免疫層析法檢測人尿液HCG試驗中，C區(qū)應(yīng)固化的成分為A.鼠源性HCG抗原B.金標(biāo)性HCG抗體C.羊抗鼠抗

7、體D. HCG抗原E.抗HCG抗體22、免疫金（銀）染色常用丁檢測A. RFB. ANAC. T細(xì)胞及業(yè)群D.病蠹E.抗ds-DNA抗體（一）單項選擇題（A型題）12345678910ACCDACABBA111213141516171819202.膠體金：是金鹽被還原成金原子后形成的金顆粒懸:液，膠體金顆粒由一個基礎(chǔ)金核（金原子Au）及包圍在外的雙離子層構(gòu)成，緊連在表面是內(nèi)層負(fù)離子（AuCl2-），外層離子層H+則分散在膠體 金溶性中，以維持膠體金游離丁溶膠間的縣液狀態(tài)。3.免疫金：是指膠體與抗原（抗體）的結(jié)合物。4.免疫金標(biāo)記技術(shù)：是批利用膠體金顆粒標(biāo)記特異性蛋白，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體大

8、量聚 集時，肉眼可見紅色或粉紅色斑上噗，從而進(jìn)行定性或半定量檢測。四.問答題1.何謂金免疫測定技術(shù)？簡述期技術(shù)類型及原理。金免疫測定技術(shù)是指用膠體金顆粒作為標(biāo)記物進(jìn)行抗原抗體反主尖的一類免疫學(xué)測定技術(shù)，其主要技術(shù)類型有斑點金免疫滲濾試驗和金免疫層析試驗。（1）斑點金免疫滲濾試驗：在以硝酸纖維素膜為載本并包被了抗原或抗體的滲濾壯置中，依次 滴加標(biāo)本、免疫金及洗滌液，因微孔濾膜貼置丁吸水材料上，故溶淮流經(jīng)滲濾裝置與膜上的抗原或抗 體快速結(jié)合并到濃縮作用，達(dá)到快速檢測目的，陽性反應(yīng)在膜上呈現(xiàn)紅色斑點。（2）斑點金免疫層析試驗：是將膠體標(biāo)記技術(shù)和蛋白質(zhì)層析技術(shù)相結(jié)合的以硝酸纖維素膜為載體的固相膜免疫分

9、析技術(shù)，滴加在膜一端的標(biāo)本溶液受載體膜的毛細(xì)血管的作用向另一端移動，猶如層析析一般，在移動過程中被分析物與固定丁載體膜上某一區(qū)域的抗體或抗原結(jié)合而被固相化，無關(guān)物則越過該區(qū)域而被分離，然后通過膠體金的呈色條帶來判訊實驗結(jié)果。2.簡述免疫金電鏡染色技術(shù)的原理、技術(shù)要點和注意事項。（1）原理：免疫金電鏡染色技術(shù)原理是膠體金標(biāo)記物與銳網(wǎng)上待檢標(biāo)本的相應(yīng)蛋白質(zhì)發(fā)生結(jié)合 反應(yīng)，由丁膠體金顆粒具有高電子密度的特性，故金標(biāo)蛋白結(jié)合處，電鏡下可見黑褐粒，從而對細(xì)胞 膜上或細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)進(jìn)行定性與定位分析。（2）技術(shù)要點：標(biāo)本包埋：用戊二醛對標(biāo)本進(jìn)行固定，后行餓酸固定（固定膜結(jié)構(gòu)） ， 丙酮或 乙醇逐級脫水，包埋（Epon812樹脂），超薄切片（80nm），置300目銳網(wǎng)上；免疫組化染色：白 蛋白封閉，加第一抗體，孵育，PBS沖洗，卵白蛋白封閉，加第二抗體（胸部體金標(biāo)記抗IgG抗體）， 孵育，PBS沖洗，蒸僻水沖洗，醋酸雙氧鈾.枸椽酸鍋復(fù)染，電鏡觀察。（3）注意事項：以上染色步驟除活洗外，皆在滴丁蠟?zāi)ぃǚ?/p>