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1、實(shí)驗(yàn)一大、小鼠的基本實(shí)驗(yàn)操作一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?: 通過實(shí)際操作,掌握大、小鼠的一般操作方法,包括大、小鼠 的抓取和固定、性別鑒定、給藥、采血。二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:昆明小鼠 4只( 2雌2雄)、大鼠 4只(2雌2雄)、灌胃器 2個(gè)、 注射器 4個(gè)、酒精、棉球、生理鹽水、小鼠固定器 1個(gè)、大鼠固定器 1個(gè)。三、實(shí)驗(yàn)步驟1、抓取和固定1.1 抓?。鹤笫肿バ∈蟮奈哺?.2 固定:左手抓住小鼠的尾根部,讓小鼠在粗糙平面上爬行,后拉尾跟部, 右手的拇指和食指抓住小鼠兩耳及其間的頸部皮膚,小指和無名指將尾巴固 定在手掌面。1.3 同樣操作將大鼠抓取和固定2、性別鑒定:2.1 抓取和固定小鼠2.2 觀察肛門與生殖器間
2、的距離和二者之間的毛發(fā)。 雄性:距離長(zhǎng),毛發(fā)密(和 其 他部位一樣);雌性:距離短,毛發(fā)稀疏。2.3 同樣鑒別方法,重復(fù)鑒別大鼠。3. 給藥3.1 灌胃法3.1.1 按正確方法用左手抓取和固定小鼠,使腹部朝上,頸部拉直。3.1.2 固定后,右手持持接灌胃針的注射器吸取藥液(或事先將藥液吸好) , 將針頭從口角插入口腔內(nèi),然后用灌胃針頭壓其頭部,使口腔與食管成一直 線,再將灌胃針頭沿上腭壁輕輕進(jìn)入,轉(zhuǎn)動(dòng)針頭刺激動(dòng)物吞咽,然后沿咽后 壁慢慢插入食道。3.1.3 當(dāng)感覺有落空感時(shí)表明灌胃針可能進(jìn)入胃內(nèi), 向外抽動(dòng)注射器活塞, 感 覺有負(fù)壓,此時(shí)可將藥液灌入。3.2 注射給藥3.2.1 皮下注射 用左
3、手拇指和食指輕輕提起動(dòng)物頸后肩胛間皮膚, 右手持注射器,使針頭水平刺入皮下,針頭能自由撥動(dòng)無牽阻,推送藥液時(shí) 注射部位隆起。撥針時(shí),以手指捏住針刺部位3.2.2 腹腔注射以左手固定小鼠,使腹部向上, 右手持注射器從下腹兩側(cè)向頭方刺入皮下, 針頭稍向前, 再將注射器沿 45 角 斜向穿過腹肌進(jìn)入腹腔, 此時(shí)有落空感,回抽無回血或尿液, 即可注入藥液。3.2.3 尾靜脈注射先將動(dòng)物固定在暴露尾部的固定器內(nèi),用 75酒精棉球反復(fù)擦拭尾部使血管擴(kuò)張, 以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè),用中指從下面托起鼠,右手持注射器,使 針頭盡量采取與尾部平行的角度進(jìn)針,從尾末端處刺入。注入藥液,無阻力,表示針頭已進(jìn)入靜
4、脈,注射后把尾部向注射側(cè)彎曲,或 拔針后隨即以干棉球按住注射部位以止血。4取血4.1 內(nèi)眥取血:手固定小鼠,食指和拇指輕輕壓迫頸部?jī)蓚?cè),使眶后動(dòng)靜脈充血。 手持毛細(xì)采血管,以 45 度從內(nèi)眼刺入,并向下旋轉(zhuǎn),感覺刺入血管后,再 向外邊退邊吸,使血液順承血管自由流入小管中, 血量后,放松加于頸部的壓力,并拔出采血器,以防穿刺孔出血 五、實(shí)驗(yàn)討論1、小鼠抓取的感受: 小鼠性情較溫順,一般不會(huì)咬人,比較容易抓取固定。大鼠抓取方法基本同 小鼠,抓大鼠時(shí)若操作者不熟練,或者大鼠特別兇猛,操作者最好戴上防護(hù) 手套( 帆布或硬皮質(zhì)均可 )。如若是灌胃、腹腔注射、肌肉和皮下注射時(shí),可 采用與小鼠相同的手法2、小鼠尾靜脈注射感受:2.1 尾靜脈注射時(shí),可用 4550度的溫水浸潤(rùn)半分鐘或用酒精擦拭,可使血管 擴(kuò)張,同時(shí)也可軟化表皮角質(zhì)。2.2 如反復(fù)注入,應(yīng)盡可能從尾末端開始,以后向尾根部方向移動(dòng)注射先遠(yuǎn)后 盡,不要一開始就從尾根部,失敗了無法選取注射部位;再次,進(jìn)血管后注 意保持穩(wěn)定,針尖很容易刺穿血管的。2.3 尾靜脈就在尾巴的正左右兩邊,先用酒精用力擦,可以去掉部分角質(zhì),然 后按住近心端讓充血,就很容易看到了。3. 灌胃3.1 針頭插入食道過程中,若動(dòng)物掙扎厲害,應(yīng)退出后灌胃針,待動(dòng)物安靜后 重新插入。切不可強(qiáng)行插入,以免損
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