PCR室內質量控制標準操作程序-檢驗科PCR室作業(yè)書

1、PCR室內質量控制標準操作程序1 .目的：隨時了解并控制實驗室檢測的精密度變化。2 .適用范圍：核酸擴增熒光定量檢測實驗室。3 .負責人：操作人：4 .程序：4. 1血清質量控制品制備及操作4.1.1質控品制備：收集本室檢測的臨床樣本，HBVDNAt量為106copies/ml的樣本混勻， 并分裝于0.5ml的離心管中,每支110口編號后（如Qb0201-n）,-20c 保存。4. 1. 2操作:每次檢測過程中將此分裝的室內質控品與樣本同時檢測，記錄此標本的檢測結果；計算前10次檢測結果的平均值作為本批質控品的靶值。4. 1. 3如果使用商品化的質控品，按4. 1 . 2要求執(zhí)行。4. 2室內

2、質控圖的使用方法4. 2. 1描點a）圖中X線為靶線，X±2s為警告線，又±3s為失控線。對于同一批號的質控血清不論使用幾個月， 其空圖均不變化。只要將 圖紙上方“起止日期”項填入每個月的實際起止日期即可。b）每天將該批號質控血清按有關規(guī)定程序復融隨同病人的標本同時 檢測。將日期、檢測結果和操作者如實記錄在圖下方的相應位置，并 按前面的方法畫出圖上的對應點，用直線將該點與前一天的點連接。c）月底計算當月全部質控血清檢測結果的 X、S和CV,并進行圖形 分析和小結，將質量控制圖存入質控資料檔案。4. 2. 2圖形分析a）如果在X± 3s線以外，則為失控，應立即報告有

3、關負責人，迅速 查找原因。必要時復測標本，然后方可發(fā)出報告，并將失控情況、查 找過程及處理結果等詳細記錄。b）如果在X± 2s線以外，或出現(xiàn)連續(xù)6點以上在一側等規(guī)律變化， 均應即使向有關負責人反映，并積極查找原因。但當天的檢驗結果一 般可以發(fā)出。4. 2. 3通過觀察圖形的規(guī)律性變化進行誤差分析，消除誤差來源 a）曲線漂移：提示有系統(tǒng)誤差，準確度發(fā)生了一次性的向上或向下 改變。這種變化往往是由于一個新的情況引起的。如更換不同批號試 劑，啟用新批號的質控血清、操作人員的變換等。在找原因時，應重 點注意“漂移”前后發(fā)生了那些變動的因素。b）趨勢性變化：向下或向上的趨勢性變化表明檢測的準確

4、度發(fā)生了 漸漸地變化。這種變化往往是由于一個逐漸改變的因素造成的。如質控血清的降解，試劑效價的降低等。c）連續(xù)多點分布在靶值一側：目前，一般認為質控血清的檢測結果連續(xù)6天以上出現(xiàn)在靶值同一側，則應迅速查找原因，爭取盡快使之回復圍繞在靶 值隨機分布的狀態(tài)。因為按照統(tǒng)計學原理，由純隨機誤差造成的這種 情況的可能性很小。連續(xù) 6天以上出現(xiàn)在靶值同一側可能性小于 1.5%。因此凡出現(xiàn)連續(xù) 6天以上出現(xiàn)在靶值同一側者均有可能存在非隨機誤差因素。如結果與靶值偏離并不太大，不會給臨床使用帶來 太大影響時，一般檢驗報告可以照常填發(fā)。d）其他規(guī)律變化：（周期性等）4 . 2. 4通過圖形的資料對比進行誤差分析，消除誤差來源a）每個月的月底將該月的全部質控血清檢測結果的 又和s與該批測 定的X和s進行比較。如果X發(fā)生了變化，說明準確度發(fā)生了變化提 示有非隨機誤差存在。如果當月s不同則表明檢測的精密度發(fā)生了變 化。b）將使用同一批號質控血清的 CT值的X和s按月份列出。如果又逐 月上升，應考慮保存不當造成的試劑效價降低或質控血清本身出現(xiàn)降 解。如果各月份X基本一致而s逐月加大，則主要提示常規(guī)工作的精 密度下降，應重點從操作、管理