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文檔簡介

1、實驗三 培養(yǎng)基的制備 一目的要求 1.掌握一般培養(yǎng)基制備的原則和要求。 2.熟悉一般培養(yǎng)基制備的過程。二.原理 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是培養(yǎng)腐生性細菌的常規(guī)培養(yǎng)基，也是微生物實驗室中常備培養(yǎng)基，為天然培養(yǎng)基。它含有牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、其中牛肉膏為微生物提供碳源和能源，磷酸鹽，蛋白胨主要提供氮源、NaCl提供無機鹽。 牛肉膏 5.0g 食鹽 5.0g pH 7.2-7.4 蛋白胨10.0g 自來水1000mL (加入1.5%-1.8%瓊脂即成固體培養(yǎng)基) 三 儀器材料 微波爐、高壓滅菌器、玻璃器皿、PH試紙、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、氯化鈉、氫氧化鈉。 四 操作步驟 一)、培養(yǎng)基的制備原則和要求 1

2、.藥品純凈 , 稱量準(zhǔn)確。 2.所用器皿須潔凈 3.準(zhǔn)確測定調(diào)節(jié)pH值. 4.過濾培養(yǎng)基 5.嚴(yán)格控制滅菌時間和溫度. 二)、培養(yǎng)基制備過程及方法 稱量-加熱溶化-過濾-PH滴定-分裝-滅菌 1)肉浸液肉湯（普通肉湯）的制法 蛋白胨 10g，氯化鈉 5g，磷酸氫二鉀 2g。 牛肉粉或牛肉膏3g,水1000ml .PH7.47.6 121.3度15磅高壓15鐘. 2)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（普通瓊脂）的制法 普通肉湯 1000ml 瓊脂粉15g PH7.47.6 121.3度15磅高壓15鐘. 3)半固體培養(yǎng)基的制法 4）鮮血瓊脂的制法 PH的滴定: 1.酸度計法 2.PH比色計法:五 注意事項1.稱量準(zhǔn)確 2.加熱攪拌3.補足水分 4.容器適合5.高壓徹底 6.空白培養(yǎng) 六 作業(yè)與思考題 （1）為什么微生物實驗室所用的移液管口或滴管口的上端均需塞上一小段棉茬再用報紙包起來，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后才能使用? （2）配制培養(yǎng)基時為什么要調(diào)節(jié)pH? （3）制作平板培養(yǎng)基的注意事項是什么? （4）培養(yǎng)基配好后，為什么必須馬上進行高壓蒸汽滅菌?如不能及時滅菌時，應(yīng)將培養(yǎng)基暫時放置何處? 四 操作步驟 一)、培養(yǎng)基的制備原則和要求 1.藥品純凈 , 稱量準(zhǔn)確。 2.所用器皿須潔凈 3.準(zhǔn)確測定調(diào)節(jié)pH值. 4.過濾培養(yǎng)基 5.嚴(yán)格控

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