農(nóng)殘檢測方法

1、農(nóng)殘檢測方法1. 農(nóng)殘試劑配置緩沖溶液：取一包緩沖劑， 加入 500ml 蒸餾水，溶解攪拌均勻， 密閉、避光、陰涼處保存。顯色劑：取顯色劑一瓶，加入15ml 緩沖溶液溶解，4冰箱中保存。底物：取底物一瓶，加入15ml 蒸餾水溶解， 4冰箱中保存。乙酰膽堿酯酶：取乙酰膽堿酯酶一瓶，用 3ml 緩沖溶液溶解，4 冰箱中保存。注：因農(nóng)殘試劑生產(chǎn)廠家眾多，使用時請以試劑說明書為準！2. 樣品處理選取有代表性的蔬菜樣品，擦掉樣品表面泥土，剪成 1cm 見方碎片，取樣品1g，放入燒杯或提取瓶中，加入5ml 緩沖溶液，振蕩1min 2min ，倒出提取液，靜置 3min 5min ，待用。注意：樣品不可用水

2、沖洗，應擦去表面泥土等雜物后取樣。為了保證取樣具有代表性，葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部樣本，果菜從不同個體的表皮處取樣。3. 對照溶液測試在提取瓶中加入 2.5ml 緩沖溶液，再加入 100ul 酶液、 100ul 顯色劑，搖勻后于37放置 15 分鐘 ( 每批樣品的控制時間必須一致 ) 。15 分鐘后再加入 100 L 底物搖勻 , 此時檢液開始顯色反應 , 應立即倒入 1cm 比色皿，放入儀器比色池中，將儀器調(diào)到測量界面 , 按操作指示面板按鍵區(qū)的 “對照” 按鈕，儀器開始做對照。3 分鐘后儀器自動對照完成，對照完成后將對照樣取出，保持儀器界面不變。注意：對照測試必須在第一通道進行，

3、對照測試A 應 0.3 ，若對照測試的結(jié)果小于以上數(shù)值時，儀器會自動提示“對照錯誤”，須重新做對照，以保證測量結(jié)果的準確性。( 對照測試 A<0.3 的原因：一是酶的活性不夠，二是反應溫度太低。 )4. 樣品溶液測試另取干凈的提取瓶，放入 2.5ml 樣品提取液，加入 100ul 酶液、 100ul 顯色劑，搖勻后于 37放置 15 分鐘 ( 放置的時間與對照液放置的時間必須一致 ) 。15分鐘后再加入 100 L 底物搖勻 , 此時檢液開始顯色反應 , 應立即倒入 1cm 比色皿，放入儀器比色池中，按操作指示面板按鍵區(qū)的“測量”按鈕開始測量， 3 分鐘后儀器測量完成，顯示測量結(jié)果。結(jié)果

4、以酶被抑制的程度（抑制率）表示，當蔬菜樣品提取液對酶的抑制率 50% 時，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，樣品為陽性結(jié)果，陽性結(jié)果的樣品需要重復檢驗 2 次以上。對陽性結(jié)果的樣品，可用其它方法進一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。5. 說明蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時，可采取整株（體）蔬菜浸提。對一些含葉綠素較高的蔬菜，也可采取整株（體）蔬菜浸提的方法，減少色素的干擾。甲醛檢測方法1. 試劑配置甲醛試劑（一）甲醛試劑（二）：將甲醛試劑（二）加少量熱水溶解，再加入甲醛試劑（二），冷卻后定容于50ml

5、容量瓶注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱 4）保存！甲醛試劑（一）有腐蝕性；配制好的甲醛試劑（二）可使用一個月。2. 樣品處理準確稱取 0.2g 樣品放入哈希管中， 加入 5 滴甲醛試劑（一）和 10ml 蒸餾水，混勻后蓋緊瓶蓋，放入沸水中加熱 5min ，取出冷卻至室溫，用 0.45 m 微孔濾膜過濾，以除去懸浮顆粒，此為待測溶液。3. 空白取蒸餾水 10ml 于 10ml 比色管中，加入甲醛試劑（二） 1 ml ，混合均勻，放入恒溫水浴鍋中 50加熱 15 分鐘，取出冷卻至室溫，移入 1cm 比色皿中，放入儀器相應比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對照”鍵進行對照，對照完成后，儀器會自動記錄對

6、照結(jié)果，并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成” 。4. 測量移取處理好的樣品溶液5ml 于 10ml 比色管中，加入蒸餾水定容至10ml ，然后再加入甲醛試劑（二） 1 ml ，混合均勻，放入恒溫水浴鍋中50加熱 15 分鐘，取出冷卻至室溫，移入1 cm 比色皿中，放入已經(jīng)做過對照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測量”鍵進行測量，測量完成后，儀器自動顯示樣品中甲醛濃度值 X（mg/kg ）。吊白塊檢測方法1. 試劑配置吊白塊試劑（一）吊白塊試劑（二）：將吊白塊試劑（二）加少量熱水溶解，再加入吊白塊試劑（二），冷卻后定容于50ml 容量瓶注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱 4）保存！吊白塊試劑（一

7、）有腐蝕性；配制好的吊白塊試劑（二）可使用一個月。2. 樣品處理準確稱取 0.2g 樣品放入哈希管中，加入 5 滴吊白塊試劑（一）和 10ml 蒸餾水，混勻后蓋緊瓶蓋，放入沸水中加熱5min ，取出冷卻至室溫，用0.45 m 微孔濾膜過濾，以除去懸浮顆粒, 此為待測溶液。3. 空白取 10ml 蒸餾水于 10ml 比色管中，加入吊白塊試劑（二）1 ml ，混合均勻，放入恒溫水浴鍋中50 加熱 15 分鐘，取出冷卻至室溫，移入1cm 比色皿中，放入儀器相應比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對照”鍵進行對照，對照完成后，儀器會自動記錄對照結(jié)果，并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。4.測量移取處理好的

8、樣品溶液5ml 于 10ml 比色管中，加入蒸餾水定容至10ml ，然后再加入吊白塊試劑（二）1 ml ，混勻后放入恒溫水浴鍋中50加熱 15 分鐘，取出冷卻至室溫，移入1 cm 比色皿中，放入已經(jīng)做過對照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測量”鍵進行測量，測量完成后，儀器自動顯示樣品中吊白塊濃度值 X（mg/kg ）。雙氧水檢測方法1. 試劑配置雙氧水試劑（一）雙氧水試劑（二）注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱4）保存！雙氧水試劑（一）有腐蝕性，雙氧水試劑（二）有毒。2. 樣品處理準確稱取 1.0g 樣品放入哈希管中，加 2ml 雙氧水試劑（一）和6ml 蒸餾水，混勻后蓋緊瓶蓋，放入恒溫水浴鍋

9、50下加熱 10min ，取出冷卻至室溫，用0.45 m 微孔濾膜過濾，濾液移入10ml 比色管中，加 0.2ml 雙氧水試劑（二），再加蒸餾水至10ml 刻度，此為待測溶液。3. 空白向比色管中加入 2ml 雙氧水試劑（一）和 0.2ml 雙氧水試劑（二），再加蒸餾水至 10ml 刻度，混勻，轉(zhuǎn)入 1cm 比色皿，放入儀器相應比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對照”鍵進行對照，對照完成后，儀器會自動記錄對照結(jié)果，并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。4. 測量向待測液中加入2ml 雙氧水試劑（一）和0.2ml 雙氧水試劑（二），再加蒸餾水至 10ml 刻度，搖勻，轉(zhuǎn)入 1cm 比色皿中，放入儀器

10、比色池中進行測量，測量完成后，儀器會自動顯示樣品濃度結(jié)果 X（mg/kg ）。亞硝酸鹽檢測方法1. 試劑配置亞硝酸鹽試劑（一）：加少量熱蒸餾水溶解，冷卻后定容于50mL 容量瓶。亞硝酸鹽試劑（二）：加蒸餾水溶解，定容于50mL 容量瓶。亞硝酸鹽試劑（三）： 將兩種亞硝酸鹽試劑（三）溶于少量熱水中，冷卻后定容于 50ml 容量瓶。亞硝酸鹽試劑（四）：將亞硝酸鹽試劑（四）加亞硝酸試劑（四）定容于 100mL 棕色容量瓶，避光保存。亞硝酸鹽試劑（五）：加蒸餾水溶解，定容于 100mL 棕色容量瓶，避光保存。X（mg/kg ）。注意：除試劑（一）需常溫保存外所有試劑均需避光、低溫（冰箱4 ）保存！亞硝

11、酸鹽試劑（一）容易析出，請用50左右水浴加熱1 分鐘后使用。配制好的亞硝酸鹽試劑（五）有腐蝕性，可放置一個月左右，溶液變綠后不能使用。2. 樣品處理準確稱取 0.1g 經(jīng)攪碎混勻的試樣，置于哈希管中，加入1mL 亞硝酸鹽試劑（一）和 5mL 的蒸餾水，密閉后于沸水浴中加熱15min ，取出后冷卻至室溫，然后一面轉(zhuǎn)動一面加入1mL 亞硝酸鹽試劑（二），搖勻，再加入1mL 亞硝酸鹽試劑（三），以沉淀蛋白質(zhì)。加水至10ml 刻度，搖勻，放置0.5 小時，除去上層脂肪，余液用 0.45 m 微孔濾膜過濾，濾液備用。3. 對照測試取 5ml 蒸餾水于 10ml 比色管中， 加入 0.1mL 亞硝酸鹽試劑

12、 （四），混勻，放置 5min 后加入 0.2ml 試劑（五），混勻，靜置 15 分鐘，轉(zhuǎn)入 1cm 比色皿，放入儀器相應比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對照”鍵進行對照，對照完成后，儀器會自動記錄對照結(jié)果，并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。4. 樣品測定取 5ml 待測溶液于 10ml 比色管中，加入 0.1 亞硝酸鹽試劑（四）混勻，放置 5min 后加入 0.2ml 試劑（五），混勻，靜置 15 分鐘，轉(zhuǎn)入 1cm 比色皿，放入已經(jīng)做過對照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的 “測量” 鍵進行測量， 測量完成后，儀器自動顯示樣品中亞硝酸鹽濃度值六價鉻檢測方法1. 試劑配置六價鉻試劑（一）：加蒸

13、餾水稀釋，定容于100mL 容量瓶六價鉻試劑（二）：加蒸餾水稀釋，定容于100mL 容量瓶六價鉻試劑（三）：加蒸餾水稀釋，定容于 100mL 容量瓶六價鉻試劑（四）：加蒸餾水稀釋，定容于 100mL 容量瓶六價鉻試劑（五）：將六價鉻試劑（五）溶解于六價鉻試劑（五）中，加水稀釋至 100ml ，儲存于棕色瓶中置冰箱內(nèi)保存。注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱 4）保存！六價鉻試劑（一）、六價鉻試劑（二）、六價鉻試劑（三）、六價鉻試劑（四）有腐蝕性；當配制好的六價鉻試劑（五）溶液色變深后不能使用。2. 樣品處理操作步驟 將待測的糧食、蔬菜、水果類樣品洗凈晾干，碾碎，混勻備用。禽蛋、水產(chǎn)等洗凈、晾干，

14、取可食部分，混勻備用。 取經(jīng)過預處理的均勻樣品1.000g 于哈希管中（敞開），加入2.0mL 試劑（一）純硝酸， 4.0mL 試劑（二）過氧化氫溶液，輕輕搖勻，放入亞臨界水萃取儀中，從溫度升到 140 時開始計時，保持恒溫 lh，同時做試劑空白，取出哈希管待自然冷卻后，將消解液移入 l0mL 比色管中，將哈希管用水洗凈，合并洗液于比色管中，用水稀釋至 10ml 刻度，混勻、待測。3. 對照測試取 10ml 蒸餾水于 10ml 比色管中，向比色管內(nèi)加入 0.1ml 六價鉻試劑（三）和六價鉻試劑（四），混勻，再加入0.4ml 試劑（五）搖勻，放置 10min 后，轉(zhuǎn)入1cm 比色皿，放入儀器相應

15、比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對照”鍵進行對照，對照完成后， 儀器會自動記錄對照結(jié)果， 并在顯示屏下方顯示為 “對照測量完成”。4. 樣品測定取待測溶液，加蒸餾水稀釋至刻度，再向比色管內(nèi)加入 0.1ml 六價鉻試劑（三）和六價鉻試劑（四），混勻，再加入 0.4ml 試劑（五）搖勻，放置 10min 后，轉(zhuǎn)入1cm 比色皿，放入已經(jīng)做過對照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測量”鍵進行測量，測量完成后，儀器自動顯示樣品中六價鉻濃度值X（mg/kg ）。重金屬檢測方法1. 試劑配置重金屬試劑（一）重金屬試劑（二）重金屬試劑（三）：加少量蒸餾水溶解，定容于100ml 容量瓶重金屬試劑（四）：加少量蒸餾

16、水溶解，定容于100ml 容量瓶注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱4）保存！重金屬試劑（一）、重金屬試劑（二）有腐蝕性。2. 樣品處理操作步驟 將待測的糧食、蔬菜、水果類樣品洗凈晾干，碾碎，混勻備用。禽蛋、水產(chǎn)等洗凈、晾干，取可食部分，混勻備用。 取經(jīng)過預處理的均勻樣品1.0g 于哈希管中，加入 2mL 重金屬試劑（一），2mL 重金屬試劑（二）， 4ml 蒸餾水，輕輕搖勻，蓋緊上蓋，放入超聲波提取儀中提取10 分鐘，取出哈希管待自然冷卻后，打開上蓋，過濾將溶液移入 10ml 比色管中，加重金屬試劑（四）調(diào)節(jié)溶液PH=9 ，加水至刻度，此為待測溶液。3. 對照測試取 10ml 蒸餾水于比色管內(nèi)

17、，加入1ml 重金屬試劑（三），混勻，放置10min后，轉(zhuǎn)入1cm 比色皿，放入儀器相應比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對照”鍵進行對照，對照完成后，儀器會自動記錄對照結(jié)果，并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。4. 樣品測定取待測溶液，加蒸餾水稀釋至刻度，再向比色管內(nèi)中加入1ml 重金屬試劑（三），混勻，放置10min 后，轉(zhuǎn)入 1cm 比色皿，放入已經(jīng)做過對照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測量”鍵進行測量，測量完成后，儀器自動顯示樣品中重金屬濃度值X（mg/kg ）。二氧化硫檢測方法1. 試劑配置二氧化硫試劑（一）：加蒸餾水溶解，定容于500ml 容量瓶二氧化硫試劑（二）：加蒸餾水溶解，定

18、容于50ml 容量瓶二氧化硫試劑（三）二氧化硫試劑（四）：加蒸餾水溶解，定容于50ml 容量瓶二氧化硫試劑（五）：將兩種二氧化硫試劑（五）混合，用熱水溶解，冷卻后定容于 50ml 容量瓶二氧化硫試劑（六）：將二氧化硫試劑（六） 溶解定容于50ml 容量瓶中，取出 20ml 于 100ml 容量瓶中，滴加二氧化硫試劑（六）混勻使溶液由紅變黃，加水至刻度二氧化硫試劑（七）：加蒸餾水溶解，定容于 50ml 容量瓶二氧化硫試劑（八）注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱4）保存！二氧化硫試劑（一）有毒，二氧化硫試劑（七）、二氧化硫試劑（八）有腐蝕性。2. 樣品處理2.1 水溶性固體樣如白砂糖稱取1.0g

19、，用少量水溶解，置于10ml 比色管中，加入0.4ml 二氧化硫試劑（七），5 分鐘后加入0.4ml 二氧化硫試劑（八），然后加入2ml 二氧化硫試劑（一），加水至刻度，混勻，此為待測溶液。2.2 其他固體樣如餅干、 粉絲稱取 1.0g 研磨均勻的試樣， 以少量水潤濕并移入 10ml 比色管中，加入 2ml 二氧化硫試劑（一），浸泡 4 小時以上，若上層溶液不澄清可加入二氧化硫試劑（四）及二氧化硫試劑（五）各 0.25ml ，混勻，過濾，加水至刻度，此為待測溶液。2.3 液體試樣如葡萄酒可直接吸取 1mL ，置于 10ml 比色管中，用少量水稀釋，加入 2ml 二氧化硫試劑（一），搖勻，最后加水至刻度，混勻，此為待測溶液。3. 空白取一支干凈的 10mL 比色管，準確加入二氧化硫試劑（一）10ml ， 1ml 二氧化硫試劑（二）， 1ml 二氧化硫試劑（三）及1ml 二氧化硫試劑（六），混勻，放置20 分鐘后，轉(zhuǎn)入 1cm 比色皿，放入儀器相應比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對照”鍵進行對照，對照完成后，儀器會自動記錄對照結(jié)果，并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。4. 測量取待測溶液 5ml 于 10mL 比色管中， 加入二氧化硫試劑 （一）至 1