醫(yī)院環(huán)境微生物采樣方法及注意事項

1、醫(yī)院環(huán)境微生物采樣方法及注意事項院感科衛(wèi)醫(yī)發(fā)2000431號醫(yī)院感染管理規(guī)范 第三十一條 環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測：包括對空氣、物體表面和醫(yī)護人員手的監(jiān)測。 醫(yī)院應(yīng)每月對手術(shù)室、重癥監(jiān)護病房室（ICU）、產(chǎn)房、母嬰室、新生兒病房、骨髓移植病房、血液病房、血液透析室、供應(yīng)室無菌區(qū)、治療室、換藥室等重點部門進行環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測。當(dāng)有醫(yī)院感染流行，懷疑與醫(yī)院環(huán)境衛(wèi)生學(xué)因素有關(guān)時，應(yīng)及時進行監(jiān)測。 第三十六條 出現(xiàn)醫(yī)院感染流行或暴發(fā)趨勢時，應(yīng)采取下列控制措施： 一、臨床科主必須及時查找原回，協(xié)助調(diào)查和執(zhí)行控制措施。 二、醫(yī)院感染管理科必須及時進行流行病學(xué)調(diào)查處理，基本步驟為； 1、證實流行或暴發(fā) 2、查找感染源：

2、對感染病人、接觸者、可疑傳染源、環(huán)境、物品、醫(yī)務(wù)人員及陪護人員等進行病原學(xué)檢查。 3、查找引起感染的因素 4、制定和組織落實有效的控制措施 5、分析調(diào)查資料 6、寫出調(diào)查報告。 一、空氣消毒效果監(jiān)測 二、手消毒效果監(jiān)測 三、物品和環(huán)境表面消毒效果監(jiān)測 四、使用中消毒液染菌量測定 五、醫(yī)療器械滅菌質(zhì)量監(jiān)測 六、滅菌質(zhì)量監(jiān)測一、空氣消毒效果監(jiān)測非潔凈區(qū)域空氣消毒效果監(jiān)測（一）采樣時間：消毒處理后，操作前進行采樣。（二）采樣方法：平板暴露法和微生物采樣器法。平板暴露法（我院采用的方法）1、布點方法：（1）室內(nèi)面積30 m2，設(shè)置內(nèi)、中、外對角線3 個點，內(nèi)、外布點部位距墻壁1m處； （2）室內(nèi)面積3

3、0 m2，設(shè)4角及中央5 點，4角布點部位距離墻壁1m處。 1 2 5 3 4 2、采樣方法：將血平板或普通營養(yǎng)瓊脂平板 （直徑9cm)放在室內(nèi)各采樣點處，采樣高度為距離地面1.5m，采樣時將平板蓋打開，扣放于平板旁，暴露時間（類15min，類5min），蓋好立即送檢。 3、檢測方法：將采樣后平皿置37 溫箱培養(yǎng)48h，計數(shù)并鑒定。 注意事項：采樣前應(yīng)關(guān)好門窗和空調(diào)，無人走動情況下，靜止10min再進行采樣。 4、結(jié)果判斷環(huán)境類別環(huán)境類別范圍范圍標(biāo)準(zhǔn)值標(biāo)準(zhǔn)值菌落總數(shù)cfu/m3 致病菌類層流潔凈手術(shù)室、層流潔凈病房10cfu/m3(或0.2cfu/平板） 不得檢出類普通產(chǎn)房、手術(shù)室、嬰兒室、早

4、產(chǎn)兒室、燒傷病房、供應(yīng)室無菌區(qū)200cfu/m3(或4cfu/平板）不得檢出類兒科病房、婦產(chǎn)科檢查室、注射室、急診室、換藥室、治療室、化驗室、供應(yīng)室清潔區(qū)、各類普通病房和房間 500cfu/m3(或10cfu/平板）不得檢出注：致病菌指溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌 二、手衛(wèi)生效果的監(jiān)測方法（一）采樣時間：在接觸患者、進行診療活動前采樣。（二）采樣方法：被檢者五指并攏，用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫水液浸濕的棉拭子在雙手指曲面從指跟到指 端往返涂擦2次，一只手涂擦面積約30cm2，涂擦過程中同時轉(zhuǎn)動棉拭子；將棉拭子接觸操作者的部分剪去，投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)，及時送檢。 外科手

5、消毒監(jiān)測采樣（三）結(jié)果判斷：醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生規(guī)范4.4手消毒效果應(yīng)達到如 下相應(yīng)要求：衛(wèi)生手清毒，監(jiān)測的細菌菌落總數(shù)應(yīng)10cfu/2外科手消毒，監(jiān)測的細菌菌落總數(shù)應(yīng)5cfu/2 醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生規(guī)范81監(jiān)測要求醫(yī)療機構(gòu)應(yīng)每季度對手術(shù)室、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、層流潔凈病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重癥監(jiān)護病房、新生兒室、母嬰室、血液透析病房、燒傷病房、 感染疾病科、口腔科等部門工作的醫(yī)務(wù)人員手進行消毒效果的監(jiān)測；當(dāng)懷疑醫(yī)院感染暴發(fā)與醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生有關(guān)時，應(yīng)及時進行監(jiān)測，并進行相應(yīng)致病性微生物的檢測。 三、物品和環(huán)境表面消毒效果監(jiān)測（一）采樣時間：在消毒處理后進行采樣。（二）采樣面積：被采面積100c2取

6、全部表面；采樣面積100 c2，取100c2 （三）采樣方法：棉拭子法：用55cm的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格版，放在被檢物體表面，用浸有含有相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的棉拭子，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，可連續(xù)采樣14個規(guī)格板面積。剪去手接觸部分，并將棉拭子放入裝有10ml含相應(yīng)中和劑的試管內(nèi)，立即送檢。步驟：（在25cm2規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂抹各5次，連續(xù)采4個規(guī)格板面積）（四）結(jié)果判斷注：致病菌指溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌。母嬰同室、早產(chǎn)兒室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門氏菌。環(huán)境類別范圍標(biāo)準(zhǔn)值標(biāo)準(zhǔn)值菌落總數(shù)cfu/cm2 致病菌 類層流潔凈手術(shù)室、層流潔凈病

7、房5不得檢出類普通手術(shù)室、產(chǎn)房、嬰兒室、早產(chǎn)兒室、燒傷病房、供應(yīng)室無菌區(qū)5不得檢出類兒科病房、婦產(chǎn)科檢查室、注 射室、急診室、 換藥室、治療室、化驗室、供應(yīng)室清潔區(qū)、各類普通病房和房間10不得檢出類傳染病科及病房15不得檢出四、使用中消毒液染菌量測定（一）采樣時間：采取更換前使用中的消毒劑與滅菌器械保存液； （二）采樣量及方法：在無菌條件下，用無菌吸管吸取1.0ml被檢樣液，加入9.0ml含相應(yīng)中和 劑的采樣管內(nèi)混勻； （三）結(jié)果判斷： 使用中消毒液染菌量100cfu/ml,不得檢出致病菌；無菌物品保存液應(yīng)無菌生長。 注意：采樣時應(yīng)無菌操作，正確選用中和劑，采樣后1小時內(nèi)檢測。 五、醫(yī)用物品的

8、實驗室監(jiān)測 由外科手術(shù)、創(chuàng)傷性操作的對病人感染也是醫(yī)院感染的一個主要途徑。 如果醫(yī)療物品的消毒不夠完善，對病人是潛在危險因素。如果對污染的醫(yī)療物品操作不當(dāng)，對醫(yī)務(wù)工作者也是一個危險因素。 對醫(yī)療物品尤其是醫(yī)療器械消毒十分重要。采樣方法和原則采樣方法：對于大的醫(yī)療器械，用浸泡有無菌生理鹽水的棉簽在醫(yī)療器械接觸病人的部分橫豎來回涂擦，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，剪去手接觸部位后，將棉拭子投人10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的試管內(nèi)，立即送檢。小的醫(yī)療器械直接投入洗脫液中送檢。檢測方法：同物體表表面采樣后的檢測方法。采樣原則：對于醫(yī)療器械盡可能采取接觸病人部分，尤其是接觸病人粘膜的部分。六、滅菌質(zhì)量監(jiān)測（壓力

9、蒸汽滅菌的監(jiān)測）（一）物理監(jiān)測法：每次滅菌應(yīng)連續(xù)監(jiān)測并記錄滅菌時的溫度、壓力和時間等滅菌參數(shù)。 （二）化學(xué)監(jiān)測法：應(yīng)進行包外、包內(nèi)化學(xué)指示物監(jiān)測。采用快速壓力蒸汽滅菌程序滅菌時， 應(yīng)直接將一片包內(nèi)化學(xué)指示物置于待滅菌物品旁進行化學(xué)監(jiān)測。 （三）生物監(jiān)測法：生物指示劑有芽孢懸液、芽孢菌片以及菌片與培養(yǎng)基混裝（自含式）的指示管。 我院使用的環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測結(jié)果分析流程正視結(jié)果，不要盲目的重復(fù)采樣細菌學(xué)數(shù)據(jù)超標(biāo)回憶采樣過程是否存在污染到一線去查看設(shè)施和每個操作環(huán)節(jié)，詢問相關(guān)人員的日常操作方法，檢查操作記錄判斷是否存在問題重復(fù)采樣否 采取措施改進操作流程是 否 是 空氣微生物消毒方法紫外線燈照射靜電吸附

10、空氣過濾 消毒劑熏蒸，如過氧乙酸熏蒸噴霧，如用含氯消毒劑、過氧乙酸進行超低容量噴霧消毒，用一些消毒器械即時產(chǎn)生的化學(xué)因子進行消毒，如可以用臭氧進行空氣消毒。物理消毒化學(xué)消毒空氣消毒 空氣消毒可采用最簡便易行的開窗通風(fēng)換氣方法，每次開窗10到30分鐘，使空氣流通，讓病菌排出室外。物理除菌物理除菌紫外線燈 無毒、經(jīng)濟、有效、方便 照射30min至1h基本能使室內(nèi)空氣達類環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)。2h達類環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)，照射后3h內(nèi)空氣仍達類標(biāo)準(zhǔn)。 而罩式、車式及固定貼墻式均因其罩背面空氣阻擋了2040的紫外線照射，而降低了殺菌效果和維持時間。 要強調(diào)最佳安裝方式、合理安排消毒間隔時間，照射時保持室內(nèi)清潔干燥、燈管無塵，

11、溫度60時適當(dāng)延長照射時間是保證消毒效果所必須的。物理除菌物理除菌空氣消毒方法的選擇1、自然通風(fēng)是最經(jīng)濟、簡便和有效的保持室內(nèi)空氣新鮮、減少細菌濃度的方法。在有人或無人在情況下均可使用。對防止非典的傳播有很重要的意義。2、在出現(xiàn)呼吸道傳染病人后，單一的使用空氣消毒方法，即使空氣中的微生物全部被殺滅，但由于污染表面的微生物沒有被殺滅，很快又可污染空氣。這種情況較合理的方法應(yīng)物體表面消毒和空氣消毒同時進行，可選用過氧乙酸或過氧化氫等消毒劑進行噴霧或熏蒸。3、人在時的空氣消毒方法，可選用循環(huán)風(fēng)消毒機或靜電等空氣消毒器進行連續(xù)動態(tài)消毒處理。使用這種空氣消毒方法時，應(yīng)結(jié)合室內(nèi)表面的衛(wèi)生清潔處理或先用消毒劑對污染表面進行消毒，以保證空氣消毒效果。空氣消