全國(guó)版高考生物一輪復(fù)習(xí)第40講微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用名師課件

1、第十一單元第十一單元 生物技術(shù)實(shí)踐生物技術(shù)實(shí)踐 第第40講講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 考綱明細(xì)考綱明細(xì) 1.微生物的分離和培養(yǎng)微生物的分離和培養(yǎng) 2.某種微生物數(shù)量的測(cè)定某種微生物數(shù)量的測(cè)定 3.培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用 4.利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用他方面的應(yīng)用 板塊一板塊一 知識(shí)知識(shí)自主梳理自主梳理 一、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 1培養(yǎng)基培養(yǎng)基 (1)概念：概念： 人們按照微生物對(duì)人們按照微生物對(duì) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 的不同需的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的求，配制

2、出供其生長(zhǎng)繁殖的 營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)營(yíng)養(yǎng)基質(zhì) 。 (2)營(yíng)養(yǎng)成分：水、營(yíng)養(yǎng)成分：水、 碳源、氮源碳源、氮源 、無(wú)機(jī)鹽四類營(yíng)養(yǎng)、無(wú)機(jī)鹽四類營(yíng)養(yǎng)pH物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì) 、特殊營(yíng)養(yǎng)、特殊營(yíng)養(yǎng) 物質(zhì)以及物質(zhì)以及 氧氣氧氣 的要求。的要求。 (3)培養(yǎng)基的分類培養(yǎng)基的分類 按物理狀態(tài)分類按物理狀態(tài)分類 按功能分類按功能分類 2無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù) 3純化大腸桿菌及菌種的保藏純化大腸桿菌及菌種的保藏 (1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 稱量稱量溶化溶化 滅菌滅菌倒平板。倒平板。 步驟：計(jì)算步驟：計(jì)算 倒平板的過程倒平板的過程 拔出棉塞拔出棉塞。 a在

3、火焰旁右手拿錐形瓶，左手在火焰旁右手拿錐形瓶，左手 火焰火焰。 b右手拿錐形瓶，使錐形瓶的瓶口迅速通過右手拿錐形瓶，使錐形瓶的瓶口迅速通過 c左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙，右手將培養(yǎng)基倒入培左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙，右手將培養(yǎng)基倒入培培養(yǎng)皿的皿蓋培養(yǎng)皿的皿蓋。 養(yǎng)皿，左手立刻蓋上養(yǎng)皿，左手立刻蓋上 倒過來(lái)倒過來(lái)放置，使皿放置，使皿d待平板冷卻凝固后，將平板待平板冷卻凝固后，將平板 蓋在下、皿底在上。蓋在下、皿底在上。 (2)純化大腸桿菌純化大腸桿菌 平板劃線平板劃線法法(圖中圖中A)：通過：通過 接種環(huán)接種環(huán)在瓊脂固體在瓊脂固體 連續(xù)劃線連續(xù)劃線培養(yǎng)基表面培養(yǎng)基表面 的操作，將聚集的菌種逐步的操作

4、，將聚集的菌種逐步 稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。 稀釋涂布平板稀釋涂布平板法法(圖中圖中B)： 將菌液進(jìn)行一系列的將菌液進(jìn)行一系列的不同稀釋度不同稀釋度的菌液分別涂布到的菌液分別涂布到 梯度稀釋，然后將梯度稀釋，然后將 瓊脂固體培養(yǎng)基瓊脂固體培養(yǎng)基 的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍菌落菌落。 數(shù)足夠高時(shí)，即可獲得單個(gè)細(xì)菌形成的數(shù)足夠高時(shí)，即可獲得單個(gè)細(xì)菌形成的 (3)菌種的保藏菌種的保藏 對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用 臨時(shí)保藏臨時(shí)保藏 法。法。 對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用 甘油管藏甘油管藏

5、 法。法。 二、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)二、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 1篩選菌株篩選菌株 (1)自然界中目的菌株篩選的依據(jù)：根據(jù)它對(duì)自然界中目的菌株篩選的依據(jù)：根據(jù)它對(duì) 生存環(huán)境生存環(huán)境 的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。 (2)實(shí)驗(yàn)室中微生物篩選的原理：人為提供有利于實(shí)驗(yàn)室中微生物篩選的原理：人為提供有利于 目的菌株目的菌株 生長(zhǎng)的條件生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等等)，同時(shí)，同時(shí) 抑制或阻止抑制或阻止 其他微生物生長(zhǎng)。其他微生物生長(zhǎng)。 (3)選擇培養(yǎng)基：允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)選擇培養(yǎng)基：允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí) 抑

6、制抑制 和和 阻止阻止 其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。 2統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 (1)常用方法：常用方法： 稀釋涂布平板稀釋涂布平板 法。法。 (2)統(tǒng)計(jì)依據(jù)統(tǒng)計(jì)依據(jù) 當(dāng)樣品的當(dāng)樣品的 稀釋度稀釋度 足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè) 菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè) 活菌活菌 。通過統(tǒng)計(jì)平。通過統(tǒng)計(jì)平 板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。 (3)活菌計(jì)算方法：每克樣品中的菌株數(shù)活菌計(jì)算方法：每克樣品中的菌株數(shù) (C V)M其中其中C代表某一稀釋度下平

7、板上生長(zhǎng)的平均代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)代表稀釋倍數(shù)。 顯微鏡直接顯微鏡直接(4)其他方法：還可利用其他方法：還可利用 計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)。 3設(shè)置對(duì)照設(shè)置對(duì)照 設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中 非測(cè)試因素非測(cè)試因素 對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度可信度 ，例如為了排，例如為了排 除培養(yǎng)基被雜菌污染的可能性，需以除培養(yǎng)基被雜菌污染的可能性，需以 未接種細(xì)菌未接種細(xì)菌 的培養(yǎng)的培養(yǎng) 基培養(yǎng)作為空白對(duì)照。基培養(yǎng)作為空白對(duì)照。

8、 4實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 三、分解纖維素的微生物的分離三、分解纖維素的微生物的分離 1纖維素酶纖維素酶 (1)纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括 葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶C 酶、酶、C 酶酶1X 和和 三種組分。三種組分。 2纖維素分解菌的篩選纖維素分解菌的篩選 (1)方法：方法： 剛果紅染色剛果紅染色 法。法。 纖維素纖維素(3)培養(yǎng)基：以培養(yǎng)基：以 為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。 (4)實(shí)驗(yàn)流程實(shí)驗(yàn)流程 深入思考深入思考 1 配制培養(yǎng)基時(shí)平板冷凝后，為什么要將平板倒置？配制培養(yǎng)基時(shí)平板冷凝后，為什么要將平板倒置？ 提示提示 平板冷凝后

9、，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。養(yǎng)基，造成污染。 2 為什么選擇培養(yǎng)能夠?yàn)槭裁催x擇培養(yǎng)能夠“濃縮濃縮”所需的微生物？所需的微生物？ 提示提示 在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營(yíng)種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑

10、制，因此可以起到養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到 “濃縮濃縮”的的作用。作用。 自查診斷自查診斷 1 培養(yǎng)基一般都含有水、培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。氮源和無(wú)機(jī)鹽。( ) 2 為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落。取菌落。( ) 3 用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)，只要稀釋度足用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)，只要稀釋度足夠高，就能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。夠高，就能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。( ) 4 對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)只能采用稀釋涂布平板法，而不能對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)只能采用稀釋涂布平板法，而不能用平板劃線法。用平板劃

11、線法。( ) 5 剛果紅可以與纖維素形成透明復(fù)合物，所以可通過剛果紅可以與纖維素形成透明復(fù)合物，所以可通過是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。( ) 板塊二板塊二 考點(diǎn)考點(diǎn)題型突破題型突破 考點(diǎn)考點(diǎn) 1 培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術(shù) 題型一題型一 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 1 下表為某培養(yǎng)基的配方，下列敘述正確的是下表為某培養(yǎng)基的配方，下列敘述正確的是( ) A從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，從用途看從用途看該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基 B該培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖，該培養(yǎng)基中屬于

12、碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖，屬于氮屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨源的物質(zhì)是蛋白胨 C該培養(yǎng)基缺少提供生長(zhǎng)因子的物質(zhì)該培養(yǎng)基缺少提供生長(zhǎng)因子的物質(zhì) D該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的pH后就可以接種使用后就可以接種使用 解析解析 從用途看該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，從用途看該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基， A 錯(cuò)誤；錯(cuò)誤；微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要包括氮源、碳源、水和無(wú)機(jī)鹽等，微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要包括氮源、碳源、水和無(wú)機(jī)鹽等，培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖，屬于氮源的物質(zhì)培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖，屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨，是蛋白胨，B 正確；生長(zhǎng)因子主要包括維生素、氨基酸和正確；生長(zhǎng)因子主要包括維生素、氨基酸

13、和堿基等，它們一般是酶和核酸的組成成分，蛋白胨可以提堿基等，它們一般是酶和核酸的組成成分，蛋白胨可以提供生長(zhǎng)因子，供生長(zhǎng)因子，C 錯(cuò)誤；錯(cuò)誤；該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的 pH后經(jīng)滅菌后后經(jīng)滅菌后才可以接種使用，才可以接種使用，D 錯(cuò)誤。錯(cuò)誤。 2關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述錯(cuò)誤的是關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述錯(cuò)誤的是( ) A操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌 B將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯 C等培養(yǎng)基冷卻至等培養(yǎng)基冷卻至50 左右時(shí)進(jìn)行倒平板左右時(shí)進(jìn)行倒平板 D待平板冷卻凝固待

14、平板冷卻凝固510 min后將平板倒過來(lái)放置后將平板倒過來(lái)放置 解析解析 操作順序?yàn)橄葴缇俚蛊桨?，操作順序?yàn)橄葴缇俚蛊桨?，A錯(cuò)誤；錯(cuò)誤；應(yīng)該將稱應(yīng)該將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯，好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯，B正確；正確；培養(yǎng)基冷卻培養(yǎng)基冷卻至至 50 左右既沒有凝固，左右既沒有凝固，同時(shí)又不燙手，同時(shí)又不燙手，可以進(jìn)行倒平板，可以進(jìn)行倒平板，C 正確；正確； 為了防止冷卻過程中培養(yǎng)皿蓋上凝集的水珠對(duì)平板為了防止冷卻過程中培養(yǎng)皿蓋上凝集的水珠對(duì)平板的污染，的污染， 培養(yǎng)基冷卻凝固后就要將平板倒過來(lái)放置，培養(yǎng)基冷卻凝固后就要將平板倒過來(lái)放置， D正確。正確。 技法提升技法提升 1

15、.培養(yǎng)基的配制原則培養(yǎng)基的配制原則 (1)目的要明確：配制時(shí)應(yīng)根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目目的要明確：配制時(shí)應(yīng)根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等確定配制的培養(yǎng)基種類。的等確定配制的培養(yǎng)基種類。 (2)營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)：注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)：注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。 (3)pH要適宜：細(xì)菌為要適宜：細(xì)菌為6.57.5，放線菌為，放線菌為7.58.5，真菌為真菌為5.06.0，培養(yǎng)不同微生物所需的，培養(yǎng)不同微生物所需的pH不同。不同。 2.培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的確定方法培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的確定方法 不同種類的微生物代謝特點(diǎn)不同，因此對(duì)培養(yǎng)基中營(yíng)不同種類的微生物代謝特點(diǎn)不同，因此對(duì)培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物

16、質(zhì)的需求也不同。如：養(yǎng)物質(zhì)的需求也不同。如： (1)自養(yǎng)型微生物所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是無(wú)機(jī)鹽，碳源自養(yǎng)型微生物所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是無(wú)機(jī)鹽，碳源可來(lái)自大氣中的可來(lái)自大氣中的CO2，氮源可由含氮無(wú)機(jī)鹽提供。，氮源可由含氮無(wú)機(jī)鹽提供。 (2)異養(yǎng)型微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要是有機(jī)物異養(yǎng)型微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要是有機(jī)物(即碳即碳源源)， 必須由含碳有機(jī)物提供，必須由含碳有機(jī)物提供，氮源也主要是由有機(jī)物提供，氮源也主要是由有機(jī)物提供，部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無(wú)機(jī)氮源。部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無(wú)機(jī)氮源。 題型二題型二 無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù) 3消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念，滅菌是指徹底殺滅消毒和滅菌是兩個(gè)不同的

17、概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠(yuǎn)喪失生長(zhǎng)繁殖的能力。消毒僅指殺死一部微生物使其永遠(yuǎn)喪失生長(zhǎng)繁殖的能力。消毒僅指殺死一部分對(duì)人體有害的病原菌而對(duì)被消毒的物體基本無(wú)害。下列分對(duì)人體有害的病原菌而對(duì)被消毒的物體基本無(wú)害。下列哪些事物適用于消毒處理哪些事物適用于消毒處理( ) 皮膚皮膚 飲用水飲用水 牛奶牛奶 注射器注射器 培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿 接種環(huán)接種環(huán) 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 果汁果汁 醬油醬油 手術(shù)刀手術(shù)刀 A B C D以上全部以上全部 解析解析 消毒指用比較溫和的方法殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)消毒指用比較溫和的方法殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞，適用于那些不耐高溫的液體，如胞，適用于那些不耐高溫的液體，如 牛奶、牛奶、果

18、汁、果汁、醬油，這樣可以使其中的營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞。另外對(duì)要求醬油，這樣可以使其中的營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞。另外對(duì)要求不是很嚴(yán)格的不是很嚴(yán)格的皮膚、皮膚、飲用水也用消毒的方法處理。而飲用水也用消毒的方法處理。而對(duì)于嚴(yán)格要求的對(duì)于嚴(yán)格要求的 注射器、注射器、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、接種環(huán)、培養(yǎng)培養(yǎng)基、基、手術(shù)刀等必須進(jìn)行滅菌處理。所以，手術(shù)刀等必須進(jìn)行滅菌處理。所以， 應(yīng)應(yīng)該用消毒的方法處理。該用消毒的方法處理。 4在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，下列操作不需要在無(wú)菌下列操作不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行的是條件下進(jìn)行的是( ) A配制培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基 B倒平板倒平板 C接種接種 D菌液稀釋菌液

19、稀釋 解析解析 配制培養(yǎng)基時(shí)不需要無(wú)菌操作，因?yàn)榕渲坪蟮呐渲婆囵B(yǎng)基時(shí)不需要無(wú)菌操作，因?yàn)榕渲坪蟮呐囵B(yǎng)基需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，而其他三項(xiàng)為防止雜菌的培養(yǎng)基需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，而其他三項(xiàng)為防止雜菌的污染，均需要進(jìn)行無(wú)菌操作。故選污染，均需要進(jìn)行無(wú)菌操作。故選 A。 題型三題型三 微生物的純化技術(shù)微生物的純化技術(shù) 5平板劃線法和稀釋涂布平板法是純化微生物的兩種平板劃線法和稀釋涂布平板法是純化微生物的兩種常用方法，下列描述正確的是常用方法，下列描述正確的是( ) A都要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋都要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋 B 平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)在固平板劃線法是將不同稀釋度的

20、菌液通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作 C 稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng) D都會(huì)在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落都會(huì)在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落 解析解析 平板劃線法不需要進(jìn)行梯度稀釋，平板劃線法不需要進(jìn)行梯度稀釋， A 錯(cuò)誤；稀錯(cuò)誤；稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液滴加到固體培養(yǎng)基的釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液滴加到固體培養(yǎng)基的表面，表面，B、C 錯(cuò)誤；平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培錯(cuò)誤；平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落，養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落，D正確。正

21、確。 6 下圖是微生物平板劃線示意圖。下圖是微生物平板劃線示意圖。 劃線的順序?yàn)閯澗€的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列操作方法正確的是。下列操作方法正確的是( ) A操作前要將接種環(huán)放在火焰旁滅菌操作前要將接種環(huán)放在火焰旁滅菌 B劃線操作須在火焰上進(jìn)行劃線操作須在火焰上進(jìn)行 C在在5區(qū)域中才有可能得到所需菌落區(qū)域中才有可能得到所需菌落 D在在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌行滅菌 解析解析 接種環(huán)滅菌時(shí)應(yīng)放在火焰上，接種環(huán)滅菌時(shí)應(yīng)放在火焰上，而不是火焰旁，而不是火焰旁，A錯(cuò)誤；劃線操作應(yīng)在火焰旁，而不是火焰上，否則接種微錯(cuò)誤；劃線操作應(yīng)在火焰旁，而

22、不是火焰上，否則接種微生物會(huì)全部死亡，生物會(huì)全部死亡，B 錯(cuò)誤；如果菌種密度低，則在錯(cuò)誤；如果菌種密度低，則在 5區(qū)域區(qū)域前面就有可能得到所需單菌落，前面就有可能得到所需單菌落， C 錯(cuò)誤。錯(cuò)誤。 技法提升技法提升 1.兩種純化細(xì)菌的方法的比較兩種純化細(xì)菌的方法的比較 2.平板劃線操作的注意事項(xiàng)平板劃線操作的注意事項(xiàng) (1)灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。太高殺死菌種。 (2)第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始，能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，開始，能使

23、微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。 (3)劃線時(shí)最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。劃線時(shí)最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。 (4)劃線用力大小要適當(dāng)，劃線用力大小要適當(dāng)， 防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。 (5)操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要進(jìn)操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要進(jìn)行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束時(shí)，仍需灼燒接種環(huán)，每行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束時(shí)，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒目的如下表：次灼燒目的如下表： 考點(diǎn)考點(diǎn)2 微生物的篩選與計(jì)數(shù)微生物的篩選與計(jì)數(shù) 題型一題型一 選擇培養(yǎng)基的成分及

24、配制選擇培養(yǎng)基的成分及配制 1選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營(yíng)選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或?qū)σ恍┪锢?、化學(xué)抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。利用這養(yǎng)要求或?qū)σ恍┪锢?、化學(xué)抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。利用這種培養(yǎng)基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出種培養(yǎng)基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來(lái)。為選擇酵母菌和硝化細(xì)菌，應(yīng)選用的培養(yǎng)基分別為來(lái)。為選擇酵母菌和硝化細(xì)菌，應(yīng)選用的培養(yǎng)基分別為( ) A伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基 B含青霉素的培養(yǎng)基、含氨的無(wú)機(jī)培養(yǎng)基含青霉素的培養(yǎng)基、含氨的無(wú)機(jī)培養(yǎng)基 C含氨的無(wú)機(jī)培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基含

25、氨的無(wú)機(jī)培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基 D含青霉素的培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基含青霉素的培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基 解析解析 酵母菌是真菌，通?？梢杂煤嗝顾氐呐囵B(yǎng)基酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，因?yàn)榍嗝顾啬芤种萍?xì)菌生長(zhǎng)，但不能抑制進(jìn)行選擇培養(yǎng)，因?yàn)榍嗝顾啬芤种萍?xì)菌生長(zhǎng)，但不能抑制真菌生長(zhǎng)；硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型生物，能夠利用氨轉(zhuǎn)變?yōu)閬喺婢L(zhǎng)；硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型生物，能夠利用氨轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯跛岷拖跛崴尫诺哪芰?，把無(wú)機(jī)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)物以維持硝酸和硝酸所釋放的能量，把無(wú)機(jī)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)物以維持自身生命活動(dòng)，利用含氨的無(wú)機(jī)培養(yǎng)基可進(jìn)行選擇培養(yǎng)。自身生命活動(dòng)，利用含氨的無(wú)機(jī)培養(yǎng)基可進(jìn)行選擇培養(yǎng)。 2原油

26、中含有大量有害的、致癌的多環(huán)芳烴。土壤中原油中含有大量有害的、致癌的多環(huán)芳烴。土壤中有些細(xì)菌可以利用原油中的多環(huán)芳烴為碳源，在培養(yǎng)基中有些細(xì)菌可以利用原油中的多環(huán)芳烴為碳源，在培養(yǎng)基中形成分解圈。為篩選出能高效降解原油的菌株并投入除污，形成分解圈。為篩選出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小組同學(xué)設(shè)計(jì)了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述，不正某小組同學(xué)設(shè)計(jì)了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確的是確的是( ) A應(yīng)配制來(lái)源于被原油污染土壤的土壤稀釋液備用應(yīng)配制來(lái)源于被原油污染土壤的土壤稀釋液備用 B配制以多環(huán)芳烴為唯一碳源的選擇性培養(yǎng)基配制以多環(huán)芳烴為唯一碳源的選擇性培養(yǎng)基 C將土壤稀釋液滅菌后接種

27、到選擇性培養(yǎng)基上將土壤稀釋液滅菌后接種到選擇性培養(yǎng)基上 D在選擇性培養(yǎng)基上能形成分解圈的即為所需菌種在選擇性培養(yǎng)基上能形成分解圈的即為所需菌種 解析解析 被原油污染的土壤中含有較多的能夠利用多環(huán)被原油污染的土壤中含有較多的能夠利用多環(huán)芳烴為碳源的細(xì)菌，芳烴為碳源的細(xì)菌， A 正確；在以多環(huán)芳烴為唯一碳源的正確；在以多環(huán)芳烴為唯一碳源的選擇性培養(yǎng)基上只有能利用多環(huán)芳烴的微生物才能生長(zhǎng)繁選擇性培養(yǎng)基上只有能利用多環(huán)芳烴的微生物才能生長(zhǎng)繁殖，殖，B 正確；將土壤稀釋液滅菌后會(huì)導(dǎo)致土壤中所需要的正確；將土壤稀釋液滅菌后會(huì)導(dǎo)致土壤中所需要的微生物死亡，微生物死亡，C 錯(cuò)誤；在選擇性培養(yǎng)基上能形成分解圈說

28、錯(cuò)誤；在選擇性培養(yǎng)基上能形成分解圈說明該菌落中的微生物能利用多環(huán)芳烴，明該菌落中的微生物能利用多環(huán)芳烴， D正確。正確。 技法提升技法提升 選擇培養(yǎng)基的作用原理選擇培養(yǎng)基的作用原理 (1)在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，如加入青霉素可以在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，如加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色分離出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的加入是在滿足基本所需培養(yǎng)成分的基礎(chǔ)葡萄球菌。這里的加入是在滿足基本所需培養(yǎng)成分的基礎(chǔ)上加入。上加入。 (2)改變培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分，如缺乏氮源時(shí)可以分離改變培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分，如缺乏氮源時(shí)可以分離出固氮微生物

29、；以石油作為唯一碳源時(shí)，可以分離出能消出固氮微生物；以石油作為唯一碳源時(shí)，可以分離出能消除石油污染的微生物。除石油污染的微生物。 (3)改變微生物的培養(yǎng)條件，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境改變微生物的培養(yǎng)條件，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)可以得到耐高溫的微生物。中培養(yǎng)可以得到耐高溫的微生物。 題型二題型二 微生物的篩選與計(jì)數(shù)微生物的篩選與計(jì)數(shù) 3苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得只能為了降解廢水中的苯酚，

30、研究人員從土壤中篩選獲得只能利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，為土利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是壤樣品。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( ) A 圖中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作圖中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為唯一碳源為唯一碳源 B如果要測(cè)定中活細(xì)菌的數(shù)量，如果要測(cè)定中活細(xì)菌的數(shù)量，常采用稀釋涂布平常采用稀釋涂布平板法板法 C若圖中為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，若圖中為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，則其中應(yīng)以苯酚作為唯一碳則其中應(yīng)以苯酚作為唯一碳源源 D使用平板劃線法可以在上獲得單菌落使用平板劃線法可以在上獲得單菌落 解析解析 要篩選能夠分解苯酚的微生物，在培養(yǎng)基

31、中應(yīng)要篩選能夠分解苯酚的微生物，在培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為唯一碳源，加入苯酚作為唯一碳源， A 正確；在微生物的分離純化過正確；在微生物的分離純化過程中常用的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法；如果要程中常用的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法；如果要測(cè)定測(cè)定中活細(xì)菌的數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法，使用平中活細(xì)菌的數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法，使用平板劃線法可以在板劃線法可以在上獲得單菌落，上獲得單菌落，B、D正確；若圖中正確；若圖中為為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，則培養(yǎng)基中不應(yīng)加苯酚，對(duì)照實(shí)驗(yàn)，則培養(yǎng)基中不應(yīng)加苯酚， C 錯(cuò)誤。錯(cuò)誤。 4下表是某同學(xué)列出的分離土壤中微生物的培養(yǎng)基配下表是某同學(xué)列出的分離土壤中微生物的培

32、養(yǎng)基配方，據(jù)此回答下列問題：方，據(jù)此回答下列問題： 選擇選擇 培養(yǎng)基，提供培養(yǎng)基，提供(1)從作用上看，該培養(yǎng)基屬于從作用上看，該培養(yǎng)基屬于_尿素尿素 ，細(xì)菌能利用該氮源是由于體內(nèi)能，細(xì)菌能利用該氮源是由于體內(nèi)能氮源的物質(zhì)是氮源的物質(zhì)是_脲脲(催化尿素分解的催化尿素分解的)酶。酶。 合成合成_ (2)在對(duì)分離的能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行鑒定時(shí)，還需在在對(duì)分離的能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行鑒定時(shí)，還需在 紅紅，說，說酚紅酚紅指示劑，若指示劑變指示劑，若指示劑變_培養(yǎng)基中加入培養(yǎng)基中加入_ 明有目的菌株存在。明有目的菌株存在。 (3)為為 了了 測(cè)測(cè) 定定 微微 生生 物物 的的 數(shù)數(shù) 量量 ， 接接 種種 時(shí)

33、時(shí) 應(yīng)應(yīng) 采采 用用稀釋涂布平板稀釋涂布平板 法，某同學(xué)在法，某同學(xué)在4個(gè)培養(yǎng)基上分別接種稀個(gè)培養(yǎng)基上分別接種稀_釋倍數(shù)為釋倍數(shù)為10的土壤樣液的土壤樣液0.1 mL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為180、155、176、129個(gè)，則每毫升原土壤樣液中上述微生個(gè)，則每毫升原土壤樣液中上述微生91.610個(gè)，測(cè)定的活菌數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)個(gè)，測(cè)定的活菌數(shù)比實(shí)際活菌數(shù) 物的數(shù)量為物的數(shù)量為_低低 填填“低低”“”“高高”或或“基本一致基本一致”)。 _( 6 解析解析 (1)題干指出表中是分離土壤中微生物的培養(yǎng)基題干指出表中是分離土壤中微生物的培養(yǎng)基配方，配方，其中尿素是唯一氮源，其中尿素是唯一

34、氮源，能生長(zhǎng)的菌落說明能利用尿素能生長(zhǎng)的菌落說明能利用尿素中的氮源，以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以選擇尿素分解中的氮源，以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以選擇尿素分解菌，所以從用途上看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。菌，所以從用途上看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 (2)在對(duì)分離的能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行鑒定時(shí)，還需在在對(duì)分離的能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行鑒定時(shí)，還需在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，若指示劑變紅，說明有目的菌株說明有目的菌株存在。存在。 (3) 純化微生物可以用稀釋涂布平板法和平板劃線法，純化微生物可以用稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法能用于微生物的計(jì)數(shù)。其中稀

35、釋涂布平板法能用于微生物的計(jì)數(shù)。 1 mL 原土壤樣原土壤樣液中上述微生物數(shù)量液中上述微生物數(shù)量 (180 155 176 129)4 10101.6 10個(gè)；稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)的數(shù)量比實(shí)際數(shù)個(gè)；稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)的數(shù)量比實(shí)際數(shù)量會(huì)偏少，量會(huì)偏少，原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。察到的只是一個(gè)菌落。 96知識(shí)拓展知識(shí)拓展 微生物的篩選與鑒別方法微生物的篩選與鑒別方法 (1)微生物的篩選方法微生物的篩選方法 (2)微生物的鑒別方法微生物的鑒別方法 板塊三板塊三 方向方向真題體驗(yàn)真題體驗(yàn) 12017全國(guó)卷全國(guó)卷某些

36、土壤細(xì)菌可將尿素分解成某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和和NH3，供植物吸收和利用。回答下列問題：，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}： (1)有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前脲酶脲酶 。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解 者能產(chǎn)生者能產(chǎn)生_分解尿素的細(xì)菌是分解尿素的細(xì)菌是產(chǎn)物產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是作為碳源，原因是_ 異養(yǎng)生物，不能利用異養(yǎng)生物，不能利用 CO2來(lái)合成有機(jī)物來(lái)合成有機(jī)物 _。 但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作為細(xì)胞生命活動(dòng)提

37、供能量，為其他有機(jī)物的為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的 用是用是_ 合成提供原料合成提供原料 _ (答出兩點(diǎn)即可答出兩點(diǎn)即可)。 (2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)尿素尿素 填填 “ 尿尿 素素 ”“NH4NO3”或或 “ 尿尿 素素 選選 擇擇_(NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是作為氮源，不選擇其他兩組的原因是 其他兩組都含有其他兩組都含有 NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能，能分解尿素的細(xì)菌和不能_分解尿素的細(xì)菌都能利用分解尿素的細(xì)菌都能利用 NH4NO3，不能起到篩選作用，不能起到篩選作用 _。 (3)用

38、來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和和為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，作為緩為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，作為緩Na2HPO4，其作用有，其作用有_ 沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過程中沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過程中pH穩(wěn)定穩(wěn)定 答出兩點(diǎn)即可答出兩點(diǎn)即可)。 _ ( 解析解析 (1)有些細(xì)菌能分解尿素是因?yàn)檫@些細(xì)菌能產(chǎn)生有些細(xì)菌能分解尿素是因?yàn)檫@些細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，將尿素分解成脲酶，將尿素分解成CO2和和NH3。能分解尿素的細(xì)菌是異。能分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用養(yǎng)生物，不能利用CO2作為碳源合成有機(jī)物，但這些細(xì)菌作為碳源合成有機(jī)物，但這些細(xì)菌可用葡萄糖作為碳源，可用葡萄糖作為碳源，

39、進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是作為能源物質(zhì)氧化分解為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，作為能源物質(zhì)氧化分解為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有為其他有機(jī)物的合成提供原料。機(jī)物的合成提供原料。 (2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇尿素作為唯一氮源，選擇尿素作為唯一氮源， 這樣只有能分解尿素的細(xì)菌才能在這樣只有能分解尿素的細(xì)菌才能在培養(yǎng)基上生存。若選擇培養(yǎng)基上生存。若選擇 “NH4NO3” 或或“尿素尿素NH4NO3”作作為氮源，為氮源， 能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌

40、都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用。，不能起到篩選作用。 (3)用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和和Na2HPO4，它們可以為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)；同時(shí)，它們可以為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)；同時(shí)，KH2PO4和和Na2HPO4還可以作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過程還可以作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過程中中pH穩(wěn)定。穩(wěn)定。 22016全國(guó)卷全國(guó)卷某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸酸鈣而不透明

41、，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}：鈣。回答下列問題： 無(wú)菌水無(wú)菌水 對(duì)泡菜濾對(duì)泡菜濾 (1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用_泡菜濾液中菌的泡菜濾液中菌的液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是_ 濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落 _。 (2)推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用中和產(chǎn)生的乳酸中和產(chǎn)生的乳酸(或酸或酸) 鑒別乳酸菌鑒別乳酸菌 和和_有有_。分離。分離具有透明圈具有透明圈 純化時(shí)應(yīng)挑選出純化時(shí)應(yīng)挑選出_的菌落作為候選

42、菌。的菌落作為候選菌。 (3)乳酸菌在乳酸菌在20 長(zhǎng)期保存時(shí)，長(zhǎng)期保存時(shí)， 菌液中常需要加入一菌液中常需要加入一甘油甘油填填“蒸餾水蒸餾水”“”“甘油甘油”或或“碳酸鈣碳酸鈣”)。 定量的定量的_( 解析解析 (1)分離純化乳酸菌時(shí)，由于泡菜濾液中乳酸菌分離純化乳酸菌時(shí)，由于泡菜濾液中乳酸菌的濃度高，的濃度高，因此需要用無(wú)菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，因此需要用無(wú)菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，其其目的是將聚集在一起的乳酸菌分散成單個(gè)細(xì)胞，目的是將聚集在一起的乳酸菌分散成單個(gè)細(xì)胞，以便在培養(yǎng)以便在培養(yǎng)基表面形成單菌落。基表面形成單菌落。 (2)乳酸菌代謝過程中可產(chǎn)生乳酸，若在培養(yǎng)基中加入乳酸菌代謝

43、過程中可產(chǎn)生乳酸，若在培養(yǎng)基中加入碳酸鈣，碳酸鈣，則碳酸鈣既可以中和乳酸，則碳酸鈣既可以中和乳酸，又可以在乳酸菌菌落的又可以在乳酸菌菌落的周圍出現(xiàn)明顯透明圈，據(jù)此可以用于乳酸菌的鑒別。周圍出現(xiàn)明顯透明圈，據(jù)此可以用于乳酸菌的鑒別。 (3)乳酸菌在乳酸菌在20 長(zhǎng)期保存時(shí)，長(zhǎng)期保存時(shí)，為了避免水結(jié)冰產(chǎn)生為了避免水結(jié)冰產(chǎn)生冰晶損傷細(xì)胞，在菌液中常需要加入一定量的甘油。冰晶損傷細(xì)胞，在菌液中常需要加入一定量的甘油。 32016全國(guó)卷全國(guó)卷空氣中的微生物在重力等作用下，空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的

44、微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下： 配制培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基(成分：成分： 牛肉膏、牛肉膏、 蛋白胨、蛋白胨、NaCl、X、H2O)； 制作無(wú)菌平板；制作無(wú)菌平板； 設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作； 將各組平板置于將各組平板置于37 恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間， 統(tǒng)計(jì)統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問題：回答下列問題： 瓊脂瓊脂 。 若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分X通常是

45、通常是_將各實(shí)驗(yàn)組平板分將各實(shí)驗(yàn)組平板分(2)步驟中，實(shí)驗(yàn)組的操作是步驟中，實(shí)驗(yàn)組的操作是_ 別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時(shí)間別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時(shí)間 。 _ 若在某次調(diào)查中，若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36(3)牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨 。(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于_個(gè)個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種個(gè)菌落，這種污染污染結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了_現(xiàn)象。若將現(xiàn)象。若將30(即即 366)個(gè)個(gè)/平平 板板 作作 為為 本本 組組 菌菌 落落 數(shù)數(shù) 的的 平平 均均 值值 ， 該該 做做 法法不正確不正確填填“正確正確”或或“不正確不正確”)。 _( 解析解析 (1)培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨可為培養(yǎng)基中的培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨可為培養(yǎng)基中的微生物提供氮源；制備固體培養(yǎng)基需加入瓊脂。微生物提供氮源；制備固體培養(yǎng)基需加入瓊脂。 (2)該實(shí)驗(yàn)的目的是了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物該實(shí)驗(yàn)的目的是了解教室內(nèi)不同高度空氣中微