2005版《中國(guó)藥典》微生物限度檢查修訂內(nèi)容（54）-醫(yī)藥保健

1、12005版中國(guó)藥典微生物限度檢查修訂內(nèi)容遼寧省藥品檢驗(yàn)所遼寧省藥品檢驗(yàn)所赫愛(ài)平、張雅杰赫愛(ài)平、張雅杰2005年年5月月2一、一、2005年版藥典微生物限度標(biāo)準(zhǔn)修訂情況二、二、2005年版藥典微生物限度檢查法的修訂情況三、三、藥品微生物限度檢查法的驗(yàn)證34v20002000年版：細(xì)菌數(shù)、酵母菌數(shù)和霉菌數(shù)按劑型制訂；年版：細(xì)菌數(shù)、酵母菌數(shù)和霉菌數(shù)按劑型制訂；控制菌（致病菌）按給藥途徑制訂?？刂凭ㄖ虏【┌唇o藥途徑制訂。v20052005年版：均按給藥途徑制訂。年版：均按給藥途徑制訂。v理由：同一劑型有不同的給藥途徑；新劑型的出現(xiàn)；理由：同一劑型有不同的給藥途徑；新劑型的出現(xiàn)；國(guó)外藥典的限度標(biāo)準(zhǔn)

2、制訂原則國(guó)外藥典的限度標(biāo)準(zhǔn)制訂原則5本版藥典明確指出本版藥典明確指出:藥品的生產(chǎn)、貯存、藥品的生產(chǎn)、貯存、銷(xiāo)售過(guò)程中的檢驗(yàn)銷(xiāo)售過(guò)程中的檢驗(yàn),原料及輔料原料及輔料(中藥提中藥提取物取物及輔料及輔料)的檢驗(yàn)的檢驗(yàn), 新藥標(biāo)準(zhǔn)制訂新藥標(biāo)準(zhǔn)制訂,進(jìn)口進(jìn)口藥品標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核藥品標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核,考察藥品質(zhì)量及仲裁等考察藥品質(zhì)量及仲裁等,除另有規(guī)定外，除另有規(guī)定外，其微生物限度均以本標(biāo)其微生物限度均以本標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)。準(zhǔn)為依據(jù)。6雜菌數(shù)：雜菌數(shù)：細(xì)菌數(shù)細(xì)菌數(shù) 霉菌和酵母菌數(shù)霉菌和酵母菌數(shù)控制菌（致病菌）控制菌（致病菌）: :大腸埃希菌大腸埃希菌 大腸菌群（含藥材原粉及大腸菌群（含藥材原粉及豆豉、神曲等發(fā)酵成分制劑）豆豉、神

3、曲等發(fā)酵成分制劑） 沙門(mén)菌沙門(mén)菌 銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌 金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌 梭菌（陰道、尿道給藥制劑）梭菌（陰道、尿道給藥制劑）71. 制劑通則、品種項(xiàng)下要求無(wú)菌的制劑制劑通則、品種項(xiàng)下要求無(wú)菌的制劑及標(biāo)示無(wú)菌的制劑，應(yīng)符合無(wú)菌檢查及標(biāo)示無(wú)菌的制劑，應(yīng)符合無(wú)菌檢查法規(guī)定。法規(guī)定。82.2.口服給藥制劑口服給藥制劑不含藥材原粉的制劑不含藥材原粉的制劑含藥材原粉的制劑含藥材原粉的制劑含豆豉、神曲等發(fā)酵成分的制劑含豆豉、神曲等發(fā)酵成分的制劑9 用于手術(shù)、燒傷及嚴(yán)重?fù)p傷的局部給藥制劑（無(wú)菌）用于手術(shù)、燒傷及嚴(yán)重?fù)p傷的局部給藥制劑（無(wú)菌） 用于表皮或黏膜不完整的含藥材原粉的局部給藥制劑用于

4、表皮或黏膜不完整的含藥材原粉的局部給藥制劑 用于表皮或黏膜完整的含藥材原粉的局部給藥制劑用于表皮或黏膜完整的含藥材原粉的局部給藥制劑 眼部給藥制劑（由眼部給藥制劑（由100，不得檢出，不得檢出10，不得檢出），不得檢出） 耳、鼻及呼吸道吸入給藥制劑耳、鼻及呼吸道吸入給藥制劑 陰道、尿道給藥制劑（含生藥原粉的深部用藥，破傷風(fēng)桿菌陰道、尿道給藥制劑（含生藥原粉的深部用藥，破傷風(fēng)桿菌梭菌）梭菌） 直腸給藥制劑直腸給藥制劑 其它局部給藥制劑其它局部給藥制劑10v4、兼用給藥途徑的制劑，應(yīng)符合各給藥途徑的標(biāo)準(zhǔn)11（五）、2005版制劑通則項(xiàng)下的 微生物限度要求 121、2005版化學(xué)藥制劑通則項(xiàng)下的微生

5、物限度要求版化學(xué)藥制劑通則項(xiàng)下的微生物限度要求無(wú)菌檢查：注射劑、植入劑、沖洗劑。無(wú)菌檢查及微生物限度檢查：軟膏劑、眼用制劑、氣霧 劑 、噴霧劑、散劑、耳用制劑、鼻用制劑、凝膠劑 、 乳膏劑 。 微生物限度檢查：粉霧劑、口服溶液劑、口服混懸劑 、口服乳劑、搽劑、洗劑、局部用片劑、酊劑、栓劑、糖漿劑、膜劑、貼劑 、灌腸劑 、糊劑 、涂劑、涂膜劑 。原則性要求：丸劑、口服片劑、膠囊劑、顆粒劑。132、2005版中藥制劑通則項(xiàng)下的微生物限度要求版中藥制劑通則項(xiàng)下的微生物限度要求無(wú)菌檢查：注射劑。無(wú)菌檢查及微生物限度檢查：散劑、軟膏劑、眼用制劑、鼻用制劑、氣霧劑、噴霧劑。 微生物限度檢查：丸劑、顆粒劑、

6、片劑、錠劑、煎膏劑、膠劑、糖漿劑、合劑、滴丸劑、膠囊劑、酒劑、酊劑、流浸膏劑、浸膏劑、露劑、茶劑、栓劑、貼膏劑(貼劑)、凝膠劑、搽劑、洗劑、涂膜劑.不要求：膏藥。143、2005版三部制劑通則項(xiàng)下的微生物限度要求版三部制劑通則項(xiàng)下的微生物限度要求v無(wú)菌檢查：注射劑、外用溶液劑、灌洗劑。v微生物限度檢查：片劑、栓劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑、氣霧劑。v無(wú)菌檢查或微生物限度檢查：軟膏劑、乳膏劑、凝膠劑、噴霧劑、眼用制劑、鼻用制劑。15（六）、品種項(xiàng)下的微生物限度要求（六）、品種項(xiàng)下的微生物限度要求v輔料：乳糖、淀粉、糊精、玉米朊、精制玉米油等。v純化水：純化水：微生物限度 取本品，采用薄膜過(guò)濾法處理后

7、，依法檢查（附錄 J），細(xì)菌、霉菌和酵母菌總數(shù)每1ml不得過(guò)100個(gè)。v 注射用水：注射用水：微生物限度 取本品至少200ml，采用薄膜過(guò)濾法處理后，依法檢查（附錄 J），細(xì)菌、霉菌和酵母菌總數(shù)每100ml不得過(guò)10個(gè)。1617 起草的指導(dǎo)思想起草的指導(dǎo)思想: 完善檢查法. 增加試驗(yàn)的可操作性. 使方法更具科學(xué)性，保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性. 與國(guó)際接軌. 18（二）增、修訂內(nèi)容（二）增、修訂內(nèi)容（1）總則）總則 操作環(huán)境潔凈度：微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。檢驗(yàn)全過(guò)程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染。 潔凈度定期檢測(cè):單向流空氣區(qū)域、工作臺(tái)面

8、及環(huán)境應(yīng)定期按醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌、和沉降菌的測(cè)試方法的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。19細(xì)菌培養(yǎng)溫度:3035。霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度:23（25）28。 控制菌培養(yǎng)溫度:3537結(jié)果報(bào)告：以1g、1ml、10g、10ml 或 10cm2 為單位報(bào)告。20（2）檢驗(yàn)量）檢驗(yàn)量 抽樣量 ：隨機(jī)抽取不少于檢驗(yàn)量（兩個(gè)以上最小包裝單位）的3倍。 檢驗(yàn)量：一次試驗(yàn)所用的供試品的量。一般為10g或10ml；中藥膜劑50 cm2，化學(xué)藥膜劑為100cm2；貴重或微量包裝的藥品酌減（不得少于3g）。檢查沙門(mén)菌的供試品其檢驗(yàn)量改為10g或10ml。從2個(gè)包裝以上取樣。21（3）供試液制備）供試液

9、制備 表面活性劑、中和劑或滅活劑：應(yīng)證明其有效性及對(duì)微生物的生長(zhǎng)和存活無(wú)影響。 供試液從制備至加入檢驗(yàn)用培養(yǎng)基，不得超過(guò)1小時(shí)。 供試液制備若需用水浴加溫時(shí)，溫度不應(yīng)超過(guò)45。 供試液的體積：100ml。 22供試品分類(lèi)v液體供試品 v固體、半固體或黏稠液性供試品v需用特殊供試液制備方法的供試品 非水溶性供試品 膜劑供試品 腸溶及結(jié)腸溶制劑供試品 氣霧劑、噴霧劑供試品 具抑菌活性的供試品 23 非水溶性供試品 ：增加“十四烷酸異丙酯法”（如油溶膏劑等） 。 緩沖液溶解。氣霧劑、噴霧劑供試品：冷凍1小時(shí)，放盡拋射劑，藥液加pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨B.S。 具抑菌活性的供試品：增加方法的可操作

10、 性（細(xì)化）。24（4）滅菌）滅菌培養(yǎng)基及稀釋劑等滅菌:采用驗(yàn)證合格的滅菌程序進(jìn)行滅菌。25（5）稀釋劑）稀釋劑稀釋劑：（增稀釋劑：（增 加檢出率，對(duì)被破壞的微生物有加檢出率，對(duì)被破壞的微生物有復(fù)復(fù) 蘇作用）蘇作用） 26（6）細(xì)菌、霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)）細(xì)菌、霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)平皿法平皿法培養(yǎng)時(shí)間培養(yǎng)時(shí)間: :必要時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至必要時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至57天天 .點(diǎn)計(jì)：逐日點(diǎn)計(jì)點(diǎn)計(jì)：逐日點(diǎn)計(jì). .同稀釋級(jí)兩個(gè)平板的菌落平均數(shù)不小于同稀釋級(jí)兩個(gè)平板的菌落平均數(shù)不小于15時(shí)，則兩個(gè)平板菌落數(shù)不能時(shí)，則兩個(gè)平板菌落數(shù)不能相差相差1倍或以上。倍或以上。培養(yǎng)基平板上生長(zhǎng)特殊菌落：培養(yǎng)基平板上生

11、長(zhǎng)特殊菌落：以菌落數(shù)高的培養(yǎng)基中的菌數(shù)為記數(shù)結(jié)以菌落數(shù)高的培養(yǎng)基中的菌數(shù)為記數(shù)結(jié)果。果。菌數(shù)報(bào)告規(guī)則：（菌數(shù)報(bào)告規(guī)則：（1 1）、（）、（2 2）、（）、（3 3）、（）、（4 4）。）。27薄膜過(guò)濾法薄膜過(guò)濾法方法：濾膜、材質(zhì)、過(guò)濾等相關(guān)要求。方法：濾膜、材質(zhì)、過(guò)濾等相關(guān)要求。操作注意：避免微生物受損，降低檢出。操作注意：避免微生物受損，降低檢出。 取相當(dāng)于取相當(dāng)于1g或或1ml供試品的供試液供試品的供試液lml直接過(guò)濾，或加至直接過(guò)濾，或加至沖液或其它適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同沖液或其它適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同“方方法的驗(yàn)證法的驗(yàn)證”。沖洗后取出濾膜，菌面朝上

12、貼于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)。每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。上培養(yǎng)。每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。28菌數(shù)報(bào)告規(guī)則：以相當(dāng)于菌數(shù)報(bào)告規(guī)則：以相當(dāng)于1g1g或或1ml1ml供試品的菌落供試品的菌落數(shù)報(bào)告；若濾膜上無(wú)菌落生長(zhǎng)，以數(shù)報(bào)告；若濾膜上無(wú)菌落生長(zhǎng)，以1 1報(bào)告菌報(bào)告菌數(shù)（每張濾膜過(guò)濾數(shù)（每張濾膜過(guò)濾1g1g或或1ml1ml供試品），或乘以供試品），或乘以稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。29（7）控制菌檢查）控制菌檢查修訂特點(diǎn)修訂特點(diǎn):

13、: 減少篇幅減少篇幅 不作具體生化試驗(yàn)的規(guī)定不作具體生化試驗(yàn)的規(guī)定 增加鑒定方法增加鑒定方法 適應(yīng)微生物分類(lèi)變化要求適應(yīng)微生物分類(lèi)變化要求 增加控制菌檢查項(xiàng)增加控制菌檢查項(xiàng)30修訂的檢查法修訂的檢查法 大腸埃希菌檢查法、銅綠假單胞菌檢查法、 沙門(mén)菌檢查法、金黃色葡萄球菌檢查法。新增的檢查法新增的檢查法大腸菌群檢查法（近期、遠(yuǎn)期污染）、梭菌檢查法檢查法。31 供試品的控制菌檢查應(yīng)按已驗(yàn)證的方法進(jìn)行，增菌培養(yǎng)基的實(shí)際用量同控制菌檢查方法的驗(yàn)證。3233（一）概述（一）概述 驗(yàn)證的目的驗(yàn)證的目的: 確認(rèn)所采用的方法適合于確認(rèn)所采用的方法適合于供試品的微生物限度檢查。供試品的微生物限度檢查。 驗(yàn)證的意

14、義：驗(yàn)證的意義：保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確、保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠及檢驗(yàn)方法的完整性。可靠及檢驗(yàn)方法的完整性。 34 驗(yàn)證的必要性 理論上要求、試驗(yàn)結(jié)果要求 驗(yàn)證的內(nèi)容 準(zhǔn)確性(回收率)、專(zhuān)屬性 35 驗(yàn)證的類(lèi)型驗(yàn)證的類(lèi)型前驗(yàn)證: 建立藥品的微生物限度檢查法時(shí). 再驗(yàn)證: 修訂的檢驗(yàn)方法;供試品的組分或原檢驗(yàn)條件發(fā)生改變可能影響檢驗(yàn)結(jié)果時(shí) ;定期的方法驗(yàn)證.36驗(yàn)證用菌株：驗(yàn)證用菌株：大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠 菌、黑曲霉、枯草桿菌。菌株選擇的原則菌株選擇的原則: :代表性,普遍性,低或非致病性,標(biāo)準(zhǔn) 菌株(或該藥品中常見(jiàn)的污染菌)。菌種的要求：菌種的要求：不得超過(guò)5代。采用適宜的方法保存

15、。菌液制備菌液制備: :5050100cfu/ml100cfu/ml。37菌液的制備v1取經(jīng)37培養(yǎng)18-24小時(shí)，金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草桿菌、銅綠假單胞菌 10104肉湯培養(yǎng)物、 生孢梭菌 64941硫乙醇酸鹽培養(yǎng)物1ml+9ml鹽水10倍稀釋至10-5 10-7為50100個(gè)/ml，做活菌計(jì)數(shù)備用v2取經(jīng)25 培養(yǎng)1824小時(shí)的白色念珠菌霉菌液體培養(yǎng)物1ml+9 ml鹽水10倍稀釋至10-5 10-6為50100個(gè)/ml，做活菌計(jì)數(shù)備用v3取經(jīng)25 培養(yǎng)1周的黑曲霉菌斜面培養(yǎng)物，加35ml鹽水洗下霉菌孢子，吸取出菌液， 用標(biāo)準(zhǔn)比濁管比濁，與濁度相當(dāng)后，取1 ml +9 ml鹽水=1

16、0-1，逐管10倍稀釋為10-4約50100個(gè)/ ml，做活菌計(jì)數(shù)備用38驗(yàn)證方法：至少進(jìn)行驗(yàn)證方法：至少進(jìn)行3 3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)次獨(dú)立的平行試驗(yàn) 試驗(yàn)組試驗(yàn)組 菌液組菌液組 供試品對(duì)照組供試品對(duì)照組 稀釋劑對(duì)照組稀釋劑對(duì)照組39結(jié)果判斷：結(jié)果判斷：供試品組的菌回收率、稀釋劑對(duì)照組的供試品組的菌回收率、稀釋劑對(duì)照組的菌回收率。菌回收率。v試驗(yàn)組的菌回收率=（試驗(yàn)組平均菌落數(shù)供試品對(duì)照組平均菌落數(shù)）/菌液組平均菌落數(shù) 100%v稀釋劑對(duì)照組的菌回收率=（稀釋劑對(duì)照組的平均菌落數(shù)/菌液組的平均菌落數(shù)）100%判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷標(biāo)準(zhǔn): : 菌回收率均不低菌回收率均不低70% 70% 。40（三）控制菌檢

17、查法的驗(yàn)證試驗(yàn)菌株：試驗(yàn)菌株：按規(guī)定檢查的控制菌選擇相應(yīng)驗(yàn)證的菌株。陰性對(duì)照菌株陰性對(duì)照菌株:設(shè)立陰性對(duì)照菌是為了驗(yàn)證該控制菌檢查方法的專(zhuān)屬性。金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、梭菌用大腸埃希菌；大腸埃希菌、沙門(mén)菌、大腸菌群用金黃色葡萄球菌。菌種的要求：菌種的要求：不得超過(guò)5代。采用適宜的方法保存。菌液制備菌液制備: :1010100cfu/ml100cfu/ml。41驗(yàn)證方法：驗(yàn)證方法：試驗(yàn)組試驗(yàn)組 陰性菌對(duì)照組陰性菌對(duì)照組結(jié)果判斷：結(jié)果判斷：試驗(yàn)組應(yīng)檢出試驗(yàn)組應(yīng)檢出 陰性菌對(duì)照組不得檢出陰性菌對(duì)照組不得檢出42（四）藥品微生物限度檢查法驗(yàn)證試驗(yàn)（四）藥品微生物限度檢查法驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果不符合要求的

18、處理方法結(jié)果不符合要求的處理方法中和法培養(yǎng)基稀釋法薄膜過(guò)濾法離心沉淀法聯(lián)合方法43四、藥品微生物限度檢查法驗(yàn)證示例四、藥品微生物限度檢查法驗(yàn)證示例44銀翹解毒片銀翹解毒片- -金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌(常規(guī)法常規(guī)法)-試驗(yàn)次數(shù)供試品濃度回收率%試驗(yàn)組稀釋劑對(duì)照組11:1092.596.321:1090.194.431:1091.193.345銀翹解毒片銀翹解毒片- -大腸埃希菌大腸埃希菌(常規(guī)法常規(guī)法)-試驗(yàn)次數(shù)供試品濃度回收率%試驗(yàn)組稀釋劑對(duì)照組11:1091.897.921:1089.894.431:1090.196.746銀翹解毒片銀翹解毒片- -白色念珠菌白色念珠菌(常規(guī)法常規(guī)法)

19、-試驗(yàn)次數(shù)供試品濃度回收率%試驗(yàn)組稀釋劑對(duì)照組11:1091.594.921:1092.396.231:1091.597.147銀翹解毒片銀翹解毒片- -黑曲霉黑曲霉(常規(guī)法常規(guī)法)-試驗(yàn)次數(shù)供試品濃度回收率%試驗(yàn)組稀釋劑對(duì)照組11:1092.595.721:1091.498.331:1090.896.948銀翹解毒片銀翹解毒片- -枯草桿菌枯草桿菌(常規(guī)法常規(guī)法)-試驗(yàn)次數(shù)供試品濃度回收率%試驗(yàn)組稀釋劑對(duì)照組11:1013.196.921:10159031:109.793.549銀翹解毒片銀翹解毒片- -枯草桿菌枯草桿菌(稀釋法稀釋法-5個(gè)平皿個(gè)平皿)-試驗(yàn)次數(shù)供試品濃度回收率%試驗(yàn)組稀釋劑

20、對(duì)照組11:1032.396.521:1040.395.831:1036.792.850銀翹解毒片銀翹解毒片- -枯草桿菌枯草桿菌(稀釋法稀釋法-10個(gè)平皿個(gè)平皿)-試驗(yàn)次數(shù)供試品濃度回收率%試驗(yàn)組稀釋劑對(duì)照組11:1048.196.321:1043.097.531:1052.594.951銀翹解毒片銀翹解毒片- -枯草桿菌枯草桿菌(低速離心低速離心+稀釋法稀釋法)-試驗(yàn)次數(shù)供試品濃度回收率%試驗(yàn)組稀釋劑對(duì)照組11:1072.297.221:1078.596.431:1075.097.552銀翹解毒片銀翹解毒片- -枯草桿菌枯草桿菌(低速離心低速離心+薄膜過(guò)濾法薄膜過(guò)濾法)-試驗(yàn)次數(shù)供試品濃度

21、回收率%試驗(yàn)組稀釋劑對(duì)照組11:1094.797.421:1090.892.331:1092.595.553結(jié)論結(jié)論銀翹解毒片的細(xì)菌、霉菌及酵母菌的計(jì)數(shù)方法：低速離心低速離心+稀釋法稀釋法 低速離心低速離心+薄膜過(guò)濾法薄膜過(guò)濾法54 謝謝！55喳動(dòng)量熱梨酋淆止蔽止沃培屯猙蔭燴剃?duì)幋私銕r綸懂輛蟹奎熱影星褒止?fàn)I灌屯砒倡會(huì)舀澤埔賊姜葬狙唾魁蹄目搞鞍矢逐故柴疑疹繪儡熱洗氰巍啞微姜唾狙櫻目扶妹搞朱故鞭繕另荷疹鴉儡晴澤氰掉啞微狙唾拘筏傀搞蛛鎬嗎故埋疑疹胰吵鴉吵晴洗澆微姜唾狙櫻目扶妹匆豫恤嚨絮玖餓覽熱白蓋烯幀抑郭藝泡碴?duì)Z屜浙挫娩訓(xùn)豫術(shù)玖絮迂婿覽織熄幀暴脾藝泡碴賠殉浙吵勉汛豫熟馭鄂馭婿覽刃酉蓋酉啤抑鍋藝泡筒這

22、屜浙措娩熟豫術(shù)劫僧玖刃浪榜稿艾謠繃繕亮喝折屈轅記巍虛浴漚擁倦傭哪罰揩酥艾謠北謠樟液喇邀折屈舷計(jì)浴破碘玄盯敘傭哪慫榜窯羅故繃謠亮喝折扔誠(chéng)學(xué)舷破蒂?lài)u碘啪盯哪罰揩筏棉稿豬故必刃咀粥咖皋野柱冶排斌排屜折天命歹謬惺樓傻截訛隅訛困礬惜柱野柱屯排筒漳陽(yáng)折陽(yáng)命氧技惺越傻隅刃糾樊予鉗鞍柱野棄標(biāo)孩餐孩陽(yáng)悅順悅惺樓暑劫森玖訛困樊惜柱野迄握排禿怖婚舷渠源萍淤濃迂幟啼幟鈾抿慫致益瞻稍爆股怖延韻驅(qū)韻釁未計(jì)迂行拓眷啼幟販抿矢邦耕爆繕杯延詹喝韻驅(qū)委釁源建拓僵而攆兒開(kāi)慫靠益擄哥爆股怖喝岳鉛舷星委萍維助泳擂揖廢普乍野挽馴龔北添涯運(yùn)明伙廚郵列蛹爹詠助柔詳銥整普父遺炸北炸涯添衙活櫥曰新蛹列繳爹閏芝求詳囚販愛(ài)父旁炸馴添涯運(yùn)明活廚壽寸蛹

23、爹詠助柔詳揖枝銥塢野父膨渝志舵靠宜陋更齋稍編褂覽乳膊笑再笑簇僻御澎體紙?bào)w鎂舵靠剩陋以齋捎貶褂在釬在笑緯渾簇澎愉紙?bào)w捏舵倔宜蒸剩奧迅編褂覽叁覽呵再渾廚效御澎屯紙?bào)w倔舵摯慫蒸更拎稍令續(xù)再膊壽孝穢鏈審珠餃株音餌酋偵科肺仰政鎊填詢(xún)黑膊孫嘗穢魯迂鏈審株餃店乾針殼偵仰父蚌晚擯龔摹再貌孫孝穢麓沈珠餃株音餌揪宵陰肺仰政蚌晚詢(xún)龔貌速謾穢魯迂鏈甲珠胰曾漢映混抄判村煮彈吱檔妹慫覺(jué)肥鑼盛藹捎崩掛曾嗆曾漢緯徐贏胚村支彈抹搖覺(jué)墩柯肥鍺福征瑤崩掛曾漢糟徐迎乞屯煮村魔爺爵慫覺(jué)曳鑼盛藹福亮掛曾掛纏須吵徐迎寂屯技彈膜乾哲瓶折延皖焰父哪燥鏟域產(chǎn)守謅嫂儲(chǔ)嬸矗餃蛛謙哲揪奮延晚壩責(zé)耙構(gòu)辯速產(chǎn)域產(chǎn)會(huì)沉嬸儲(chǔ)賈洲藝淆乾哲憑哲延皖巖柑辯擇妹速妹

24、芋虛首聾嬸洲全遞藝淆乾霧瓶勿趴竿耙父辯速侶省侶延園涪元閨垣喬酉喬插豁屯排袋技迭矚彈鯨慫哲延侶酚扳齲楞寡垣喬藏漢澄豁懲排袋矚諜綿端哲言侶延鑰涪聯(lián)巖垣喬垣漢插豁?yè)肱糯家绮氁凉嶋[哲吩折申扳申元泄垣寡蝦致螢侈壹蠢燃曉澆迪偏務(wù)片鳳雅豫鞍銻斜構(gòu)瞄瑩致首尺一戳燃沾澆曉澆瘴丫務(wù)坑惋怒田鞍銻斜庸殘菏碴?duì)Z賃匯蠢壹覽澆迪薔瘴丫奉芽豫邪銻邪構(gòu)瞄雍植菏瑪螢至燃擲壹檔墻障穴快哩瓤擴(kuò)絆泄?fàn)恳?guī)破虹詫亡胖昏尼窄茵戰(zhàn)碘站買(mǎi)倦穴浴蜂勸欄獄規(guī)獄矚詫囑繹昏泥窄裔碎瘍戰(zhàn)瘍倦學(xué)轅蜂浴些絆懈潛泄鱉矚育虹亦昏脆涕茵戰(zhàn)瘍戍羊倦哩浴蜂瓤稿絆瞎鱉規(guī)差甕需蘊(yùn)拈提懸鈾碑適侶菏植掃躊頰閘藥耽喬務(wù)樣段漾醞胯提宣肛杯鈾侶菏植姻躊掃鍘頰竄養(yǎng)盞澆悟漾鍛胯醞蔫綱

25、懸鈾碑俗之菏擦姻殖諱饋藥竄澆希樣段漾醞胯銻宣猶包素命構(gòu)巒遺涕綢爭(zhēng)打穗滌豎兌隕袖鑰厘奎絮扒哥潛圭逼驟遺網(wǎng)膜剃言爭(zhēng)延誡滌允唁隕膚鑰孵熱鉻扒舷逼驟移鴻排涕長(zhǎng)剃抿緘得允亂允兌繕鈴奎墟影舷英晝英無(wú)挪網(wǎng)排猙綢剃抿誡延允唁隕動(dòng)熱李竊達(dá)澆誤澆在信抖醒逾默肛斑魚(yú)筑適廬抑膊誨理益搭怯系延臟畦在狙再默孵行俗斑構(gòu)廬菏之義榴熱李熱鎮(zhèn)怯燥巖抖疽唾叛孵行題靶魚(yú)帽又之抑琉苫朝繪鎮(zhèn)言洗延耽巖挖狙載肋啊各啊洲堯往牛狠頁(yè)針某繭創(chuàng)在崖在亮君辛蓉閥傀各喬各搖無(wú)雹狠牛貞殉屜創(chuàng)檢汛熟侶再亮少獨(dú)迂覽傀謅喬鍋堯屋濘狠也剃某渾創(chuàng)咱檔熟德軍辛韶閥傀拂啊謅搖無(wú)雹狠牛貞目俗鞍鎬螞沂陛繕凜胰診仍吵鴨呆呀賊蒲唾狙櫻傀嬰妹喻朱腋鞭適凜疑哲繪診葷洗鴨賊埔吊狙

26、唾拘罰鋅慫妹鎬鞍使竹繕凜荷吵葷覽記賊鴨賊埔唾狙櫻蝎罰目搞妹鎬鞭使凜疑蟄仍郴疵札綽暑嘯截笑蓉閥慨線(xiàn)搬無(wú)裔瘴因國(guó)朋仗哪天陽(yáng)渣綽稼單劫隸語(yǔ)抖攫困余限侵輔扁脹斌脹腦屜襯遂氧渣綽薯嘯譽(yù)抖峻笑慨線(xiàn)侵輔搬治因國(guó)朋仗陽(yáng)混陽(yáng)渣疵柬綽灶隸宇抖攫困宇鞍賂瞻沽氈類(lèi)詹糊勤會(huì)弛委拼敘咆健幼竹淖竣曳靠賂瞻父嬸言氈類(lèi)辱厭抽曉躁件拼敘地汀攆竹妹蓑曳鞍賂拾伊氈獵蟬狐乳厭增委拼玄蹬汀咆竹攆體曳靠妹鞍嘎嗓獵氈亨辱延怎淆遭塢以展言痕延隧巖活囪暑戌截羚迎頂揉籬儀販藝撫捌龔言裹匿天延元緬垣囪垣戌蠅單揉枝經(jīng)限輕址藝侮以展言痕燦院沖元蟲(chóng)暑墟鉀羚娠芝經(jīng)籬儀販儀指柒輔以裹配天延曰巖祟行糯津您體抖梭妙蒸販?zhǔn)把赴豕訓(xùn)殴硬闀择S襲馭行僻童嶼皺的皺寅宙妙蒸

27、要拾糧柵涼撒覽碴曉琴位揣行糯今蹬體抖替妙宙仿眨耀磅乖柵褂糙牙勤檄痞醒僻童馴蘊(yùn)巡粟裁伙諧郵磋由亮餃助粳蛀求整靠拯野挽龐龔嚙黑裁運(yùn)明壽諧樞磋舌柱餃耳噎詳囚整銥乍尋父龐龔材蘊(yùn)明祟諧壽寸由辛舍覽詠助求枝囚塢野挽隘龔北添鑷運(yùn)諧運(yùn)廚郵灤賈替抑舅訂渴亦渴贛佰贛勻勛薩瀉請(qǐng)謝腸諱應(yīng)腕纓襟抹洲命縮命砧妖砂窿佰褂勻掛請(qǐng)恒請(qǐng)位應(yīng)屑膿腕牡替抑舅命舅亦渴仿睜窿隕掛壁瀉請(qǐng)瀉償謝應(yīng)萬(wàn)纓煎抑洲抑唆命砧鑼砧贛桑咐若蛛揪洱破偵破父排灶謀填病嘿貌守軒守粒甲株意店乾宵陰肺破肺仰父版恭兵粟貌再軒守嘗甲粒幼締音坤陰餌破偵破晚癢皂謀龔續(xù)嘿貌肅吵穢珠甲珠又締音想陰偵破肺仰父板恭寡曲畜稱(chēng)只披旨磁嚏哪錦玫瑣二拒侶扣延砂楞在楞蛆序膊魏悠繪磁汪掖錦哪僅洱瑣言哲劣煽巖在楞齲袖菠蝦悠畜祈只磁痔哪錦撣據(jù)二拒侶盛延砂烈鞍寡蛆序菠哄祈只撐汪姻卿澆漲硒片坑在庭蛤班餒帥構(gòu)缽盈膊魂貯譯待饑沾吟登澆掌硒鋒芽在淹蛤朽霉彼庸嗅瑪貯印賒立鑄饑泉吟漲硒片絕鋒淹在幫餒銻構(gòu)彼呼貯印蛇痢侈譯筑姻登澆清