從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報(bào)告三篇

1、從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報(bào)告三篇從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報(bào)告一【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、通過綠色植物色素的提取和分離，了解天然物質(zhì)的分離提純 與方法。2、通過薄層色譜分離操作，加深了解微量有機(jī)物色譜分離鑒定 的原理?！緦?shí)驗(yàn)原理】葉綠色存在兩種結(jié)構(gòu)相似的形式即葉綠素aC55H77O5N4Mg和葉綠素 b C55H70O6N4Mg ； 胡蘿卜素是具有長鏈結(jié)構(gòu)的共軛多烯， 有三種異構(gòu)體；葉黃素C40H56O2是胡蘿卜素的羥基衍生物。當(dāng)提取 時(shí)，從上到下顏色依次為：黃綠色，藍(lán)綠色，黃色和橙色。【實(shí)驗(yàn)儀器】研缽，色譜柱，丙酮，乙醇，乙醚， 中性氧化鋁，菠菜葉，燒杯， 漏斗，玻璃棒，濾紙，剪刀，脫脂棉，紗布?！緦?shí)驗(yàn)步驟

2、】1、稱取 30g 洗凈后用濾紙喜感的新鮮菠菜葉，用剪刀剪碎，放 入研缽中研磨， 研磨時(shí)放入少量碳酸鈣， 防止研磨過猛破壞葉綠素結(jié) 構(gòu)，研磨至爛。2、 將研磨碎的菠菜葉轉(zhuǎn)入小燒杯中，加入30mL 配好的乙醇乙 醚溶液，蓋上表面皿，防止有機(jī)溶劑蒸發(fā)。按小組成員分別浸泡 10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分鐘。3、浸泡期間，填充色譜柱，在最下面墊入脫脂棉，再蓋上一個(gè) 小濾紙片，裝入氧化鋁至 4/5 處，再蓋上一層濾紙片。4、將燒杯中的菠菜葉連帶著有機(jī)溶劑用紗布擠入漏斗中，轉(zhuǎn)入分液漏斗，加入10mL水洗滌，除去水層（下層），再用10mL水洗滌 一次。5、將分頁漏斗中的溶液慢慢

3、倒入色譜柱中，加幾滴丙酮既可以 看到顏色變化。6、洗凈儀器，收拾實(shí)驗(yàn)室，打掃衛(wèi)生。 【實(shí)驗(yàn)記錄】 雖然分層現(xiàn)象不是非常明顯，但是還是可以看得見分層現(xiàn)象?！窘Y(jié)果與討論】1 、做這個(gè)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，我覺得不應(yīng)該用紗布擠干，因?yàn)閭€(gè)人感 覺很多色素都被紗布吸走了，導(dǎo)致后來的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象沒有很明顯，經(jīng)過對比，沒用 紗布直接過濾的同學(xué)做出的現(xiàn)象比用紗布做的現(xiàn)象要明顯的多。2、有機(jī)溶劑往往比較容易揮發(fā)，所以加入后要蓋上表面皿。3、此實(shí)驗(yàn)浸泡 15 分鐘以后現(xiàn)象就可以很明顯， 因此以后在課堂 上給學(xué)生演示的時(shí)候浸泡的時(shí)間不是越長越好的， 15 分鐘足矣。4、若最后顏色沒有明顯的分層，可以加入幾滴丙酮幫助分層。 從菠菜

4、中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報(bào)告二綠色植物如菠菜葉中含有葉綠素（綠） 、胡蘿卜素（橙）和葉黃 素（黃）等多種天然色素。葉綠素存在兩種結(jié)構(gòu)相似的形式即葉綠素a(C55H72O5N4Mg和葉綠素b(C55H70O6N4Mg)差別僅是a中一個(gè)甲基被b中的甲?；?所取代。它們都是吡咯衍生物與金屬鎂的絡(luò)合物， 是植物進(jìn)行光合作 用所必需的催化劑， 也是食用的綠色色素， 可用于糕點(diǎn)、飲料水等中， 添加于膠姆糖中還可消除口臭。植物中a的含量通常是b的3倍。盡 管葉綠素分子中含有一些極性基團(tuán)， 但大的烴基結(jié)構(gòu)使它易溶于石油 醚等一些非極性溶劑。胡蘿卜素(C40H56)是具有長鏈結(jié)構(gòu)的共軛多烯。它有三種異 構(gòu)體a ,B ，

5、和丫 一胡蘿卜素，其中B 異構(gòu)體含量最多，也最 重要。生長期較長的綠色植物中，異構(gòu)體中B的含量多達(dá)90%。B具有維生素A的生理活性，其結(jié)構(gòu)是兩分子維生素 A在鏈端失去 兩分子水結(jié)合而成。生物體內(nèi)，B體受酶催化氧化即形成維生素 A。 目前，B體可作為維生素A使用，也可作為食品工業(yè)的色素，B 胡蘿卜素還有防癌功能。葉黃素(C40H56O2是胡蘿卜素的羥基衍生物，在光合作用中 能起收集光能的作用。 在綠葉中通常是胡蘿卜素的兩倍。 較易溶于醇 而在石油醚中溶解度較小。 由此可見，葉綠素等天然色素有廣泛的 用途，對于色素的提取與分離就顯得很重要了 本實(shí)驗(yàn)就提取和分離 做了相關(guān)的研究。1 實(shí)驗(yàn)部分1.1

6、儀器與試劑儀器：研缽、分液漏斗、顯微載玻片、毛細(xì)管、層析柱(20X 10 cm)、UV-240紫外分光光度計(jì)試劑：石油醚、 乙醇（95%）、菠菜葉、丙酮 （化學(xué)純 ）、乙酸乙酯 （化 學(xué)純）、無水硫酸鈉、硅膠G、中性氧化鋁（150目160目）1.2 提取與分離浸泡法提取色素在研缽中放入20 g新鮮的菠菜葉，加入20 mL3: 2（體積比）石油 醚乙醇混合液， 適當(dāng)研磨 （不要研成糊狀， 否則會給分離造成困難 ）， 用傾析法將提取液轉(zhuǎn)移到分液漏斗中， 每次用 10ml 水洗滌兩次 ,以除去萃取液中的乙 醇。洗滌時(shí)要輕輕旋蕩，以防乳化。棄去水乙醇層，石油醚層用無水 硫酸鈉干燥，干燥后濾入小圓底燒瓶

7、， 在水浴上蒸發(fā)濃縮至大約 l m L。薄層層析取四塊顯微載玻片， 硅膠 G 經(jīng) 0.5羧甲基纖維素鈉調(diào)制后制板， 在室溫下晾干后在110° C活化1h。選取效果最好的一塊進(jìn)行點(diǎn)樣。展開劑:（1 ）石油醚丙酮 =8:2（體積比） （2）石油醚乙酸乙酯 =6:4（體積比） 取活化后的層析板，點(diǎn)樣，放入預(yù)先選定展開劑的廣口瓶。瓶的 內(nèi)壁貼一張高5cm,繞周長4/5的濾紙，下部浸入展開劑中，蓋上 瓶蓋。待展開劑上升至規(guī)定高度時(shí)，取出層析板，晾干，做出標(biāo)記。分別用兩種展開劑展開, 比較不同展開劑的展開效果。 觀察斑點(diǎn)在板上的位置并排列出胡蘿卜素、葉綠素和葉黃素的 Rf 值的大小 注意更換展開

8、劑時(shí)， 需干燥層析瓶， 不允許前一種展開劑帶入后一系 統(tǒng)。柱層析取少量脫脂棉在小燒杯中用石油醚浸潤后， 擠壓除去氣泡， 放在 層析柱底部。在層析柱中加15cm石油醚。加入中性氧化鋁8克，打 開柱下活塞，保持石油醚高度不變，氧化鋁在柱子中堆積。裝完后， 打開下端活塞， 放出溶劑， 直到氧化鋁表面剩下 1 2mm 高為止（不 能使氧化鋁表面露出液面） 。將濃縮液用滴管加到柱頂部， 打開下端活塞， 讓液面下降到柱面 以下1mm,關(guān)閉活塞，加數(shù)滴石油醚，打開活塞，使液面下降，幾次 反復(fù)，使色素全部進(jìn)入柱體。在柱頂加 1.5cm 洗脫劑 9：1（體積比）石油醚丙酮。打開 活塞，用錐形瓶收集。當(dāng)?shù)谝粋€(gè)有色

9、成分即將滴出時(shí)，取另一錐形瓶 收集，得橙黃色溶液，即胡蘿卜素。2. 結(jié)果與討論2.1 提取由于甲醇與乙醇的極性相近，但是乙醇易得、無毒，所以用3：2 的石油醚一乙醇通過浸泡的方法提取菠菜色素，而不是用石油醚 甲醇。2.2 分離薄層層析薄層層析又叫薄層色譜， 是色譜法中的一種， 是快速分離和定性 分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)， 屬固液吸附色譜， 它兼?zhèn)?了柱色譜和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)，可以用于少量樣品（幾到幾微克，甚至0.01微克）的分離。實(shí)驗(yàn)中涉及的菠菜色素的比移值 （Rf）（薄層色譜 法中原點(diǎn)到斑點(diǎn)中心的距離與原點(diǎn)到溶劑前沿的距離的比值） 列表如 下：在一定的色譜條件下，特定化合物的 Rf 值

10、是一個(gè)常數(shù)，因此有 可能根據(jù)化合物的Rf值鑒定化合物。菠菜色素中各種色素的比移值 Rf大小為：胡蘿b素 葉黃素 葉 綠素，按此順序它們的非極性依次減弱。 物質(zhì)極性的判斷為柱層析中 洗脫劑的選擇提供了參考價(jià)值。柱層析胡蘿卜素極性最小，因此胡蘿卜素的洗脫劑用極性較小的 9： l 的石油醚 -丙酮溶劑效果較好。但要收集其他幾種色素得換用其他的 洗脫劑，因?yàn)樯氐臉O性各不相同，且有一定差別。如用7： 3 石油醚-丙酮分離葉黃素分離出胡蘿卜素和葉黃素后，可加大溶劑極性以較快速度洗脫葉綠素用 3： 1： 1 的 丁醇-乙醇-水洗脫劑洗脫葉綠素。3.結(jié)論采用浸泡法提取色素比抽濾法更好。在薄層層析時(shí)，用石油醚

11、 - 丙酮=8:2時(shí)，能更明顯的看到分層。 在柱色譜洗脫劑的選擇上， 基于 薄層分析的極性判斷選擇了石油醚 -丙酮 =9:1 的溶劑作為洗脫劑，取 得了非常好的效果。 通過實(shí)驗(yàn)， 進(jìn)一步認(rèn)識到洗脫劑在柱層析中的重 要性。從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報(bào)告三【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、通過綠色植物色素的提取和分離，了解天然物質(zhì)的分離提純 與方法。2、通過薄層色譜分離操作，加深了解微量有機(jī)物色譜分離鑒定 的原理?！緦?shí)驗(yàn)原理】葉綠色存在兩種結(jié)構(gòu)相似的形式即葉綠素A(C55H77O5N4Mg和葉綠素B (C55H70O6N4MQ胡蘿卜素是具有長鏈結(jié)構(gòu)的共軛多烯， 有三種異構(gòu)體；葉黃素(C40H56O2是胡蘿卜素的羥基衍生

12、物。是胡蘿卜素的 羥基衍生物。當(dāng)提取時(shí)，從上到下顏色依次為：黃綠色，藍(lán)綠色，黃 色和橙色?！緦?shí)驗(yàn)儀器】研缽， 色譜柱， 丙酮，乙醇，乙醚， 中性氧化鋁，菠菜葉，燒杯， 漏斗，玻璃棒，濾紙，剪刀，脫脂棉，紗布?！緦?shí)驗(yàn)步驟】1、稱取 30g 洗凈后用濾紙喜感的新鮮菠菜葉，用剪刀剪碎，放 入研缽中研磨， 研磨時(shí)放入少量碳酸鈣， 防止研磨過猛破壞葉綠素結(jié)構(gòu)，研磨至爛2、將研磨碎的菠菜葉轉(zhuǎn)入小燒杯中，加入 30mL 配好的乙醇乙 醚溶液，蓋上表面皿，防止有機(jī)溶劑蒸發(fā)。按小組成員分別浸泡 10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分鐘。3、浸泡期間，填充色譜柱，在最下面墊入脫脂棉，再蓋上一個(gè)小濾紙片，裝入氧化鋁至 4/5 處，再蓋上一層濾紙片。4、將燒杯中的菠菜葉連帶著有機(jī)溶劑用紗布擠入漏斗中，轉(zhuǎn)入分液漏斗，加入10mL水洗滌，除去水層（下層），再用10mL水洗滌 一次。5、將分頁漏斗中的溶液慢慢倒入色譜柱中，加幾滴丙酮既