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文檔簡介
1、發(fā)酵工程試題庫 一、名詞解釋1. 代謝控制發(fā)酵:人為地改變微生物的代謝調(diào)控機制,使有用中間代謝產(chǎn)物過量積累,這種發(fā)酵稱為代謝 控制發(fā)酵。2. 臨界氧濃度:微生物的耗氧速率受發(fā)酵液中氧的濃度的影響,各種微生物對發(fā)酵液中溶氧濃度有一個最 低要求,這一溶氧濃度叫做臨界氧濃度。3. 固定化酶:在酶促反應(yīng)過程中,將酶定位或限制在一定的空間范圍內(nèi),使其在反應(yīng)后易于與反應(yīng)物和產(chǎn) 物分開,從而達到反復(fù)使用和連續(xù)化生產(chǎn)的新型酶制劑。4. 營養(yǎng)缺陷型突變株:指某一菌株喪失了合成某種營養(yǎng)物質(zhì)的能力,在培養(yǎng)基中若不外加這種營養(yǎng)成分就 不能正常生長的變異菌株。5. 巴氏消毒法:將物料加熱至60C維持60min,以殺死不
2、耐高溫的物料中的微生物營養(yǎng)細胞。6. 發(fā)酵工程:是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段,利用微生物的某些特定功能,或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn) 過程,為人類生產(chǎn)有用產(chǎn)品的一種技術(shù)。7. 初級代謝產(chǎn)物:微生物細胞在其對數(shù)生長期所產(chǎn)生的產(chǎn)物,往往是細胞生長和繁殖中所必需的物質(zhì),如 糖、氨基酸、脂肪酸、核苷酸以及由這些化合物聚合而成的高分子化合物,如多糖、蛋白質(zhì)、脂類和核 酸等,這些化合物稱為初級代謝產(chǎn)物。8. 培養(yǎng)基:是人工配制的適合于不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。根據(jù)微生物對營養(yǎng)的要 求,培養(yǎng)基都基本包括碳源、氮源、無機鹽、生長因子和水分,此外,還應(yīng)根據(jù)微生物的要求,有一定 的酸堿度和滲透壓。9
3、. 發(fā)酵:指微生物在無氧條件下,分解各種有機物質(zhì)產(chǎn)生能量的一種方式?;蛘吒鼑栏竦卣f,發(fā)酵是以有 機物作為電子受體的氧化還原產(chǎn)能反應(yīng)。如葡萄糖在無氧條件下被微生物利用產(chǎn)生酒精并放出二氧化 碳,同時獲得能量。10. 酵母的第三型發(fā)酵,又稱堿法甘油發(fā)酵。即在堿性條件下(pH7.6), 2 分子乙醛發(fā)生歧化反應(yīng),生成 1分子乙醇和 1 分子乙酸,而磷酸二羥丙酮則還原為甘油。 總反應(yīng)式: 2 葡萄糖 + H2O 2 甘油 + 乙醇 + 乙酸 + 2CO211. DE 值(葡萄糖值):表示淀粉水解程度及糖化程度,指葡萄糖(所有測定的還原糖都當(dāng)作葡萄糖來計 算)占干物質(zhì)的百分率。12. 發(fā)酵熱:引起發(fā)酵過程
4、溫度變化的原因是發(fā)酵過程所產(chǎn)生的熱量,稱為發(fā)酵熱。發(fā)酵熱包括生物熱、 攪拌熱、蒸發(fā) (汽化 )熱和輻射熱等。13. 生物膜法廢水處理:使微生物群體附著在固體介質(zhì)(濾料) 的表面形成生物膜,廢水與生物膜接觸過程中,有機污染物質(zhì)被吸附且氧化分解,使廢水得到凈化的廢水處理方法。14. 耗氧速率:指單位體積培養(yǎng)液在單位時間內(nèi)的吸氧量,單位為mmolO2/L?h 。15. 酶合成調(diào)節(jié):酶合成的調(diào)節(jié)是通過調(diào)節(jié)酶合成的量來控制微生物代謝速度的調(diào)節(jié)機制,這類調(diào)節(jié)在基 因轉(zhuǎn)錄水平上進行。酶合成調(diào)節(jié)主要有酶的誘導(dǎo)和酶的阻遏兩種類型。16. 呼吸強度:指單位重量的干菌體在單位時間內(nèi)所吸取的氧量,單位為mmolO2/
5、g 干菌體 ?h。17. 連續(xù)培養(yǎng):是指以一定的速度向發(fā)酵罐內(nèi)添加新鮮培養(yǎng)基,同時以相同的速度流出培養(yǎng)液,從而使發(fā) 酵罐內(nèi)的液量維持恒定,使培養(yǎng)物在近似恒定狀態(tài)下生長的培養(yǎng)方法。18. 固定化技術(shù) : 通過化學(xué)或物理的手段將游離細胞或酶定位于限定的空間區(qū)域內(nèi),并保持其固有的催化 活性,使其活性能被反復(fù)利用的技術(shù)。19. BOD :指 1L 廢水中的有機污染物在好氧微生物作用下進行氧化分解時所消耗的溶氧量。實際測定水樣在20C下培養(yǎng)5d的需氧量 B0D5。20. 碳源:凡可構(gòu)成微生物細胞和代謝產(chǎn)物中碳素來源的營養(yǎng)物質(zhì),統(tǒng)稱為碳源。21. 酶活性調(diào)節(jié):通過改變酶分子的活性來調(diào)節(jié)代謝速度的調(diào)節(jié)方式稱
6、為酶活性的調(diào)節(jié),是發(fā)生在蛋白質(zhì)水平上的調(diào)節(jié)。22. COD :指用強氧化劑使被測廢水中有機物進行化學(xué)氧化時所消耗的氧量。常用重鉻酸鉀測得的耗氧量 CODCr 值表示。23. 介質(zhì)過濾除菌:是使空氣通過經(jīng)高溫滅菌的介質(zhì)過濾層,將空氣中的微生物等顆粒阻截在介質(zhì)層中, 而達到除菌的目的。二、判斷改錯題1. 人工誘變、細胞工程、基因工程等都能對微生物進行定向改造。.X2. 單細胞蛋白是從微生物細胞中提取岀來的。X3. 精確定量某些成分而配制的培養(yǎng)基是所有成分的性質(zhì)和數(shù)量已知的培養(yǎng)基,稱為天然培養(yǎng)基。X4. 環(huán)境條件的變化不僅會影響微生物的生長繁殖,也會影響微生物的代謝途徑。5. 發(fā)酵罐中微生物的生長繁
7、殖、代謝產(chǎn)物的形成都與攪拌速度有關(guān)。6. 微生物的最適生長繁殖溫度就是積累代謝產(chǎn)物的最適溫度。X7. 通過調(diào)節(jié)基礎(chǔ)培養(yǎng)基的配方和補料控制可以調(diào)控發(fā)酵醪的pH值。8. 滅菌就是殺死一定環(huán)境中所有微生物的營養(yǎng)細胞、抱子和胚芽。X9. 巴斯德消毒法能殺死牛奶或奶制品中存在的所有微生物。X10. 發(fā)酵產(chǎn)物的提取和精制過程也就是產(chǎn)物濃縮和純化過程?!?1. 細菌分裂繁殖一代所需時間為代時?!?2. 凡是影響微生物生長速率的營養(yǎng)成分均稱為生長限制因子。V13. 在最適生長溫度下,微生物生長繁殖速度最快,因此生產(chǎn)單細胞蛋白的發(fā)酵溫度應(yīng)選擇最適生長溫 度。X14. 參與淀粉酶法水解的酶包括淀粉酶、麥芽糖酶和纖
8、維素酶等。X15. EMP和HMP代謝途徑往往同時存在于同一種微生物的糖代謝中。X16. 同功酶是行使同一功能、結(jié)構(gòu)不同的一組酶V17. 最適的生長繁殖溫度就是微生物代謝的最適溫度。X18. 微生物的次級代謝產(chǎn)物是初級代謝不暢通時,由支路代謝產(chǎn)生的。X19. 底物水平磷酸化和氧化磷酸化一樣都是通過電子傳遞系統(tǒng)產(chǎn)生ATP oX20. 分批培養(yǎng)時,細菌首先經(jīng)歷一個適應(yīng)期,此期間細胞處于代謝活動的低潮,所以細胞數(shù)目并不明顯增 加。21. 化能異養(yǎng)菌以有機物作為呼吸底物,以02作為最終電子受體進行有氧呼吸作用產(chǎn)生能量。三、單項選擇題1. 下列關(guān)于發(fā)酵工程的說法,錯誤的是(C )A 發(fā)酵工程產(chǎn)品主要是指
9、微生物的代謝產(chǎn)物、酶和菌體本身B 可以通過人工誘變選育新菌株C 培養(yǎng)基、發(fā)酵設(shè)備和菌種必須經(jīng)過嚴格的滅菌D 環(huán)境條件的變化既影響菌種的生長繁殖又影響菌體代謝產(chǎn)物的形成2. 下列關(guān)于單細胞蛋白的敘述,正確的是(B )A 是微生物細胞中提取的蛋白質(zhì)B 是通過發(fā)酵生產(chǎn)的微生物菌體C 是微生物細胞分泌的抗生素D 單細胞蛋白不能作為食品3. 關(guān)于菌種的選育不正確的是(C )A 自然選育菌種費時且盲目性大B 誘變育種原理的基礎(chǔ)是基因突變C 代謝控制育種方法有轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)及雜交D 采用基因工程的方法可構(gòu)建工程菌4.當(dāng)培養(yǎng)基 pH 發(fā)生變化時,應(yīng)該C )A 加酸B 加堿C 加緩沖液D 加無機鹽5.下列營養(yǎng)物質(zhì)中
10、,不同時含有碳源、氮源和生長因子的是(C)A 牛肉膏B 蛋白胨C 生物素D 酵母粉6.平板劃線分離法不需要下面哪個物品或設(shè)備(D)A 接種環(huán)B 瓊脂培養(yǎng)基平板C 超凈工作臺D 電泳儀7.在培養(yǎng)基的配制過程中,具有如下步驟,其正確順序為(B)溶化 調(diào) pH 加棉塞 包扎培養(yǎng)基的分裝 稱量A B C D8.甘油生物合成主要由下列哪種物質(zhì)引起(D)A 尿素B 硫酸銨C酶D 亞硫酸鹽9.對谷氨酸發(fā)酵的敘述正確的是(D)A 菌體是異養(yǎng)厭氧型微生物B 生物素對谷氨酸生成無影響C 谷氨酸的形成與攪拌速度無關(guān)D 產(chǎn)物可用離子交換法提取10.代謝中如發(fā)生還原反應(yīng)時,(C)A 從底物分子丟失電子B 通常獲得大量的
11、能量C電子加到底物分子上D 底物分子被氧化11.下面哪項特征不適合于三羧酸循環(huán)(.D )A C02 分子以廢物釋放B 循環(huán)時形成檸檬酸C所有的反應(yīng)都要酶催化D 反應(yīng)導(dǎo)致葡萄糖合成12. 當(dāng)一個 NADH 分子被代謝和它的電子通過電子傳遞鏈傳遞時,產(chǎn)生( C ) A 6 個氨基酸分子B 1個葡萄糖分子C 3個ATP分子D 1個甘油三酯和2個甘油二酯13. 為使淀粉和纖維素進行代謝而提供能量,( B )A 它們必須第一步變成脂肪分子B 它們的葡萄糖單位必須被釋放C 環(huán)境中必須有游離氧存在D 遺傳密碼必須起促進作用14. 常作為生產(chǎn)菌種和科研材料的細菌群體,應(yīng)該是代謝旺盛、個體形態(tài)和生理特性比較穩(wěn)定
12、的。所以應(yīng)選擇在它的( B )A 遲滯期B 對數(shù)期C 穩(wěn)定期D 衰亡期15. 某些放線菌產(chǎn)生的抗生素,是它們的( B )A 初級代謝產(chǎn)物 B 次級代謝產(chǎn)物 C 代謝中間產(chǎn)物 D 代謝廢物16. 固體培養(yǎng)基中需要加入瓊脂的目的是( D )D 使培養(yǎng)A 為菌體提供碳源B 為菌體提供氮源C 使培養(yǎng)基保持水分基凝固17. 微生物代謝的調(diào)節(jié)屬于( C)A神經(jīng)調(diào)節(jié)B.激素調(diào)節(jié)C 酶的調(diào)節(jié)D.基因調(diào)節(jié)18. 關(guān)于微生物代謝產(chǎn)物的說法中不正確的是(D )A 初級代謝產(chǎn)物是微生物生長和繁殖所必須的B 次級代謝產(chǎn)物并非是微生物生長和繁殖所必須的C 初級代謝產(chǎn)物在代謝調(diào)節(jié)下產(chǎn)生D 次級代謝產(chǎn)物的合成無需代謝調(diào)節(jié)19
13、. 在發(fā)酵中有關(guān)氧的利用正確的是(B )A 微生物可直接利用空氣中的氧B 微生物只能利用發(fā)酵液中溶解氧C 溫度升高,發(fā)酵液中溶解氧增多D 機械攪拌與溶氧濃度無關(guān)20. 某藥廠用谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸,結(jié)果代謝產(chǎn)物沒有谷氨酸而產(chǎn)生乳酸及琥珀酸,其原因可能是( B )A 溫度控制不適 B 通氣量過多 C pH 呈酸性 D 溶氧不足B 鏈球菌、大腸桿菌( C)C 谷氨酸棒狀桿菌,黃色短桿菌 D21. 下列可用于生產(chǎn)谷氨酸的菌種是A 谷氨酸棒狀桿菌、金黃色葡萄球菌 大腸桿菌、乳酸菌22. 發(fā)酵過程中,不會直接引起pH 變化的是C 微生物細胞數(shù)目的增加A營養(yǎng)物質(zhì)的消耗B微生物呼岀的 CO 2謝產(chǎn)物
14、的積累23. 關(guān)于滅菌和消毒的不正確的理解是(B )A 滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物的細胞、芽孢和孢子B 消毒和滅菌實質(zhì)上是相同的C 接種環(huán)用燒灼法滅菌D 常用滅菌方法有加熱法、過濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法24. 加熱滅菌時,一般營養(yǎng)細胞的致死溫度是多少度(B )A 32 CB 60CC 100 CD 120 C25. 下列反應(yīng)中,消耗 1 摩爾葡萄糖產(chǎn)生 ATP 最多的是(A )A 檸檬酸發(fā)酵 B 甘油發(fā)酵 C 乳酸發(fā)酵 D 酒精發(fā)酵26. 生物學(xué)意義上的發(fā)酵作用是在什么條件下的生物氧化作用(D )A 氧氣參與下 最終受體B 無機氧化物參與下 C 有外源電子最終受體D 無外源電子27. 營
15、養(yǎng)缺陷型菌株是指( D )A 有營養(yǎng)不良癥的菌株 B 在完全培養(yǎng)基上也不能生長良好的菌株C 培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分缺少時獲得的菌株 D 喪失了合成某種營養(yǎng)成分能力的菌株28. 血糖快速測試儀上的酶傳感器,使用的是(B )A 復(fù)合酶 B 固定化酶 C 游離的酶D 一般酶制劑29. 使用高壓鍋滅菌時,打開排汽閥的目的是(D )A 防止高壓鍋內(nèi)壓力過高,使培養(yǎng)基成分受到破壞B 排盡鍋內(nèi)有害氣體 C 防止鍋內(nèi)壓力過高,造成滅菌鍋爆炸 D 排盡鍋內(nèi)冷空氣30.巴斯德效應(yīng)是指A 乳酸對微生物的抑制作用的抑制B 酒精對葡萄糖分解的抑制( D )C 氧氣對呼吸作用的抑制D 氧氣對發(fā)酵C 改變了酵母菌的pH值D 葡萄
16、糖不( B)( B)31. 微生物群體生長狀況的測定方法可以是(B ) 測定樣品的細胞數(shù)目測定次級代謝產(chǎn)物的總含量測定培養(yǎng)基中細菌的體積 測定樣品的細胞重量A B C.D.32. 酵母菌培養(yǎng)液中常含有一定濃度的葡萄糖,但當(dāng)葡萄糖濃度過高時,反而會抑制微生物的生長,原因是( B )A 碳源供應(yīng)太充足B 細胞會發(fā)生質(zhì)壁分離是酵母菌的原料33. 下列微生物代謝產(chǎn)物中沒有菌種特異性的一組是A 氨基酸、核苷酸、多糖、毒素、激素B 核苷酸、維生素、多糖、脂類、氨基酸C.多糖、脂類、維生素、抗生素、氨基酸D 氨基酸、多糖、維生素、色素、抗生素34. 通過影響微生物膜的穩(wěn)定性,從而影響營養(yǎng)物質(zhì)吸收的因素是A.
17、溫度 B. pHC.氧含量D 前三者的共同作用35.下列生理過程中,釋放能量最多的是A. 葡萄糖氧化分解為 CO2 和 H2OB.葡萄糖分解為酒精和 C02C. 葡萄糖分解為乳酸D. 葡萄糖分解為甘油36. 實驗室常用的培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基是A 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 B 馬鈴薯培養(yǎng)基37. 在實驗中我們所用到的淀粉水解培養(yǎng)基是一種A 基礎(chǔ)培養(yǎng)基B 富集培養(yǎng)基 C38. 下列物質(zhì)屬于生長因子的是A 葡萄糖B 蛋白胨C NaCIQ 甘工、戶4關(guān)甘C 高氏一號培養(yǎng)基A )D 麥芽汁培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基A)D鑒別培養(yǎng)基)D 維生素39.1 摩爾葡萄糖通 EMP 和 TCA 循環(huán)徹底氧化共產(chǎn)生多少摩爾ATPA 3
18、4B 36C 38D 3940. 下列抗生素作用機制中,抑制細胞壁合成的是A 利福霉素B 四環(huán)素C 氯霉素41. 實驗室常規(guī)高壓蒸汽滅菌的條件是A 135C 140C, 5 15 秒 B 72 C、42. 出于控制微生物的目的,滅菌一詞指的是 A 除去病原微生物 B 降低微生物的數(shù)量43. 紫外線輻射主要作用于微生物的A 糖類B 酶類C 核酸D 青霉素15 秒44. 發(fā)酵工程是生物技術(shù)實現(xiàn)以下哪項的關(guān)鍵環(huán)節(jié)A 產(chǎn)業(yè)化B 商品化 C 社會化45. 酶活性調(diào)節(jié)速度比酶合成調(diào)節(jié)速度A 快B 慢C 相等46. 受反饋調(diào)節(jié)的酶一般是 A 同功酶 B 組成酶變構(gòu)酶47. 通氣攪拌技術(shù)的建立是發(fā)酵技術(shù)進步的
19、 A 第一個轉(zhuǎn)折期 四個轉(zhuǎn)折期)C 121 C, 30 分鐘 D 100 C, 5 小時( C )D 只消滅體表的微生物( C )消滅所有的生物細胞壁(A安全化D 無法比較(CD 激酶B 第二個轉(zhuǎn)折期48. 酵母菌的皿型發(fā)酵的產(chǎn)物是A 酒精B 甘油C49. 目前發(fā)酵工業(yè)常用的處理菌體、固形物雜質(zhì)和懸浮物等固體物質(zhì),( A)A 離心和過濾B 離心和萃取50. 抗生素的合成是在微生物生長的A 延滯期 B 對數(shù)生長期C 穩(wěn)定期51. 發(fā)酵液中含量最高的成分為A 水分B 蛋白質(zhì)C 發(fā)酵產(chǎn)物52. 連續(xù)發(fā)酵中的恒濁培養(yǎng)所控制的對象為 A 培養(yǎng)液流速 B 菌液密度 C 生長速度53. 誘變處理時所用的出發(fā)
20、菌細胞應(yīng)處于A 延遲期B 對數(shù)生長期 C 穩(wěn)定期54. 實驗室常用的培養(yǎng)放線菌的培養(yǎng)基是A 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基B 馬鈴薯培養(yǎng)基攔甘 養(yǎng)基乳酸D 丙酸(CC 第三個轉(zhuǎn)折期保證處理液澄清的主要方法為C 蒸餾和萃取D 衰亡期菌體D 離子交換和過濾(BD 發(fā)酵液體積衰亡期(CC 高氏一號培養(yǎng)基)興甘D 麥芽汁培55.酵母菌適宜的生長 pH 值為A 3.8-6.0 B 3.0-4.0 C 8.0-9.0 D 7.0-7.556.發(fā)酵有不同的類型,谷氨酸發(fā)酵屬于( A )A.液體發(fā)酵和需氧發(fā)酵B 液體發(fā)酵和厭氧發(fā)酵C 固體發(fā)酵和需氧發(fā)酵D 固體發(fā)酵和厭氧發(fā)酵57. 如果發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品是菌體,菌體分離采
21、用的方法是( B )A 蒸餾 B 過濾 C.萃取 D 離子交換58. 下列關(guān)于生長因子的說法中,不正確的一項是(B )A 是微生物生長不可缺少的微量有機物B 是微生物生長不可缺少的微量礦質(zhì)元素C.主要包括維生素、氨基酸和堿基等D 是微生物自身不能合成的59. 下列對連續(xù)培養(yǎng)優(yōu)點的敘述,不正確的是(B )A 能及時補充微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì),提高產(chǎn)量B 有利于微生物盡快將代謝產(chǎn)物釋放到培養(yǎng)基中C.能消除不利于微生物生長的某些環(huán)境因素D 能提高發(fā)酵設(shè)備的利用率60. 谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸,以下說法合理的是(C )A 谷氨酸對谷氨酸脫氫酶的抑制作用屬于酶合成的調(diào)節(jié)B 谷氨酸與谷氨酸脫氫酶的結(jié)合
22、可以使酶結(jié)構(gòu)產(chǎn)生不可逆改變C 促使谷氨酸釋放到細胞外的措施可以促進谷氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)D 谷氨酸只能由a -酮戊二酸發(fā)生還原氨基化作用生成61. 發(fā) 酵工程 的第一個重要工 作是選擇 優(yōu)良的 單一純種 。消滅 雜菌, 獲 得純種的 方法不 包 括 ( C )A 根據(jù)微生物對碳源需求的差別,使用含不同碳源的培養(yǎng)基B 根據(jù)微生物缺乏生長因子的種類,在培養(yǎng)基中增減不同的生長因子C.根據(jù)微生物遺傳組成的差異,在培養(yǎng)基中加入不同比例的核酸D 根據(jù)微生物對抗菌素敏感性的差異,在培養(yǎng)基中加入不同的抗菌素62.谷氨酸棒桿菌合成天冬氨酸族氨基酸時,天冬氨酸激酶受賴氨酸和蘇氨酸的A 協(xié)同反饋抑制B 累積反饋抑制C 順
23、序反饋抑制D 協(xié)作反饋抑制63.在微生物生長的過程中,細胞形態(tài)最多和數(shù)目最多的時期是(B )A.對數(shù)期、穩(wěn)定期B.衰亡期、穩(wěn)定期C.穩(wěn)定期、衰亡期D. 衰亡期、對數(shù)期64.在實際生產(chǎn)中,對數(shù)期的長短取決于培養(yǎng)罐的大小接種量的大小的多少( A )培養(yǎng)基的多少代謝產(chǎn)物合成A.B C D 65.以下有關(guān)酶的固定化的敘述,正確的是A.分離后的酶加填充劑B.分離純化后的酶加穩(wěn)定劑構(gòu)成化酶的形狀單一( C )C.分離后的酶包埋在凝膠中D 固定66. 下列屬于微生物不可缺少的微量有機物是 牛肉膏 蛋白胨 氨基酸 維生素 A B C 67. 下列不屬于發(fā)酵工程應(yīng)用的是A. 生產(chǎn)抗生素、維生素、藥用氨基酸等 C
24、.用于化學(xué)檢測和水質(zhì)監(jiān)測68. 大多數(shù)芽孢細菌形成芽孢在哪個時期A 調(diào)整期 B 對數(shù)期 C 穩(wěn)定期( D )堿基 生物素D.( C )B 生產(chǎn)啤酒、果酒和食醋等D生產(chǎn)各種各樣的食品和添加劑( C )D 衰亡期69. 下列有關(guān)谷氨酸棒狀桿菌的生長和谷氨酸發(fā)酵的敘述,錯誤的是(B )A.組成酶是維持菌體基本生活的必要條件B.菌體能合成各種生長因子,無需從外界補充C.發(fā)酵液pH 呈酸性時,不會生成乙酰谷氨酰胺D. 細胞膜透性的改變,可解除代謝產(chǎn)物對有關(guān)酶活性的抑制四、多項選擇題1. 典型的發(fā)酵過程包括以下哪幾個基本組成部分(ABCDE )A 繁殖菌種和發(fā)酵生產(chǎn)所用的培養(yǎng)基的配制B 培養(yǎng)基、發(fā)酵罐以及
25、輔助設(shè)備的消毒滅菌C 控制發(fā)酵罐中的菌株在最適條件下生長并形成代謝產(chǎn)物D 產(chǎn)物的提取和精制,以得到合格的產(chǎn)品E 回收或處理發(fā)酵過程中所產(chǎn)生的廢物、廢水2. 糖酵解途徑的調(diào)節(jié)因素包括(ABCDE )A 糖酵解途徑的關(guān)鍵酶 酸、乙酰 CoA能荷C 無機磷環(huán)腺苷酸E 檸檬酸、脂肪3.下列有關(guān)有氧呼吸與發(fā)酵的相同點A 都有從葡萄糖分解成丙酮酸的過程 分解產(chǎn)物中都有 CO2 E 最終電子受體都是有機物,正確的是(ABCB 都有有機物的氧化分解 C)都有能量釋放 ,并有 ATP 的生成 D4. 微生物的次級代謝產(chǎn)物,(BCDEA 是 微生 物生 長 繁殖所必 需的 物質(zhì) B 對微 生物 無 明顯的 生 理
26、功能D 具有菌株特異性 E 是以初級代謝產(chǎn)物作為前體衍生而來5. 目前發(fā)酵過程已經(jīng)實現(xiàn)在線測量和控制的參數(shù)是A 溫度 B pH 值 C 溶解氧濃度 D 消泡6. 發(fā)酵過程中,補料有利于控制微生物的中間代謝,A 能源和碳源B 氮源7. 發(fā)酵過程中污染雜菌的途徑可能有A 種子帶菌 不當(dāng)C 可 以積累在細 胞內(nèi)C 酶制劑( ABCDEE 流量補料的內(nèi)容有( ABDED 微量元素或無機鹽( ABCDE )E 誘導(dǎo)酶的底物B 無菌空氣帶菌C 設(shè)備滲漏D 培養(yǎng)基和設(shè)備滅菌不徹底E 操作8.滅菌方法主要有A 干熱滅菌法 除菌法B 濕熱滅菌法C 射線滅菌法( ABCDE )D 化學(xué)藥品滅菌法E 過濾9. 固定
27、化酶的特點是A 穩(wěn)定、壽命長E 專一性差、催化效率低10. 近代微生物工業(yè)具有以下特點A 由自然發(fā)酵轉(zhuǎn)為代謝控制發(fā)酵和人工支配遺傳因子的發(fā)酵 結(jié)合 C 向大型發(fā)酵和連續(xù)化、自動化方向發(fā)展 從糖質(zhì)原料轉(zhuǎn)到利用石油、天然氣、空氣及纖維素資源B 可以反復(fù)多次使用C 易與產(chǎn)物分離ABCD )D 使生產(chǎn)管道化、連續(xù)化及自動化( ABCDE )B 微生物酶反應(yīng)生物合成和化學(xué)合成相 微生物工業(yè)涉及國民經(jīng)濟的各個領(lǐng)域11. 異型乳酸發(fā)酵的產(chǎn)物有A 乙醇 B 甘油 C 乳酸 D CO2 E12. 按微生物發(fā)酵產(chǎn)品的性質(zhì),現(xiàn)代發(fā)酵工業(yè)涉及的范圍包括 生物酶發(fā)酵 C 微生物代謝產(chǎn)物發(fā)酵 D 微生物的生物轉(zhuǎn)化發(fā)酵乙酸
28、ACDEABCDE )A 微生物菌體發(fā)酵E 微生物特殊機能的利用13. 固定化細胞的制備方法包括A 層析法B 吸附法14. 液態(tài)深層好氧發(fā)酵基本操作的控制點包括度控制C pH 控制 D 溶氧控制(13.BCDE )包埋法 D 交聯(lián)法 E 共價法 ( ABCDE) A 泡沫控制E 補料控制15. 酶合成阻遏包括ACD )A 末端代謝產(chǎn)物阻遏 B 底物阻遏 C 結(jié)構(gòu)類似物阻遏 D 分解代謝物阻遏E 酶量阻遏16. 分批培養(yǎng)過程中,細菌生長階段包括A 遲滯期 B 對數(shù)生長期17. 下列不是微生物生長、繁殖所必須的物質(zhì)的是A、激素B、核苷酸18. 高溫對培養(yǎng)基成分的有害影響,表現(xiàn)在A 形成沉淀B 破壞
29、營養(yǎng)濃度19. 目前發(fā)酵過程已經(jīng)實現(xiàn)在線測量和控制的參數(shù)是( ABCD)C 穩(wěn)定期 D 衰亡期E 孢子形成期( DE )C、維生素D、色素E 抗生素( ABCDE )C 提高色澤 D 改變培養(yǎng)基的 pH 值 E 降低培養(yǎng)基( ABCDE )A 溫度B pH 值20. 能影響發(fā)酵過程中溫度變化的因素是 A 微生物分解有機物釋放的能量21. 影響培養(yǎng)基滅菌效果的因素有A 溫度B 時間22. 補料有利于控制微生物的中間代謝,A 能源和碳源B 氮源C 溶解氧濃度 D 消泡 E 流量( ABCD )B.機械攪拌C 水分蒸發(fā) D 發(fā)酵罐散熱E.菌體自溶( ABCDE )C pH 值 D 培養(yǎng)基成分和顆粒物
30、質(zhì)E 泡沫補料的內(nèi)容有( ABDE )C 消泡劑 D 微量元素或無機鹽E 誘導(dǎo)酶的底物 五、填空題1. 淀粉水解糖的制備可分為酸解法、酶解法和酸酶結(jié)合法三種。2. 糖酵解途徑中的三個重要的關(guān)鍵酶是己糖激酶、磷酸丙糖激酶、丙酮酸激酶。3. 甘油的生物合成機制包括在酵母發(fā)酵醪中加入亞硫酸氫鈉與乙醛起加成反應(yīng)和在堿性 條件下乙醛起歧化反應(yīng)。4. 微生物的吸氧量常用呼吸強度;耗氧速率兩種方法來表示,二者的關(guān)系是。5. 發(fā)酵熱包括生物熱;攪拌熱;蒸發(fā)熱和輻射熱等幾種熱。6. 發(fā)酵過程中調(diào)節(jié) pH 值的方法主要有添加碳酸鈣法;氨水流加法和尿素流加法。7. 微生物工業(yè)上消除泡沫常用的方法有化學(xué)消泡;機械消泡
31、兩種。8. 谷氨酸等電點提取工藝是根據(jù)在等電點時氨基酸的溶解度最小的原理確定的。9. 固定化酶的制備方法可分物理吸附法、載體偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等。10. 可比喻成細胞內(nèi)流通的能量貨幣是ATP 。11. 一條典型的微生物群體生長曲線可分為遲滯期、對數(shù)期;穩(wěn)定期;衰亡期四個生長時期。12. 常用菌種保藏方法有斜面保藏法、沙土管保藏法、液體石蠟保藏法;真空冷凍保藏法等。13. 培養(yǎng)基應(yīng)具備微生物生長所需要的五大營養(yǎng)要素是碳源、氮源;無機鹽;生長因子和水。14. 電子通過電子傳遞鏈傳遞的最終命運是和_氧(02)分子結(jié)合。15. 提高細胞膜的谷氨酸通透性,必須從控制磷脂的合成著手或者使細胞膜受損傷。
32、16. 根據(jù)微生物與氧的關(guān)系,發(fā)酵可分為_有(需)氧發(fā)酵;厭氧發(fā)酵 _兩大類。17. 在三羧酸循環(huán)和糖酵解反應(yīng)中,一個吸收電子的重要輔酶是_ NAD+_。18. 工業(yè)微生物育種的基本方法包括自然選育、誘變育種;代謝控制育種;基因重組定向育種 等。19. 腸膜明串珠菌進行異型乳酸發(fā)酵時,產(chǎn)物為乳酸;乙醇; C02。20. 誘導(dǎo)酶指存在底物時才能產(chǎn)生的酶,它是轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)節(jié)酶濃度的一種方式。21. 谷氨酸對糖的重量理論轉(zhuǎn)化率為81.7%。22. 發(fā)酵工業(yè)的發(fā)展經(jīng)歷了自然發(fā)酵,純培養(yǎng)技術(shù)的建立,通氣攪拌的好氣性發(fā)酵技術(shù)的建立,人工誘變育種代謝控制發(fā)酵技術(shù)的建立,開拓新型發(fā)酵原料時期,與基因操作技術(shù)相
33、結(jié)合的現(xiàn)代發(fā)酵工程技術(shù)等六個階段。23. 去除代謝終產(chǎn)物主要是通過改變細胞的.膜的通透性來實現(xiàn)。24. 谷氨酸的生物合成的途徑包括EMP,HMP,TCA循環(huán),DCA循環(huán),C02固定作用。25. 獲得純培養(yǎng)的方法有稀釋法,劃線法,單細胞挑選法,利用選擇培養(yǎng)基分離法等方法。26. 生長因子主要包括維生素,氨基酸,堿基,它們對微生物所起的作用是供給微生物自身不能合成但又 是其生長必需的有機物質(zhì)。27. 微生物生長和培養(yǎng)方式,可以分為分批培養(yǎng),連續(xù)培養(yǎng),補料分批培養(yǎng)三種類型。28. 影響種子質(zhì)量的主要因素包括培養(yǎng)基,種齡與接種量,溫度,pH 值,通氣和攪拌,泡沫,染菌的控制和種子罐級數(shù)的確定。29.
34、抗生素形成的主要代謝調(diào)節(jié)機制有分解代謝物調(diào)節(jié),磷酸鹽調(diào)節(jié),NH4+ 的抑制作用,次級代謝的反饋調(diào)節(jié)和次級代謝的能荷調(diào)節(jié)等。30. 空氣除菌的方法有 .加熱殺菌法,靜電除菌法,介質(zhì)過濾除菌法。31. 發(fā)酵產(chǎn)物的濃縮和純化過程一般包括發(fā)酵液預(yù)處理,提取,精制。32. 菌種擴大培養(yǎng)的目的是為每次發(fā)酵罐的投料提供數(shù)量相當(dāng)?shù)拇x旺盛的種子。33. 碳源物對微生物的功能是構(gòu)成細胞物質(zhì)和代謝產(chǎn)物、異養(yǎng)微生物的主要能源物質(zhì)_。34. 微生物的營養(yǎng)類型可分為光能自養(yǎng)型,光能異養(yǎng)型,化能自養(yǎng)型,化能異養(yǎng)型。35. 在微生物研究和生長實踐中,選用和設(shè)計培養(yǎng)基的最基本要求是_ 目的明確,營養(yǎng)協(xié)調(diào),物理化學(xué)條件適宜和價
35、廉易得。36. 液體培養(yǎng)基中加入 CaCO3 的目的通常是為了 調(diào)節(jié) pH 值。37. 實驗室常用的有機氮源有牛肉膏,蛋白胨_等,無機氮源有 硫酸銨,硝酸鈉, 等。為節(jié)約成本,工廠中常用 _ 尿素 等作為有機氮源。38. 呼吸作用與發(fā)酵作用的根本區(qū)別在于電子的最終受體不同。39. 乳酸菌進行同型乳酸發(fā)酵時通過EMP 途徑,產(chǎn)物為 乳酸 ,腸膜明串珠菌進行異型乳酸發(fā)酵時通過 HMP 途徑,產(chǎn)物為乳酸、 乙醇和 二氧化碳 。40. 操縱子是由 結(jié)構(gòu)基因,操縱基因,啟動子組成。六、簡答題1. 簡述菌種保藏的基本原理及措施 答:菌種保藏的基本原理主要是根據(jù)菌種的生理生化特點,人工地創(chuàng)造條件,使菌種的代
36、謝活動處于不 活潑狀態(tài),同時,使菌種避免污染、死亡和變異。 保藏菌種時首先要挑選優(yōu)良純種,最好是它們 的休眠體(孢子、芽胞等);其次,要創(chuàng)造一個有利于休眠的環(huán)境條件,如低溫、干燥、缺氧和缺乏營養(yǎng) 物質(zhì)等,即可以達到降低其代謝活動,延長保存期的目的。2. 簡述溫度對發(fā)酵的影響 答:溫度對發(fā)酵的影響是多方面的,對菌體生長和代謝產(chǎn)物形成的影響是由各種因素綜合表現(xiàn)的結(jié)果。1) 溫度升高,酶促反應(yīng)速度加大,生長代謝加快,產(chǎn)物生成提前。但溫度愈高酶失活愈快,菌體易于衰 老影響產(chǎn)物生成。 2) 溫度通過影響發(fā)酵液中溶解氧從而影響發(fā)酵。 3) 溫度能影響生物合成方向。 4) 溫度能影響微生物酶系的組成及酶的特
37、性。 5) 同一種生產(chǎn)菌,菌體生長和積累代謝產(chǎn)物的最適溫度往 往不同。3. 簡述大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)對菌種選擇的要求 答:發(fā)酵生產(chǎn)對菌種選擇的要求包括: 1) 能在易得、價廉的原料制成的培養(yǎng)基上迅速生長,且代謝產(chǎn) 物產(chǎn)量高。目標產(chǎn)物最好能分泌到胞外,以降低產(chǎn)物抑制并利于產(chǎn)物分離。 2) 發(fā)酵條件粗放、易于控 制,且所需的酶活性高。 3) 菌種生長和發(fā)酵速度較快,發(fā)酵周期短。發(fā)酵周期短的優(yōu)點在于感染雜菌 的機會減少;提高設(shè)備的利用率。 4) 根據(jù)代謝控制的要求,選擇單產(chǎn)高的營養(yǎng)缺陷型突變菌株或調(diào)節(jié) 突變菌株或野生菌株。 5) 抗雜菌、抗噬菌體能力強。 6) 菌種純粹,遺傳性狀穩(wěn)定,以保證發(fā)酵生產(chǎn) 和產(chǎn)
38、品質(zhì)量的穩(wěn)定性。菌種退化,生產(chǎn)性能下降是生產(chǎn)中常碰到的問題。 7) 菌體不是病源菌,不產(chǎn)生任 何有害的生物活性物質(zhì)和毒素(包括抗生素、激素和毒素等),以保證安全。4. 簡述發(fā)酵熱產(chǎn)生的原因.答:微生物分解有機物釋放的能量,一部分用于合成 ATP ,另一部分散發(fā)到培養(yǎng)基中時,會引起發(fā)酵溫 度升高(生物熱) ;機械攪拌也會產(chǎn)生一部分熱量引起溫度升高 (攪拌熱) 。此外,發(fā)酵罐壁散熱 (輻射熱 )、 水分蒸發(fā)(蒸發(fā)熱)會帶走部分熱量,使發(fā)酵溫度降低5. 簡述發(fā)酵過程進行中間補料的原則.答:菌體生長代謝需要一個合適的濃度,過高的濃度對菌體生長有抑制作用,過低,不能滿足產(chǎn)物合成 的需要。中間補料的原則是
39、使生產(chǎn)菌在分泌期有足夠多而不過多的養(yǎng)料,使代謝活動朝著有利于合成產(chǎn) 物的方向發(fā)展。6. 簡述發(fā)酵生產(chǎn)中如何調(diào)節(jié) pH 值 答:在實際發(fā)酵生產(chǎn)中,調(diào)節(jié) pH 值的方法應(yīng)根據(jù)具體情況加以選用。 1) 調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的初始 pH 值。初 始 pH 值是指發(fā)酵液配制完畢后、滅菌前的pH 值 (注意:滅菌前與滅菌后 pH 值有所不同 )?;蚣尤刖彌_劑(如磷酸鹽)制成緩沖能力強、 pH 值改變不大的培養(yǎng)基。 2) 在發(fā)酵過程中加弱酸或弱堿進行 pH 值的 調(diào)節(jié),合理地控制發(fā)酵條件,如添加 CaCO3 ?;蛘{(diào)節(jié)通氣量來控制 pH 值。 3) 進行中間補料是調(diào)節(jié) pH 值較好的辦法,既調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的 pH 值,又可
40、補充營養(yǎng),如氨水、尿素流加法等。通過補料調(diào)節(jié) pH 值來 提高發(fā)酵產(chǎn)率已在酶制劑發(fā)酵和抗生素發(fā)酵生產(chǎn)上取得明顯的效果。7. 簡述發(fā)酵工業(yè)經(jīng)歷的幾個不同階段 答:發(fā)酵工業(yè)經(jīng)歷了以下幾個不同階段: 1) 自然(天然)發(fā)酵時期 2) 純培養(yǎng)技術(shù)的建立 3) 通氣攪拌 (好氣性)發(fā)酵(工程)技術(shù)的建立 4) 人工誘變育種與代謝控制發(fā)酵工程技術(shù)的建立 5) 開拓新型發(fā)酵 原料時期 6) 與基因操作技術(shù)相結(jié)合的現(xiàn)代發(fā)酵工程技術(shù)階段8. 簡述反饋阻遏和反饋抑制 答:在微生物合成代謝過程中,反饋阻遏和反饋抑制往往共同對代謝起著調(diào)節(jié)作用,它們通過對酶的合 成和酶的活性進行調(diào)節(jié),使細胞內(nèi)各種代謝物濃度保持在適當(dāng)?shù)?/p>
41、水平。反饋阻遏是轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié),產(chǎn) 生效應(yīng)慢,反饋抑制是酶活性水平調(diào)節(jié),產(chǎn)生效應(yīng)快。 此外,前者的作用往往會影響催化一系列反應(yīng)的 多個酶,而后者往往只對是一系列反應(yīng)中的第一個酶起作用。9. 簡述谷氨酸的生物合成途徑 答:大致是:葡萄糖經(jīng)糖酵解( EMP 途徑)和己糖磷酸支路( HMP 途徑)生成丙酮酸,再氧化成乙酰輔 酶A (乙酰COA ),然后進入三羧酸循環(huán),生成a 酮戊二酸。a 酮戊二酸在谷氨酸脫氫酶的催化及有NH+4 存在的條件下,生成谷氨酸。10. 簡述發(fā)酵工業(yè)對微生物菌種的要求答:發(fā)酵工業(yè)對微生物菌種的要求是:1) 能在易得、價廉的原料制成的培養(yǎng)基上迅速生長,且代謝產(chǎn)物產(chǎn)量高。目標產(chǎn)
42、物最好能分泌到胞外,以降低產(chǎn)物抑制并利于產(chǎn)物分離。 2) 發(fā)酵條件粗放、易于控 制,且所需的酶活性高。3) 菌種生長和發(fā)酵速度較快,發(fā)酵周期短。發(fā)酵周期短的優(yōu)點在于感染雜菌的機會減少;提高設(shè)備的利用率。4) 根據(jù)代謝控制的要求,選擇單產(chǎn)高的營養(yǎng)缺陷型突變菌株或調(diào)節(jié)突變菌株或野生菌株。 5) 抗雜菌、抗噬菌體能力強。6) 菌種純粹,遺傳性狀穩(wěn)定 (不易變異退化) ,以保證發(fā)酵生產(chǎn)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。菌種退化,生產(chǎn)性能下降是生產(chǎn)中常碰到的問題。7) 菌體不是病源菌,不產(chǎn)生任何有害的生物活性物質(zhì)和毒素,以保證安全。11. 簡述代謝網(wǎng)絡(luò)假說的要點答:代謝網(wǎng)絡(luò)假說的要點包括: 1) 代謝途徑(中心、注入
43、、發(fā)散) 交織形成網(wǎng)絡(luò); 2) 分解代謝和合成 代謝具有單向性; 3) ATP 是通用的能量載體; 4) NAD(P)H 以還原當(dāng)量形式攜帶能量。12. 簡述發(fā)酵醪的一般特征懸浮固體物主要含有菌體和蛋白質(zhì)膠狀物;答:發(fā)酵醪的一般特征是: 1) 發(fā)酵醪大部分是水; 2) 發(fā)酵醪中發(fā)酵產(chǎn)物濃度較低; 3) 發(fā)酵醪中的4) 培養(yǎng)基殘留成分中含有無機鹽類、非蛋白質(zhì)大分子雜質(zhì)6) 發(fā)酵醪中含有色素、熱原質(zhì)、毒性物質(zhì)及其降解產(chǎn)物; 5) 除發(fā)酵產(chǎn)物外,伴有一些代謝副產(chǎn)物; 等有機雜質(zhì)。13. 簡述生物傳感器的工作原理 答:生物傳感器的工作原理:將酶、細胞,甚至細胞器、組織或抗體固定于透性膜上構(gòu)成生物敏感膜
44、。 待測物質(zhì)經(jīng)擴散作用進入生物膜層,經(jīng)分子識別,發(fā)生特異性的生化反應(yīng),產(chǎn)生的信號繼而被相應(yīng)的化 學(xué)或物理換能器轉(zhuǎn)換成可定量、可處理的電信號,再經(jīng)放大輸出,就可從儀表上讀取待測物的濃度。14. 簡述泡沫給發(fā)酵造成的影響答:泡沫給發(fā)酵造成的影響包括: 1) 泡沫過多,升到罐頂從軸封滲出,易造成染菌; 2) 使發(fā)酵罐裝 填系數(shù)減少,降低了設(shè)備利用率; 3) 影響通風(fēng)攪拌正常進行,影響氧的傳遞,妨礙菌的呼吸; 4) 增 加菌群的非均一性,微生物隨泡沫漂?。?5) 造成產(chǎn)物的損失; 6) 加入消泡劑給下游提取工序帶來困 難。15. 簡述實驗室用壓力鍋進行培養(yǎng)基滅菌時的注意事項 答:壓力鍋是實驗室進行培養(yǎng)
45、基滅菌最常用的設(shè)備,使用時應(yīng)注意以下幾點: 6) 實驗室常采用 1 公斤 / 厘米2 (約15磅/?英寸2)的蒸汽壓(蒸汽溫度約 121 C)處理1530分鐘,?即可殺死各種微生物及其芽 孢。 7) 在使用高壓滅菌鍋時,必須將滅菌鍋內(nèi)的冷空氣完全趕光,否則壓力表所表示的壓力是水蒸汽壓 力和空氣壓力的總和,不是水蒸汽的實際壓力,它所相當(dāng)?shù)臏囟扰c滅菌鍋內(nèi)的溫度是不一致的。8) 滅菌完畢應(yīng)緩慢減壓(放汽),若急速減壓,則容器內(nèi)裝的液體必然會突然沸騰,將試管或三角瓶棉塞頂出 或弄溫,造成污染。 應(yīng)在壓力下降至零后再打開滅菌鍋的蓋子,否則蒸汽外溢會燙傷人16. 簡述包埋法制備固定化酶(細胞)的方法及特點
46、答:包埋法是將酶或細胞包埋在凝膠的微小空格內(nèi)或埋于半透膜的微型膠囊內(nèi)。該法操作簡單,又不會 明顯影響生物活性,是比較理想的方法,目前應(yīng)用最多。但其包埋材料(即載體 )會一定程度地阻礙底物和氧的擴散,影響催化效果。17. 簡述氧化塘生物處理法的原理 答:氧化塘法處理廢水中污染物,主要是由于好氧性微生物的代謝活動而氧化降解,氧化有機物所需的 溶解氧,由塘內(nèi)藻類的光合作用以及塘面的復(fù)氧作用提供。氧化塘內(nèi)發(fā)生光合作用和共生作用,即好氧 微生物利用藻類光合作用所生成的氧,對 BOD 物質(zhì)進行分解,另一方面,藻類又利用在這一氧化分解過 程中所產(chǎn)生的 CO2 進行光合作用。藻類和微生物在氧和 CO2 的互相
47、接收狀態(tài)下共生,也就在此過程中, 有機性污水得到凈化。18. 舉例說明生物化學(xué)意義上的“發(fā)酵”和工業(yè)意義上的“發(fā)酵”概念的異同。答:生物化學(xué)意義上的“發(fā)酵”,指微生物在無氧條件下分解各種有機物質(zhì)產(chǎn)生能量的一種方式。如葡 萄糖在無氧條件下被微生物利用產(chǎn)生酒精并放出二氧化碳,同時獲得能量;丙酮酸被還原為乳酸而獲得 能量等。而工業(yè)意義上的“發(fā)酵”,它泛指利用微生物制造成生產(chǎn)某些產(chǎn)品的過程。它包括厭氧培養(yǎng)的 生產(chǎn)過程,如酒精、乳酸、丙酮丁醇等,以及通氣(有氧)培養(yǎng)的生產(chǎn)過程,如抗生素、氨基酸、酶制劑 等的生產(chǎn)。產(chǎn)品既有微生物細胞代謝產(chǎn)物,也包括菌體細胞(如單細胞蛋白SCP)、酶等。19. 簡述選擇和配
48、制發(fā)酵培養(yǎng)基應(yīng)遵循哪些基本原則答:選擇和配制發(fā)酵培養(yǎng)基時應(yīng)遵循以下幾項基本原則:1) 必須提供合成微生物細胞和發(fā)酵產(chǎn)物的基本成份; 2)所用的單位營養(yǎng)物質(zhì)能產(chǎn)生最大量的微生物體或發(fā)酵產(chǎn)物;能形成最大濃度的微生物體或 產(chǎn)物; 3) 能形成最大產(chǎn)物生成率,從而縮短發(fā)酵周期;4) 盡量減少副產(chǎn)物的形成,便于產(chǎn)物的他離純化; 5) 對生產(chǎn)中除發(fā)酵以外的其他方面如通氣、攪拌、精制、廢棄物的處理等所帶來的困難最少; 6) 原料價格低廉、質(zhì)量穩(wěn)定、取材容易。20. 簡述固定化酶的特點 答:固定化酶的特點有: 1) 固相的酶作用于液相的底物;2) 仍具有酶的高度專一性、催化效率高及作用條件溫和等特點; 3)
49、較水溶性酶穩(wěn)定、使用壽命長;4) 易用過濾或離心的方法與反應(yīng)液分離,可以反復(fù)使用多次; 5) 可裝成酶柱,實現(xiàn)生產(chǎn)管道化、連續(xù)化及自動化;6) 不污染反應(yīng)液,產(chǎn)物的分離提純簡單,收率高。 缺點:固定化過程中往往會引起酶的七、論述題1. 分析影響谷氨酸發(fā)酵產(chǎn)量的因素及其調(diào)控機制 答:在谷氨酸發(fā)酵過程中,影響菌種代謝途徑的因素有氧、溫度、pH 和磷酸鹽等,并且谷氨酸產(chǎn)生菌需要生長因子一一生物素。當(dāng)生物素缺乏時,菌種生長十分緩慢;當(dāng)生物素過量時,則轉(zhuǎn)為乳酸發(fā)酵。因 此,一般將生物素控制在亞適量條件下,才能得到高產(chǎn)量的谷氨酸。在谷氨酸發(fā)酵中,如果能夠改變細胞膜的通透性,使谷氨酸不斷地排到細胞外面,就會
50、大量生成谷氨酸。研究表明,影響細胞膜通透 性的主要因素是細胞膜中的磷脂含量。因此,對谷氨酸產(chǎn)生菌的選育,往往從控制磷脂的合成或使細胞 膜受損傷入手,如生物素缺陷型菌種的選育。生物素是不飽和脂肪酸合成過程中所需的乙酰 CoA 的輔 酶。生物素缺陷型菌種因不能合成生物素,從而抑制了不飽和脂肪酸的合成。而不飽和脂肪酸是磷脂的 組成成分之一。因此,磷脂的合成量也相應(yīng)減少,這就會導(dǎo)致細胞膜結(jié)構(gòu)不完整,提高細胞膜對谷氨酸的通透性。在發(fā)酵過程中,氧、溫度、 pH和磷酸鹽等的調(diào)節(jié)和控制如下:氧。谷氨酸產(chǎn)生菌是好氧菌,通風(fēng)和攪拌不僅會影響菌種對氮源和碳源的利用率,而且會影響發(fā)酵周期和谷氨酸的合成量。尤其是在發(fā)酵
51、后期,加大通氣量有利于谷氨酸的合成。溫度。菌種生長的最適溫度為3032 C。當(dāng)菌體生長到穩(wěn)定期,適當(dāng)提高溫度有利于產(chǎn)酸,因此,在發(fā)酵后期,可將溫度提高到3437 C。pH。谷氨酸產(chǎn)生菌發(fā)酵的最適 pH 在 7.08.0。但在發(fā)酵過程中,隨著營養(yǎng)物質(zhì)的利用,代謝產(chǎn)物的積累,培養(yǎng) 液的 pH 會不斷變化。如隨著氮源的利用,放出氨,pH 會上升;當(dāng)糖被利用生成有機酸時, pH 會下降。磷酸鹽。它是谷氨酸發(fā)酵過程中必需的,但濃度不能過高,否則會轉(zhuǎn)向纈氨酸發(fā)酵。2. 分析發(fā)酵生產(chǎn)中雜菌污染的途徑以及一旦發(fā)現(xiàn)染菌應(yīng)采取的挽救措施答:發(fā)酵生產(chǎn)中雜菌污染途徑包括以下幾個方面:1) 種子帶菌。原因主要有:培養(yǎng)基
52、及用具滅菌不徹底;菌種在移接過程中受污染;菌種在培養(yǎng)或保藏過程中受污染等。2) 無菌空氣帶菌。杜絕無菌空氣帶菌,必須從空氣凈化流程和設(shè)備的設(shè)計、過濾介質(zhì)的選用和裝填、過濾介質(zhì)的滅菌和管理等方面完善 空氣凈化系統(tǒng)。 3) 培養(yǎng)基和設(shè)備滅菌不徹底導(dǎo)致染菌。原因主要有:原料性狀影響滅菌效果;實罐滅 菌時未能充分排出罐內(nèi)空氣;培養(yǎng)基連續(xù)滅菌時,蒸汽壓力波動大,培養(yǎng)基未達到滅菌溫度,導(dǎo)致滅菌 不徹底而污染;設(shè)備、管道存在“死角”。4) 設(shè)備滲漏引起染菌。發(fā)酵設(shè)備、管道、閥門、的長期使用,由于腐蝕、磨擦和振動等原因,往往造成滲漏。5) 操作失誤和技術(shù)管理不善也會引起染菌。如移種時或發(fā)酵過程罐內(nèi)壓力跌零,使
53、外界空氣進入而染菌;泡沫頂蓋而造成污染;壓縮空氣壓力突然下 降,使發(fā)酵液倒流入空氣過濾器而造成污染等等。發(fā)酵生產(chǎn)中一旦發(fā)現(xiàn)污染雜菌,應(yīng)考慮采取以下措施:1) 首先應(yīng)盡力尋找染菌的原因和途徑,杜絕后患。 2) 同時,對染菌的發(fā)酵液要根據(jù)具體情況做出處理。例如:發(fā)現(xiàn)種子染菌,應(yīng)立即加熱滅菌后廢 棄,絕對不能將染菌種子接入發(fā)酵罐,以免造成更大損失,如果是發(fā)現(xiàn)早期染菌,則可采取適當(dāng)補充營 養(yǎng)物,重新滅菌,再接種發(fā)酵;如果在發(fā)酵中后期染菌,而雜菌又不影響生產(chǎn)菌株的正常發(fā)酵或不妨礙 產(chǎn)品的分離、提純,則可讓其“共生共長”、“和平共處”至發(fā)酵終了,否則就應(yīng)提前放罐。(3 分)3)染菌后的挽救措施要根據(jù)不同生
54、產(chǎn)菌株的特點、產(chǎn)品性質(zhì)以及各工廠的具體情況,采取可行辦法。3. 分析影響谷氨酸發(fā)酵產(chǎn)量的因素及其調(diào)控機制答:在谷氨酸發(fā)酵過程中,影響菌種代謝途徑的因素有氧、溫度、pH和磷酸鹽等,并且谷氨酸產(chǎn)生菌需要生長因子一一生物素。當(dāng)生物素缺乏時,菌種生長十 分緩慢;當(dāng)生物素過量時,則轉(zhuǎn)為乳酸發(fā)酵。因此,一般將生物素控制在亞適量條件下,才能得到高產(chǎn) 量的谷氨酸。在谷氨酸發(fā)酵中,如果能夠改變細胞膜的通透性,使谷氨酸不斷地排到細胞外面,就會大量生成谷氨酸。研究表明,影響細胞膜通透性的主要因素是細胞膜中的磷脂含量。因此,對谷氨酸 產(chǎn)生菌的選育,往往從控制磷脂的合成或使細胞膜受損傷入手,如生物素缺陷型菌種的選育。生物素是 不飽和脂肪酸合成過程中所需的乙酰 CoA 的輔酶。生物素缺陷型菌種因不能合成生物素,從而抑制了不 飽和脂肪酸的合成。而不飽和脂肪酸是磷脂的組成成分之一。因此,
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