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1、第1頁(yè)基因工程一、單選題1.下列有關(guān)基因工程的說(shuō)法正確的是()A.如果某種生物的CDNA文庫(kù)中的某個(gè)基因與該生物的基因組文庫(kù)中的某個(gè)基因控制的性狀相同,則這兩個(gè)基因的結(jié)構(gòu)也完全相同B.一個(gè)基因表達(dá)載體的組成,除了目的基因外,還必須有啟動(dòng)子、終止密碼子和標(biāo)記基因C.目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程,稱(chēng)為轉(zhuǎn)化D.限制酶切割DNA產(chǎn)生的末端都為黏性末端【答案】C2.采用基因工程技術(shù)將人凝血因子基因?qū)肷窖蚴芫?,培育出了轉(zhuǎn)基因羊,但人凝血因子只存在于該轉(zhuǎn)基因羊的乳汁中。下列敘述正確的是()A.如果人凝血因子基因的核苗酸序列已知,可用人工合成的方法獲得該目的基因B.人凝血因
2、子基因進(jìn)入羊受精卵后,其傳遞和表達(dá)不再遵循中心法則C.人凝血因子基因存在于該羊的乳腺細(xì)胞,而不存在于其他體細(xì)胞中D.該過(guò)程所用的運(yùn)載體質(zhì)粒是廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中的一種顆粒狀的細(xì)胞器【答案】A3 . 1PS細(xì)胞是利用病毒將四個(gè)基因(Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc )導(dǎo)入動(dòng)物體細(xì)胞使其轉(zhuǎn)化為類(lèi)似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞。在1PS細(xì)胞培育過(guò)程中()A.運(yùn)用了基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等現(xiàn)代生物技術(shù)B.病毒的作用只是通過(guò)侵染將基因?qū)塍w細(xì)胞中C.使用的工具酶主要有DNA聚合酶和DNA連接酶D.僅有Oct4、Sox2x Klf«和c-Myc能夠轉(zhuǎn)錄、翻譯【答案】A4 .如圖為細(xì)胞內(nèi)某基因(
3、i>N標(biāo)記)局部結(jié)構(gòu)示意圖,A占全部堿基的20% ,下列說(shuō)法 錯(cuò)誤的是()A .維持該基因結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要化學(xué)鍵有磷酸二酯鍵和氫鍵來(lái)源:Z+xx+k.ComB.在無(wú)變異條件下,該基因的堿基TAG* 的比值為23C .限制性核酸內(nèi)切酶作用部位,DNA解旋酶作用于部位D .將該基因置于15N培養(yǎng)液中復(fù)制3次后,含i5N-的脫氧核吉酸鏈占41 【答案】D5 .圖1為某種質(zhì)粒簡(jiǎn)圖,圖2表示某外源DNA上的目的基因,小箭頭所指分別為限制 性核酸內(nèi)切酶EcoR I、BamH I、Hind I的酶切位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( ) 第2頁(yè)A.在基因工程中若只用一種限制酶完成對(duì)質(zhì)粒和外源DNA的切割,則可
4、 選 EcoR IB.如果將一個(gè)外源DNA分子和一個(gè)質(zhì)粒分別用EcoR I酶切后,再用DNA連接酶連 接,形成一個(gè)含有目的基因的重組DNA ,此重組DNA中EcoR I酶切點(diǎn)有1個(gè)C.為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化,酶切時(shí)可使用BamH I和 Hind I兩種限制酶同時(shí)處理D.一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoR I切割后,含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán) 【答案】B6 .下列關(guān)于酶的說(shuō)法,正確的是()A.限制酶廣泛存在于各種生物中,其化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)B.一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苗酸序列C.不同的限制酶切割DNA后都會(huì)形成黏性末端D. DNA連接酶可將單個(gè)核苜酸加到某個(gè)DNA片段的末
5、端,形成磷酸二酯鍵【答案】B7 .下圖為四種限制酶Bam H I , EcoR I , Hind I以及Bgl I的識(shí)別序列。箭頭表示 每一種限制酶的特定切割部位,其中哪兩種限制酶所切割出來(lái)的DNA片段末端可以互 補(bǔ)?其正確的末端互補(bǔ)序列是()A. BamH I 和 EccR I、末端互補(bǔ)序列-AATT -來(lái)源:Z。xx。k.ComB. BamH I和Hind I、末端互補(bǔ)序列-GATC-C. EcoR I和Hind I、末端互補(bǔ)序列-AATT-D. BamH I和Bgl I、末端互補(bǔ)序列-GATC-【答案】D8 .基因工程在操作過(guò)程中需要限制酶、DNA連接酶、載體三種工具。以下有關(guān)基本工 具
6、的敘述,正確的是()A.所有限制酶的識(shí)別序列均由6個(gè)核吉酸組成B.所有DNA連接酶均能連接黏性末端和平末端C.真正被用作載體的質(zhì)粒都是天然質(zhì)粒D.原核生物內(nèi)的限制酶可切割入侵的DNA分子而保護(hù)自身【答案】D9 .下列關(guān)于基因操作工具的敘述中,正確的是()A.限制酶的切口一定是GAATTC堿基序列B.基因工程所用的工具酶是限制酶、連接前和運(yùn)載體C.一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苗酸序列D.目的基因就是指重組DNA質(zhì)?!敬鸢浮緾第3頁(yè)10.下圖為DNA分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化,圖中依次表示限制 性?xún)?nèi)切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用的正確順序是()A. I I I I B. I
7、I I I C. I I I I D. I I I I【答案】C11 .如圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖,以下敘述錯(cuò)誤的是()A. I的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接醐兩種酶參與B.圖示此過(guò)程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)最好采用顯微注射法C抗蟲(chóng)基因整合到受體細(xì)胞核DNA上需借助于T1質(zhì)粒中的T-DNAD.細(xì)胞I的染色體上含有抗蟲(chóng)基因,植株I也不一定會(huì)表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀【答案】B12.基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,便于重組和篩選。已知限 制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一GlGATCC一,限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一IGATC一。 根據(jù)下圖示判斷下列操作正確的是()A.目的基因
8、和質(zhì)粒均用限制酶I切割B,質(zhì)粒用限制酶I切割,目的基因用限制酶I切81C.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶I切割D.質(zhì)粒用限制酶I切割,目的基因用限制酶I切8)【答案】D13 .基因編輯是指翎外源DNA片段導(dǎo)入到細(xì)胞染色體特定位點(diǎn)或刪除基因內(nèi)部的片段, 定點(diǎn)改造基因,獲得預(yù)期的生物體基因序列發(fā)生遺傳改變的技術(shù)。下圖是對(duì)某生物B基 因進(jìn)行編輯的過(guò)程該過(guò)程中用sgRNA可指引核酸內(nèi)切酶Cas9結(jié)合到特定的切割位點(diǎn), 下列敘述正確的是()A. sgRNA是合成Cas9醐的模板B. sgRNA的堿基序列與靶基因堿基序列能夠全部互補(bǔ)C.核酸內(nèi)切酶Cas9可在特定切割位點(diǎn)斷裂核甘酸之叫的磷酸二酯鍵D. B基因被編
9、輯后因不能轉(zhuǎn)錄而無(wú)法表達(dá)相關(guān)蛋白質(zhì)【答案】C14 .為了增加菊花花色類(lèi)型,研究者從其他植物中克隆出花色基因C (圖1 ),擬將其與 質(zhì)粒(圖2 )重組,再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。下列操作不正確的是()A.用限制性核酸內(nèi)切酶EcoR I和相應(yīng)DNA連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒B.重組質(zhì)粒的構(gòu)建依賴(lài)于堿基互補(bǔ)配對(duì)C.在培養(yǎng)基中添加卡力隆素,篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞D. C基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,不一定能夠成功表達(dá),需要進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè)與鑒定【答案】C15.科研人員以抗四環(huán)素基因?yàn)闃?biāo)記基因,通過(guò)基因工程的方法讓大腸桿菌生產(chǎn)鼠的B- 珠蛋白,治療鼠的鐮刀型細(xì)第4頁(yè) 胞貧血癥。下列相關(guān)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中,不合理的是()A.用編碼序列
10、加啟動(dòng)子、抗四環(huán)素基因等元件來(lái)構(gòu)建表達(dá)載體B.利用小鼠DNA分子通過(guò)PCR克隆出0-珠蛋白基因的編碼序列c.用含有四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選出已經(jīng)導(dǎo)入珠蛋白編碼序列的大腸桿菌D.用Caz.處理大腸桿菌后,將表達(dá)載體導(dǎo)入具有四環(huán)素抗性的大腸桿菌中【答案】D16 .研究表明,每個(gè)人的DNA者壞完全相同,因此DNA也可以像指紋一樣用來(lái)識(shí)別 身份,這種方法就是DNA指紋技術(shù)。下列關(guān)于DNA指紋技術(shù)的說(shuō)法正確的是() A.應(yīng)用DNA指紋技術(shù)首先需用合適的酶將待檢測(cè)的樣品DNA切成片段該酶是DNA 酶B.切出的DNA片段可以用差速離心的方法進(jìn)行分離C.該技術(shù)利用了 DNA分子的特異性D.通過(guò)檢測(cè)線粒體DNA可以鑒
11、定父、子關(guān)系【答案】C17 .上海醫(yī)學(xué)遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶人白蛋白基因的轉(zhuǎn)基因牛。他們還研究 出一種可大大提高基因表達(dá)水平的新方法,使轉(zhuǎn)基因動(dòng)物乳汁中的藥物蛋白含量提高了 30多倍,標(biāo)志著我國(guó)轉(zhuǎn)基因研究向產(chǎn)業(yè)化的目標(biāo)又邁進(jìn)了一大步。以下與此有關(guān)的敘述 中,正確的是()A.運(yùn)用基因工程技術(shù)讓牛合成人白蛋白,該技術(shù)將導(dǎo)致定向變異B.可將白蛋白基因?qū)肱5穆鸭?xì)胞中,通過(guò)組織培養(yǎng)形成轉(zhuǎn)基因牛C.人們只在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中才能獲取人白蛋白,是因?yàn)橹辉谵D(zhuǎn)基因牛的乳腺細(xì)胞中 才有人自蛋白基因D.所謂"提高基因表達(dá)水平”是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞中含有更多的人白蛋白基因 【答案】A18 .關(guān)于蛋
12、白質(zhì)工程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.蛋白質(zhì)工程又稱(chēng)為第二代基因工程B.蛋白質(zhì)工程能定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)C.在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作D.能產(chǎn)生自然界中不存在的新型蛋白質(zhì)分子【答案】C19 .人們發(fā)現(xiàn)蛛絲蛋白比蠶絲蛋白更細(xì),但強(qiáng)度卻更大,于是有人試圖通過(guò)破解蛛絲 蛋白的結(jié)構(gòu)從而推出其基因結(jié)構(gòu),以指導(dǎo)對(duì)蠶絲蛋白基因的修改,從而讓蠶也吐出像蛛 絲蛋白一樣堅(jiān)韌的絲,此過(guò)程的名稱(chēng)和依據(jù)的原理分別是()A.基因突變:DNA-RNA蛋白質(zhì)第 5 頁(yè) B.基因工程:RNARNA一蛋白質(zhì)C.基因工程:DNA-RNA蛋白質(zhì)D.蛋白質(zhì)工程:蛋白質(zhì)-RNA-*DNA-RNA-蛋白質(zhì)【答案】D20 .蛋白質(zhì)工
13、程是新崛起的一項(xiàng)生物工程,又稱(chēng)第二代基因工程。下圖示意蛋白質(zhì)工程 流程,圖中A、B在遺傳學(xué)上依次表示()A.轉(zhuǎn)錄和翻譯B.翻譯和轉(zhuǎn)錄C.復(fù)制和轉(zhuǎn)錄 D.傳遞和表達(dá)【答案】A二、非選擇題21 .( 8分)科研人員利用"基因敲除技術(shù)”敲除了新生小鼠心肌細(xì)胞中的GATA4基因, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)一個(gè)分泌型因子FGF16的表達(dá)水平降低,小鼠心臟喪失了再生能力,并出現(xiàn) 了嚴(yán)重的心肌大現(xiàn)象。緊接著科研人員利用腺相關(guān)病毒載體AAV9 ,實(shí)現(xiàn)了在心肌細(xì) 胞中"過(guò)表達(dá)"Fgfl6基因,發(fā)現(xiàn)心肌細(xì)胞恢復(fù)增殖能力,心肌肥大也受到一定的抑制。這項(xiàng)工作為心肌損傷修復(fù)和病理性心肌肥大的臨床治療提供了
14、理論基礎(chǔ)。請(qǐng)回答:(1 )"基因敲除"和"基因工程"技術(shù)所依賴(lài)的生物學(xué)原理是 0(2 )腺相關(guān)病毒載體AAV9作為基因工程的工具,除具備普通“質(zhì)粒載體"的條件外, 還應(yīng)具有、(答出兩點(diǎn)即可)的條件。(3 )目的基因與載體結(jié)合過(guò)程中需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。已知限制性?xún)?nèi) 切酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一GlGATCC一。請(qǐng)畫(huà)出目的基因被限制性?xún)?nèi)切酶I切割后 所形成的黏性末端。DNA連接酶對(duì)所連接的兩端堿基序列是否有專(zhuān) -性要求?O(4)定性的檢測(cè)目的基因的“過(guò)表達(dá)”產(chǎn)物可采用 的方法。(5 )資料說(shuō)明:、基因與基因產(chǎn)物、基因與環(huán)境之間存在著復(fù)
15、雜的相互 作用,這種相互作用形成了一個(gè)錯(cuò)綜復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò),精細(xì)地調(diào)控的生物體的性狀?!敬鸢浮浚? )基因重組(2 )必需是安全的(不會(huì)對(duì)受體細(xì)胞有害,或不能進(jìn)入到除 受體細(xì)胞外的其他生物細(xì)胞中去)分子大小應(yīng)適合(以便提取和在體外進(jìn)行操作);宿 主范圍廣;對(duì)靶細(xì)胞具有較高的轉(zhuǎn)化效率;在宿主細(xì)胞中不會(huì)引起免疫排斥(或免疫排斥 較低)(3 )(或)(2分)否(4 )抗原-抗體雜交(5 )基因與基因22 ( 7分)為了增加油菜種子的含油量,研究人員嘗試將酶D基因與轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連, 一起導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。(1 )研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物,采用 法快速擴(kuò)增從陸地棉基因文庫(kù)中獲取到的
16、酶D基因第6頁(yè) 和從擬南芥基因文庫(kù)中獲取到的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因。所含三種限制酶(Clal、 Sac I、Xba I )的切點(diǎn)如圖所示,則用 酶處理兩個(gè)基因后,可得到 端(填圖中字母)相連的融合基因。(2 )將上述融合基因插入如圖所示T1質(zhì)粒的T-DNA中,構(gòu)建 并導(dǎo)入農(nóng)桿 菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含 的固體平板上培養(yǎng)得到含融合基因的單菌落,再利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng),可以得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液。(3 )剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間,此過(guò)程的目的是,進(jìn)一步 篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞。(4)用 法可檢測(cè)轉(zhuǎn)基因油菜植株中的融合基因是否成功表達(dá)?!敬鸢浮浚?) PCR Clal和DNA連接 A和D (2)
17、基因表達(dá)載體(或"重組質(zhì) 粒")四環(huán)素(3 )利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞(4 )抗原-抗體雜交23 .( 9分)雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細(xì)胞因子,廣泛用于動(dòng)物領(lǐng) 域的抗病毒治療??蒲腥藛T將雞干擾素基因作為目的基因,構(gòu)建基因表達(dá)載體,通過(guò)農(nóng) 桿菌介導(dǎo)法導(dǎo)入煙草,以獲得抗病毒煙草。下圖為科研人員制備能合成雞干擾素的煙草 愈傷組織細(xì)胞的流程,I I表示相關(guān)的操作,兩種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表 所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:步驟I中利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí),設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是。 科研人員還在兩種引物的一端分別加上了 和 序列,以便于后續(xù)的剪切和連接。
18、為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化,構(gòu)建表達(dá)載體需用兩種限制酶,選擇的原則是:T1 質(zhì)粒內(nèi),每種限制醐有 個(gè)切割位點(diǎn),酶切后,目的基因形成的兩個(gè)黏性末端序列(相同,不相同)(2)步驟I所構(gòu)建的基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需元件還有,步驟I中需先用 處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞。步驟I中,科研人員提取愈傷組織細(xì)胞的RNA后,先通過(guò) 獲得DNA ,再進(jìn)行PCR擴(kuò)增,若最終未能檢測(cè)出干擾素基因,其可能原因是 o【答案】(1)雞干擾素基因兩端的部分核吉酸序列GAATTC GGATCC 1不相 同(2)復(fù)制原點(diǎn)Caz- (3)逆轉(zhuǎn)錄 雞干擾素基因未能導(dǎo)入煙草愈傷組織細(xì)胞或 導(dǎo)入煙草愈傷組織細(xì)胞的雞干擾素基因未
19、能轉(zhuǎn)錄或雞干擾素的inRNA已經(jīng)被水解24 . ( 8分)高致病性禽流感爆發(fā)的地岡,家禽養(yǎng)殖業(yè)蒙受巨大的經(jīng)濟(jì)損失,同時(shí)也威 脅到人類(lèi)的健康??茖W(xué)家致力于提高家禽對(duì)病毒的抵抗力,減輕禽流感的傳播和流行。(1 )在雞的多個(gè)品種中都存在Mx蛋白,但只有少數(shù)品種的Mx蛋白,具有抗病毒的 活性。比較兩種Mx蛋白,發(fā)現(xiàn)其差異是第631號(hào)氨基酸的種類(lèi)不同,這很可能是由于 Mx蛋白發(fā)生了堿基對(duì)的 而造成的。若對(duì)Mx蛋白缺陷的雞進(jìn)行基因治療,該技術(shù)用來(lái)傳遞基因的載體多是病毒類(lèi)載體,因?yàn)樗鼈兡?,但這類(lèi)病毒必 須經(jīng)過(guò)基因改造才能使用,改造后的病毒具有的特點(diǎn)是。(2 )研究人員利用 作探針,從某個(gè)品種的雞體內(nèi)成功提取出正常Mx蛋白的mRNA ,通過(guò)第7頁(yè) 法獲取cDNA,再利用某種病毒將cDNA攜帶進(jìn)入Mx蛋白缺陷 的另一個(gè)品種的雞受精卵中,并將這些受精卵培育成成體。檢測(cè)發(fā)現(xiàn),在上述獲得的雞 體內(nèi)cDNA成功表達(dá)了。從分子水平上說(shuō)這項(xiàng)檢測(cè),通常采用 方法,但合成的Mx蛋白是否具有正?;钚?,還需要從個(gè)體水平上進(jìn)行 實(shí)驗(yàn)。(3 )讓轉(zhuǎn)基因雞的雌雄個(gè)體之間隨機(jī)交配,所產(chǎn)生的子T弋、子二代均按照孟德?tīng)柕?分離定律遺傳,這說(shuō)明。【答案】(1)替換 將目的基因整合進(jìn)宿主的DNA分子 無(wú)毒性(或無(wú)感染性X 2) Mx基因逆轉(zhuǎn)錄抗原-抗體雜交禽流感病毒感染(3)Mx基因已經(jīng)整合到轉(zhuǎn)基因 雞的一條染色體上25
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