仙靈癃閉通膠囊對實驗動物前列腺增生的影響(精)

1、仙靈癃閉通膠囊對實驗動物前列腺增生的影響【摘要】目的 觀察仙靈癃閉通膠囊對實驗動物前列腺增生模型的影響。方法給前列腺增生的老年犬和丙酸睪丸酮所致前列腺增生鼠不同劑量的仙靈癃閉 通膠囊，測定犬前列腺體積、血清睪丸酮和雌二醇的含量。結(jié)果老年犬以5.76,2.88,1.44 g 生藥/kg 劑量口服給藥，能夠使老年犬前列腺體積縮小，但 對血清睪丸酮和雌二醇含量無明顯影響。小鼠以28.08,14.04,7.02 g生藥/kg劑量灌胃給藥，對丙酸睪丸酮所致小鼠前列腺增生模型有較好的預(yù)防和治療作 用。結(jié)論 仙靈癃閉通膠囊有較好的抑制實驗動物前列腺增生的作用。【關(guān)鍵詞】仙靈癃閉通膠囊；前列腺增生前列腺增生癥

2、屬中醫(yī)“癃閉”范疇，為男性老年人的常見病，其發(fā)病率高并給 患者帶來很大的痛苦。本課題組依據(jù)中醫(yī)藥研究理論，研制出仙靈癃閉通膠 囊，擬用于治療前列腺增生癥，本研究即是對該藥進行的臨床前藥理作用研 究。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 藥物：仙靈癃閉通膠囊（由淫羊霍、補骨脂、丹參、穿心蓮、扁蓄等 五味中藥組成，每粒膠囊含生藥 1.80 g），4.76 g 生藥/g 粉，由吉林天藥科技 股份有限公司提供，批號：20030824 實驗時取未裝膠囊的藥粉，以水配成所 需濃度的藥液。陽性對照藥：癃閉舒膠囊，含量0.3 g 藥粉/粒（此藥無生藥量標(biāo)示，實驗中所用藥量為藥粉用量）,由石家莊科迪藥業(yè)有限公司

3、生產(chǎn)，批號：030706084 丙酸睪丸酮注射液（山東博山制藥有限公司，批號：020412）。1.1.2 動物 昆明種小鼠，雄性，1822 g、2635 g。Wistar 種大鼠165195 g，雄性，購自長春高新醫(yī)學(xué)動物實驗研究中心，動物質(zhì)量合格證號：SCXK （吉）2003 004。雜種犬，雄性，體重（15 2）kg，自購。1.1.3 儀器 752 紫外光柵分光光度計（上海）;JN B 型精密扭力天平（上 海）;惠普尖端影像（美國）;GC 2010&放射免疫計數(shù)器（科大創(chuàng)新股份有限公司中 佳分公司）。1.1.4 試劑 睪酮放射免疫分析藥盒、雌二醇放射免疫分析藥盒（北京北方生物技術(shù)研

4、究所）。1.2 方法1.2.1 對老年犬前列腺增生的影響1取雄性老年雜種犬，首先經(jīng)美國 惠普尖端影像檢查測定前列腺體積，證實為前列腺明顯增大者供實驗用。實驗前先飼養(yǎng)觀察 2w，使適應(yīng)環(huán)境，之后隨機分為 5 組，每組 6 只，即對照組、 癃閉舒膠囊組、仙靈癃閉通膠囊高、中、低3 個劑量組，按表 1 所示劑量口服給藥，每日 1 次，連續(xù) 1 個月。于末次給藥后，雜種犬依次于前肢皮下頭靜脈 注射3%戊巴比妥鈉(30 mg/kg)麻醉，再經(jīng)導(dǎo)尿管向膀胱內(nèi)注入 200 ml 滅菌生 理鹽水，用美國惠普尖端影像進行檢查，探頭置于恥骨上，經(jīng)仔細掃查顯示前 列腺橫斷面及縱斷面聲像圖后全部進行圖像“凍結(jié)”固定并

5、攝片，分別用電子 尺仔細測量前列腺的最大橫徑、縱徑和厚徑，三徑相乘得腺體體積的近似值 (cm3)，比較服藥前后前列腺的體積變化。之后采血，1 500 r/min 離心，分離血清，采用放免試劑盒，測定血清睪丸酮和雌二醇含量。剖取前列腺作病理組 織學(xué)切片鏡檢。1.2.2 對實驗性小鼠前列腺增生的治療作用2取雄性小鼠 70 只，留下 15 只作正常對照，其余小鼠每天依次皮下注射丙酸睪丸酮5 mg/kg。注射 21d,處死其中 5 只小鼠，正常對照小鼠亦同樣處死 5 只，稱取體重和前列腺重并 作病理組織學(xué)切片鏡檢，證實前列腺有增生后，將余下小鼠均分為5 組，每組10 只，按表 2 所示劑量灌胃給藥。每

6、日 1 次，對照組和模型對照組給予等體積 水，連續(xù) 1 個月。末次給藥后稱量小鼠體重，將動物處死，剖取前列腺稱重，并作病理組織切片鏡檢。1.2.3 對實驗性小鼠前列腺增生的預(yù)防作用 2 取雄性大鼠 60 只， 均分 為 6 組，每組 10 只。除對照組外，其余各組大鼠每日皮下注射丙酸睪丸酮5mg/kg，對照組及模型對照組灌服等體積水。其余組按表3 所示劑量灌胃給藥，每日 1 次，給藥第 24 天稱量小鼠體重，將動物處死，剖取前列腺稱重，并作病 理組織學(xué)切片鏡檢。1.2.4 對大鼠棉球肉芽腫的影響 取雄性大鼠 50 只，在乙醚淺麻醉無菌條 件下，將滅菌棉球(10 mg)植入各鼠腋窩雙側(cè)皮下，手術(shù)

7、后次日，隨機分為5組，每組 10 只。按表 4 所示劑量灌胃給藥，每日 1 次，連續(xù) 7 d，末次給藥后 1 h，將大鼠斷頭處死，剝離并取出棉球肉芽組織，稱重、并減去棉球重量即為 肉芽組織濕重。1.2.5 對醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性增加的影響3取雄性小鼠 50 只，隨機分為 5 組，每組 10 只，按表 5 所示劑量灌胃給藥，每日 1 次，連續(xù) 7 d。于末次給藥后 30 min，小鼠依次尾靜脈注射 0.5%伊文思藍生理鹽水溶液 (0.1 ml/10g)，隨即依次腹腔注射 0.6%醋酸(0.2 ml/只)，20 min 后脫臼處 死，腹腔注射生理鹽水 6 ml，輕按小鼠腹部，抽取腹腔液 3

8、 ml，3 000 r/min 離心 10 min，取上清液置 752 紫外光柵分光光度計上，590 nm 處測 OD 值。1.2.6 對小鼠單核巨噬細胞吞噬功能的影響4取小鼠 50 只，隨機分為 5 組，每組 10 只，按表 6 所示劑量灌胃給藥，每日 1 次，連續(xù) 15 d，對照組給 予等體積水。末次給藥后 30 min，各鼠尾靜脈注射墨汁(墨汁：生理鹽水 =1 : 5)0.05 ml/10 g 體重，于注射后 2、15 min 從小鼠眼眶后靜脈叢采血 50 卩 l，溶于 2 ml 1%Na2C0 豁液中搖勻后，置 752 紫外光柵分光光度計上，在 680 nm 波長下比色，測定 OD 值

9、，立即脫臼處死小鼠，剖取肝、脾臟器稱重， 計算吞噬指數(shù) K 吞噬活性a。1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 實驗數(shù)據(jù)除特殊說明外均經(jīng) t 檢驗處理。2 結(jié)果2.1 對老年犬前列腺增生的影響仙靈癃閉通膠囊可使老年犬前列腺體積縮 小，只有高劑量組與對照組比較有顯著性差異(PV0.05)，對老年犬血清睪酮和 雌二醇無明顯影響。見表 1。2.2 對實驗性小鼠前列腺增生的治療作用注射丙酸睪丸酮 21 d 后小鼠的前列腺重明顯增大(PV0.01)，前列腺腺體明顯增生(PV0.01)。具有前列腺增生 的小鼠服用仙靈癃閉通膠囊治療 1 月后，其前列腺重量與模型組比較明顯減輕 (P0.01)，近乎正常。對小鼠的體重?zé)o明顯差異。

10、見表2。2.3 對實驗性大鼠前列腺增生的預(yù)防作用注射丙酸睪丸酮的同時服用仙靈癃閉通膠囊，對大鼠的前列腺增生有明顯的抑制作用。給藥組與模型組比較差 異顯著(P0.05)，前列腺指數(shù)與模型組比較顯著偏小(P0.05)。見表 2。2.4 對醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性增加的影響仙靈癃閉通膠囊對醋酸引起小鼠腹腔毛細血管通透性增加有明顯抑制作用。與對照組比較差異顯著(P0.05)。見表 3。2.5 對小鼠單核巨噬細胞吞噬功能的影響仙靈癃閉通膠囊各劑量組能明顯提高小鼠巨噬細胞的吞噬指數(shù)及吞噬活性 (P0.05)。見表 3。2.6 對大鼠棉球肉芽腫的影響 仙靈癃閉通膠囊可明顯抑制肉芽腫組織的增 生，使肉芽棉球重量減輕，與對照組比較差異顯著(P0.05)。見表 4。表 1 仙靈癃閉通膠囊對老年犬前列腺體積及激素水平的影響表2 仙靈癃閉通膠囊對實驗鼠前列腺增生的治療及預(yù)防作用表 3 仙靈癃閉通膠囊對實驗鼠毛細血管通透 性、巨噬細胞吞噬功能的影響表 4 仙靈癃閉通膠囊對大鼠棉球肉芽腫濕重的影 響3 討論綜合上述實驗結(jié)果表明，仙靈癃閉通膠囊能夠使老年犬前列腺體積縮小， 明顯改善老年犬前列腺的組織形態(tài)，但對老年犬血清睪酮和雌二醇含量無明顯 影響;對丙酸睪丸酮所致鼠前列腺增生有較好的預(yù)防和治療作用；能夠減輕棉球肉芽腫的肉芽重量；對醋酸致小鼠腹