微生物技能考核標準

1、顯微鏡的使用與維護班級：姓名：學號:一、實操部分（80分）序號內(nèi)容評分標準分值得分1準備（滿分10分）材料準備充分，中途不得取用非操作臺材料5顯微鏡取用姿勢準確，安放位置合理52低倍鏡使用（滿分25分）插上電源，打開光源，用拇指和 中指移動旋轉(zhuǎn)器（切忌手持物鏡 移動5使低倍鏡對準鏡臺的通光孔，放 置載玻片，標本中間對準通光孔， 弁用壓片夾夾好5調(diào)節(jié)焦距，從側(cè)看著向上調(diào)節(jié) 載物臺，粗準焦螺旋調(diào)節(jié)物鏡與 載物臺至最小距離處5雙眼視目鏡，調(diào)節(jié)粗準焦螺旋至 有模糊的像，然后調(diào)節(jié)細準焦螺10旋至清晰的像，二者不得來回交替使用，且光線強弱適宜（2分）。3高倍鏡使用（滿分10分）將觀察對象調(diào)至視野中央，轉(zhuǎn)動

2、 轉(zhuǎn)換器至高倍鏡，防止撞到玻片5調(diào)節(jié)細準焦螺旋至清晰的像，光線調(diào)節(jié)至強弱適宜104油鏡的使用（15分）轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使高倍鏡頭離開通 光孔，在需觀察部位的玻片上滴 加一滴香柏油，然后慢慢轉(zhuǎn)動油 鏡，在轉(zhuǎn)換油鏡時，從側(cè)面水平 注視鏡頭與玻片的距離，使鏡頭 浸入油中而又不以壓破載玻片為 宜。5如果不出現(xiàn)物象或者目標不埋想 要重找，在加油區(qū)之外重找時應 按：低倍一高倍-油鏡程序。在 加油區(qū)內(nèi)重找應按：低倍-油鏡 程序，不得經(jīng)高倍鏡，以免油沾 污鏡頭（3分），至調(diào)出清晰的像。10擦拭目鏡和物鏡上的油污，擦鏡 紙、一甲苯、擦拭方法均要正確15取卜坡片，拔下電源，關上開關， 載物臺調(diào)至最大距離處，物鏡八 字

3、擺開，罩上防塵罩，弁認真填 寫使用記錄。55計時不得超過5分鐘，超過者倒扣分，最多扣5分簡單染色評分標準班級：姓名：學號:序號考核項目評分要素配分評分標準檢驗結(jié)果得分備注i準備（10分）著裝整潔；實驗用物齊全適用，放置合理10少選多選1件扣5分2制片（40分）無菌操作取菌20無菌操作正確規(guī)范，錯1處扣5分，涂片區(qū)域圓形，直徑 1cm左右3干燥固定5不可過熱、固定操作的規(guī)范性，錯1處扣2分4染色、水洗15染液滴加的量；染色時間，水洗操作的規(guī)范性，錯1處扣5分5鏡檢（35分）顯微鏡的預備5顯微鏡的檢查；正確放置打開光源，光路又準，錯1處扣2分6涂片鏡檢10低倍到高倍，到油鏡，物鏡的轉(zhuǎn)換；物象調(diào)節(jié)，

4、錯1處扣2分7鏡檢結(jié)果15菌體分布均勻，密度合適，明暗合適，對比度合適。錯1處扣3分8顯微鏡的整理5鏡頭的擦拭；物鏡的“八字形”轉(zhuǎn)換；將載物臺降到最低，錯1處扣2分9其他（5分）清理用物，環(huán)境衛(wèi)生5清掃實驗臺及收拾產(chǎn)生垃圾，少 1環(huán)節(jié)扣1分10時間（10分）操作時間15要求10分鐘內(nèi)完成，每超過 1分鐘，扣5分?？偡种苽錈o菌平板評分標準（時間5分鐘）班級：姓名：學號:項目考核內(nèi)容分值評分細則扣分備注得分準備（10分）物品準備、擺放及酒精擦拭8物品擺放合理、酒精擦手正確，材料準備齊全，得8分中途不得取用任何物品，取 1次扣4分擺放的物品影響操作，扣 2分取菌前未用酒精擦拭，扣 2分貼標簽（培養(yǎng)皿

5、）2貼標簽且位置合理，得2分每漏貼一個，扣1分每錯貼一個，扣1分三角瓶操作（15）開塞、瓶口滅菌、持法、蓋塞15三角瓶操作正確，得15分未灼燒，開塞不正確，塞子放置不正確，均扣5分蓋塞前瓶口和塞子不灼燒，均扣 5分三角瓶的瓶口開口處位置不對，扣 5分以上幾項合計最多扣 15分倒平板（40分）加培養(yǎng)基（培養(yǎng)皿 持法、加入量、污 染皿壁、混勻、）40正確（單手持皿，平端，兩指自如開合皿蓋，另一只手持培養(yǎng)基瓶），平板效果優(yōu)秀，得 40分培養(yǎng)基溫度不適宜，皿蓋上方水汽過多，扣5分平板未鋪全或高于培養(yǎng)皿高的2/3 , 一個扣5分，培養(yǎng)基污染皿壁，一個扣 10分三角瓶口接觸平皿，一個扣 5分培養(yǎng)基傾斜，一

6、個扣 5分培養(yǎng)基有凝塊、不透明，一個扣 5分無菌操作（15）酒精燈附近區(qū)操作15在酒精燈無菌區(qū)操作，得 15分所有開口處均應在酒精燈無菌區(qū)，出無菌區(qū)1次扣5分操作情況（10分）操作熟練程度10熟練，得10分較熟練，得8分一般，得6分不熟練，得0分無菌檢查（10分）培養(yǎng)48h ,有無微生物生長10無雜菌生長，且平板無開裂，無干枯部位，得10分培養(yǎng)皿有雜菌，每個扣 5分平板開裂，共扣5分平板干枯，共扣5分血球計數(shù)板計數(shù) （時間：30min）班級：姓名：學號:項目考核內(nèi)容分值考核記錄（以，表示）備注得分準 備（3分）物品擺放及酒精擦手物品擺放合理、酒精擦手正確，得分擺放的物品影響操作，扣分取菌前未用

7、酒精擦手，扣分顯微鏡的取用顯微鏡的取用與擺放方式準確，得分取用與擺放方式不正確，扣分血球計數(shù)板的放置與檢查1正確放置血球計數(shù)板于載物臺上，得 1分沒用壓片夾夾住，扣分沒有放在計數(shù)區(qū)內(nèi)，扣分1進行檢查或經(jīng)清洗后確定清潔，得1分沒有進行檢查扣1分清洗后干燥方法不合理，扣 1分加樣（2 分）添加酵母菌懸液于血球計數(shù) 板上2能夠正確添加酵母菌懸液2分加樣前未搖勻菌懸液扣1分未用濾紙吸除多余菌液扣分蓋好玻片后有氣泡扣分顯微 鏡調(diào) 節(jié)（3 分）調(diào)整顯微鏡找到血球計數(shù)板 上計數(shù)網(wǎng)格340倍鏡下找到最左上角的大網(wǎng)格，并將顯微鏡調(diào)清晰，給監(jiān)考老師看，得 3分未從低倍到高倍轉(zhuǎn)換，扣分未給監(jiān)考老師看扣分未找到最左上

8、角的大網(wǎng)格扣2分找到最左上角的大網(wǎng)格但不清晰扣 1分。計數(shù)（2 分）準確計數(shù)，并寫出原始數(shù)據(jù)2分準確計數(shù)，并寫出原始數(shù)據(jù)，得 2分沒有原始數(shù)據(jù)，扣2分數(shù)據(jù)不準確，扣1分原始數(shù)據(jù)不合理，扣1分計 算， 報告（6 分）計算公式、過程4準確計算，得出菌懸液濃度，得 4分數(shù)據(jù)處理過程不正確，扣 4分數(shù)據(jù)處理結(jié)果不正確，扣 4分數(shù)據(jù)不合理，扣1分報告結(jié)果規(guī)范、正確2報告清楚、準確、無涂改，得 2分結(jié)果報告不準確，扣分報告填寫每改1次，扣分清洗（2 分）血球計數(shù)板清洗，歸位2血球計數(shù)板清洗，并干燥歸位 2分清洗方法不正確，扣1分干燥方法不合理，扣1分未將血球計數(shù)板歸位，扣 1分文明 操作（2 分）實驗后臺

9、面整理，設備歸位2整理，得2分顯微鏡未整理，扣1分臺面未整理，扣1分血球計數(shù)板損壞，扣 2分蓋玻片損壞，扣分完 成 時 間共用（）分鐘開始：結(jié)束：0提前，不加分不扣分按時，不加分不扣分超時：每超1分鐘，扣1分（最多扣5分）（0分）合計平板劃線分離考核標準班級：姓名：學號:序 號項目內(nèi)容滿分（100 分）評分細則扣分總分1實驗 前的 準備準備全所需的所有實驗 材料15分3材料準備充分，中途取用物品扣3分貼標簽4未貼扣4分，貼錯扣2分；信息不完 整扣2分酒精棉球擦拭手與工作 臺面4分未擦拭扣4分擦手不徹底最多2分擦臺面不徹底最多2分接種針的灼燒是否徹 底，拿法是否科學4分灼燒不徹底，最多扣 3分接

10、種環(huán)拿法不對，扣1分未灼燒4分2從試 管中 取樣 接入 培養(yǎng) 皿中試管中取菌（15分）50分3試管口未灼燒，扣3分2持塞手法不正確，扣2分3接種環(huán)未冷卻，扣 3分4塞塞子時未灼燒塞子與管口， 扣4分3試管口離開無菌區(qū)，扣 3分手法是否標準（5分）1持平板的手法不當扣1分4開口過大扣4分分區(qū)接種（30）5有離開5cm酒精燈無菌區(qū)1次扣2分， 最多扣5分離開無菌區(qū)10cm以上一次扣 5分5劃完1區(qū)未灼燒，扣5分5灼燒完未冷卻，扣5分5單手旋轉(zhuǎn)平板，有明顯的分區(qū)操作10劃破平板，最多扣10分3接種 完畢， 臺面 的處 理以 及培 養(yǎng)等臺面的整理：酒精燈熄滅，各試驗器材歸位（4分）10分1分熄滅方式不

11、對，扣1分3分未歸位，扣3分；未整理，扣2分 未帶走垃圾，扣2分。最多扣3分置入培養(yǎng)箱中倒置培 養(yǎng)，以及最適培養(yǎng)溫度 的設置（4分）4分未倒置，扣2分培養(yǎng)溫度和時間寫在標簽上，未注明 扣2分完成實驗，酒精棉球擦拭手或者洗手（2分）2分未擦拭手或洗手14結(jié)果檢查分離效果20分10分10個以上單菌落，少1個扣1分分區(qū)效果5分無明顯分區(qū)，只有一個區(qū)，扣 5分平板無菌落區(qū)按占的比例扣分污染情況5分有其他雜菌污染，扣 5分5用時55分鐘，超過1分鐘扣1分平板涂布分離考核標準（20min）班級：姓名：學號:項目考核內(nèi)容值考核記錄（扣分）備注得分準備（10 分）物品擺放及酒精擦 手5物品準備合適，不多不少，

12、得 3分物品擺放合理、酒精擦手正確，得 2分擺放的物品影響操作，扣 1分取菌前未用酒精擦手，扣 1分編號（試管、培養(yǎng)M）,貼標簽5都編號且正確，得5分每漏編（貼）一個，扣 1分每錯編一個，扣1分；標簽信息不全，一個扣 1分樣 品 稀 釋（30 分）樣品混勻（原始樣 品、稀釋樣品）10進行且操作正確（平搖樣品瓶、手心震搖試管），得10分原始樣品沒有混勻，扣 2分稀釋樣品沒有混勻，一個扣 2分手心震搖試管時沒塞塞子，扣 2分移液過程其他問題，一次扣 2分吸管或移液器使用 （打開方式、取液、 調(diào)節(jié)液面、放液、 稀釋順序）10吸管或移液器使用正確，得 5分打開吸管包扎紙時手碰到管尖至吸管的1/3處，一

13、次扣2分；槍頭盒每取一次都要迅速蓋上，注意無菌操作，未蓋一次扣2分放液時若吸管（或移液器）外壁碰到試管口卻沒有灼燒試 管口，一次扣2分吸取刻度不準確，一次扣 2分稀釋時將移取過高濃度菌液的吸管插入到低濃度試管中， 一次扣2分移液過程中液體流滴在試管外面，一次扣2分試管、三角瓶操作（開塞、管口滅菌、 持法、蓋塞）10試管三角瓶操彳正確，得 10分菌種試管三角瓶開塞未灼燒，扣 2分開塞不正確，一次扣 2分蓋塞不正確，一次扣 2分持法不正確，一次扣 2分蓋塞未灼燒，扣 2分平板涂布加樣5操作正確，得5分（25分）將移取過高濃度菌液的吸管插入到低濃度試管中進行接 種，一次扣1分吸管外壁碰到培養(yǎng)皿壁，一

14、次扣1分漏接培養(yǎng)皿，一個扣1分試管被污染，每根扣1分涂布棒使用正確，涂布效果好，得 10分涂布棒上酒精未灼燒徹底，扣 2分涂布10涂布棒未冷卻，一次扣 2分涂布方法不對，扣2分涂布使平板破，扣4分單手持皿，平端，兩指自如開合皿蓋，錯誤扣2分酒精燈附近區(qū)操作3在酒精燈附近區(qū)操作，得 3分未在酒精燈附近區(qū)操作，扣 3分空白4進行，得4分未進行，一個扣2分熟練，得3分操作熟練程度3較熟練，得2分一般，得1分不熟練，得0分培正確培養(yǎng)，得3分培養(yǎng)3培養(yǎng)時未翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿，一個扣 2分（3分）將培養(yǎng)時間與培養(yǎng)溫度寫在標簽上，錯誤或漏寫均扣1分文實驗后臺面整理i整理，得1分明未整理，扣1分操未破損，得1分作（2

15、 分）器皿破損i破損，扣1分完提前，不加分不扣分成共用（）按時，不加分不扣分時分鐘開始：0間(0)結(jié)束：超時：每超1分鐘，扣1分（最多扣5分）合計結(jié)果觀察結(jié) 果 判 斷（30 分 ）培養(yǎng)結(jié)果觀察10菌落無片狀，空白無菌落，得 10分有10個以上單菌落，少一個扣 1分空白平板有菌落，一個平板扣 5分精 密 度極差與平均值之比（%） （以計數(shù)平板進行計算）1230%得0分準確（以計數(shù)平板進行計算）830%得0分培養(yǎng)基的制備與滅菌班級：姓名：學號:項目考核內(nèi)容分值考核記錄（扣分）備注得分題目配制50mL牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基，全部分裝入試管中，滅菌完畢擺斜面準備（10 分）藥品準備2藥品齊全，類別準確天

16、平準備4水平，干凈其他4操作所需所有物品，均齊全合適計算（5分）準確5所有物品均計算準確，且稱量準確稱量（25 分）加水3加水量適宜順序準確2按照配方順序加入樣品方法正確5牛肉膏的稱取方法正確5蛋白陳迅速，不至潮解操作文明10不得有藥品撒入天平中，一次扣5分溶解與 定容（10）藥品溶解5按順序溶解樣品，不糊不溢準確定容至 要求的體積5體積準確，定容方法準確調(diào)節(jié)pH （10分）調(diào)制要求值5pH試紙使用準確5調(diào)節(jié)準確，不過量，不回調(diào)分裝（15 分）分裝試管，將 所有培養(yǎng)基5裝量適宜，過大或過小一支扣1分分裝完5分裝時培養(yǎng)基沾染在試管口上，一支 1分5分裝過程培養(yǎng)基凝固滅菌（5分）高壓蒸汽滅 菌5溫度時間設定合適，寫在標簽上滅菌鍋使用熟練擺斜面5分擺接種斜面5長短適宜表面整齊熟練程度（5分）操作熟練程 度5熟練，得5分較熟練，得3分一般，得2分不熟練，得0分文明操作（5分）實驗后臺面整理3整理，得3分未整理，扣3分器皿破損2未破損，得2分破