廈門大學(xué)天然藥物化學(xué)第2章糖和苷

1、第二章 糖和苷本章基本內(nèi)容 概述 結(jié)構(gòu)類型 糖苷分類 糖和苷的物理性質(zhì) 糖的化學(xué)性質(zhì) 苷鍵的裂解 糖的提取分離 糖的鑒定和糖鏈結(jié)構(gòu)的測(cè)定 基本概念 糖類（saccharide） 亦稱碳水化合物（carbohydrate） 是植物光合作用的初生產(chǎn)物 同時(shí)也是絕大多數(shù)天然產(chǎn)物合成的初始原料 苷類（glycosides） 亦稱苷或配糖體 是由糖或糖衍生物與另一非糖物質(zhì) (苷元, aglycone或配基, -genin) 通過糖的半縮醛或半縮酮羥基與苷元，脫水形成的簡(jiǎn)介 分布廣泛，常常占植物干重的8090% 主要活性：抗腫瘤、抗肝炎、抗心血管疾病、抗衰老等 例：人參、靈芝、黃芪、枸杞子、香菇、刺五加

2、生命活動(dòng)所必需的四大類化合物 糖類、核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)第1節(jié) 單糖的立體化學(xué)1、單糖的立體結(jié)構(gòu)表示法 單糖 多羥基醛 (酮)類 水溶液中主要以環(huán)狀半縮醛 (酮)形式存在 理論上，有多個(gè)位置上的OH可與C=O成環(huán) 由于環(huán)張力因素，自然界的糖存在形式為 5元氧環(huán) (呋喃型糖，furanose) 6元氧環(huán) (吡喃型糖，pyranose) 成苷后，縮 (酮)結(jié)構(gòu)固定 單糖結(jié)構(gòu)的3種表示方法 Fischer投影式 Haworth投影式 優(yōu)勢(shì)構(gòu)象式HCHOOHOHHHOHHOHCH2OHOOFischer 式Haworth 式優(yōu)勢(shì)構(gòu)象式Fischer投影式 基本規(guī)則 主C鏈上下排列 氧化程度高的在上 橫前

3、豎后 缺點(diǎn)：不能真實(shí)表示單糖在水溶液中半縮醛 (酮)的環(huán)狀存在形式D-D-葡萄糖葡萄糖HCHOOHOHHHOHHOHCH2OHCHOOHOHOHOHCH2OHCHOCH2OH2、Fischer與Haworth式的改換 Fischer式與Haworth式的改換 Fischer式成環(huán)保證環(huán)張力最小成環(huán)C取代基發(fā)生了旋轉(zhuǎn)旋轉(zhuǎn): H的位置發(fā)生的變換的位置發(fā)生的變換 Fischer式右側(cè)的在環(huán)下 Fischer式左側(cè)的在環(huán)上CHOCH2OHOD-葡萄糖Fischer式與Haworth式的改換HCHOOHOHHHOHHOHCH2OHOOHOHOHOHOH-D-葡萄糖HOHOHHHOHHCH2OHOHHOH

4、OHOHHHOHHOH2COHHHOOOOHOHOHOHOH-D-葡萄糖HOHOHHHOHHCH2OHHOHOHOHOHHHOHHOH2CHOHHOOFischer 式Haworth 式Haworth 簡(jiǎn)式3、單糖的絕對(duì)構(gòu)型 (D、L) 以-OH甘油醛為標(biāo)準(zhǔn)，將單糖分子的編號(hào)最大的不對(duì)稱C原子的構(gòu)型與甘油醛作比較而命名分子構(gòu)型的方法CHOCHOHCH2OHD-羥基甘油醛CHOCOHHCH2OHL-羥基甘油醛Fischer式 Fischer式中，最后1個(gè)手性C上的OH 向右的為D型 向左的為L(zhǎng)型D-葡萄糖CHOOHOHOHOHCH2OHCHOHOHCH2OHCHOOHOHOHCH2OHOHL-葡

5、萄糖D-羥基甘油醛Haworth式 最后1個(gè)手性C參與成環(huán) 依據(jù)最后1個(gè)手性C ：C5 (吡喃糖)或C4 (呋喃糖)上大取代基的方向向上為D型向下為L(zhǎng)型 最后1個(gè)手性C (原構(gòu)型標(biāo)準(zhǔn)) 未參與成環(huán) 依據(jù)該手性C原有構(gòu)型判斷呋喃型已醛糖吡喃型戊醛糖 吡喃型已酮糖OOHOHOHOHOHD-吡喃葡萄糖吡喃葡萄糖OOHOHOHOHOHL-吡喃葡萄糖吡喃葡萄糖OOHOHOHOHOOHOHOHOHD-呋喃核糖呋喃核糖L-呋喃木糖呋喃木糖 呋喃型已醛糖，C5-C6部分成為環(huán)外側(cè)鏈 C5-R者為D型 C5-S者為L(zhǎng)型OOHOHOHOHCH2OHD-呋喃葡萄糖呋喃葡萄糖D-呋喃半乳糖呋喃半乳糖RRHOH2COH

6、OOHOHOH 吡喃型戊醛糖 (C4-OH) 、吡喃型已酮糖 (C5-OH) 環(huán)上者為L(zhǎng)構(gòu)型: S構(gòu)型 環(huán)下者為D構(gòu)型: R構(gòu)型D-木糖CHOOHOHOHCH2OHD-果糖CH2OHOOHOHOHCH2OHOOHOHOHOH4OOHOHOHOHOH54、單糖的相對(duì)構(gòu)型 (,) C1-OH與最后1個(gè)手性C C5 (六碳糖)或C4 (五碳糖)上取代基間的相對(duì)構(gòu)型 Fischer式 順式為 反式為 Haworth式 同側(cè)為 異側(cè)為CHOOHOHOHOHCH2OHOOCH2OHHOH異側(cè)OCH2OHOHH同側(cè)O-D-葡萄糖-D-葡萄糖-D-葡萄糖-D-葡萄糖異側(cè)同側(cè) 最后1個(gè)手性C (原構(gòu)型標(biāo)準(zhǔn)) 未

7、參與成環(huán)的Haworth式 先判斷糖D、L構(gòu)型，再判斷、 習(xí)慣上D型糖中C1-OH處環(huán)上者為體環(huán)下者為體 在L型糖中相反處環(huán)上者為體環(huán)下者為體 -D-呋喃葡萄糖呋喃葡萄糖RHOH2COHOOHOHOHOOHOHOHOH -D-吡喃木糖吡喃木糖OOHOHOHOH -L-L-吡喃阿拉伯糖吡喃阿拉伯糖5、單糖的優(yōu)勢(shì)構(gòu)象式OOHOHOHOHOHOOHOHOHOHOHO1 (2)4 (5)3 (4)2 (3)O12345O12345(4)C1式, N式(1)C4式, A式 Angyal用總自由能來分析構(gòu)象式的穩(wěn)定性，比較二種構(gòu)象式的總?cè)纾浩咸烟堑淖杂赡懿钪担芰康偷氖莾?yōu)勢(shì)構(gòu)象。 二種構(gòu)象式的比較： OO

8、HOHOHOHOHOOHOHOHOHOHOOHOHOHOHOH(1)C4式, A式(4)C1式, N式第2節(jié) 糖和苷的分類1、單糖類 已發(fā)現(xiàn)的種類 200多種 38個(gè)C，其中五、六碳糖最多 存在形式 多為結(jié)合狀態(tài) 僅有葡萄糖、果糖等少數(shù)為游離存在 詞根 呋喃糖 -furanose 吡喃糖 -pyranose 配基-genin 苷-oside 糖-ose 糖醛酸 -uronic acid 氨基糖 -samine 糖醇-itol1) 五碳醛糖 (aldopentose) L-阿拉伯糖 (L-arabinose, Ara) D-木糖 (D-xylose, Xyl) D-核糖 (D-ribose, R

9、ib)CH2OHOHOHCHOOHCH2OHOHOHCHOOHCH2OHOHOHCHOOH-L-Arabinofuranose-D-Xylulofuranose-D-RibofuranoseOOHOHOHOHOOHOHOHOHOOHOHOHOHOOHOHOHOHOOHOHOHOHOOHOHOHOHOHOOHOHOHOHCHOCH2OHD-木糖OOH2) 六碳醛糖 (aldohexose) D-葡萄糖 (D-glucose, Glc) D-甘露糖 (D-mannose, Man) D-半乳糖 (D-galactose, Gal) D-阿洛糖 (D-allose, All)D-葡萄糖CHOOHOH

10、OHOHCH2OHOOHOHOHOHOHD-半乳糖CHOOHOHOHCH2OHOHOOHOHOHOHOHD-甘露糖CHOOHOHOHCH2OHOHOOHOHOHOHOH3) 六碳酮糖 D-果糖 (D-fructose, Fru) L-山梨糖 (L-sorbose)當(dāng)構(gòu)成二糖或多糖時(shí)呋喃當(dāng)游離存在時(shí)吡喃-OH-OHOOHOHOHD-果糖CHOOOHOHOHCH2OHL-山梨糖CHOOOHOHCH2OHOHOOHOHOH4) 甲基五碳醛糖 L-鼠李糖 (L-rhamnose, Rha)L-鼠李糖L-鼠李糖OOHOHOHOHCHOOHOHOHCH3OH5) 支碳鏈糖 D-芹糖 (D-apicose,

11、 Api)OOHOHOHOHCHOOHCH2OHOHHOH2CD-芹糖 -D-芹糖6) 氨基糖 (amino sugar) 是指單糖的伯或仲醇基置換成氨基的糖類 主要存在于動(dòng)物和微生物中 龍蝦甲殼中得到的葡萄糖胺 (2-氨基-2-去氧-D-葡萄糖)為第1個(gè)發(fā)現(xiàn)的 天然存在的大多為2-氨基-2-去氧醛糖 氨基取代后往往對(duì)藥理活性有較大的影響OOHOHOHOHOHOOHOHOHNH2OHNH32-氨基-2-去氧-D-葡萄糖7) 去氧糖 (dexylsugars) 單糖分子的12個(gè)OH為H原子代替的糖 常見6-去氧糖、2,6-二去氧糖 主要存在于強(qiáng)心苷和微生物代謝產(chǎn)物中OOHOHOHOHOOHOHO

12、HOOHOHOHOH2,6-二去氧糖6-去氧糖2-去氧糖8) 糖醛酸 (uronic acid) 單糖分子中伯醇基氧化成羧基的化合物 存在于多糖、苷中 常見的類型：葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸 糖醛酸在水溶液中易環(huán)合成內(nèi)酯，以平衡狀態(tài)存在C6-OH氧化成酸OOHOHOHOHOHOCOOHOHOHOHOHOOHOOHOHOHOH2COHOOHOHOHCOOHOHOOHOHOHOOHOOHOHOC6-OH氧化成酸9) 糖醇 單糖的醛或酮基還原成OH后所得的多元醇 自然界分布很廣 有的具有甜味 D-山梨醇 (D-sorbitol) D-甘露醇 (D-mannitol) D-木糖醇 (D-xylitol)D

13、-甘露醇CH2OHOHOHOHCH2OHOHD-山梨醇CH2OHOHOHOHCH2OHOHD-木糖醇CH2OHOHCH2OHOHOH木糖醇的制備玉米芯、花生殼、甘蔗渣中含有多聚戊糖，將其粉碎，加硫酸、水加熱，水解生成木糖精制催化加氫，就得到木糖醇 10) 環(huán)醇 (cyclitols) 環(huán)狀多羥基化合物，從生源看屬單糖衍生物 游離或成苷 具有很好的水溶性 環(huán)六醇 (肌醇，inositols)，9個(gè)異構(gòu)體OHOHOHOHOHOHcis-inositol2、低聚糖類 (oligosaccharides) 定義 2 9 個(gè)單糖分子 通過苷鍵結(jié)合而成的 直鏈或支鏈聚糖 分類 糖個(gè)數(shù)：雙糖、三糖 是否具有

14、游離醛、酮C=O 還原糖 非還原糖 如： 蔗糖 (sucrose) -D-葡萄糖-(12)-D-果糖 麥芽糖 (maltose) -D-葡萄糖-(14)- -D-葡萄糖OOOHOHOHOHOOHOHOHOHOOHOHOHOHOOOHOHOHOH12環(huán)糊精 環(huán)糊精 (cyclodextrin) 由Bacillus macerans等菌產(chǎn)生的一種淀粉，可將淀粉水解為68個(gè)葡萄糖以1,4-環(huán)狀結(jié)合的低聚糖 6、7、8聚體稱為：、-環(huán)糊精 特點(diǎn)良好水溶性分子內(nèi)側(cè)具有疏水性，可包合脂溶性藥物由于具有多個(gè)手性中心，可用于手性分離低聚糖的簡(jiǎn)明表示方法 p: 吡喃型 f: 呋喃型 更正： p67文字 p 68

15、圖62-D-Fruf-D-Galp-(14)-D-Glcp-(14)-D-GlcpOOOHOHOOHOHOOOOHOHOHOHOOHOHOHOHOHOH3、多糖類 (polysaccharides) 10個(gè)以上單糖通過苷鍵結(jié)合而成 按生物體內(nèi)功能分類動(dòng)植物的支持組織：纖維素、甲殼素等 不溶于水 分子呈直線型動(dòng)植物用于貯存養(yǎng)料的：淀粉、肝糖元等 可溶于熱水成膠體溶液 分子呈支鏈型 按單糖組成分類 (-an)均多糖：由1種單糖組成 葡聚糖 (glucan), 果聚糖 (frucan)雜多糖：由2種以上單糖組成 葡萄甘露聚糖 (glucomannan), 半乳甘露聚糖 (galactomannan)

16、 許多多糖還含有O-乙酰基、N-乙酰基、磺酸酯等幾個(gè)重要的多糖 香菇多糖：抗腫瘤 人參多糖：抗腫瘤、抗突變 女貞子多糖：免疫增強(qiáng) 茶葉多糖：抗凝血、抗血栓、降血脂-D-Glcp16-D-Glcp-(13)-D-Glcp-(13)-D-Glcp-(13)-D-Glcp-(13)-D-Glcp n-D-Glcp161) 植物多糖 淀粉 (starch) 由直鏈淀粉 (糖淀粉) +支鏈淀粉 (膠淀粉)組成 糖淀粉：(14)連接D-葡聚糖，溶于熱水得澄明溶液，占1734% 膠淀粉： (14)或(16)連接D-葡聚糖，溶于熱水呈粘膠狀 呈螺旋狀，每個(gè)螺環(huán)6個(gè)葡萄糖分子 碘分子、離子可進(jìn)入螺環(huán)通道，形成有

17、色的包結(jié)化合物顯色 平均聚合度越大，顏色越深 糖淀粉：藍(lán)色 膠淀粉：因?yàn)橛蟹种?，平均聚合度只?025，呈紫紅色 纖維素 (cellulose) 聚合度30005000的(14)結(jié)合直鏈葡聚糖 直線狀 人、肉食動(dòng)物所含的-苷酶很少，故無法吸收 利用 微生物、原生動(dòng)物、反芻動(dòng)物可利用 果聚糖 (fructans) 菊淀粉 (inulin): D-Fru-(24)-D-Glc, 聚合度35，可用于測(cè)定腎清除率 levans: D-Fru-(26)-D-Glc，也有(21)分支 半纖維素 (hemicellulose) 雜多糖 可被堿水溶解的酸性多糖：支鏈上多有糖醛酸 樹膠 (gum) 粘液質(zhì) (m

18、ucilage)、粘膠質(zhì) (pectic substance)2) 動(dòng)物多糖 糖原 (glycogen) 結(jié)構(gòu)類似淀粉，但聚合度較大、分支更高 遇碘：紅褐色 甲殼素 (chitin) 由N-乙酰葡萄糖胺通過(14)連接而成 結(jié)構(gòu)、穩(wěn)定性與纖維素類似 酸性粘多糖 (acid mucopolysaccharide) 亦稱：糖胺聚糖 (glycosaminoglycan) 由氨基己糖+糖醛酸組成的雜多糖 如：肝素硫酸軟骨素透明質(zhì)酸 常以蛋白質(zhì)結(jié)合狀態(tài)存在，統(tǒng)稱：蛋白聚糖酸性粘多糖 肝素 (heparin) 由2種二糖單元A、B聚合而成 高度硫酸酯化的右旋多糖，糖鏈上常接有絲氨酸、小肽 很強(qiáng)的抗凝血作

19、用 硫酸軟骨素 (chondroitin sulfate) 降血脂作用 動(dòng)物組織的基礎(chǔ)物質(zhì)：包括A、B、C數(shù)種 A：軟骨的主要成分 B：硫酸皮膚素，半乳糖胺L-伊杜糖醛酸雙糖聚合物 透明質(zhì)酸 (hyaluronic acid) 存在于眼球玻璃體、關(guān)節(jié)液中的酸性粘多糖 潤(rùn)滑、緩沖作用OOOHOSO3HOCOOHONHSO3HCH3OSO3HOOHOOOSO3HOONHSO3HCH3OSO3HOOHCOOHOHAB硫酸軟骨素硫酸軟骨素AOOOSO3HCOOHOHONHCOCH3CH2OHOHO3SOOOOOSO3HOCOOHOHONHCOCH3HO3SOOSO3HOCOOOSO3HOCOOHOHO

20、NHCOCH3OHOOH透明質(zhì)酸透明質(zhì)酸4、苷類 糖與非糖組成的化合物苷 分類 按苷原子不同分類：O、S、N、C-苷苷 按苷元不同分類：黃酮苷、蒽醌、香豆素、強(qiáng)心苷、皂苷 按端基碳構(gòu)型分 苷，多為L(zhǎng)型； 苷，多為D型。 按連接單糖個(gè)數(shù)分：?jiǎn)翁擒铡㈦p糖苷、叁糖苷 按糖鏈個(gè)數(shù)分 1個(gè)位置成苷單糖鏈 2個(gè)位置成苷雙糖鏈 按生物體內(nèi)存在分 原級(jí)苷在植物體內(nèi)原存在的苷 次級(jí)苷原級(jí)苷水解掉一個(gè)糖或結(jié)構(gòu)發(fā)生改變1) O-苷 按苷鍵不同分類 醇苷是通過醇羥基與糖端基羥基脫水而成的苷 酚苷是通過酚羥基而成的苷 酯苷苷元以-COOH和糖的端基碳相連接的是酯苷 氰苷-羥腈苷 己發(fā)現(xiàn)50多種-羥腈苷氧化偶氮類醇苷 紅

21、景天苷 (rhodioloside) 強(qiáng)壯增強(qiáng)適應(yīng)力 毛茛苷 (ranunculin) 殺蟲、殺菌 京尼平苷 (geniposide) 梔子 瀉下、利膽 甘草酸 抗腫瘤 海星環(huán)苷OHOOOHOHOHOH紅景天苷紅景天苷OOHOHOHOHOOO毛茛苷毛茛苷OCOOCH3HOH2COOOHOHOHOH京尼平苷京尼平苷OOCOOHOHOOCOHOHOOHOOCOHOHOH甘草酸甘草酸OOOONaOOCOHOHOOOHOHOOHOOHOHOH海星環(huán)苷海星環(huán)苷酚苷 天麻苷 (gastrodin) 鎮(zhèn)靜 番瀉苷A (sennoside A) 瀉下 蘆丁 (rutin) 軟化血管 秦皮素 抗菌天麻苷天麻苷O

22、OOHOHOHOHOHOOHCOOHOOOHCOOHOOOHOHOHOHHHOOHOHOHOH番瀉苷 A番瀉苷 AOOOHOHOOHOHrutinose蘆丁蘆丁OOOOOHOHOHOH秦皮素秦皮素氰苷 (cyanogenic glycoside) -羥氰苷 體內(nèi)產(chǎn)生HCN發(fā)揮鎮(zhèn)咳作用，過量死亡 服用乳糖競(jìng)爭(zhēng)體內(nèi)的-葡萄糖苷酶預(yù)防中毒、提高LD50COHNOROOHOHOHCONOOHOHOHOHRR=H 野櫻苷 glc 苦杏仁苷R=H 亞麻氰苷 CH3 百脈根苷稀H+，酶濃H+OH-HCN+OR1R2+COR1R2N糖COCOO-R1R2糖COHCOOHR1R2+糖糖NH3NH4+COHCOO

23、HR1R2+糖H+氰苷 -羥氰苷 垂盆草苷：降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶 稀堿，水解異垂盆草苷 氧偶氮苷類 蘇鐵苷 (cycasin)、新蘇鐵苷 (neocycasin) 肝臟內(nèi)代謝CH2N2毒性O(shè)OHOHOHOHONOH.+OOHOHOHOOCN-OHOOHOHOHOOCNOH垂盆草苷異垂盆草苷OOOOHOOHR1R2N NO酯苷 (酰苷) 酯苷的苷鍵 酯的性質(zhì) 縮醛的性質(zhì)OOHOHOHOHOOOHOOHOHOHOHOHOO+山慈菇苷 AOHOHHOH2COOOOHOHOHOOOHOHOHO RR=H 瓜子金皂苷乙 Glc 瓜子金皂苷丁吲哚苷 靛苷 (indicant) 菘藍(lán)苷 (isatan B)NHO

24、OOHOHOHOHNHOHNONOHHH+O靛苷靛藍(lán)NHOOOHOHOHOHONHOHOOHOHHOOCOHOH+OH-菘藍(lán)苷果糖酮酸2) S-苷 蘿卜苷 (glucoraphenin) 黑芥子苷 (sinigrin) 白芥子苷 (sinalbin)OOHOHOHOHSNROSO3-RNameSO蘿卜苷-CH2CH=CH2黑芥子苷 OH白芥子苷 3) N-苷 腺苷 (adenosine) 鳥苷 (guanosine) 胞苷 (cytidine) 尿苷 (uridine) 巴豆苷 (crotonoside)NNNNNH2OOHOHOHNNNNHOOOHOHOHNNNHNNH2OOHOHOHONN

25、NHNHOOOHOHOHOACU4) C苷 活性C，電子云密度高，易形成C苷 苷元多為間苯二酚、間苯三酚 主要為黃酮、查耳酮、蒽醌、蒽酮、酚酸等 化學(xué)性質(zhì)：難以水解 消化道中的部分微生物可以水解R1R2NameHGlc牡荊素GlcH異牡荊素GlcGlc三色堇素OOOHOHOHR2R1OOHOHOOHOHGlcOOHOHOOHOHGlc芒果苷異芒果苷OHOHCH2OHH GlcOOHOHCH2OHH GlcO蘆薈苷OOOHOHOHCOOHOHGlc胭脂酸OOOHOHH3COOOHOHOH矮地茶素第3節(jié) 糖的化學(xué)性質(zhì)物理性質(zhì) 溶解性 糖 小分子極性大，水溶性好 單糖極性 雙糖極性 與-OH/C的分

26、擔(dān)情況而定 聚合度增高水溶性下降 多糖難溶于冷水，或溶于熱水成膠體溶液 苷：親水性 與連接糖的數(shù)目、位置有關(guān) 苷元：親脂性 味覺 單糖低聚糖：甜 多糖：無甜味 隨著糖的聚合度增高，則甜味減小 苷類：苦、甜等，人參皂苷、甜菊苷旋光性 旋光性 具有加和性，可用于苷鍵構(gòu)型的測(cè)定M=+A+BM=-A+B端基C的旋光貢獻(xiàn) C1=1/2 (MM) 規(guī)則1對(duì)糖或苷的端基異構(gòu)體分子旋光差為2A，只與端基旋光性有關(guān)分子旋光和2B：只與下端有關(guān)，與端基C無關(guān)D系糖型比型更右旋L系糖型比型更左旋OHOHOHOCH2OHHROOHOHOHOCH2OHORH-A+AB Klyne法 將苷和苷元的分子旋光差 與組成該苷的

27、糖的一對(duì)甲苷的分子旋光度進(jìn)行比較 數(shù)值上相接近的一個(gè)便是與之有相同苷鍵的一個(gè) 摩爾旋光度M=M/100=M/(100cL)一、氧化反應(yīng) 單糖基團(tuán)的活潑性順序 半縮醛 (酮) 伯醇 仲醇2-OH 3,4-OHe鍵-OH a鍵-OH 反應(yīng)條件與產(chǎn)物 -CHO-COOH銀鏡反應(yīng)：Ag+Ag弗林反應(yīng)：Cu2+Cu2O 磚紅色Br2/H2O ：褪色 HNO3: 醛糖糖二酸 HIO4、Pb(Ac)4氧化：鄰二醇-OHCHOOHOHOHOHCH2OHCOOHOHOHOHOHCOOHCOOHOHOHOHOHCH2OHBr2/H2O稀HNO3過碘酸反應(yīng) 主要作用于 鄰二醇 -氨基醇 -羥基醛(酮): 反應(yīng)較慢

28、鄰二酮：反應(yīng)最慢 某些活性次甲基等結(jié)構(gòu)RCCRHHOH OHIO4-R-CHOR-CHO+CCCHHOH OHHOHIO4-2R-CHOR-CHO+HCOOHRCCROOHHIO4-R-CHOR-COOH+CCHHNH2OH-IO4R-CHOR-CHO+NH3CCROHOOIO4R-COOHR-COOH+反應(yīng)特點(diǎn) 反應(yīng)條件 含水溶液（否則不反應(yīng)） 避光 反應(yīng)特點(diǎn) 反應(yīng)定量進(jìn)行 降解產(chǎn)物穩(wěn)定 生成的HIO3可滴定 反應(yīng)速度 順式 反式 中、酸性條件下：順式易形成環(huán)式中間體 堿性條件下：速度相差不大 吡喃糖 呋喃糖 在異邊而無扭轉(zhuǎn)余地的鄰二醇不起反應(yīng)OOHOHOOH61OOHOHOOH1,6-D-

29、葡萄呋喃糖酐1,6-D-半乳呋喃糖酐反應(yīng)機(jī)制 與鄰二醇形成五無環(huán)狀酯中間體 HIO4形成離子pH7: HIO4H2IO5-，6面體 a,e-OH可通過半船式扭曲共平面 e,e-OH無法共平面pH7: HIO4H3IO62-，8面體 a,e; e,e-OH均可形成中間體 形成中間體 將-OH氧化為C=OIOOHOHOO-I-OOOOO-O-HHRCCRHHOHOH-R-CHOR-CHO+H2IO5-RCCRHHOIOOOOHOH2+HIO4消耗量的確定 單糖：按Fischer式計(jì)算 成苷：按Haworth式某處 活性CH2：多消耗1分子HIO4CH2CHOCH2OHIO43-CHOCH2CHO+

30、HCHO2 HCOOH+CHOCHOOHIO42HCHO2 HCOOH+IO4D-葡萄糖CHOOHOHOHOHCH2OHOOHOHOHOHOH3 IO4-OOHCCHOOH+2 HCOOHOHOHCOH+2 HCOOHHCHO2 IO4-+HCOOH醚鍵開裂用途 推測(cè)糖中鄰二-OH多少 推測(cè)吡喃糖、呋喃糖 推測(cè)低、多聚糖聚合度 推測(cè)1,3連接還是1,4連接 糖與糖連接的位置-D-葡萄糖OOHOHOROHOROOHROOHOHOROOHOHOHOHORHOH2COHOOHOHORHIO4HIO4HCOOH無HCOOH產(chǎn)生Pb(Ac)4氧化 氧化能力較HIO4強(qiáng) 室溫下可氧化草酸 立體選擇性更高

31、呋喃糖反式二醇OH不能氧化 需要在有機(jī)溶劑中進(jìn)行 HAc, 二氧六環(huán) 多糖類物質(zhì)使用受限二、糠醛形成反應(yīng)糖類型RName五碳糖H糠醛甲基五碳糖CH35-甲基糠醛六碳糖CH3OH5-羥甲基糠醛六碳糖醛酸COOH5-羧基糠醛ORCHOOROHOHOHOH呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)，濃酸單糖礦酸多糖O3H-10N)(4 (10%HCl)2Molish反應(yīng) 樣品 + 濃H2SO4 + -萘酚 棕色環(huán) 多糖、低聚糖、單糖、苷類Molish反應(yīng)= ？ )( 酮等苯酚、萘酚、苯胺、蒽顯色芳胺或酚類糠醛衍生物縮合三、羥基反應(yīng) 反應(yīng)活性 最高的半縮醛羥基（C1-OH） 其次是伯醇基（C6-OH） 仲醇次之 伯醇因其處于末端的空

32、間，對(duì)反應(yīng)有利，因此活性高于仲醇 反應(yīng)類型：醚化、酯化和縮醛（酮）化1、醚化反應(yīng) (甲基化) Haworth法（不常用） 含糖樣品 + Me2SO4 + 30%NaOH 醇-OH全甲基化 需反復(fù)68次 判斷反應(yīng)是否完全的方法：IR測(cè)試直到無-OH吸收峰為止 用途：制備成甲苷，用限量試劑，即克分子比1 1時(shí)，可得甲苷 Purdie法 樣品 + MeI + Ag2O 全甲基化 (醇-OH) 只能用于苷，不宜用于還原糖 (即有C1-OH的糖)，Ag2O有氧化作用C1-OH氧化 Hakomori法 (箱守法) 樣品 + DMSO + NaH + MeI 全甲基化：一次即可 該反應(yīng)是在非水溶劑中，即二甲

33、基亞砜（DMSO）溶液中進(jìn)行反應(yīng) 重氮甲烷法 (CH2N2) 樣品 + CH2N2 / Et2O + MeOH 得到：部分甲基化產(chǎn)物，-COOH、-CHO等2、?；磻?yīng) (酯化反應(yīng)) OH活性與甲基化反應(yīng)相同 即：C1-OHC6-OHC3-OH 由于C2位取代后空間障礙C3-OH最難 用途 判斷糖上-OH數(shù)目 保護(hù)-OH等3、縮酮和縮醛化反應(yīng) 酮或醛 + 多元醇 (有2個(gè)有適當(dāng)空間位置的OH) 脫水劑如礦酸、無水ZnCl2、無水CuSO4等存在下 形成環(huán)狀縮酮 (ketal)和縮醛(acetal) 酮類易與順鄰-OH生成五元環(huán)狀物 醛類易與1,3-雙-OH生成六元環(huán)狀物 目的:保護(hù)-OH糖 +

34、 酮 糖 + 丙酮 五元環(huán)縮酮 (異丙叉衍生物) 有順鄰-OH時(shí)五元環(huán)狀物 無順鄰-OH時(shí)轉(zhuǎn)變?yōu)檫秽墙Y(jié)構(gòu)是再生成五元環(huán)狀物OOHOHOHOHOH+O-D-半乳糖OOOOHOO1,2,3,4-二-O-異丙叉-D-半乳吡喃糖OOHOHOHOHOHOOHOHOHOHOH-D-葡萄糖OOHOOOO1,2,5,6-二-O-異丙叉-D-半乳吡喃糖H2SO4丙酮轉(zhuǎn)變?yōu)檫秽虷2SO4-H2O糖 + 醛 糖 + 苯甲醛 六元環(huán)狀縮醛 (苯甲叉衍生物) 葡萄糖甲苷 + 苯甲醛 具1,3-OH結(jié)構(gòu)OOOOHOHOCH3H4,6-O-苯丙叉-D-葡萄吡喃糖甲苷OOHOHOHOHOCH3-D-葡萄糖甲苷+CHOH2

35、SO4-H2O四、羰基反應(yīng) 還原糖 + 苯肼 糖腙 (易溶于水) + 2分子苯肼 糖脎 (難溶于水) 2-去氧糖不能成脎：C2上無-OH 應(yīng)用：糖的鑒定、分離和純化C OHCHOHRC OHCHHRN NHC OCHRN NHC NCHRN NHNHPhNHNH2PhNHNH2PhNHNH2還原糖糖腙糖脎五、硼酸絡(luò)合反應(yīng) 糖的鄰二-OH可與許多試劑生成絡(luò)合物物理常數(shù)的改變有助于糖的分離、鑒定和構(gòu)型推定 重要的如：硼酸絡(luò)合物、鉬酸絡(luò)合物、銅氨離子絡(luò)合物等 糖 + 硼酸 絡(luò)合物 (酸性增加、可離子化) H3BO3是接受電子對(duì)的Lewis酸 中性酸性，應(yīng)用 酸堿中和滴定 離子交換法分離 電泳鑒定 可

36、在混有硼砂緩沖液的硅膠薄層上層析第4節(jié) 苷鍵的裂解 了解苷元結(jié)構(gòu)、糖的組成、連接方式 方法 酸催化水解反應(yīng) 乙酰解反應(yīng) 堿催化水解和消除反應(yīng) 酶催化水解反應(yīng) 氧化開裂法（Smith降解法） 一、酸催化水解 苷鍵屬于縮醛結(jié)構(gòu)，易為稀酸催化水解 苷原子先質(zhì)子化 斷鍵生成陽碳離子或半椅型的中間體 水中溶劑化而成糖HOOOHOHOHOHRHOO+OHOHOHOHRHO+OHOHOHOHHHOOHOHOHOHOH.H+OH2.OH2.abaOOHOHOHOHOHHHOHOH+OHOHOHOHbH+.酸水解的規(guī)律 (總) 總規(guī)律 (反應(yīng)容易) 苷原子的電子云密度 質(zhì)子化位阻 環(huán)張力 (穩(wěn)定性)酸水解的規(guī)律

37、 (具體) 苷鍵 N O S C苷 酰亞胺苷？ 構(gòu)型 苷元為小基團(tuán) ( e a )：質(zhì)子化位阻小 苷元為大基團(tuán) ( a e )：穩(wěn)定性 苷元 酚苷、烯醇苷 醇苷 醇苷：叔OH仲OH伯OH 糖 取代基的I效應(yīng) 2,3-二去氧糖 2-去氧糖 3-去氧糖 羥基糖 糖醛酸2-氨基糖 糖醛酸：難 (-I效應(yīng)) 氨基糖：難 (-NH2-NH3+，強(qiáng)烈-I效應(yīng)) 呋喃糖吡喃糖；酮糖醛糖 (穩(wěn)定性、張力) 糖a鍵多：易 (穩(wěn)定性) C5-取代基大小：越大越難 (質(zhì)子化位阻) 七碳糖 六碳糖甲基五碳糖 五碳糖 NOOOOOHOOHOHOHOH朱砂蓮苷酸水解的方法 酸水水解法 5%HCl 得到游離的糖 苷元構(gòu)型易

38、改變 兩相水解法 酸水+CHCl3 (有機(jī)相) 水層：糖 有機(jī)層：苷元，構(gòu)型保持不變 溫和酸水解 0.3% HCOOH, CH3COOH 選擇性開裂易開裂的苷鍵 鹽酸甲醇水解 5%HCl+MeOH 直接醚化半縮醛OH：能夠確定糖氧環(huán)大小 (呋喃、吡喃)二、乙酰解反應(yīng) 試劑：醋酐 + 酸 H2SO4、HClO4、CF3COOH Lewis酸 (ZnCl2、BF3) 反應(yīng)條件：一般是在室溫放置數(shù)天。 反應(yīng)機(jī)理 與酸催化水解相似 但以CH3CO+為進(jìn)攻基團(tuán) 用途 保護(hù)苷元上的-OH、增加親脂性 部分開裂苷鍵：鑒別多糖連接方式反應(yīng)規(guī)律 易發(fā)生異構(gòu)化 糖的端基 糖cis-C2, 3-OH 反應(yīng)速率 電子

39、云密度容易 苷鍵周圍有電負(fù)性強(qiáng)的基團(tuán) (如環(huán)氧基)：難 -苷鍵易斷 -苷鍵的葡萄糖雙糖的反應(yīng)速率 (16) (14) (13) (12) 乙?；疧H電子云密度密度難難伯OH仲OH叔OH酚OHCOOHOAcOAcOOAcOAcOAcOAcOAcOOAcOAcOAcOAcC+AcOAcOOAcOAcOAcHOAcOAcOOAcOAcOAc+OAcAcOOAcOAcCH2OAcOAcAcO三、堿催化水解 一般苷鍵對(duì)稀堿是穩(wěn)定的，但苷元上有吸e基團(tuán)直接與苷原子相連時(shí)，易為堿水解 酯苷 酚苷 烯醇苷 -吸電子基取代的苷：-消除反應(yīng)OOOOOHOHOHOHHCOOHOOOHOHOHOHHOOOHOHOHO

40、HHCNCOOHCOOH海韭菜苷水楊苷4-OH香豆素苷OOHOHOHOOHOROOHOHOHOHOH+RCOOHOH-/H2O C1-OH與C2-OH 反式易水解1,6-葡萄糖酐 發(fā)生了二次Walden轉(zhuǎn)換 順式正常的糖* 利用水解產(chǎn)物可判斷苷鍵構(gòu)型 苯酚-葡萄糖苷1,6-葡萄糖酐OOHOHOOOHC6H5HOH-OOHOHO-OOHC6H5OOHOHOO-OOHOHOHOOH-脫水OH-消除反應(yīng) 苷鍵-位有吸e基團(tuán)-H活化利于OH-進(jìn)攻與苷鍵共同發(fā)生消除開裂 例：()-CN蜀黍苷OOOHOHOHOHOHCNHOOOHOHOHOHOHCOOHHOHOHCOOHOH-OH- 糖還原端，游離的CO

41、活化鄰位H 與3-O-或4-O-苷鍵起消除反應(yīng) 堿使多糖還原端單糖逐個(gè)剝落，對(duì)非還原端無影響 生成的是-脫氧糖酸 用途：從生成的糖酸了解還原糖的取代方式 3-O-代的糖可3-脫氧糖酸 4-O-代的糖可3-脫氧-2-羥甲基糖酸 二個(gè)以上取代的還原糖難生成糖酸 HCHOOHROHHOHHOHCH2OH3-O-代糖苷鍵-位苷鍵CHOOHROHHOHHOHCH2OH-CHOOHC HHOHHOHCH2OHCHOOCH2HOHHOHCH2OHCOOHOHCH2HOHHOHCH2OHCOOHCH2HOHHOHCH2OHOHOH-OR-互變重排3-脫氧-D-阿拉伯已糖酸3-脫氧-D-核已糖酸+四、酶催化水解

42、反應(yīng) 酶專屬性高，選擇性地催化水解某一構(gòu)型的苷 苦杏仁酶 (emulsin)：-6C醛糖苷 蝸牛酶：-苷鍵 纖維素酶 (cellulase)：-D-葡萄糖苷 麥芽糖酶 (maltase)：-D-葡萄糖苷 轉(zhuǎn)化糖酶 (invertase)：-D-果糖苷 酶：提取純化困難，使用微生物代替 用途 判斷苷鍵構(gòu)型 得到的苷元保持結(jié)構(gòu)不變 提取分離時(shí)，注意殺酶保苷!五、氧化開裂法 (Smith降解法) 試劑: HIO4 (NaIO4)+ NaBH4 + 稀H+ 反應(yīng)條件溫和，可得到原苷元 不適用于含鄰二醇OH的苷元 可用于C苷的水解OOHOHOHOROHOOHOROHCOHCCH2OHHOH2COOHOR

43、ROHCH2OHCHOCH2OHHOH2COH+苷二元醛二元醇苷元2IO4-氧化BH4-還原H+水解具真正的縮醛結(jié)構(gòu)縮醛結(jié)構(gòu)很弱的酸很弱的酸即可水解例：人參皂甙Rb1水解OOHOHOHOOOOHOHOHOHOHOOOHOHOOHOOHOHOHOHginsenoside Rb1OHOHOHOHOOHOOHOHOOHOOHOHOHOHOHOHO20(S)-原原人參二醇20(S)-protopanaxadiol20(R)-次皂甙20(S, R)-人參二醇20(S, R)-panaxadiolIO4-, BH4-, H+HOAcHClC苷的Smith裂解 HIO4 (NaIO4)+ NaBH4 + 稀

44、H+ R-CHO FeCl3 糖C1，C2間開裂的產(chǎn)物 例：葡萄糖碳苷阿拉伯糖OOHOHOHROH+OHOHOHROHOHRCHOIO4-a. IO4-b. BH4-c. H+六、糖醛酸苷的選擇性水解 由于酸水難水解，反應(yīng)劇烈苷元破壞 光解法 Pb(Ac)4分解 法 醋酐-吡啶分解法 微生物培養(yǎng)法 醚鍵相連的苷 水解無法得到苷元 例：芍藥新苷 (lactiflorin)OOHOHOOOHOOOO第5節(jié) 糖的NMR性質(zhì)其它波譜學(xué)特征 IR -葡萄糖苷在770、780 cm-1有強(qiáng)吸收峰 MS 葡萄糖苷乙?；?31碎片峰強(qiáng)度： 一、1H-NMR 非信號(hào)峰 TMS 溶劑峰D2O溶劑 4.8，可能會(huì)

45、影響端基質(zhì)子信號(hào) 隨T改變而改變：-0.01/K 水峰：4.8 雜質(zhì)峰：看積分比化學(xué)位移 端基質(zhì)子：4.36.0 黃酮3-D-Glc: 5.36.0 黃酮其它位置的-D-Glc: 4.85.2 醇苷：80 端基C：95105100：多數(shù)的-D、-L苷 少數(shù)降為98：酯苷、酚苷 (注意1H-NMR的數(shù)值)、叔醇苷100：多數(shù)的-D、-L苷*特殊：D-arabinoseQC37-C.ESP10210098969492908886848280787674727068666462Chemical Shift (ppm)101.5879.1478.5174.7071.2262.38OOHOHOHOHOO

46、H3CO1JC1-H1與苷鍵構(gòu)型 吡喃糖 C1式165 (170175) Hz: -D、-L 1C式：鼠李糖，相反!-L： 160170 Hz-L： 150160 Hz 呋喃糖：無法判斷苷化位移 (glycosidation shift) 定義 糖苷化后 端基碳 多向低場(chǎng)移動(dòng) 酯苷：稍向高場(chǎng)! 醇苷元 -C：向低場(chǎng)移動(dòng) -C：多向高場(chǎng)移動(dòng) 酚、酯苷元 -C：向高場(chǎng)移動(dòng) -C：稍向低場(chǎng)移動(dòng) 其余碳的影響不大 這種苷化前后的化學(xué)變化，稱苷化位移OOOHOHOHOHR+ 5.06.5-3.55.0OHOOHOOOHOHOHOH101.1-0.9+1.6-0.7+ 0.8苷元位有取代時(shí)的苷化位移 苷元

47、-碳和糖端基手性相同(同為R或S)時(shí)：與苷元為-無取代的環(huán)醇相同 苷元-碳和糖端基碳手性不同時(shí)：苷化位移值增大3.5R-ROOOHOHOHOH+3.4+ 6.8-4.7-0.6RRR-SOOOHOHOHOH+7.6+ 10.6-1.7-0.2SR相應(yīng)增加約3.5 ppm例：齊墩果酸OHCOOH+ 10.3-1.2+0.3OOHOHOHOHOH106.9OOHOHOHOHOH95.7-3.9-0.2-0.813C-NMR的取代基位移 -OH的甲基化位移 無論醇、酚-OH，甲基化后，-C低場(chǎng)位移，-C高場(chǎng)位移H3COR-3.1OCH3+3.3-3.0-0.8-1.0H3CORR+10.5+9.2-

48、2.9H3COCH2RRR+3.7-4.513C-NMR的取代基位移 -OH的酰化位移 醇-OH： -C低場(chǎng)位移，-C高場(chǎng)位移 酚-OH： -C高場(chǎng)位移，-C低場(chǎng)位移AcOR-3.9OAc-4.1+6.1AcORR+2.4+3.6-3.4AcOCH2RRR+11.1-3.2第7節(jié) 糖和苷的提取分離一、提取 殺酶保苷 采集新鮮材料 迅速加熱干燥；冷凍保存 溶劑法：水；稀醇 (單糖、低聚糖、多糖) 糖類: 冷熱水、冷熱稀醇 苷類: 根據(jù)極性大小，選擇相適應(yīng)的溶劑蛋白質(zhì)除去法 粗多糖，常夾雜有較多的蛋白質(zhì) 方法 Sevag法 CHCl3+戊醇(丁醇)+多糖水溶液 5：1：25劇烈振搖20 min離心

49、，除去兩相間的變性蛋白 溫和，但要重復(fù)5次 三氟三氯乙烷法 多糖水溶液+CF3-CCl3 1:1攪拌10 min離心取水層，2次 溫和 三氯醋酸法 多糖水溶液，滴加3%CCl3COOH至不繼續(xù)混濁為止510過夜離心除沉淀 酶解法 多糖水溶液+胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、鏈蛋白酶等 糖Pr的處理 硼氫化鉀+稀OH- 注意：處理時(shí)間要短，溫度要低 避免多糖降解二、分離1. 季銨氫氧化物沉淀法2. 分級(jí)沉淀或分級(jí)溶解法3. 活性炭柱色譜4. 纖維素色譜5. 離子交換柱色譜6. 凝膠柱色譜7. 制備性區(qū)域電泳* 蛋白質(zhì)除去法 (提取)1、季銨鹽沉淀法 季銨鹽&氫氧化物 是一類乳化劑 可與酸

50、性多糖形成溶液pH或含硼砂緩沖液 (糖酸性)中性多糖 常用的季銨鹽CTAB (十六烷基三甲胺溴化物)&氫氧化物 (CTA-OH)CP-OH (十六烷基吡啶) 操作 110% CTAB或CP-OH，攪拌下滴加于0.11% 多糖溶液中 (pH 單糖 洗脫順序 水有機(jī)溶劑 (EtOH)H2O10%20%30%50%70%EtOH 無機(jī)鹽單糖 二糖 三糖 多糖4、纖維素色譜 原理 與PC相同，屬分配層析 溶劑系統(tǒng)：水、丙酮、水飽和的正丁醇等 洗脫順序 水EtOH 水溶性大先出無機(jī)鹽單糖 二糖 三糖 多糖5、離子交換柱色譜 纖維素改性離子交換纖維素 陽離子：CM-cellulose等用于分離：酸

51、性、中性、粘多糖洗脫劑：pH相同，離子強(qiáng)度不同的緩沖液吸附力 (變大) 酸性基團(tuán)多 MW大 直鏈 陰離子：DEAE-cellulose等中性多糖硼酸絡(luò)合物洗脫劑：不同濃度硼酸鹽液6、凝膠柱色譜 常用商品名稱及型號(hào) 葡聚糖凝膠：Sephadex G-10、G-15、G-200等10表示吸水量乘以10，即1.0ml/g的吸水量 瓊脂糖凝膠（Sepharose，Bio-Gel A） 聚丙烯酰胺凝膠（Bio-Gel P） 羥丙?；宦?lián)葡聚糖凝膠（Sephadex LH-20）親脂性，可在有機(jī)溶劑中進(jìn)行分離的分子篩 操作過程： 將凝膠在適當(dāng)?shù)娜芤褐薪?(多為洗脫劑) 除LH-20外，均在H2O中進(jìn)行

52、待充分膨脹后裝入層析柱 用洗脫液洗脫 收集、回收溶液，干燥 洗脫溶劑的選擇 分離中性物質(zhì): 水及電解質(zhì)溶液 (酸、堿、鹽溶液及緩沖液) 阻滯較大的組分: 水+有機(jī)溶液 (MeOH, EtOH, 丙酮) LH-20可用有機(jī)溶液進(jìn)行溶脹 (如：CHCl3、丁醇、二氧六環(huán)等) 適用：有機(jī)物質(zhì)的分離7、制備性區(qū)域電泳 裝柱 水+玻璃粉膠狀物 冷卻夾層 電泳緩沖液：0.05M硼砂/水 電泳 上端+，下端- 1.22V/cm, 3035 mA 512 hr 處理：推出、切割、洗脫、檢測(cè)三、糖的提取分離實(shí)例 地黃根中單糖和低聚糖的分離 鮮地黃根熱EtOH、H2O提 陰陽離子交換樹脂 (除酸堿成分)得中性成分

53、 活性炭柱 (15%HOAc處理)H2O、5、10、15、25%EtOH 順次洗脫 PC檢定，合并 產(chǎn)物：D-葡萄糖、D-半乳糖、D-果糖、蔗糖、棉子糖、甘露三糖、水蘇糖(四糖)、毛蕊糖(五糖) 第6節(jié)糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定單糖、低聚糖多糖一、糖的鑒定 (單糖、低聚糖)1. PC2. TLC3. GC4. HPLC5. ILC1、PC 展開系統(tǒng)：常用水飽和的有機(jī)溶劑展開。 正丁醇：醋酸：水（4：1：5上層）BAW 水飽和苯酚等溶劑系統(tǒng) 顯色劑 鄰苯二甲酸+苯胺 (使還原糖顯棕黑色) 硝酸銀試劑 (使還原糖顯棕黑色) 三苯四氮唑鹽試劑（單糖和還原性低聚糖呈紅色） 3,5-二羥基甲苯鹽酸試劑（酮糖呈紅色）2

54、、TLC (0.03M硼酸液 + 無機(jī)鹽) + 硅膠 制板 常用的無機(jī)鹽 0.02M硼酸鹽緩沖液 0.3M磷酸氫二鈉或磷酸二氫鈉 0.02M乙酸鈉 0.1M亞硫酸氫鈉 特點(diǎn) 增加糖在固定相中的溶解度 使硅膠薄層吸附能力下降，利于斑點(diǎn)集中 可增加樣品的承載量 顯色劑 除紙層析應(yīng)用的以外 H2SO4/H2O或乙醇液 茴香醛-硫酸試劑 苯胺-二苯胺磷酸試劑3、GC 將糖制備成三甲基硅醚 增加其揮發(fā)性 醛糖 NaBH4還原成多元醇（避免形成端基異構(gòu)體） 制成乙?；锘蛉阴；?、HPLC 填充材料 化學(xué)修飾的硅膠，如-NH2柱 Sugar D 特點(diǎn) 不必制備成衍生物 適合分析對(duì)熱不穩(wěn)定、不揮發(fā)的低聚糖、多糖 分析單糖和低聚糖，靈敏度不及GC5、離子交換層析 糖的硼酸絡(luò)合物: 可進(jìn)行離子交換層析 不必制成衍生物 直接用水溶液進(jìn)行分離 糖自動(dòng)分析儀 顯色：3,5-二羥基甲苯-濃硫酸 波長(zhǎng)：425nm 上樣量：每種組成不超過1mg 洗脫劑：四硼酸鉀的緩沖溶液 二、單糖絕對(duì)構(gòu)型確定 對(duì)映異構(gòu)體的分離原則 衍生化，引入新的手性中心非對(duì)映體 色譜柱具備手性 方法 GC HPLC 手性色譜法: 昂貴 旋光檢測(cè)器：儀器昂貴 旋光比較法：樣品用量大1、GC 單糖+手性