淋球菌培養(yǎng)及鑒定ppt課件

1、1共同點：革蘭陰性球菌、單個或成雙排列、無芽孢、無鞭毛、有菌毛 觸酶試驗（+） 氧化酶試驗（+）不同點：對糖分解能力、硝酸鹽還原能力和DNA合成酶 淋球菌即淋病奈瑟菌，屬于奈瑟菌屬。淋球菌即淋病奈瑟菌，屬于奈瑟菌屬。2淋球菌，是一種革蘭陰性雙球菌，呈卵圓形或腎形，成對排列，直徑約0608m，常位于多形核白細胞的胞漿內，慢性期則在細胞外。生長適宜溫度為3738，淋菌不耐熱，干燥環(huán)境存活12小時，555分鐘立即死亡，附著在衣褲和臥具上的淋菌最多只能生存24小時，一般消毒劑易將其殺死。34傳染方式：成人 性接觸 初生嬰兒 患病母親產(chǎn)道感染 致病物質：菌毛 外膜蛋白PI：中性粒細胞受損 外膜蛋白PII

2、：黏附 外膜蛋白PIII：阻抑抗體活性 IgA1酶:破壞粘膜局部抗體5男性急性淋菌性前尿道炎 女性淋菌性宮頸炎、尿道炎 初生嬰兒膿漏眼 發(fā)展：男性后尿道炎、前列腺炎、精囊炎、附睪炎等 女性子宮內膜炎、輸卵管炎等 后遺癥：不育、不孕、異位妊娠6淋病是由奈瑟淋球菌所致的泌尿生殖系統(tǒng)感染。不僅可引起男性尿道炎、女性宮頸或尿道炎，還可經(jīng)血行播散引起菌血癥。臨床表現(xiàn)因感染的人群不同，部位不同而有差別7直接涂片：取尿道或宮頸膿性分泌物涂片，作革蘭染色，鏡下可見大量多形核白細胞，細胞內可見數(shù)量不等的革蘭陰性雙球菌。涂片對女性檢出率低，有假陰性，必要時應作培養(yǎng)。細菌培養(yǎng)：標本在選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可出現(xiàn)典型菌

3、落，氧化酶試驗陽性，鏡檢可見到革蘭陰性雙球菌，還可用檢測淋球菌DNA，直接免疫熒光試驗協(xié)助確診。8淋球菌是淋病的病原菌，為實驗室確診淋病提供依據(jù)。（培養(yǎng)法為確診淋病的金標準）淋球菌藥敏試驗，測定藥物抑菌或殺菌能力，以便準確有效利用藥敏進行治療。9淋球菌的營養(yǎng)要求較復雜，所用的培養(yǎng)基中應含有動物蛋白及細菌生長所需的各種因子。目前國內常用的是血液瓊脂或巧克力瓊脂。國外常用的培養(yǎng)基有Thayer-Martin(T-M)培養(yǎng)基、NewYork City(NYC)培養(yǎng)基和Martin-Lewis(ML)培養(yǎng)基等。10T-M培養(yǎng)基是在GC基礎培養(yǎng)基中，加入血紅蛋白(1%)、抗生素(萬古霉素3g/ml、粘菌

4、素7.5g/ml和制霉菌素12.5g/ml)和淋球菌增菌劑，使絕大多數(shù)雜菌被抑制而淋球菌菌落長得較大，在乎皿中幾乎呈純培養(yǎng)，從而大大提高了由子宮頸、尿道，尤其是咽和直腸部位分離出淋菌的陽性率。 11淋球菌對外環(huán)境變化頗為敏感，對寒冷和干燥抵抗力很弱。因此，為了保證培養(yǎng)有足夠的成功率，取材后應立即接種，標本離體時間越短越好。培養(yǎng)的最適溫度為3537，超過38.5或低于30便生長不良。因此，孵育的溫度要恒定。淋球菌為需氧菌，但最初從人體分離時，為促進生長，需用5%二氧化碳環(huán)境培養(yǎng)。12取材部位準確女性病人標本：取宮頸內膜分泌物 男性病人標本：取尿道口膿性分泌物培養(yǎng)基預溫立即接種最好床邊接種合適的培

5、養(yǎng)基CO2培養(yǎng)13分泌物分泌物直接涂片染色直接涂片染色 分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)可疑菌落可疑菌落 涂片染色涂片染色生化反應生化反應初步報告初步報告生長特性生長特性14經(jīng)24h48h的培養(yǎng)后，可形成圓形、凸起、濕潤、光滑、半透明或灰白色菌落，似露水珠，易乳化，直徑為0.5mm 1.0mm。1516從菌落上取材作涂片，革蘭染色后可見到菌的大小及染色的深度有差異，排列也不一致，呈典型革蘭陰性雙球菌。1718來自泌尿生殖道符合初步鑒定標準的分離株，一般可診斷為淋球菌，準確率達98%。對于菌落形態(tài)不典型的分離株，來自咽部、眼睛或其他泌尿生殖道外部位的分離株，應作確診試驗。19氧化酶試驗糖分解試驗（葡萄糖、麥芽糖

6、、蔗糖）30過氧化氫試驗20形態(tài)染色典型：革蘭陰性球菌培養(yǎng)特性：光滑、濕潤、易乳化菌落生化反應：氧化酶陽性、僅分解葡萄糖（麥芽糖、乳糖、蔗糖、果糖均不分解）21菌名菌名生長生長產(chǎn)酸產(chǎn)酸硝酸鹽還硝酸鹽還原原DNA酶酶巧克力平皿上特巧克力平皿上特點點巧克力或血瓊脂(22)營養(yǎng)瓊脂(35)葡萄糖麥芽糖乳糖蔗糖果糖淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌-+-光滑,灰白色,透明腦膜炎奈瑟腦膜炎奈瑟菌菌-+-光滑,灰,無色,透明,個別淡黃粘膜奈瑟菌粘膜奈瑟菌+-+-黃綠,光滑卡他布蘭漢卡他布蘭漢d+-+灰白棕色、易乳化22分泌物分泌物男性確診男性確診女性（其女性（其他標本）他標本）直接涂片染色直接涂片染色 分泌物培養(yǎng)分泌物培養(yǎng)（巧克力色平板）巧克力色平板）可疑菌落（菌落形態(tài)、陰性雙球菌、可疑菌落（菌落形態(tài)、陰性雙