植物組織培養(yǎng)技術(shù)考試復習題

1、植物組織培養(yǎng)技術(shù)考試復習題一、填空題1、組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是： 植物細胞的全能性 。2、根據(jù)培養(yǎng)的外植體材料不同，可將植物組織培養(yǎng)分為以下幾種類型： 愈傷組織培養(yǎng) 、 器官培養(yǎng) 、 胚培養(yǎng)  、 細胞培養(yǎng)  、 原生質(zhì)體培養(yǎng)  、 遺傳轉(zhuǎn)化 。3、植物組織培養(yǎng)實驗室一般劃分為 洗滌室 、 培養(yǎng)基配置室 、 緩沖室 、 無菌接種室 、培養(yǎng)室、觀察室、馴化室等分室，其中植物組織培養(yǎng)實驗室對無菌條件要求最嚴格的區(qū)域是 無菌接種室 。4、培養(yǎng)基成分主要包  水分  、  無機鹽類  、 有機營養(yǎng)成、植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì) 、 天

2、然物 質(zhì)  、  pH  、  凝固劑  。5、目前應用最廣泛的組培基本培養(yǎng)基是 MS培養(yǎng)基 。6、培養(yǎng)基最常用的碳源是 糖類物質(zhì) ，使用濃度在1%-5% 常用 3 %。7、培養(yǎng)基中加入活性炭的目的： 減少外植體的褐變 。8、生長素/細胞分裂素的高低決定著外植體的發(fā)育方向，其比值高則有利于 根 的形成； 其比值低則有利于 芽 的形成。9、一個已停止分裂的成熟細胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象稱為"_脫分化_"10、某些生長調(diào)節(jié)物質(zhì)及抗生素、酶類物質(zhì)遇熱不穩(wěn)定，對其滅菌時不能進行 (高壓蒸汽 )滅菌，而要進行 過

3、濾方法滅菌 。11、確定花粉發(fā)育時期最簡捷有效的方法是 壓片鏡檢法 。12、液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基最主要的區(qū)別是：固體培養(yǎng)基中添加了 瓊脂粉 ，而液體培養(yǎng)基一般不添加。13、細胞懸浮培養(yǎng)的方法有 分批培養(yǎng) 和 連續(xù)培養(yǎng) 。14、外植體滅菌常用的消毒劑是 酒精 ，使用濃度一般為 7075 。15、具有防止褐變作用的維生素是 抗壞血酸（維生素c） 。16、常用防止褐變的試劑有 有機酸 、 硫代硫酸鈉 。17、組培中按照污染的對象分，常見的污染類型有 細菌性污染 、 真菌性污染 。18、在使用超凈工作臺進行無菌操作前，應先將借種器械放進超凈工作臺，并打開 紫外線燈和風機組工作 進行消毒20分鐘左右。

4、19、配制培養(yǎng)基調(diào)節(jié)pH值時常用 氫氧化鈉溶液 和 稀鹽酸溶液 。20、某溶液在使用前已配制成100倍的母液，在使用時，若需要配制1/2 L的培養(yǎng)基，則需要吸取母液的量是 5ml 。21、 原球莖 是蘭科植物特有的一種快繁方式。22、組織培養(yǎng)植株的再生途徑有兩條，分別是： 器官發(fā)生途徑 和 胚胎發(fā)生途徑 。23、一般進行外植體培養(yǎng)時，須誘導形成新的分生組織，即形成 愈傷組織 。24、在使用完移液槍后，應注意 調(diào)回至該移液槍最大量程 。25、植物組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)的基本過程包括 材料的初代培養(yǎng) 、 繼代培養(yǎng) 、 生根培養(yǎng) 、 馴化培養(yǎng) 。26、接種室每隔三個月會定期進行熏蒸消毒，一般使用 甲醛

5、 和 高錳酸鉀。二、選擇題：1、20世紀30年代，植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域有兩大發(fā)現(xiàn)，一是（ B  ）族維生素對植物生長的重要性，二是生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)。    A、 A     B、 B    C、 C   D、 E2、( B ）下列哪種不是原生質(zhì)體分離所用的酶_ _。 A、纖維素酶 B、淀粉酶 C、果膠酶 D、半纖維素酶3、( D )下列哪種在MS培養(yǎng)基中不起促進生長作用_。 A、氨基酸 B、肌醇 C、維生素 D、瓊脂4、下列激素，（ D ）是天然的A、 IB

6、A B、 NAA C、 BA D 、 ZT5、下列不能作為植物組織培養(yǎng)的材料是：（ D ）  A、秋海棠的葉  B、馬鈴薯的塊莖 C、成熟的花粉  D、木質(zhì)部中的導管細胞6、離體培養(yǎng)中，對溫度的調(diào)控比對光照更為重要，培養(yǎng)室一般所用的溫度是（  C ） A、15-35  B、23-32  C、 25±2  D、20-237、外植體表面滅菌可選擇的表面滅菌劑的種類較多，但滅菌效果最好的是（  B  ）A、2次氯酸鈉   

7、 B、 0.1氯化汞    C、70酒精   D、吐溫808、生根培養(yǎng)一般可采用12或者14MS培養(yǎng)基，并加入適量的（  D ）。   A、2.4-D    B、赤霉素  C、細胞分裂素  D、生長素9、影響培養(yǎng)基凝固程度因素有（  D ）  A、瓊脂的質(zhì)量好壞  B、高壓滅菌的時間與溫度  C、培養(yǎng)基的PH  D、以上都是10、下列不屬于大量元素的鹽是（C 

8、0; ）A、 NH4NO3    B、 KNO3  C、 ZnSO4.7H2O   D、 MgSO4.7H2O11、接種操作中一方面要建立（  A ）的概念，對可能有菌的地方進行嚴格消毒處理，另一方面操作時干凈利落，不可拖泥帶水。    A、無菌  B、 污染   C、科學   D、滅菌12、在組織培養(yǎng)中，月季、菊花是通過（  A ）方式快繁；蝴蝶蘭是通過（   ）方式快繁的。A、 無菌

9、短技型，原球莖發(fā)生型    B、原球莖發(fā)生型，無菌短技型    C、 無菌短技型，器官發(fā)生型     D、胚狀體發(fā)生型，原球莖發(fā)生型13、為了誘導芽的形成，培養(yǎng)基中細胞分裂素與生長素的濃度（ A ）A 、比值大     B、 比值小   C、 比值相等   D、 比值的大小沒有關(guān)系14、為了誘導根的形成，培養(yǎng)基中細胞分裂素與生長素濃度（ B  ）A

10、 、比值大     B、 比值小    C、 比值相等   D、 比值的大小沒有關(guān)系15、植物病毒病害防治上，植物病毒脫毒技術(shù)得到了廣泛的應用，下列脫毒技術(shù)效果最好、應用最廣泛的是（C  ）。A、熱處理脫毒法B、莖尖培養(yǎng)脫毒法C、熱處理與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合的脫毒法D、基因工程技術(shù)脫毒法16、熱處理法中，最主要的影響因素是（D  ）。A、溫度     B、時間C、濕度     D、溫度和時間17、根據(jù)特異性的抗原

11、抗體反應可檢測植物病毒的存在，這種檢測方法是（  C）。A、直接鑒定法 B、電子顯微鏡鑒定法C、血清學鑒定法 D、分子生物學鑒定法18、( B )大多數(shù)植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基最適pH為 。 A、5.0-7.0 B、5.0-6.0 C、3.0-4.0 D、7.0-8.019有一種植物經(jīng)初代培養(yǎng)得到株無菌苗，以后按每天繼代增殖一次，每次增殖倍數(shù)為倍，一年后繁殖苗有C A、 3×410株 B 、4 × 312株 C 、× 310株 D、× 412株20、(D )下列哪種在MS培養(yǎng)基中不起促進生長作用_D_。 A、氨基酸 B、肌醇 C、維生素 D、瓊脂21

12、、植物病毒病害防治上，植物病毒脫毒技術(shù)得到了廣泛的應用，下列脫毒技術(shù)效果最好、應用最廣泛的是（ C  ）。A、熱處理脫毒法B、莖尖培養(yǎng)脫毒法C、熱處理與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合的脫毒法D、基因工程技術(shù)脫毒法22、下列物質(zhì)不能用高溫蒸汽滅菌的是（C ）A、鑷子 B、濾紙 C、抗生素類 D、6-BA23、( A )下列那種不是無性繁殖的器官_。A、種子 B、枝條 C、塊莖 D、塊根22、( B ) 植物離體保存的主要步驟是      。離體培養(yǎng)物的保存離體培養(yǎng)與祛除病原物 種質(zhì)離體收集遺傳穩(wěn)定性鑒定A、B、C、D、24、 ( C ) 原生質(zhì)體純化步

13、驟大致有如下幾步 。將收集到的濾液離心，轉(zhuǎn)速以將原生質(zhì)體沉淀而碎片等仍懸浮在上清液中為準，一般以500rmin離心15min。用吸管謹慎地吸去上清液。將離心下來的原生質(zhì)體重新懸浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次離心，去上清液，如此重復三次。將原生質(zhì)體混合液經(jīng)篩孔大小為40100um的濾網(wǎng)過濾，以除去未消化的細胞團塊和篩管、導管等雜質(zhì)，收集濾液。用培養(yǎng)基清洗一次，最后用培養(yǎng)基將原生質(zhì)調(diào)到一定密度進行培養(yǎng)。一般原生質(zhì)體的培養(yǎng)密度為104106ml。A、 B、 C、 D、25、( D )下列有關(guān)細胞全能性的含義，正確的是  。A、每個生物體內(nèi)的所有細胞都具有相同的功能 B、

14、生物體內(nèi)的任何一個細胞可以完成該個體的全部功能 C、生物體的每一個活細胞都具有發(fā)育成完整個體的潛能 D、生物體的每個細胞都經(jīng)過產(chǎn)生、分裂、分化、生長、衰老、死亡的全過程 26、( D )下列不屬于活性炭在組織培養(yǎng)中的作用是_。A、吸附有毒物質(zhì) B、減少褐變，防止玻璃化 C、創(chuàng)造黑暗環(huán)境，增加培養(yǎng)基的通透性，利于根的生長 D、增加培養(yǎng)基中的養(yǎng)分三、名詞解釋1、植物組織培養(yǎng)：又稱植物離體培養(yǎng)，是在無菌和人工控制的條件下，利用合適的培養(yǎng)基，完成對植物的器官，組織，細胞以及原生質(zhì)體的培養(yǎng)，使其按人們的意愿生長，增殖或再生完整植株的一門生物技術(shù)。2、脫分化：是指一個成熟個體恢復分化狀態(tài)，失去已分化組織，

15、形成愈傷組織的過程。3、離體培養(yǎng)：在植物組織培養(yǎng)中，把植物體的組織或細胞離體在一定條件下培養(yǎng)。4、愈傷組織：植物培養(yǎng)中，植物細胞表現(xiàn)其全能性，經(jīng)過脫分化，形成的一團無序生長的薄壁組織。5、細胞懸浮培養(yǎng)：是指植物的細胞和細胞小聚體在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，使之在體外繁殖，生長，發(fā)育，并在培養(yǎng)過程中保持很好的分散性的技術(shù)。6、玻璃化現(xiàn)象：是試管苗的一種生理失調(diào)癥狀，當植物材料進行離體培養(yǎng)時，有些組培苗的嫩莖，葉片往往會出現(xiàn)半透明狀和水漬狀的現(xiàn)象。7、外植體：進行植物組織培養(yǎng)中作為離體培養(yǎng)材料的器官或組織的片段。在繼代培養(yǎng)時，將培養(yǎng)的組織切段移入新的培養(yǎng)基時，這種切段也稱外植體。8、馴化現(xiàn)象：在植物組

16、織培養(yǎng)的早期研究中，發(fā)現(xiàn)一些植物的組織經(jīng)長期的繼代培養(yǎng)發(fā)生了一些變化，在前期的繼代培養(yǎng)中需要生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的植物材料，其后加入少量或不加入生長調(diào)節(jié)物質(zhì)就可以繼續(xù)生長的現(xiàn)象。四、簡答題：1.簡述培養(yǎng)基配制的基本過程答：1）取出母液并按順序排好，并將有機營養(yǎng)物質(zhì)貯液溶化待用。2）再取出潔凈各種的玻璃器皿如：燒杯，玻璃棒，移液管，移液槍，量筒放在指定位置。3）取一個大燒杯，倒入三分之一的純水，并依母液所需量按順序加入，并不斷攪拌。4）再加入蔗糖，瓊脂，并加熱使其完全溶解。5）加入植物生長調(diào)節(jié)劑，用純水定容。6）調(diào)節(jié)pH，用預先配制好的氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液進行調(diào)節(jié)。7）將培養(yǎng)基分裝到各培養(yǎng)器皿，并封

17、好瓶口。2.在植物組織培養(yǎng)實驗中，造成污染的因素有哪些？答：1）培養(yǎng)基和各種使用器具消毒不徹底2）外植體滅菌不徹底，雜菌殘存外植體表面3）超凈工作區(qū)域污染4）操作人為因素帶入5）環(huán)境不潔凈3.簡述外植體的消毒過程。清水清洗清潔精清洗吸干水分70酒精清洗升汞清洗無菌水清洗。4.簡述緩解和減輕褐變的措施。1）外植體和培養(yǎng)材料進行2040d的遮光或暗培養(yǎng)，可以減輕一些種類的褐變現(xiàn)象；2）選擇適宜的培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)激素用量，控制溫度和光照，降低溫度，減少光照；3）選擇年齡適宜的外植體材料進行培養(yǎng)；4）在培養(yǎng)基中，加入抗氧化劑和其他抑制劑如抗壞血素，可以有效地抑制褐變；5）連續(xù)轉(zhuǎn)移，對易褐變的材料可間隔1224h的培養(yǎng)后，再轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上，連續(xù)培養(yǎng)處理710d后，褐變現(xiàn)象便會得到控制或大為減輕；6）添加活性炭等吸附劑，這是生產(chǎn)上常用的降低褐變的有效方法。5.脫毒苗的鑒定方法有哪些？1）指示植物病毒鑒定法；2）抗血清鑒定法；3）電子顯微鏡鑒定法；4）分