葉綠體色素的提取和分離

1、2制作人：呂鳳鳳目 錄實驗拓展實驗拓展 實驗步驟實驗步驟高考解讀高考解讀實驗原理實驗原理 實驗目的實驗目的材料用具材料用具實驗目的1（1）初步掌握提取和分離綠葉中色素的方法。（2）探索綠葉中有幾種色素。實驗原理2（1）提取原理：綠葉中的色素不溶于水，但可溶于無水乙醇等有機溶劑中。（2）分離原理：綠葉中的色素在層析液中的溶解度不同。溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散的快，溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散的慢。過一段時間后，綠葉中的色素就會隨著層析液在濾紙上的擴散而分離開。材料用具實驗材料新鮮的綠色葉片（如菠菜葉）實驗試劑無水乙醇、層析液、二氧化硅、碳酸鈣實驗儀器干燥的定性濾紙、研缽、玻璃漏斗、尼龍布、

2、毛細吸管、剪刀、試管、試管架、棉塞、藥匙、量筒（10ml）、天平3要選用新鮮的顏色較深的葉片，以便使濾液中含較多的色素。烘干后研磨，效果會更好。試劑組成：由20份石油醚（60-90）、2份丙酮、1份苯混合而成；本質(zhì)：一種脂溶性很強的溶劑。選擇層析液的要求：不同色素在這種溶劑中的溶解度要有明顯的差別，差別越大，層析效果越明顯。揮發(fā)性強，應隨用隨配。防止研磨過程中色素被破壞。有助于材料研磨的充分。實驗步驟4提取色素（1）稱取5g綠色葉片，剪碎，放入研缽中。（2）向研缽中放入少許二氧化硅、碳酸鈣和10ml無水乙醇，迅速、充分研磨。（3）將研磨液迅速導入玻璃漏斗過濾。將濾液收集到試管中，并用棉塞封口。

3、溫馨提示：漏斗基部放一塊單層尼龍布。實驗步驟4（1）將干燥處理過的定性濾紙剪成略小于試管長與直徑的濾紙條；在濾紙條的一端剪去兩角。（2）用鉛筆在距濾紙條尖端1cm處畫一條細的橫線。溫馨提示：剪去濾紙條兩角的目的是使色素在濾紙條上擴散均勻，得到的色素帶整齊，便于觀察實驗結果。畫細線的目的是做標記，以便使每次重復畫的濾液細線在同一位置。制備濾紙條提取色素提取色素實驗步驟4用毛細吸管吸少量的濾液，沿鉛筆線均勻地畫一條濾液線；干燥處理，重復畫2-3次。溫馨提示：重復畫線可增加濾液細線上的色素含量，使實驗效果更加明顯。畫濾液細線制備濾紙條提取色素制備濾紙條實驗步驟4（1）將3ml層析液倒入試管中；（2）

4、將濾紙條輕輕插入層析液中，并用棉塞塞緊試管口。溫馨提示：（1）濾紙條放置要求：有濾液細線的一端朝下；濾液細線不能接觸層析液。（2）封閉式管的目的：為了防止層析液中的丙酮、苯等有毒物質(zhì)揮發(fā)出來。使燒杯中的層析液蒸汽處于飽和狀態(tài)，有利于層析液的擴散。分離色素畫濾液細線提取色素畫濾液細線制備濾紙條實驗步驟4觀察結果分離色素提取色素分離色素制備濾紙條 畫濾液細線實驗拓展51、為什么研磨時要迅速、充分？（1）葉綠素極不穩(wěn)定，能被活細胞中的綠葉素酶水解而破壞，故研磨要迅速。（2）為了使葉綠體完全破裂，從而能提取出較多的色素，故研磨要充分。實驗拓展52、試分析濾紙上畫的濾液細線不能觸到層析液的原因。如果濾液

5、細線浸沒在層析液中，會使濾液細線中的色素溶解在層析液中，無法再濾紙上擴散開來。實驗拓展53、畫濾液細線時，為什么一定要細且直？這樣可以防止色素帶重疊，使色素分子均勻分布在一條直線上，做到擴散起點一致。實驗拓展54、分析層析后， 濾紙條上出現(xiàn)4條不清晰色素帶的原因。（1）選擇實驗材料時，沒有選新鮮、濃綠的葉片，這樣導致色素種類不全或含量不夠；（2）在提取時研磨未充分、迅速，導致研磨過程中色素提取到的比較少；（3）在做色素分離時，層析液沒及了濾液細線，使色素含量減少。實驗拓展55、若用圓形濾紙代替濾紙條做層析實驗，分析實驗結果。用圓形濾紙進行實驗時，應在圓心處點樣，濾紙在圓形濾紙上的擴散原理與在濾

6、紙條上一樣，看到的結果是4個同心圓，由外向內(nèi)依次是胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b。實驗拓展56、對濾紙條上色素帶的分析（1）擴散最快的是胡蘿卜素；（2）色素帶最寬的是葉綠素a；（3）兩條色素帶間距最大的是胡蘿卜素和葉黃素。高考解讀典例導悟典例導悟 考情分析考情分析強化訓練強化訓練通過本實驗，應明確綠葉中色素的提取和分離的原理，初步掌握提取和分離葉綠體中色素的題本方法，知道各種試劑的作用，并能分析實驗中出現(xiàn)的各種現(xiàn)象。近幾年高考中，幾乎年年涉及本實驗內(nèi)容。1.綜觀近三年各省市的高考試題，本部分內(nèi)容主要以選擇題形式出現(xiàn)；命題點主要有：（1）考查對實驗原理的理解；（2）考查各種試劑的作用；（3

7、）考查某種實驗現(xiàn)象出現(xiàn)的原因。2.在今后的備考中，本實驗仍是重點內(nèi)容，結合光合作用及其他相關知識，通過創(chuàng)設情境、設置問題的方式命制判斷及探究實驗等方面的非選擇題的可能性較大。（2011廣東高考）中國的飲食講究“色香味”，顏色會影響消費。小李同學擬研發(fā)“綠色”食用色素，他以生長很快的入侵植物水葫蘆為材料進行如下實驗。.提取葉綠素.探究PH對葉綠素穩(wěn)定性的影響取一些葉綠素粗產(chǎn)品，配成一定濃度的溶液，于室溫（約25）下進行實驗，方法和結果如下表。注：葉綠素被破壞后變成黃褐色。根據(jù)所學知識和實驗結果，請回答：（1）提取食用葉綠素的X應該為原因是（2）表中Y應該為 原因是 （3）若用作食品色素，天然葉綠

8、素色素不適用于 食品，否則（4）小李想了解葉綠素粗產(chǎn)品中是否含有其他色素，請你提供檢測方法并寫出主要步驟。1.（2011江蘇高考）某研究組獲得了水稻的葉黃素缺失突變體。將其葉片進行了紅光照射光吸收測定和色素層析條帶分析（從上至下），與正常葉片相比，實驗結果是（ ）A.光吸收差異顯著，色素帶缺第2條B.光吸收差異不顯著，色素帶缺第2條C.光吸收差異顯著，色素帶缺第3條D.光吸收差異不顯著，色素帶缺第3條2.（2010海南高考）某同學從楊樹葉片中提取并分離得到4中色素樣品，經(jīng)測定得到下列吸收光譜圖，其中屬于葉綠素b的是（ ）ABCD3.（2009福建高考）下列對有關實驗的敘述，正確的是（ ）A.在

9、觀察洋蔥細胞有絲分裂的實驗中，將已經(jīng)解離、漂洗、染色的根尖至于載玻片上，輕輕蓋上蓋玻片后即可鏡檢B.對酵母菌計數(shù)時，用吸管吸去培養(yǎng)液滴滿血球計數(shù)板的計數(shù)室及其四周邊緣，輕輕蓋上蓋玻片后即可鏡檢C.在葉綠體色素提取實驗中，研磨綠葉時應加一些有機溶劑，如無水乙醇等D.檢測試管中的梨汁是否有葡糖糖，可加入適量斐林試劑后，搖勻并觀察顏色變化 生物是一門實踐性較強的學科，但是由于受學校實驗條件的限制，不能滿足所有實驗均能動手操作，所以“類虛擬仿真實驗教學”應運而生。 本實驗教學系統(tǒng)由東北師范大學生命科學學院胡建教授工作室制作，該系統(tǒng)基本包括了高中生物實驗教學的基本內(nèi)容。本教學系統(tǒng)主要服務于高中生物實驗教學,可供高中教師、學生使用。 1. 根據(jù)我國法律，在因特網(wǎng)上發(fā)表的作品仍然受到同等的著作權