第三章 紅細(xì)胞檢驗(yàn)

1、 第三章 紅細(xì)胞檢驗(yàn) 第一節(jié) 紅細(xì)胞生理第二節(jié) 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)第三節(jié) 血紅蛋白測(cè)定第四節(jié) 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定的臨床意義第五節(jié) 網(wǎng)織紅細(xì)胞概述第三章 紅細(xì)胞檢驗(yàn) 第六節(jié) 紅細(xì)胞比容測(cè)定第七節(jié) 紅細(xì)胞直徑測(cè)定第八節(jié) 計(jì)算紅細(xì)胞平均數(shù)第九節(jié) 紅細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)第十節(jié) 點(diǎn)彩紅細(xì)胞檢驗(yàn)學(xué)習(xí)目標(biāo) 1.概述紅細(xì)胞的生成、形態(tài)與功能以及血紅蛋白的結(jié)構(gòu)和吸收光譜。 2.敘述紅細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)原理、試劑、操作、計(jì)算、注意事項(xiàng)。 3.比較紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞計(jì)數(shù)的異同。 4.概述紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的計(jì)數(shù)誤差及質(zhì)量控制。第一節(jié) 紅細(xì)胞生理一、紅細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程二、紅細(xì)胞形態(tài)與功能三、血紅蛋白結(jié)構(gòu)與吸收光譜一、紅細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程 造血干

2、細(xì)胞 早幼紅細(xì)胞中幼紅細(xì)胞晚幼紅細(xì)胞網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟紅細(xì)胞一、紅細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程成熟紅細(xì)胞120天二、紅細(xì)胞的形態(tài)與功能形態(tài)：雙凹圓盤狀；直徑：6m，平均7.2；厚度：邊緣部分約2，中央約側(cè)面觀呈啞鈴形。在高滲溶液中：紅細(xì)胞皺縮，邊緣呈鋸齒狀；在低滲溶液中：紅細(xì)胞腫漲甚至破裂，血紅蛋白逸出后形成影細(xì)胞。血涂片經(jīng)瑞特染色后，細(xì)胞呈粉紅色，中央著色較淡，有明顯的中央淡染區(qū)，淡染區(qū)的直徑約占紅細(xì)胞直徑的1/32/5。紅細(xì)胞主要成分血紅蛋白和水（6470），其余成分為蛋白質(zhì)、磷脂、無(wú)機(jī)鹽和酶。 功能：1.運(yùn)輸O2和CO22.調(diào)節(jié)酸堿平衡3.免疫粘附三、血紅蛋白結(jié)構(gòu)與吸收光譜 Hb的結(jié)構(gòu)： Hb的分子量：6

3、4458。1分子Hb：4個(gè)亞鐵血紅素，4個(gè)Fe， 可結(jié)合4個(gè)O2。 1molHb：4mol Fe，可結(jié)合4mol O2。1克Hb：含3.47mg Fe , 結(jié)合1.39ml O2。在正常情況下，外周血中的血紅蛋白主要有：氧合血紅蛋白（HbO2）還原血紅蛋白（Hbred）碳氧血紅蛋白（HbCO）高鐵血紅蛋白（Hi或MHb）。吸收光譜特征：氧合血紅蛋白(HbO2）：呈鮮紅色，在578nm（黃色光）和540nm（綠色光）處有兩條吸收光帶。還原血紅蛋白（Hbred）：呈暗紅色，在556nm（黃、綠色光之間）處有一條吸收光帶。碳氧血紅蛋白（HbCO）：呈櫻紅色，在572nm（黃色光）和535nm（綠色光

4、）處有兩條吸收光帶。高鐵血紅蛋白（Hi）：呈紅褐色，在634nm、578nm、540nm和500nm處有條吸收光帶。第二節(jié) 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)原理第二節(jié) 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)器材稀釋液 甲醛枸櫞酸鹽稀釋液 Hayem稀釋液稀釋液 1.甲醛枸櫞酸鹽稀釋液成分 功能枸櫞酸鈉 抗凝、維持滲透壓36%甲醛液 防腐并固定紅細(xì)胞氯化鈉 維持滲透壓蒸餾水稀釋液2.Hayem稀釋液成分 功能氯化鈉 調(diào)節(jié)滲透壓硫酸鈉 提高相對(duì)密度，防止細(xì)胞粘連氯化高汞 防腐劑蒸餾水操作加稀釋液：2.0ml 采血：10l 混勻 充液 靜置：23min操作 計(jì)數(shù)：高倍鏡下中央大方格 五個(gè)中方格的RBC 計(jì)算： RBC/L =五個(gè)中方格的 RBC &

5、#215;5×10×200×106 報(bào)告：RBC：. ×1012/L請(qǐng)您練習(xí)取稀釋液1.99ml,加血10µl，計(jì)數(shù)中央大格內(nèi)五個(gè)中方格紅細(xì)胞為500個(gè)，請(qǐng)報(bào)告結(jié)果? 答案： RBC=500×5×10×200×106 =5.00×1012/L請(qǐng)您練習(xí) 取稀釋液2.0ml,加血20µl，計(jì)數(shù)中央大格內(nèi)10個(gè)中方格紅細(xì)胞為800個(gè)，請(qǐng)報(bào)告結(jié)果? 答案：RBC=800/10×25×10×(2000+20)/20×106 =2.02×1012/

6、L壓線紅細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法：注意事項(xiàng)1. 血量要準(zhǔn)確。2. 稀釋液要過(guò)濾。3. 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)池內(nèi)要分布均勻。注意事項(xiàng)4. 實(shí)驗(yàn)器材應(yīng)清潔干燥。5. 自身凝集素增高者，宜用不含甲醛的枸櫞酸鹽稀釋 液。6.同時(shí)做白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定，應(yīng)先取紅細(xì)胞計(jì)數(shù)用血。7. 如實(shí)記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，每次簽發(fā)報(bào)告前應(yīng)仔細(xì)核對(duì)。計(jì)數(shù)誤差1.技術(shù)誤差 同白細(xì)胞計(jì)數(shù) 白細(xì)胞數(shù)過(guò)高時(shí)應(yīng)進(jìn)行校正。2.固有誤差 嚴(yán)重貧血的標(biāo)本，應(yīng)縮小稀釋倍數(shù)或擴(kuò)大計(jì)數(shù) 范圍 。質(zhì)量控制1.兩差比值評(píng)價(jià)法 DR= 質(zhì)量控制2.變異系數(shù)評(píng)價(jià)法 |Xm-X | V = × 100 Xm 質(zhì)量得分=100-（2 × V）目標(biāo)

7、形成性檢測(cè)與校正請(qǐng)您思考 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)與白細(xì)胞計(jì)數(shù)方法上有哪些不同？答案（1）紅細(xì)胞稀釋液是等滲溶液而白細(xì)胞稀釋液是低滲溶液。pH也不相同。（2）紅細(xì)胞稀釋液不破壞細(xì)胞。（3）稀釋倍數(shù)不同。（4）選用計(jì)數(shù)池區(qū)域不同。（5）計(jì)數(shù)域誤差大小不同。思考題： 1.試著比較顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的異同。 2.常用紅細(xì)胞稀釋液由哪些成分配成，各有何作用？為什么有的患者可致渾濁？該怎樣處理？作業(yè) 1.測(cè)知一Hb含鐵量是416mg/L，氧結(jié)合量是16.68%，問(wèn)含血紅蛋白多少？ 2.取紅細(xì)胞稀釋液1.98ml，加外周血20l，混勻后充入計(jì)數(shù)池，計(jì)數(shù)中央大方格中5個(gè)中方格，平均每個(gè)中方格的

8、紅細(xì)胞為80個(gè)，試報(bào)告該標(biāo)本的RBC計(jì)數(shù)結(jié)果。 第三節(jié) 血紅蛋白測(cè)定一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定二、其他測(cè)定方法學(xué)習(xí)目標(biāo)敘述血紅蛋白HiCN法的原理、操作、注意事項(xiàng)。說(shuō)出HiCN轉(zhuǎn)化液的成分及作用。概述十二烷基硫酸鈉.堿羥高鐵血紅素血紅蛋白測(cè)定方法。復(fù)習(xí)舊課 HiCN的吸收光譜與Hi、HbO2、HbCO、Hbred等的吸收光譜有何不同？第三節(jié) 血紅蛋白測(cè)定【定義】 Hb測(cè)定包括濃度測(cè)定和質(zhì)量測(cè)定。本單元是指測(cè)定血液中各種血紅蛋白的總濃度，用表示。 第三節(jié) 血紅蛋白測(cè)定【方法】比密法 氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法比色法 十二烷基硫酸鈉法 堿羥高鐵血紅素法 血氧結(jié)合力法 全血鐵法 一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

9、 HiCN法：ICSH推薦 WHO確認(rèn)的參考方法 我國(guó)推薦為首選方法一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法原 理表面活性劑溶解紅細(xì)胞膜，釋放血紅蛋白。血紅蛋白被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白（），在一定的值下，與氰離子（）結(jié)合生成穩(wěn)定棕紅色氰化高鐵血紅蛋白（iC）。 i在540處有一吸收峰，測(cè)定其吸光度，可求得血紅蛋白濃度（ ）。 一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法試劑文齊血紅蛋白轉(zhuǎn)化液 氰化鉀 提供CN離子高鐵氰化鉀 氧化劑無(wú)水磷酸二氫鉀 調(diào)節(jié)pHTriton X-100（非離子表面活性劑）加速溶血、防止渾濁蒸餾水一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法 配成后用濾紙過(guò)濾，置棕色玻瓶中（不能用塑料瓶！

10、），塞緊后保存于冷暗處，勿使結(jié)冰，可保存數(shù)月。 此液應(yīng)呈透明、淡黃色，在.0.4之間，以蒸餾水作空白，用540nm比色，吸光度應(yīng)0.001。若變渾、變綠或發(fā)生混濁則應(yīng)廢棄。一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法操作 取指血20l，加入5ml轉(zhuǎn)化液中，充分混勻，靜置5min。 用分光光度計(jì)（帶寬應(yīng)小于8 m）比色。波長(zhǎng)540nm，光徑（比色杯內(nèi)徑）1.000cm，以轉(zhuǎn)化液或蒸餾水為空白，測(cè)定其吸光度“”。 一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法 操 作加轉(zhuǎn)化液: 5ml 采血: 20l 靜置：混勻后放置5min 比色： =540 nm，比色杯1.000cm,轉(zhuǎn)化液 （蒸餾水）為空白，測(cè)A值 一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法【

11、操 作】計(jì)算：分光光度計(jì)符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法 【操 作】 分光光度計(jì)不符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，結(jié)果不能直接計(jì)算得出，可采用的方法為： 一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法【操 作】 i標(biāo)準(zhǔn)曲線制備用HICN標(biāo)準(zhǔn)液在所用的分光光度計(jì)或光電比色計(jì)上，分別測(cè)定其吸光度（A），以為縱坐標(biāo)，血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液的參考值為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，或求出K值，以后根據(jù)測(cè)定管吸光度即可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出Hb濃度值。 一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法【操 作】 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法【操 作】 K值法一、氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法專用血紅蛋白儀測(cè)定法 依據(jù)氰化高鐵血紅蛋白比色法的專用血紅蛋白儀，采用交流蠕動(dòng)泵自動(dòng)

12、進(jìn)液排液，流動(dòng)比色池微量比色，半導(dǎo)體冷光源及光電轉(zhuǎn)換器件，電子線路采用模擬橋式光電轉(zhuǎn)換。信號(hào)經(jīng)處理放大，送至模/數(shù)轉(zhuǎn)換液晶顯示器，直接顯示出所測(cè)血紅蛋白濃度值（/）。測(cè)試速度快，操作簡(jiǎn)便，更適合于臨床。專用血紅蛋白儀測(cè)定法操作按說(shuō)明調(diào)試好儀器。取全血20u，加入5ml HICN轉(zhuǎn)換液中，混勻，靜置5min，吸入儀器測(cè)定，待顯示屏上的數(shù)字穩(wěn)定不跳動(dòng)時(shí)，此讀數(shù)即為該血樣的值。方法學(xué)評(píng)價(jià)主要優(yōu)點(diǎn)：1操作簡(jiǎn)便。2試劑較穩(wěn)定，易保存，測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定。3血標(biāo)本中的血紅蛋白（除SHb外）在轉(zhuǎn)化液的作用下能迅速被轉(zhuǎn)化為HiCN，且HiCN穩(wěn)定便于測(cè)定。4HiCN參考品可長(zhǎng)期保存，便于質(zhì)控。方法學(xué)評(píng)價(jià)缺點(diǎn)與不足：

13、1試劑含劇毒品氰化鉀，使用、處理不當(dāng)可能污染環(huán)境，引起公害。2對(duì)碳氧血紅蛋白（HbCO）轉(zhuǎn)化太慢。3不能轉(zhuǎn)化硫化血紅蛋白（SHb）。4遇高白細(xì)胞和高球蛋白血癥的血標(biāo)本會(huì)出現(xiàn)渾濁，標(biāo)本或試劑應(yīng)經(jīng)處理后才能比色。注意事項(xiàng) 1可由指血直接測(cè)定，耳血結(jié)果偏高。靜脈血可按每毫升血 1.5mgEDTA二鈉的比例抗凝，不可用肝素抗凝（可致混濁）。注意事項(xiàng) 有條件的單位應(yīng)校正分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確性、波長(zhǎng)重復(fù)性、譜帶半寬度（狹縫）。雜散光、光度線性和比色杯光徑。注意事項(xiàng) 專用血紅蛋白儀、標(biāo)準(zhǔn)曲線或值應(yīng)定期檢查、校正。專用血紅蛋白儀零點(diǎn)漂移絕對(duì)值超過(guò) 2/，需重新調(diào)零。分光光度計(jì)必須有良好的線性才可用 值法。注意

14、事項(xiàng) 轉(zhuǎn)化液（文齊氏液）p應(yīng)穩(wěn)定7.2±0.2，放置在棕色硼硅有塞玻璃瓶中，20室溫保存，冰箱保存穩(wěn)定時(shí)間更長(zhǎng)，但勿使結(jié)冰，不然會(huì)使Fe（CN）6失效。放白色瓶、塑料瓶和強(qiáng)光照射會(huì)使CN-下降，結(jié)果偏低。注意事項(xiàng) 轉(zhuǎn)化液中KCN是劇毒藥品，極不安全，也污染環(huán)境。這是iC法的缺點(diǎn)。KCN必須按劇毒藥品管理規(guī)定保存，在配制和保存過(guò)程中應(yīng)提高警惕，防止污染。用后廢液應(yīng)分散稀釋處理，或按每升加次氯酸鈉液35混勻后敞開過(guò)夜，使CN一氧化成CO2和2。揮發(fā)后，再排入下水道。 注意事項(xiàng) 高丙種球蛋白血癥、變性血紅蛋白血癥和白細(xì)胞特高的病例都可出現(xiàn)混濁，可于每升試劑中加氯化鈉15g甚至50g防止混濁

15、。 但高濃度有核紅細(xì)胞所致混濁尚不能防止。 質(zhì)量控制1.氰化高鐵血紅蛋白參考液的純度檢查： 1）波峰540 nm, 波谷504nm； 2) A540/A504：1.591.63； 3）A710800 <0.002； 質(zhì)量控制2、室內(nèi)質(zhì)量控制將三種已知不同濃度的血紅蛋白參考液每日用HiCN法測(cè)定一次，連續(xù)20天；將結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后，作質(zhì)控圖。質(zhì)量控制3.室間質(zhì)量控制由臨檢中心發(fā)放質(zhì)控血紅蛋白液，各實(shí)驗(yàn)室分別測(cè)定其結(jié)果，經(jīng)統(tǒng)計(jì)計(jì)算偏離指數(shù)、變異值后進(jìn)行評(píng)價(jià)。 二、其他測(cè)定方法（一）十二烷基硫酸鈉血紅蛋白（SLS-Hb）測(cè)定法 原理 除SHb外，血液中各種血紅蛋白均可與十二烷基硫酸鈉作用，生

16、成SLS-Hb棕紅色化合物，SLS-Hb最大吸收峰538nm，波谷在500nm。由于其摩爾吸光系數(shù)尚未確定，不能直接用吸光度換算Hb濃度。一般先用HiCN法標(biāo)定新鮮血標(biāo)本，再用來(lái)制備本法的標(biāo)準(zhǔn)曲線。二、其他測(cè)定方法（二）堿羥高鐵血紅素（AHD-575）法 原理 AHD試劑為非離子化去垢劑堿性溶液，能使血紅素、血紅蛋白及其衍生物全部轉(zhuǎn)化為一種穩(wěn)定的堿性高鐵血紅素，在575nm處有一特征性的吸收峰。（三）方法學(xué)評(píng)價(jià) SLS-Hb法操作簡(jiǎn)便，呈色穩(wěn)定，試劑中不含KCN，無(wú)公害，準(zhǔn)確性和精確性好，但SLS質(zhì)量差異較大，且試劑成分破壞白細(xì)胞，不能同時(shí)測(cè)定白細(xì)胞數(shù)。AHD試劑簡(jiǎn)單，不含有毒劑，呈色穩(wěn)定，對(duì)

17、光不敏感，室溫中能長(zhǎng)期保存?？捎寐然t素作標(biāo)準(zhǔn)品，準(zhǔn)確度、精密度較高。但該法的反應(yīng)產(chǎn)物的吸收峰位于575nm波長(zhǎng)，自動(dòng)分析儀的選定波長(zhǎng)多為540nm，限制了此法在自動(dòng)分析儀上的應(yīng)用?？偨Y(jié)比色分析的依據(jù)是郎伯比爾定律 A1A2C1C2NiCN法具有主要優(yōu)點(diǎn)是：操作簡(jiǎn)便、結(jié)果穩(wěn)定、試劑易保存、能測(cè)定除硫化血紅蛋白（）以外的所有血紅蛋白。因而是Hb測(cè)定的參考方法?？偨Y(jié)AHD-575法優(yōu)點(diǎn)是試劑對(duì)光不敏感，放室溫中能長(zhǎng)期保存，基本無(wú)毒性。血液與試劑混合后立即發(fā)生溶血，生成橄欖綠溶液色澤穩(wěn)定。作業(yè)1.概括HiCN測(cè)定的注意事項(xiàng)2.為何HiCN與AHD-575測(cè)定計(jì)算公式不同？第四節(jié) 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋

18、白測(cè)定的臨床意義一、參考區(qū)間二、生理性變化三、病理性變化學(xué)習(xí)目標(biāo)1.說(shuō)出紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定的參考值2.簡(jiǎn)述紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定的生理變化3.簡(jiǎn)述紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定的病理變化復(fù)習(xí)舊課紅細(xì)胞的主要功能有哪些？答案：1.運(yùn)輸氣體（O2、CO2）；2.維持酸堿平衡；3.運(yùn)輸類脂、蛋白、激素、維生素、碳水化合物；4.免疫粘附。新課學(xué)習(xí)紅細(xì)胞的主要成分是血紅蛋白，在正常增況下，每個(gè)紅細(xì)胞含有一定量的血紅蛋白。隨著紅細(xì)胞的增多或減少，血紅蛋白含量也發(fā)生相應(yīng)的變化，它們的臨床意義基本相同。 在貧血時(shí)，由于病因不同，紅細(xì)胞和血紅蛋白降低的程度并非完全平行。一、參考區(qū)間 血紅蛋白（g/L）紅細(xì)胞數(shù)

19、（×1012/L）成年男性 1311724.095.74成年女性 1131513.685.13 新生兒 1801905.26.4 嬰兒 1101204.04.3 兒童 1201404.04.5二、生理變化1.年齡與性別的變化 二、生理變化2.精神因素：紅細(xì)胞及血紅蛋白3.劇烈的體育運(yùn)動(dòng)和勞動(dòng)：紅細(xì)胞及血紅蛋白4.氣壓因素：氣壓低則紅細(xì)胞及血紅蛋白5.妊娠因素：紅細(xì)胞及血紅蛋白三、病理變化（一）紅細(xì)胞和血紅蛋白病理性減少1.造血原料不足或利用障礙 ：見(jiàn)于缺鐵性貧血；鐵粒幼細(xì)胞性貧血；巨幼細(xì)胞性貧血等。2.紅細(xì)胞丟失過(guò)多：各種原因?qū)е碌募?、慢性失血。三、病理變?.紅細(xì)胞壽命縮短 ：見(jiàn)于

20、溶血性貧血。4.促紅細(xì)胞生成素（EPO）分泌減少 ：慢性腎疾病所致的貧血。5. 造血功能障礙：見(jiàn)于再生障礙性貧血、白血病三、病理變化（二）紅細(xì)胞和血紅蛋白病理性增多1相對(duì)性增多血液濃縮，造成紅細(xì)胞和血紅蛋白濃度相對(duì)增高。三、病理變化2絕對(duì)性增多指血漿容量不變，紅細(xì)胞和血紅蛋白的絕對(duì)值增加。三、病理變化（1）繼發(fā)性紅細(xì)胞生成增多：機(jī)體因長(zhǎng)期缺氧，刺激促紅細(xì)胞生成素分泌增多，使紅細(xì)胞、血紅蛋白代償性增加，（2）原發(fā)性紅細(xì)胞生成增多：機(jī)體并不缺氧，無(wú)促紅細(xì)胞生成素分泌增加而紅細(xì)胞數(shù)量持續(xù)增多，見(jiàn)于真性紅細(xì)胞增多癥。目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正1.細(xì)胞計(jì)數(shù)池結(jié)構(gòu)下列哪項(xiàng)不對(duì): A.池內(nèi)分九大格加蓋片后深度為0

21、.1毫米 B.每個(gè)大方格長(zhǎng)寬為1毫米 C.每個(gè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)大格分為16個(gè)中方格 D.中央大格分25個(gè)中方格蓋片后每格體積0.04 E. 中央大格分為400個(gè)小格目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正2.縮小血細(xì)胞計(jì)數(shù)固有誤差唯一的方法是: A.充液前充分混勻B.提高操作熟練程度C.提高鏡下識(shí)別能力D.多進(jìn)行此項(xiàng)練習(xí)E.擴(kuò)大計(jì)數(shù)范圍目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正3.HiCN轉(zhuǎn)化液中KCN的作用: A.溶血B.氧化Hb為Hi C.防腐 D.與Hi結(jié)合成HiCNE.以上都不對(duì)目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正4.指出與紅細(xì)胞不符合的: A.平均直徑7.2 umB.主要成分磷脂,水C.成熟后無(wú)細(xì)胞核D.壽命3-4月E.具有免疫粘附性目標(biāo)形成性檢

22、測(cè)與校正5.除哪項(xiàng)外,均可引起RBC,Hb相對(duì)增高: A.反復(fù)腹瀉B.排汗過(guò)多C.連續(xù)嘔吐D.骨髓功能亢進(jìn)E.大面積燒傷目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正6.一種Hb衍生物是棕紅色,在540nm波長(zhǎng)處有較寬的吸光帶,它是:A.HiB.HbredC.HbCOD.HbO2E.HiCN目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正7.引起RBC和Hb代償性增高的疾病: A.肺氣腫 B.反復(fù)腹瀉 C.大面積燒傷 D.真紅 E.妊娠期目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正8.某人細(xì)胞內(nèi)鐵含量為48.58 mg/dL,其Hb含量應(yīng)為: A.140 g/L B.130 g/L C.120 g/L D.110 g/L E.100 g/L目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正9.Hb屬

23、于: A.白蛋白B.球蛋白 C.結(jié)合蛋白D.纖維蛋白E.酸性蛋白目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正 10.不符合正常成熟紅細(xì)胞形態(tài)特征是:A.瑞特染色后呈粉紅色B.兩面微凹的圓盤形C.平均直徑7.2µD.平均厚度2µE.以上都不是目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正 11.不能轉(zhuǎn)化為HiCN的Hb的衍生物是:A.HbO2B.硫化血紅蛋白C.Hbred D.Hi E.HbCO目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正12.HICN測(cè)定,下述哪項(xiàng)有錯(cuò):A.波長(zhǎng)為540±1nmB.轉(zhuǎn)化液透明淡黃色C.將外血稀釋251倍D.氰化鉀將Fe+->Fe+E.HbO2 可轉(zhuǎn)化為HiCN目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正 13.對(duì)于HiCN

24、的描述,有錯(cuò)的是: A.為Hb衍生物 B.呈棕紅色 C.吸收峰在540nm D.穩(wěn)定性較差 E.只有一較寬的吸收光帶目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正14.下列哪種試劑可用于紅細(xì)胞稀釋液: A.碳酸銨B.碳酸氫鈉 C.氯化汞 D.鐵氰化鉀E.以上都不行目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正15.采用HiCN參考標(biāo)準(zhǔn)液是因?yàn)?A.儀器的差異 B.技術(shù)誤差 C.操作方便 D.快速 E.以上均不對(duì)目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正16.對(duì)Hb的描述,除哪一條件,均正確:A.由4條多肽鏈組成B.為結(jié)合蛋白質(zhì)C.含有4個(gè)Fe+原子D.每克含鐵3.47mg E.每克結(jié)合氧1.39ml目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正 17.對(duì)于轉(zhuǎn)化液的要求,有錯(cuò)的是:A.淡黃透明

25、B.貯存于棕色瓶C.不能偏堿 D.不宜用塑料瓶裝 E.變深后不宜再用目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正18.下述哪種試劑不能用于HiCN轉(zhuǎn)化液:A.亞鐵氰化鉀B.氰化鉀C.磷酸二氫鉀D.Triton X-100 E.O-P乳化劑目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正 19.關(guān)于RBC正確的是: A.只需將血液稀釋B.通常稀釋20倍C.在鏡下計(jì)數(shù)四角大格D.報(bào)告: .×1012/L E.計(jì)數(shù)域誤差較WBC大目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正20.血細(xì)胞計(jì)數(shù)池充液后,數(shù)RBC用的中方格體積是: A. 0.4l B. 0.1lC. 0.04l D. 0.01lE. 0.004l目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正21.RBC液(顯微鏡計(jì)數(shù)法)中最主要

26、成分: A.氯化鈉 B.硫酸鈉 C.氯化汞 D.氯化低汞E.碳酸鈉目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正22.除哪一條件,均可使RBC的結(jié)果偏高:A.混入酵母菌B.白細(xì)胞過(guò)高C.管尖外血液未擦凈D.稀釋液蒸發(fā)E.血液凝固目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正23.HiCN正確的是:A. 高濃度有核紅細(xì)胞混濁可加NaCl防止B. OP乳化劑可代替TritonX-100 C. 轉(zhuǎn)化液不能偏鹼D. 轉(zhuǎn)化液用棕色瓶保存再見(jiàn)！第五節(jié) 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)一、網(wǎng)織紅細(xì)胞概述二、網(wǎng)織紅細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)1.描述網(wǎng)織紅細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)2.敘述網(wǎng)織紅細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法和注意事項(xiàng)3.闡述網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的臨床意義 一、網(wǎng)織紅細(xì)胞概述 （一）概念 網(wǎng)織紅細(xì)胞：

27、是介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間尚未完全成熟的紅細(xì)胞，因其胞質(zhì)中殘存的核糖核酸經(jīng)堿性染料活體染色后呈現(xiàn)藍(lán)色點(diǎn)狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 活體染色：是指細(xì)胞未經(jīng)固定，在保持細(xì)胞生物活性的情況下加染料進(jìn)行染色的方法。（二）分型及形態(tài)特征 型：絲球型，無(wú)核紅細(xì)胞中央的嗜堿性物質(zhì)交織成密集的絲團(tuán)狀。（二）分型及形態(tài)特征 型：網(wǎng)型，無(wú)核紅細(xì)胞中央的絲團(tuán)狀結(jié)構(gòu)開始松散，呈疏松網(wǎng)眼狀結(jié)構(gòu)排列。（二）分型及形態(tài)特征 型：破網(wǎng)型，網(wǎng)織狀結(jié)構(gòu)開始減少，形成殘破不全的網(wǎng)狀。（二）分型及形態(tài)特征 型：點(diǎn)粒型，只有少數(shù)藍(lán)色點(diǎn)狀顆粒（兩個(gè)以上），或極小的網(wǎng)狀殘余，散布于胞質(zhì)一側(cè)。網(wǎng)織紅細(xì)胞 I型 絲球型 型 網(wǎng)型 型 破網(wǎng)型 IV型

28、 顆粒型經(jīng)瑞特染色復(fù)染的網(wǎng)織紅細(xì)胞形態(tài)二、網(wǎng)織紅細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)原理煌焦油藍(lán)、新亞甲藍(lán)和天青等染料都是雜蒽的衍生物，雖然取代基不同，但都含有氨基，在水溶液中呈弱堿性，帶陽(yáng)電荷，可與酸性基團(tuán)發(fā)生電偶合，特別是與核酸分子中的磷酸基結(jié)合，使膠體的電位發(fā)生變化，分子間排斥力下降，膠體分散力降 低而凝集成藍(lán)色顆粒。二、網(wǎng)織紅細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)試劑1.10g/L新亞甲藍(lán)（或煌焦油藍(lán)）生理鹽水溶液2.10g/L新亞甲藍(lán)ACD溶液3.新亞甲藍(lán)染液試劑 煌焦油藍(lán)溶液 煌焦油藍(lán) 1.0g 枸椽酸鈉 0.4g 氯化鈉 0.85g 雙蒸水加至 100 充分振蕩溶解，過(guò)濾后備用。試劑 新亞甲藍(lán)溶液 新亞甲藍(lán) 1 枸椽酸鹽生理

29、鹽水（30g/枸椽酸鈉溶液份，9/ 氯化鈉溶液份，混合而成） 100 待染料溶解后過(guò)濾備用。試劑 .天青溶液 將新亞甲藍(lán)1改為天青 1， 其余與新亞甲藍(lán)溶液配制相同。二、網(wǎng)織紅細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)操作加試劑：2滴 外周血：2滴 染色：混勻，371520min 制薄血片：取1滴制片，干燥后鏡檢操作 .試管法 （）于小試管中加煌焦油藍(lán)溶液2滴3滴，加外周血2滴3滴，混勻，塞緊管口，室溫置15min。 （）取上述混勻的細(xì)胞懸液1滴，推制薄血片。操作 （）低倍鏡選擇細(xì)胞分布均勻、著色清晰的部位，于目鏡內(nèi)加一圓形硬紙，中央開一約×方孔，油鏡計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞（包括網(wǎng)織紅細(xì)胞）中網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，除以1

30、000，即得網(wǎng)織紅細(xì)胞分?jǐn)?shù)數(shù)（×103）。二、網(wǎng)織紅細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)1.直接計(jì)數(shù)法油鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中的網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)算:2.米勒窺盤法窺盤為一直徑19mm，厚1mm的圓形玻片，玻片上用微細(xì)刻線劃出大小兩個(gè)正方形格子，圖中大方格B的面積是小方格A的9倍。 將iller窺盤置于目鏡內(nèi)，油鏡計(jì)數(shù)大方格內(nèi)的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，同時(shí)計(jì)數(shù)小方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。然后移動(dòng)視野進(jìn)行同樣的觀察計(jì)數(shù)。 對(duì)壓線的紅細(xì)胞采取統(tǒng)一的計(jì)數(shù)原則：凡壓小方格下線、右線及右下角的一律不計(jì)數(shù)；凡壓上線、左線及左上角的一律計(jì)數(shù)。凡壓大方格下線、右線及右下角的網(wǎng)織紅細(xì)胞一律不計(jì)數(shù)；凡壓上線、左線及左上角的一律計(jì)數(shù)。注意 由于本

31、法是用1/9面積推斷整個(gè)大方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，所以細(xì)胞分布必須很均勻，否則會(huì)得出錯(cuò)誤的結(jié)果。判斷方法及標(biāo)準(zhǔn)如下：2.米勒窺盤法當(dāng)小方格內(nèi)計(jì)數(shù)的紅細(xì)胞達(dá)到111時(shí)，即相當(dāng)于至少觀察了1000個(gè)紅細(xì)胞，計(jì)錄在此過(guò)程中計(jì)數(shù)到的所有網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)。請(qǐng)您練習(xí)計(jì)數(shù)10個(gè)視野小方格中紅細(xì)胞數(shù)是120個(gè)，同時(shí)計(jì)數(shù)大方格中網(wǎng)織紅細(xì)胞總數(shù)為16個(gè)，如何報(bào)告結(jié)果？解： 網(wǎng)織紅細(xì)胞%16/（120×9）×100 1.5%請(qǐng)您練習(xí)計(jì)數(shù)10個(gè)視野小方格中紅細(xì)胞數(shù)是102個(gè)，同時(shí)計(jì)數(shù)大方格中網(wǎng)織紅細(xì)胞總數(shù)為15個(gè)，請(qǐng)報(bào)告網(wǎng)紅結(jié)果？答案： 網(wǎng)織紅細(xì)胞%15/（102×9）×100 1.63

32、%1.網(wǎng)織紅細(xì)胞相對(duì)值：百分率或分?jǐn)?shù)數(shù)。2.網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值: 紅細(xì)胞濃度數(shù)(1012/L)×網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)3.網(wǎng)織紅細(xì)胞生成指數(shù)（RPI）: 網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟時(shí)間與紅細(xì)胞比積的關(guān)系_紅細(xì)胞比容（L/L） 網(wǎng)紅成熟時(shí)間（天）- 0.45 1 0.35 1.5 0.25 2 0.15 2.5-請(qǐng)您練習(xí) 己知一患者網(wǎng)紅分?jǐn)?shù)數(shù)為0.045，紅細(xì)胞比積為0.35，求網(wǎng)紅生成指數(shù)是多少？ 解：查表得紅細(xì)胞比積為0.35時(shí)，網(wǎng)紅成熟時(shí)間為1.5天，代入公式 答案： RPI=0.045/1.5×0.35/0.45 =0.023注意事項(xiàng) 1.靜脈血標(biāo)本在4小時(shí)內(nèi)完成計(jì)數(shù)。 2.需活體染色。

33、 3.血液與染液的比1：1。注意事項(xiàng) 4.染色時(shí)間要充足，溫度應(yīng)控制在37。 5.涂片應(yīng)薄而均勻。 6.網(wǎng)織紅細(xì)胞偏低時(shí)可增加計(jì)數(shù)至20003000個(gè)。 7.瑞特染液復(fù)染或二甲苯擦血膜可使結(jié)果偏低。臨床意義.正常參考值 網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)： 成 人：0.0050.015 新生兒：0.030.06 兒 童：0.0050.015 網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值： 成人：（2484）×109/L臨床意義 2. 臨床應(yīng)用 （1）判斷骨髓紅細(xì)胞系增生情況 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)增加：增生性貧血。 網(wǎng)織紅細(xì)胞減少： 再障、白血病等。 （2）觀察貧血療效的指標(biāo) （3）監(jiān)測(cè)骨髓移植術(shù)后造血功能 （4）監(jiān)測(cè)腫瘤放、化療后骨髓

34、抑制及其恢復(fù)情況 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)增加 表示骨髓紅細(xì)胞系統(tǒng)增生旺盛，多見(jiàn)于各種增生性貧血。急性溶血性貧血時(shí)，網(wǎng)織紅細(xì)胞顯著升高，其數(shù)值可達(dá)20或更高。急性失血性貧血也較明顯增高，缺鐵性貧血和巨幼細(xì)胞性貧血常僅輕度增高。骨髓受白血病、癌腫等浸潤(rùn)時(shí)也呈不規(guī)則輕度增加，此系病理刺激所致，并不反映骨髓造血機(jī)能。網(wǎng)織紅細(xì)胞減少表示骨髓造血機(jī)能減退，常見(jiàn)于再生障礙性貧血，某些溶血性貧血發(fā)生再生障礙危象時(shí)可一過(guò)性明顯減少。觀察貧血療效缺鐵性貧血和巨幼細(xì)胞性貧血用鐵劑及維生素12、葉酸治療后，網(wǎng)紅迅速增加，周左右達(dá)到高峰。由于網(wǎng)紅增加先于紅細(xì)胞和血紅蛋白增加，可用于療效評(píng)價(jià)。作為骨髓造血功能恢復(fù)的敏感指標(biāo) 骨髓

35、移植和造血系統(tǒng)惡性腫瘤化療后，血小板、中性粒細(xì)胞、白細(xì)胞和網(wǎng)紅計(jì)數(shù)項(xiàng)指標(biāo)在移植后恢復(fù)的天數(shù)以網(wǎng)紅計(jì)數(shù)出現(xiàn)的最早（13.7天），可作為造血功能恢復(fù)的早期指標(biāo)。嗜多色性紅細(xì)胞 紅細(xì)胞中殘存的嗜堿性物質(zhì)，在瑞特染色血片中，呈均勻分布，染灰藍(lán)、紅藍(lán)等，稱為嗜多色性紅細(xì)胞。 二、儀器計(jì)數(shù)法 .流式細(xì)胞儀（FCM）進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)FCM是高檔次的血細(xì)胞分析儀，是一種快速的單細(xì)胞定量分析儀器，F(xiàn)CM同CT一樣，被認(rèn)為是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中重要的診斷和科研工具。它可以測(cè)量細(xì)胞的生化成分，如DNA、RNA、蛋白質(zhì)、各種股成分及各種酶活性等。FCM測(cè)定網(wǎng)織紅細(xì)胞基本原理 某些染料（如Y啶橙）與網(wǎng)織紅細(xì)胞中的RNA結(jié)合，在

36、FCM測(cè)定時(shí)發(fā)出特定顏色的熒光，進(jìn)行單參數(shù)定量。 不同階段的網(wǎng)織紅細(xì)胞RNA的含量不同，通過(guò)FCM可以精確的測(cè)定網(wǎng)織紅細(xì)胞的百分率。自動(dòng)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 測(cè)定原理 血液標(biāo)本計(jì)數(shù)前不經(jīng)固定和染色，標(biāo)本直接吸入儀器內(nèi)計(jì)數(shù)，以氫激光束為光源，堿性槐黃為染料與網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)的RNA結(jié)合，應(yīng)用鞘流原理使網(wǎng)織紅細(xì)胞呈單行排列通過(guò)波長(zhǎng)488nm的激光束，測(cè)量散射光強(qiáng)度判斷細(xì)胞體積的大小，測(cè)量熒光強(qiáng)度顯示細(xì)胞內(nèi)RNA多少。.血細(xì)胞分析儀檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞 將儀器轉(zhuǎn)換到網(wǎng)紅計(jì)數(shù)的操作程序，即可得到網(wǎng)紅絕對(duì)值、百分比、平均體積、體積分布寬度、血紅蛋白濃度、平均血紅蛋白濃度、血紅蛋白分布寬度及網(wǎng)紅分類等多項(xiàng)參數(shù)。總結(jié) 網(wǎng)

37、織紅細(xì)胞是尚未完全成熟的紅細(xì)胞，分為四型。正常人外周血中大多是型（點(diǎn)粒型）。 傳統(tǒng)的網(wǎng)紅檢查方法是根據(jù)其胞質(zhì)內(nèi)殘存核糖體、核糖核酸等嗜堿性物質(zhì)，經(jīng)新亞甲藍(lán)、煌焦油藍(lán)活體染色后而顯示出來(lái)?？偨Y(jié) 檢查網(wǎng)紅的目的是了解骨髓紅細(xì)胞系統(tǒng)的增生情況。以判斷貪血類型，觀察貧血療效。因其數(shù)量變化十分敏感，可作為骨髓造血功能恢復(fù)的敏感指標(biāo)。 正常成人參考值為0.0050.015想一想說(shuō)出HiCN法測(cè)定Hb的優(yōu)點(diǎn)和不足。說(shuō)出紅細(xì)胞及血紅蛋白病理性減少的原因。什么是網(wǎng)織紅細(xì)胞？可分為幾型？有何臨床應(yīng)用？第六節(jié) 血細(xì)胞比容測(cè)定一、溫氏管法二、毛細(xì)管法三、臨床意義學(xué)習(xí)目標(biāo)說(shuō)出紅細(xì)胞比容的測(cè)定原理、方法和臨床意義。概括紅

38、細(xì)胞直徑測(cè)定方法和直徑曲線變化的臨床意義。能夠計(jì)算紅細(xì)胞平均值并分析臨床意義。定義與方法一、溫氏管法 原理 定量抗凝血溫氏管離心觀察壓實(shí)紅細(xì)胞高度求得紅細(xì)胞的容積/血液容積：即為Hct。器材和試劑操 作采血：靜脈血2ml，EDTA-K2或肝素鈉抗凝 加樣：用細(xì)長(zhǎng)毛細(xì)滴管將抗凝血加至比容管刻度“10”處 操 作 離心：RCF為2264g，時(shí)間為30 min。 讀數(shù)：紅細(xì)胞層高度 操 作再離心：同樣RCF，10min 讀數(shù)：紅細(xì)胞層柱高度 計(jì)算：Hct值離心后的血液分五層 血漿層 血小板層 有核細(xì)胞層 還原紅細(xì)胞層 帶氧紅細(xì)胞層注意事項(xiàng)1.器材清潔干燥。2.抗凝劑應(yīng)對(duì)紅細(xì)胞體積無(wú)影響且溶解迅速。

39、3.血漿若有黃疸、溶血現(xiàn)象應(yīng)注明。4.離心條件必須恒定。本試驗(yàn)要求的相對(duì)離心力是2264g，離心時(shí)間為30分鐘。注意事項(xiàng)相對(duì)離心力（RCF）g 1.11810-5×有效離心半徑（cm） ×每分鐘轉(zhuǎn)速的平方（n2）有效離心半徑是指由離心機(jī)軸心至水平位置時(shí)管底的距離（）。例：有效離心半徑為22.5cm，要求RCF為2264g時(shí)，每分鐘離心速度是：練習(xí)某離心機(jī)有效半徑是·9，用作比積測(cè)定時(shí)其離心速度每秒應(yīng)為多少轉(zhuǎn)？ 解： 亦可由相對(duì)離心力計(jì)算圖查出所需離心速度。 在左側(cè)找出離心半徑，右側(cè)找出每分鐘轉(zhuǎn)速，將兩點(diǎn)連成一條直線，與中間相交的一點(diǎn)為相對(duì)離心力。 二、毛細(xì)管法 原

40、理 定量的抗凝血特制的毛細(xì)管高速離心機(jī)離心沉淀觀察壓實(shí)的紅細(xì)胞層的高度求得每升血液中紅細(xì)胞與全血的容積比：即為Hct。二、毛細(xì)管法器材和試劑1.專用高速離心機(jī)2.一次性使用的專用毛細(xì)管3.毛細(xì)管密封膠 4.刻度讀數(shù)器5.抗凝劑：肝素或EDTA-K2二、毛細(xì)管法操作 準(zhǔn)備：抗凝劑處理毛細(xì)管 吸血：血液吸入毛細(xì)管內(nèi) 6065mm 處 混勻 封口二、毛細(xì)管法操作編號(hào) 離心：12000r/min，5 min。 讀數(shù)：用刻度讀數(shù)器測(cè)量紅細(xì)胞比容的讀數(shù) 計(jì)算 注意事項(xiàng)1.末梢血采血應(yīng)防止混入組織液。2.靜脈血標(biāo)本收集后擱置時(shí)間不可超過(guò)6小時(shí)。3.同一標(biāo)本的兩次測(cè)量結(jié)果之差不可大于0.015。4.毛細(xì)管不能

41、用燒熔的方法密封。5.嚴(yán)格控制離心條件。6.讀數(shù)應(yīng)盡量避免視差，不能將白細(xì)胞和血小板層的高度算入三、臨床意義正常參考值成年男性0.3800.508L/L成年女性0.3350.450L/L兒童0.350.49L/L新生兒0.490.54L/L微量法較溫氏法平均低12臨床意義1.紅細(xì)胞比容增高 生理性增高：見(jiàn)于紅細(xì)胞生理性增多的情況。 病理性增高：見(jiàn)于真性紅細(xì)胞增多癥、血液濃縮。臨床意義2.紅細(xì)胞比容減低 見(jiàn)于各種貧血時(shí)。3.紅細(xì)胞比容可作為計(jì)算靜脈補(bǔ)液量的指標(biāo)。4.紅細(xì)胞比容可用于紅細(xì)胞平均值中的計(jì)算。5. 紅細(xì)胞比容可作為判斷全血粘度的指標(biāo)。臨床意義通過(guò)比容測(cè)定可決定是否需要靜脈輸液及輸液量。

42、例：一男性腹瀉病人測(cè)得HCT為0.62L/L（62%），問(wèn)每升血容量應(yīng)補(bǔ)液多少升？解：由0.620.49（1X）得 補(bǔ)液量0.620.491 0.26（升）總 結(jié) 1.紅細(xì)胞比容測(cè)定，是將定量的抗凝血置于比積管中，用一定速度（相對(duì)離心力2246g）和時(shí)間（30min）離心沉淀，由此獲得壓實(shí)紅細(xì)胞和上層血漿體積的比值的測(cè)定方法。 2.所用抗凝劑不能影響和改變紅細(xì)胞體積?？?結(jié) 3.離心條件要恒定。離心半徑不同的離心機(jī)轉(zhuǎn)速應(yīng)測(cè)算確定。 4.讀取紅細(xì)胞層的柱高以還原紅細(xì)胞層表面為準(zhǔn)，其毫米數(shù)乘以0.01，即為每升血液中紅細(xì)胞體積的升數(shù)，以L/L為單位報(bào)告結(jié)果。總 結(jié) 5.HCT參考值隨性別和年齡有一

43、定變化幅度。 6.HCT主要用于診斷貧血和判斷貧血類型，了解血液粘度，輸液時(shí)確定劑量等。第七節(jié) 紅細(xì)胞直徑測(cè)量一、測(cè)微計(jì)的校正二、紅細(xì)胞直徑的測(cè)量方法三、臨床意義一、測(cè)微計(jì)的校正（一）測(cè)微計(jì)的組成1.目鏡測(cè)微計(jì) 為一個(gè)直徑1820mm，圓形玻璃片，中央刻有精確等距離的平行線刻度，一般有50或100等分格。2.鏡臺(tái)測(cè)微計(jì)是一種特制的載玻片，正中有一圓形蓋片封有標(biāo)準(zhǔn)尺，總長(zhǎng)為1mm，被劃分為100等分，每一小格長(zhǎng)為10µm。（二）目鏡測(cè)微計(jì)的校正1. 將目鏡測(cè)微計(jì)有刻度一面向下裝入目鏡筒。2. 將鏡臺(tái)測(cè)微計(jì)有刻度一面朝上放在載物臺(tái)上夾好，使標(biāo)準(zhǔn)尺位于視野中央。（二）目鏡測(cè)微計(jì)的

44、校正3.換用測(cè)量被測(cè)物所用的物鏡頭。4. 使兩種測(cè)微計(jì)的刻度平行，先使左邊的“0”刻度重合，然后由左向右找出尋找另一次重合的刻度。5.記錄兩刻度的讀數(shù)，并根據(jù)比值計(jì)算出在此條件下目鏡測(cè)微計(jì)每小格所相當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)度（）。 （二）目鏡測(cè)微計(jì)的校正二、紅細(xì)胞直徑測(cè)量方法 紅細(xì)胞直徑測(cè)量：即在顯微鏡下用專用的測(cè)微計(jì)測(cè)量一定數(shù)量的紅細(xì)胞直徑。根據(jù)測(cè)得直徑數(shù)據(jù)，可計(jì)算出紅細(xì)胞平均直徑，繪制紅細(xì)胞直徑分布曲線（Price-Jones曲線），從而了解紅細(xì)胞大小的變化，可判斷紅細(xì)胞形態(tài)有無(wú)改變，從而對(duì)貧血類型的鑒別有一定的意義。原理 用已經(jīng)校正目鏡測(cè)微計(jì)，在顯微鏡下測(cè)量一定數(shù)量紅細(xì)胞的直徑。求出紅細(xì)胞的平均直徑（MC

45、D），并繪制紅細(xì)胞直徑曲線?！静僮鳌恐苽浔⊙x擇合適區(qū)域測(cè)量紅細(xì)胞直徑：200500個(gè) 計(jì)算平均直徑繪制P-J曲線P-J曲線注意事項(xiàng) 1.血片要求厚薄均勻，較白細(xì)胞分類血片略薄，紅細(xì)胞無(wú)重疊和皺縮變形。 2. 應(yīng)依次測(cè)量紅細(xì)胞直徑，不可任意取舍，對(duì)異形紅細(xì)胞，應(yīng)測(cè)量其長(zhǎng).短徑，取其平均值。 3.目鏡測(cè)微計(jì)一經(jīng)校正，就不得更換物鏡。 4. 鏡臺(tái)測(cè)微計(jì)的標(biāo)準(zhǔn)尺因油鏡放大而成粗線，目鏡測(cè)微計(jì)放大倍數(shù)較小而呈細(xì)線，細(xì)線重合在粗線上的位置應(yīng)前后一致。三、臨床意義 1.正常人及正常細(xì)胞性貧血紅細(xì)胞直徑曲線特征 紅細(xì)胞直徑范圍在6.09.0之間，平均直徑7.2左右；曲線頂峰在78之間，基底部窄，呈尖峰狀。

46、三、臨床意義 2.大細(xì)胞性貧血紅細(xì)胞直徑曲線特征 紅細(xì)胞直徑增大，MCD 7.49.6，曲線頂峰右移，基底部明顯增寬，多見(jiàn)于巨幼細(xì)胞性貧血等。三、臨床意義 3.小細(xì)胞素性貧血紅細(xì)胞直徑曲線特征 紅細(xì)胞直徑減少，MCD 6.26.7，曲線頂峰左移，基底部增寬。見(jiàn)于缺鐵性貧血和單純小細(xì)胞性貧血等。第八節(jié) 計(jì)算紅細(xì)胞平均值一、平均紅細(xì)胞體積二、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量三、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度四、臨床意義一、平均紅細(xì)胞體積平均紅細(xì)胞體積（MCV）：是指每個(gè)紅細(xì)胞的平均體積。以飛升（fl）為單位，1L=1015 fl。二、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH）：是指每個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)所含血紅蛋白的平均量。以皮克（pg）為單位，1g1012 pg三、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）：是指平均每升紅細(xì)胞中所含血紅蛋白濃度（g/L）。四、臨床意義貧血類型 MCV (fl) MCH (pg) MCHC(g/L)正常細(xì)胞性貧血 正常 正常