纖維素的測定方法(共5頁)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上實驗原理植物的主要化學(xué)成分是纖維素、半纖維素和木質(zhì)素這三部分。它們是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的主要組分。其中，纖維素組成微細(xì)纖維，構(gòu)成纖維細(xì)胞壁的網(wǎng)狀骨架，而半纖維素和木質(zhì)素是填充在纖維和微細(xì)纖維之間的“粘合劑”和“填充劑”。1.     纖維素    生物制粉末在加熱的情況下用醋酸和硝酸的混合液處理，在這種情況下，細(xì)胞間的物質(zhì)被溶解，纖維素也分解成單個的纖維，木質(zhì)素、半纖維素和其它的物質(zhì)也被除去。淀粉、多縮戊糖和其它物質(zhì)受到了水解。用水洗滌除去雜質(zhì)以后，纖維素在硫酸存在下被重鉻酸鉀氧化成二氧化碳和水。C6H

2、10O5 + 4K2Cr2O7  + 16H2SO4  = 6CO2 + 4Cr2(SO4)3 + 4K2SO4 + 21H2O    過剩的重鉻酸鉀用硫酸亞鐵銨溶液滴定，再用硫酸亞鐵銨滴定同量的但是未與纖維素  反應(yīng)的重鉻酸鉀，根據(jù)差值可以求得纖維素的含量。2.     半纖維素    用沸騰的80硝酸鈣溶液使淀粉溶解，同時將干擾測定半纖維素的溶于水的其它碳水化合物除掉。將沉淀用蒸餾水沖洗以后，用較高濃度

3、的鹽酸，大大縮短半纖維素的水解時間，水解得到的糖溶液，稀釋到一定體積，用氫氧化鈉溶液中和，其中的總糖量用銅碘法測定。    銅碘法原理：半纖維素水解后生成的糖在堿性環(huán)境和加熱的情況下將二價銅還原成一價銅，一價銅以Cu2O的形式沉淀出來。用碘量法測定Cu2O的量，從而計算出半纖維素的含量。    測定還原性糖的銅堿試劑中含有KIO3和KI，它們在酸性條件下會發(fā)生反應(yīng)，也不會干擾糖和銅離子的反應(yīng)。加入酸以后，會發(fā)生反應(yīng)釋放出碘：KIO3  +  5KI  +3H2SO4  =  3I2&#

4、160; +  3K2SO4  +3H2O    加入草酸以后，碘與氧化亞銅發(fā)生反應(yīng)：Cu2O  +  I2  +  H2C2O4  =  CuC2O4  +  CuI2  +  H2O    過剩的碘用Na2S2O3溶液滴定：2Na2S2O3  +  I2  =  Na2S4O6  +  2NaI3.  &

5、#160;  木質(zhì)素    用1的醋酸處理以分離出糖、有機(jī)酸和其它可溶性化合物。然后用丙酮處理，分離出葉綠素、擬脂、脂肪和其它脂溶性化合物。將沉淀用蒸餾水洗滌以后，在硫酸存在下，用重鉻酸鉀氧化水解產(chǎn)物中的木質(zhì)素：C11H12O4 + 8K2Cr2O7 + 32H2SO4 = 11CO2 + 8K2SO4 + 8Cr2(SO4)3 + 32H2O過量的重鉻酸鉀用硫酸亞鐵銨溶液滴定。方法和測定纖維素相同。 實驗所需試劑和儀器1. 實驗試劑硫酸亞鐵銨  分析純，  重鉻酸

6、鉀    分析純，  硫代硫酸鈉  分析純，硝酸鈣      分析純，  硫酸銅      分析純，  可溶性淀粉  分析純， 碘酸鉀      分析純，  草酸        分析純，  酒石酸      分析純，&#

7、160;氯化鋇      分析純，  鄰菲啰啉    分析純，  濃硫酸      分析純， 鹽酸        分析純，  冰醋酸      分析純，  硝酸        分析純。  2. 實驗儀器50mL

8、酸式滴定管，50mL堿式滴定管，10mL離心試管若干，不同型號燒杯若干，真空塞，250mL錐形瓶若干，電爐，離心沉淀器。 五 實驗步驟（一） 纖維素含量的測定1. 所需溶液硝酸和醋酸的混合液，0.5N重鉻酸鉀溶液，試亞鐵靈指示劑(將鄰苯二胺與甘油、及一起加熱，或改用8-氨基喹啉為原料，都可制備該品。試亞鐵靈指示劑（1,10-菲繞啉）的配制方法：1.10-菲繞啉(1.10-phenanathrolinemonohydrate)指示劑溶液：溶解0.7g七水合硫酸亞鐵(FeSO4.7H2O) 于50mL 的水中，加入1.5g1.10-菲繞啉，攪動至溶解，加水稀釋至100mL。)0.1N硫酸

9、亞鐵銨溶液，濃硫酸，0.1N重鉻酸鉀溶液。 2. 實驗步驟（1）       配制所需的各種溶液，硫酸亞鐵銨溶液在使用的一周內(nèi)準(zhǔn)備，并在使用當(dāng)天測定其滴定度K。用該硫酸亞鐵銨溶液滴定25mL 0.1N的重鉻酸鉀溶液，用去m mL。K= 25×0.1/m（2）       稱取自然風(fēng)干的生物質(zhì)粉末0.05-0.06g，數(shù)值為n（3）       裝入離心管內(nèi)，加入硝酸和醋酸的混合液5mL（4）

10、60;      塞住離心管，在沸水中煮沸25min，并定期攪拌（5）       離心，倒去清液，加入蒸餾水離心洗滌沉淀，共洗三次（6）       加入10mL 0.5N的重鉻酸鉀溶液和8mL濃硫酸，攪勻，放入開水中10min，并定期攪拌（7）       冷卻，倒入錐形瓶中，用少許蒸餾水沖洗沉淀，滴入3滴試亞鐵靈試劑，用0.1N的硫酸亞鐵銨溶液滴定，用去b mL

11、，由黃色經(jīng)黃綠色至紅褐色為終點（8）       用0.1N的硫酸亞鐵銨溶液單獨滴定加入8mL濃硫酸和10mL 0.5N重鉻酸鉀溶液，用去a mL（9）       生物質(zhì)中纖維素的含量計算公式x% = 0.675×K（ab）/n0.05mol/L硫代硫酸鈉溶液配制：用臺秤稱取Na2S2O3?5H2O 12.5g和Na2CO3 0.5g，溶于1000mL經(jīng)煮沸后冷卻了的蒸餾水中，轉(zhuǎn)移到試劑瓶中，搖勻，靜置一周后，過濾備用。標(biāo)定：利用上述（2）中配制的K2C

12、r2O7標(biāo)準(zhǔn)溶液來進(jìn)行標(biāo)定，用移液管移取25.00mL該K2Cr2O7標(biāo)液三份，分別置于250mL錐形瓶中，加入5mL 3mol/L HCl，1g KI，搖勻，置于暗處5分鐘。待反應(yīng)完全后，用蒸餾水稀釋至50mL。用Na2S2O3溶液滴定至黃綠色，加入2mL淀粉溶液，繼續(xù)滴定至溶液藍(lán)色消失呈現(xiàn)淺綠色即為終點，記下所消耗的Na2S2O3溶液體積，計算Na2S2O3溶液的濃度。    (mol/L)    0.2942為K2Cr2O7的毫摩爾質(zhì)量(g /mmol)為準(zhǔn)確稱取K2Cr2O7的質(zhì)量(g) （二）半纖維素含量的測定1.

13、 所需溶液80%硝酸鈣溶液，2N鹽酸，酚酞指示劑，2N氫氧化鈉溶液，堿性銅試劑草酸-硫酸混合液，0.5%淀粉，0.01N硫代硫酸鈉溶液。 2. 實驗步驟（1）       稱取自然風(fēng)干的生物質(zhì)粉末0.1-0.2g，數(shù)值為n（2）       裝入小燒杯中，加入15mL 80%的硝酸鈣溶液，蓋好加熱至沸騰，在慢慢沸騰的情況下加熱5min（3）       分步離心，分別用10mL熱水洗滌沉淀三次（4）

14、0;      在沉淀中加入10mL 2N的鹽酸，攪勻，沸水浴中攪拌情況下微沸45min（5）       離心，殘渣分別用10mL蒸餾水沖洗三次，沖洗后的水溶液合并在離心液中（6）       加入1滴酚酞，用2N氫氧化鈉溶液中和到顯橙紅色（7）       轉(zhuǎn)入100mL的容量瓶，稀釋到刻度（8）     

15、0; 用干燥濾紙過濾到干燥燒杯中（9）       移液管吸取10mL濾液，加入10mL堿性銅試劑，蓋好在沸水中煮15min（10）   冷卻，加入5mL草酸-硫酸混合液，加入0.5mL 0.5%淀粉，用0.01N硫代硫酸鈉溶液滴定至藍(lán)色消失，用去b mL（11）   取10mL堿性銅試劑，加5mL草酸-硫酸混合液，再加10mL濾液，加入0.5mL 0.5%的淀粉，0.01N硫代硫酸鈉溶液滴定至藍(lán)色消失，用去a mL（12）   生物質(zhì)中半纖維素的含量計算公式x% = 0.9

16、×100 248（ab）（ab）/10000×10×n （三）木質(zhì)素含量的測定1. 所需溶液1%醋酸，丙酮，73%硫酸，10%氯化鋇溶液，0.5N重鉻酸鉀溶液濃硫酸，0.1 N硫酸亞鐵銨溶液，試亞鐵靈指示劑（稱取1.485g鄰菲羅啉(C12H8N2·H2O)放人燒杯中，加水30ml，溫?zé)嶂镣耆芙?，稱取0.695g硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O)放入燒杯中加水溶解，移入鄰菲羅啉溶液中混勻，用水稀釋至100ml。）。 2. 實驗步驟（1）       標(biāo)定新配的0.1

17、N硫酸亞鐵銨溶液, 滴定度為K（2）       稱取自然風(fēng)干的生物質(zhì)粉末0.05-0.1g，數(shù)值為n（3）       裝入離心管，加入10mL 1醋酸，搖動5min混勻（4）       離心，用5mL 1醋酸洗沉淀（5）       加丙酮3-4mL，在搖蕩的情況下浸泡3min，洗三次（6）       用玻璃棒將沉淀沿管壁分散開，將離心管放熱水中使沉淀充分干燥（7）       在干燥沉淀中加入73硫酸3mL，用玻璃棒攪勻，擠壓成均勻的漿液（8）       室溫下放置一夜（9）       加入10mL蒸餾水，攪勻，置沸水中5min（10）   冷卻，加入0.5mL 10%氯化鋇溶液，攪勻，離心，倒出清液，分別用10mL蒸餾水沖洗