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文檔簡介
1、蛋白質(zhì)的提取和分離2012廣東29 (16分)食品種類多,酸堿度范圍廣。生物興趣小組擬探究在食品生產(chǎn)應(yīng)用范圍較廣的蛋白酶,查閱相關(guān)文獻(xiàn),得知:(1)pH對(duì)不同蛋白酶的活力影響有差異。據(jù)圖12可知,_更適宜作為食品添加劑,理由是_。蛋白酶的活力可用_的量來表示。(1) 該蛋白酶的提取工藝流程如下:興趣小組分別對(duì)酶保護(hù)劑濃度、提取液pH進(jìn)行了探究實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示,酶保護(hù)劑濃度在0.020.06mol/L范圍內(nèi),酶活力較高;提取液pH在6.08.0范圍內(nèi),酶活力較高。他們認(rèn)為,要進(jìn)一步提高粗酶制劑的酶活力,以達(dá)到最佳提取效果,還需對(duì)酶保護(hù)劑濃度和提取液pH進(jìn)行優(yōu)化,并確定以此為探究課題。請(qǐng)擬定該課題名
2、稱,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表?!敬鸢浮浚?)木瓜蛋白酶 由圖可以看出,木瓜蛋白酶的活性不隨pH的變化而變化單位時(shí)間內(nèi)底物消耗(產(chǎn)物產(chǎn)生)(2)課題:探究酶保護(hù)劑的最適濃度和提取液的最適pH單位時(shí)間內(nèi)底物的消耗量提取液的pH6.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.0酶保護(hù)劑的濃度0.020.030.040.050.06【解析】(1)審題結(jié)合圖形和文字,在題目中已經(jīng)提供了信息“食品種類多,酸堿度范圍廣”,所以選擇的食品添加劑應(yīng)該有較廣的酸堿適應(yīng)范圍。從圖形中,可以看出木瓜蛋白酶的適應(yīng)范圍最廣,所以可以選作食品添加劑。酶的活力,一般用酶催化的底物消耗量或者產(chǎn)物生成量來表示。(2)實(shí)
3、驗(yàn)設(shè)計(jì),應(yīng)該明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄棵副Wo(hù)劑的最適濃度和提取液的最適pH值,所以可以將酶保護(hù)劑的濃度和提取液的pH值作為自變量,因變量為單位時(shí)間內(nèi)底物的消耗量?!驹囶}點(diǎn)評(píng)】本題以蛋白酶在食品方面的應(yīng)用為背景,考查了蛋白酶的應(yīng)用、活力測定、蛋白酶的提取流程等內(nèi)容和學(xué)生繪制表格的能力,難度不大。2012安徽31(24分)甲型血友病是由X染色體上的隱性基因?qū)е碌倪z傳?。℉對(duì)h為顯性)。圖1中兩個(gè)家系都有血友病發(fā)病史,III2和III3婚后生下一個(gè)性染色體組成是XXY的非血友病兒子(IV2),家系中的其他成員性染色體組成均正常。 圖1(1)根據(jù)圖1, (填“能”或“不能”)確定IV2兩條X染色體的來源;II
4、I4與正常女子結(jié)婚,推斷其女兒患血友病的概率是 。(2)兩個(gè)家系的甲型血友病均由凝血因子VIII(簡稱F8,即抗血友病球蛋白)基因堿基對(duì)缺失所致。為探明IV2的病因,對(duì)家系的第III、IV代成員F8基因的特異片段進(jìn)行了PCR擴(kuò)增,其產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖2所示,結(jié)合圖I,推斷III3的基因型是 。請(qǐng)用圖解和必要的文字說明IV2非血友病XXY的形成原因。(2) 現(xiàn)III3再次懷孕,產(chǎn)前診斷顯示胎兒(IV3)細(xì)胞的染色體為46,XY;F8基因的PCR檢測結(jié)果如圖2所示。由此建議III3 。 圖2(4)補(bǔ)給F8可治療甲型血友病。采用凝膠色譜法從血液中分離純化F8時(shí),在凝膠裝填色譜柱后,需要用緩沖液處理較長
5、時(shí)間,其目的是 ;若F8比某些雜蛋白先收集到,說明F8的相對(duì)分子質(zhì)量較這些雜蛋白 。(5)利用轉(zhuǎn)基因豬乳腺生物反應(yīng)器可生產(chǎn)F8。要使乳腺細(xì)胞合成F8,構(gòu)建表達(dá)載體時(shí),必須將F8基因cDNA與豬乳腺蛋白基因的 等調(diào)控組件重組在一起。F8基因cDNA可通過克隆篩選獲得,該cDNA比染色體上的F8基因短,原因是該cDNA沒有 。(6)為獲得更多的轉(zhuǎn)基因母豬,可以采用體細(xì)胞克隆技術(shù),將純合轉(zhuǎn)基因母豬的體細(xì)胞核注入 ,構(gòu)成重組胚胎進(jìn)行繁殖?!敬鸢浮浚?)不能 0(2)XHXh,遺傳圖解如下:說明: 2產(chǎn)生異常的XhY精子和3產(chǎn)生正常的卵細(xì)胞XH結(jié)合而成XHXhY在III3形成卵細(xì)胞過程中的減數(shù)第二次分裂
6、后期,帶有基因H的姐妹染色單體移向細(xì)胞的同一極,形成XHXH卵細(xì)胞,XHXH卵細(xì)胞與正常精子結(jié)合形成XHXHY受精卵。(3)終止妊娠。(4)洗滌平衡凝膠,并使凝膠裝填緊密 大(5)啟動(dòng)子 內(nèi)含子(6)去核的卵母細(xì)胞“漢水丑生的生物同行【解析】(1)因?yàn)?的染色體組成可能是XHXH,也可能是XHXhY,所以不能確定,4的基因型為XHY,所以后代女性中沒有患病個(gè)體。(2)由圖可知第一條帶是顯性,第二條帶是隱性,所以3基因型為XHXh,圖解如下:在III3形成卵細(xì)胞過程中的減數(shù)第二次分裂后期,帶有基因H的姐妹染色單體移向細(xì)胞的同一極,形成XHXH卵細(xì)胞,XHXH卵細(xì)胞與正常精子結(jié)合形成XHXHY受精
7、卵。(3)由題可知,IV3是血友病患者,所以建議III3終止妊娠。(4)采用凝膠色譜法從血液中分離純化F8時(shí),在凝膠裝填色譜柱后,需要用緩沖液處理較長時(shí)間,其目的是洗滌平衡凝膠,并使凝膠裝填緊密;若F8比某些雜蛋白先收集到,說明F8的相對(duì)分子質(zhì)量較這些雜蛋白較大。(5)要使乳腺細(xì)胞合成F8,構(gòu)建表達(dá)載體時(shí),必須將F8基因cDNA與豬乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子和終止子等調(diào)控組件重組在一起。F8基因cDNA可通過克隆篩選獲得,該cDNA比染色體上的F8基因短,原因是該cDNA沒有內(nèi)含子。(6)為獲得更多的轉(zhuǎn)基因母豬,可以采用體細(xì)胞克隆技術(shù),將純合轉(zhuǎn)基因母豬的體細(xì)胞核注入去核卵細(xì)胞,構(gòu)成重組胚胎進(jìn)行繁殖。
8、【試題點(diǎn)評(píng)】本題考查了遺傳規(guī)律,減數(shù)分裂,血紅蛋白的提取,基因工程,胚胎工程;遺傳規(guī)律是近幾年的考查熱點(diǎn),但每年考查的都有區(qū)別,在解遺傳題時(shí),要記住一些常用解題方法,減數(shù)分裂的圖示是高中生物的基本技能,會(huì)畫,能理解,能夠?qū)z傳規(guī)律有個(gè)很高的認(rèn)識(shí),遺傳實(shí)質(zhì)都體現(xiàn)在其中。至于選修部分,基因工程、胚胎工程是近幾年的考查熱點(diǎn),而血紅蛋白的提取,是今年生物考試說明中有,意味著我們要認(rèn)真閱讀考試說明??傮w來說,該題是本試卷中的難題,原因是,遺傳本身對(duì)于學(xué)生來說就難,加之選修部分題目較偏僻,從該題可以看出,安徽高考對(duì)于選修的考查,與必修部分建立了聯(lián)系,進(jìn)行了學(xué)科內(nèi)的綜合,希望學(xué)生在備考的過程中多加注意。20
9、11廣東5.以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述,不正確的是(D)A洗滌紅細(xì)胞時(shí),使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂B豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核,提純時(shí)雜蛋白較少C血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測D在凝膠色譜法分離過程中,血紅蛋白比分子量較少的雜蛋白移動(dòng)慢2011山東34.(8分)(生物生物技術(shù)實(shí)驗(yàn))研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白質(zhì))均有抑菌作用,兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。(3)培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌A生長提供_。電泳法純化乳酸菌素時(shí),若分離帶電荷相同的蛋白質(zhì),則其分子量越大,電泳速度_。答案: (3)碳源和氮源 越慢09年廣東38. (10分)生物技術(shù)實(shí)踐(2)利用上述所得菌株
10、制備植酸酶的流程如下圖:中的主要成分為 ;中包含植酸酶等多種蛋白質(zhì)。請(qǐng)寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據(jù)。答案:(2)小分子雜質(zhì), 凝膠色譜法:根據(jù)蛋白質(zhì)之間的分子大小、吸附性質(zhì)等差異進(jìn)行純化(或電泳法:根據(jù)蛋白質(zhì)之間的電荷、分子大小等差異進(jìn)行純化);2008山東34.(8分)【生物生物技術(shù)實(shí)踐】科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白。這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力,受到研究者重視。(1)分離該抗菌蛋白可用電泳法其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的 、大小及形狀不同,在電場中的 不同而實(shí)現(xiàn)分離。答案:(1)電荷(帶電情況) 遷移速度 (2)碳源 氮源2008江蘇18下列敘述中錯(cuò)誤的是A改變NaCl溶液的濃
11、度只能使DNA溶解而不能使其析出B在沸水浴中,DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色C加鹽和加酒都能抑制微生物的生長D密封瓶口前最好將瓶口通過火焰以防雜菌污染答案:A2007江蘇38(8分)單基因遺傳病可以通過核酸雜交技術(shù)進(jìn)行早期診斷。鐮刀型細(xì)胞貧血癥是一種在地中海地區(qū)發(fā)病率較高的單基因遺傳病。已知紅細(xì)胞正常個(gè)體的基因型為BB、Bb,鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的基因型為bb。有一對(duì)夫婦被檢測出均為該致病基因的攜帶者,為了能生下健康的孩子,每次妊娠早期都進(jìn)行產(chǎn)前診斷。下圖為其產(chǎn)前核酸分子雜交診斷和結(jié)果示意圖。 (1)從圖中可見,該基因突變是由于 引起的。巧合的是,這個(gè)位點(diǎn)的突變使得原來正?;虻南拗泼盖懈钗稽c(diǎn)丟
12、失。正?;蛟搮^(qū)域上有3個(gè)酶切位點(diǎn),突變基因上只有2個(gè)酶切位點(diǎn),經(jīng)限制酶切割后,凝膠電泳分離酶切片段,與探針雜交后可顯示出不同的帶譜,正?;蝻@示 條,突變基因顯示 條。 (2)DNA或RNA分子探針要用 等標(biāo)記。利用核酸分子雜交原理,根據(jù)圖中突變基因的核苷酸序列(ACGTGTT),寫出作為探針的核糖核苷酸序列 。(3)根據(jù)凝膠電泳帶譜分析可以確定胎兒是否會(huì)患有鐮刀型細(xì)胞貧血癥。這對(duì)夫婦4次妊娠的胎兒-lII-4中基因型BB的個(gè)體是 ,Bb的個(gè)體是 ,bb的個(gè)體是 ?!敬鸢浮浚?分)(1)堿基對(duì)改變(或A變成T)2 1(2)放射性同位素(或熒光分子等)UGCACAA (3)一l和一4一3一20
13、7新課標(biāo)廣東卷41(現(xiàn)代生物科技專題,15分)香蕉原產(chǎn)熱帶地區(qū),是我國南方重要的經(jīng)濟(jì)作物之一。廣東省冬季常受強(qiáng)寒潮和霜凍影響,對(duì)香蕉生長發(fā)育影響很大。由香蕉束頂病毒(BBTV,單鏈環(huán)狀DNA病毒)引起的香蕉束頂病,對(duì)香蕉生產(chǎn)的危害十分嚴(yán)重。當(dāng)前香蕉栽培品種多為三倍體,由于無性繁殖是香蕉繁育的主要方式,缺少遺傳變異性,因此利用基因工程等現(xiàn)代科技手段提高其種質(zhì)水平,具有重要意義。請(qǐng)根據(jù)上述材料,回答下列問題:(5)如何利用afp基因,通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得抗寒能力提高的香蕉植株?在運(yùn)用轉(zhuǎn)基因香蕉的過程中,在生態(tài)安全方面可能會(huì)出現(xiàn)什么問題?(列舉兩點(diǎn))【答案】(15分)(5)將afp基因插入土壤農(nóng)桿菌的質(zhì)粒,構(gòu)建表達(dá)載體,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化導(dǎo)入香蕉受體細(xì)胞,成功轉(zhuǎn)化的香蕉細(xì)胞通過組織培養(yǎng)形成植株。
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