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1、鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵一、實驗?zāi)康?. 學(xué)習(xí)確定實驗條件的方法,2. 掌握鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵的方法原理;3. 掌握721型分光光度計的使用方法,并了解此儀器的主要構(gòu)造。二、實驗原理1. 本試驗測定鐵含量的原理:根據(jù)朗伯一比耳定律:A=ebco當(dāng)入射光波長X及光程b定時,在一定濃度范圍內(nèi),有色物質(zhì)的吸光度A與該物質(zhì)的濃度c成正比。只要繪出以吸光度A為縱坐標(biāo),濃度c為橫坐標(biāo)的 標(biāo)準曲線,測出試液的吸光度,就可以由標(biāo)準曲線查得對應(yīng)的濃度值,測出鐵的含量。2. 鄰二氮菲法簡介:?鄰二氮菲為顯色劑,選擇測定微量鐵的適宜條件和測量條件,并用于水中鐵的測定。在pH二29的范圍內(nèi),鄰二氮菲與二
2、價鐵生成穩(wěn)定的桔紅色配合物(Fe(phen)J 3。2+量。測定時控制溶液的酸度為pH5較為適宜,用鄰二氮菲可測定試樣中鐵的總?cè)?、儀器試劑1. 儀器:721型分光光度計;1cm吸收池;lOmL吸量管;5OmL容量瓶(7 個)o2. 試劑:20 Pgml?鐵標(biāo)準溶液;鄰二氮菲水溶液;10%鹽酸疑胺溶液; lmolI?乙酸鈉溶液;1 molLNaOH溶液。四、實驗步驟1. 吸收曲線的繪制容量瓶(50mL) 20ug/mL鐵標(biāo)準5m匚10%鹽酸疑胺搖勻,一 mL %鄰二氮菲溶液 luDKaAc 務(wù)液°以水參比在440560 nm間,每隔10 nm測量一次吸光度長。以波長為橫坐標(biāo),吸光度為縱
3、坐標(biāo),繪制吸收曲線,選擇測量的適宜波2. 標(biāo)準曲線的制作在6支50mL比色管中,分別加入20 U g/mL鐵標(biāo)準溶液,再加入10%鹽酸疑胺溶液,經(jīng)2min后,再各加入鄰二氮菲溶液和mLNaAc溶液,以水稀釋至刻度,搖勻。在510nm處,以試劑 空白為參比,測吸光度A。3.未知液中鐵含量測定吸取5mL未知液代替標(biāo)準液,其他步驟同上。測定并記錄吸光度。由繪制的標(biāo)準曲線查出Fe2+離子濃度。五、實驗數(shù)據(jù)記錄與處理1.吸收曲線的繪制波長(nm)吸光度A波長(nm)吸光度A570500550490530470520450510430根據(jù)上面數(shù)據(jù),作得標(biāo)準曲線圖如下:由作圖可知,最大吸收波長為510nmo
4、2.標(biāo)準曲線的制作試液編號標(biāo)準溶液的量/mL標(biāo)準溶液濃度/(ug/mL)總含鐵量/吸光度A10000240380412051606200根據(jù)以上數(shù)據(jù)繪制出Fe2+離子濃度吸光度曲線圖,如下濃度一一吸光度曲線.211.1.0110.2038 6 4 o o O<V = 0.2527x +0.00050.808 .0.4040.60911.52乙533.544.5Fe2+離子濃度ug/mL)3.未知液中鐵含量測定測得未知液A=由表得C(Fe2+) = Ug/mL。所以,未知液濃度C柚液二C(Fe2+)*50/5 = Ug/mLo小結(jié):通過實驗數(shù)據(jù)可知,最適宜波長為X=510nm;最終由標(biāo)準曲線得未知液鐵的含量為:u g/mLo六、實驗誤差分析實
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