食品中人工合成色素新紅的極譜快速檢驗法_張耀亭

1、性差異。表 1 HT L V 抗體陽性者情況姓名 性別 年 齡 輸血史 海外關系 滴度 盧××男 61無 無 1 128李××男 38有 無 1 1024趙××男 31無 無 1 128華××女 18無 無 1 64呂××男 36無 無 1 64胡××女 27無 無 1 643討論3. 1人 T 細胞白血病病毒 (HT L V 是 1980年首次分 離成功的人類 C 型逆轉(zhuǎn)錄酶病毒 , 它與人 T 細胞惡性 腫瘤有著密切關系 , 此病毒在日本、 加勒比地區(qū)廣泛流 行 , 世

2、界 各 地 人 群 HT LV 1抗 體 陽 性 率 , 日 本 為 9% 25%, 加勒比地區(qū)為 3. 1%。 國內(nèi)曾毅等報道調(diào)查 40歲以上人群血 清標本 10013例 , 發(fā)現(xiàn)陽性者 8例 , 陽 性率 0. 08%, 其中老年人 6例 , 均為日本人及與日本人 密切接觸者 3 ; 呂聯(lián)煌等在 福建沿海地區(qū)調(diào)查 518例 , 發(fā)現(xiàn)陽性者 5例 , 陽性率 1. 0%, 無老年人陽性者。本 文采用從日本引進的 HT L V 1血清診斷試劑 , 對本地 區(qū)境 內(nèi)老年人 進行了 血清 HT L V 1抗 體的流行 病學 調(diào)查 , 共 采血清 1610份 , 陽性率 0. 37%, 其中老年人

3、群中陽性者 1例 , 陽性率 0. 19%, 青中年人群中陽性者 5例 , 陽性率 0. 46%, 兩組 相比較 , 無顯著差異 (P > 0. 05 , 提 示本地 區(qū)內(nèi) 老年 人與青 年中 年人 同樣 存在 HT L V 1感染及流行 , 值得臨床注意。3. 2本組一例陽性者滴度效價極高 (1 1024 , 追問 病史 , 曾經(jīng)有輸血史 , 推 測本例 其感染 途徑與 輸血有 關。國內(nèi)外報道 HT LV 1通過輸血、體液途徑傳播。 3. 3 HT L V 1與地區(qū)分布關 系 , 我地區(qū)與 呂聯(lián)煌著 福建沿海地區(qū)調(diào)查結(jié) 果相比 , 明顯低于后者 , 提示沿海 地區(qū)為小流行區(qū) , 本地區(qū)

4、存在有 HT LV 1散在流行。 參考文獻1王毓巒 , 等 . 山西醫(yī)藥雜志 1985; 14(5 :2732呂聯(lián)煌 , 等 . 中華血液學雜志 1989; 10(5 :225 3曾毅 , 等 . 病毒學報 1985; 1(4 :3444太 . 光利著癌與病毒 1989; 33:108方法測定食品中人工合成色素新紅的極譜快速檢驗法 張耀亭侯志強韓津生董子珍天津市衛(wèi)生防疫中心 (天津 300011新 紅是我國獨自 合成的一 種新型食用 色素 , 目前尚未見 示波極譜法測 定新紅色 素的報道。本文 利用示 波極譜 法對食品中新 紅色素的 測定進行了 研究。新紅 色素分 子中含有氮氮 雙鍵和碳 碳雙

5、鍵 , 這些基 團是電 活性的 , 在 滴汞電極上可以被還原產(chǎn)生還原波 , 本方法 利用其還原電位 (峰電位 進行定性分析 , 色素的還原 波高與其濃度成線性關系 , 來進行定量分析。 本方法具 有儀器簡單 , 方法選擇性強 , 靈敏度高 , 操作 簡單 , 液 體樣品 不經(jīng)分離可直 接測定等 優(yōu)點。最低檢出 濃度為 1. 15 g /20ml , 樣品回收率 93%98%, 變異系數(shù)小于 3%?？蓮V泛應用于含有新紅等色素的食品分析中。 1原理 :食用合 成色素新紅 在分子中含 有氮氮雙鍵 和碳碳 雙鍵 , 而這 些基團均是電活性的 , 在滴汞電極上可以還N aO 3SN aO 3SNHCOC

6、H 3SO 3Na 本方法利用其還原電位 (峰電位 進行定性分析 , 色素 的還原波高與其濃度成線性關 系 , 用來進行定量分析。 2試劑 :2. 1 0. 1mol /L N aA c HAc2. 2 標 準 溶 液 :精 確 稱 取 純 度 95%的 新 紅 色 素 0. 1000g , 用蒸餾水溶解 , 移入 100ml 容量瓶中稀釋至 刻度 , 混勻 , 此即為 1mg /ml 標準溶液。3儀器 :3. 1 M P 1溶出分析儀 (山東電訊七廠 , 滴汞電極 , 301中國衛(wèi)生檢驗雜志 1998年第 8卷第 5期4操作 :4. 1 樣品處理4. 1. 1果味水 , 果子露 , 汽水 (

7、需除 CO 2 , 取混勻樣 品 1 5ml 。4. 1. 2硬糖、 沖劑類 :準確稱取粉碎混勻樣品 0. 5g 或 1. 0g , 加蒸餾水溶解并定容 10ml 20ml 。4. 1. 3酒類 :取混勻樣品 20ml 置于 50ml 燒杯中 , 加 熱驅(qū)除乙醇。4. 1. 4火腿腸 類 :將待測火腿腸用刀切成米粒大小的 小塊 , 稱量 1. 0g 放于 10ml 比色管中 , 加 1%氨水 10ml 浸泡 2h, 然后用濾紙濾出浸泡液到另一比色管中。 4. 2 定性 :吸 取 0. 5ml 1. 0m l 樣 品 溶 液 置 于 50ml 小 燒 杯 中 , 加入 N aA c -HA c

8、緩沖液至 20ml , 在 -0. 1伏進行 掃描 , 根據(jù) 色素的特征峰電位進行定性。 新紅的峰電位 為 -0. 48V (V S. SCE , 胭脂紅的出峰在 -0. 58V , 莧 菜紅在 -0. 34V 出峰 , 紅色 40在 -0. 38V , 赤蘚紅出峰 位置大于 -1. 0V4. 3 定量4. 3. 1工作曲 線法 :標準曲線的制作 :于 50ml 燒杯中加入緩沖溶液至 20ml , 先測定空白峰高值 , 然后準確加入 1mg /ml 的標 液 10 l, 混 勻 , 進行分析 , 測畢再加 10 l, 共加 6次 , 以峰高為縱作標 , 以濃度為橫座標繪制工作曲線 , 求回 歸

9、方程。樣品測定 :準 確吸取樣品溶液 0. 52. 0ml (視濃度 高低而定 , 置于 50m l 小燒杯中 , 準確加入緩沖溶液至 20ml , 于在起始電位 -0. 1V 進行掃描 , 得到 極譜圖 , 測 得峰高后 , 從工作曲線上查出稀釋樣 液含色素的濃度。 結(jié)果計算 :色素 (g /K g = (A *V 1*VV 2/1000A 從 標準 曲線 查出 稀釋 樣品 含色 素濃 度 , mg / ml 。V 1測定時樣品稀釋體積 , ml 。V 2測定時樣品溶液體積 , ml 。V 樣品溶液總體積 , ml 。W 樣品重量 , g 。4. 3. 2標準加 入法 :向燒杯中各加入被測樣

10、液 1ml (視濃度高低而定 , 再用緩沖液稀釋至 20ml, 測其峰高 , 然后精密吸取與樣 品含量相近的色素標準溶液 , 混勻 , 測其峰高。 按下式 色素 (g /Kg =樣品峰高 -空白峰高加標后峰高 -樣品峰高×加標量 (mg 取樣量 (g 5結(jié)果與討論5. 1底液選擇對 pH =9的 0. 1mol /L 氨氯化氨緩沖溶液和 pH =5的 0. 1mol/L 醋酸醋酸鈉緩沖溶液進行了試驗 , 證 實 , pH=9的 0. 1mo l/L 氨氯化氨緩沖溶液中紅色 40與新紅的峰電位不能分開 , 而新紅、胭脂紅、莧菜紅、紅 色 40、赤蘚紅在 pH=5的 0. 1mol/L

11、醋酸醋酸鈉底液 中均能很好分開 , 所以本文選擇 pH=50. 1mo l/L 醋酸 醋酸鈉緩沖溶液作為底液進行新紅色素的測定。5. 2靈敏度和檢出限對標準系列空白 測定六次 , 空白值均為零 , 基線噪 聲 為 0. 25格 , 截距為 0. 117; 斜率 (靈敏度 為 0. 497 (0. 476-0. 508 , S =0. 011; 回歸方程為 Y =0. 497X+ 0. 117, r =0. 9994(0. 9988-0. 9998 。 按國際純粹化學 與應用化學聯(lián)合會推薦的方法 , 最低分析響應值應為 3倍基線噪聲即 0. 25×3=0. 75格 , 代入公式 X=0

12、. 75-0. 117/0. 497=1. 15, 即 最 低檢 出 濃 度 約 為 1. 15 g / 20ml 。5. 3 精 密 度 取 含 有 新 紅 等 的 飲 料 , 濃 度 為 在 1. 0mg /kg (n =6 時 , CV %=2. 3, 在 5. 0mg /kg 時 (n =6 CV %=1. 5%, 在 10mg /kg (n =6 時 CV %= 1. 0%。5. 4回收率本法以含有新紅色素 1. 0mg /kg 的飲料 為本底 , 分別加標 , 加標量 為 1. 0mg /kg 、 5. 0mg /kg 、 10. 0mg /kg 測其回收率 , 分別為 93%、

13、98%和 96%。 5. 5特異性實驗在 (0. 1mol /L NaA c -A c 底液中新紅的峰電位為 -0. 48V (V S. SCE , 胭脂紅的出峰在 -0. 58V , 莧菜 紅在 -0. 34V 出峰 , 赤蘚紅出峰位置大于 -1. 0V , 均能 很好的分開。5. 6樣 品測 定利 用本 方法 對 6種 樣品進 行了 測定 結(jié)果如下 :(個別樣品人為添加了新紅色素 樣 品名稱 色素含量 (mg /kg 冰棒 2. 8汽水 0. 6鹽 水火腿 12. 6固 體飲料 30. 8色酒 1. 56小結(jié)本法選擇性強 , 靈敏度高 , 操作簡單 , 最低檢出濃 度為 1. 15 g /

14、20ml , 方法準確 , 樣品回收率 93%98%之間 , 變 異系數(shù)小于 3%。 樣品不經(jīng)分離可直接測定。 可302 中國衛(wèi)生檢驗雜志 1998年第 8卷第 5期參 考 文 獻1欒秀坤 . 吉林省地方標準 食品中人工合成色素測定方法 . DB/22/54 92 2韓津生 , 侯志強 , 張耀亭 , 等 . 標波極譜法測定食用合成色 素誘惑紅 . 中國衛(wèi)生檢驗雜志 1997; 5(7 :282 283方法測定溶血離心培養(yǎng)法用于分離血液中傷寒桿菌的初探 鄧曼玲桂林地區(qū)衛(wèi)生防 疫站 (廣 西 541001從 血液中分離傷 寒桿菌一 般采用肉湯 增菌 , 血平 板分離 (常規(guī)法 。查閱有關資料 1

15、5 , 用溶血離心法 (Ly sis -Cent rifug atio n , 簡稱 L C 法 能明顯縮短培 養(yǎng)周期和提高血液中細菌的檢出率。 為探討用 L C 法 分離血 液中傷寒桿菌 的可行性 , 我 們對該法在 傷寒流 行疫區(qū) 現(xiàn)場及臨床上 應用作了 一些初步探 索 , 并與常 規(guī)法進行對比試驗 , 結(jié)果如下 :1材料1. 1溶血離心 管 (L C 管 :采用 10ml 磨口 刻度試 管 , 內(nèi)含溶血劑聚乙二醇辛基苯基醚 (乳化劑 o p 和抗 凝劑共 1ml, 經(jīng) 高壓滅菌后 , 置室溫備用。1. 2常規(guī)膽鹽葡萄糖肉湯增菌管 , 按 傷寒副傷寒防 治手冊 6 配制。1. 3 實驗用血

16、液標本 :由傷寒流行疫區(qū)和醫(yī)院臨床疑 似傷寒病患者中采集 , 共 89份。2方法2. 1 溶血離 心培 養(yǎng)法 :采 集的血 標本 5ml 立即 注入 L C 管 , 并顛倒充分 混勻 10次以上 , 待 L C 管內(nèi)紅 細胞完全溶解后 (液體透明 , 以 4000r /m in 離心 15 20min , 然后將上清棄去 , 取管底沉渣 劃線接種血平板 , 同時涂片染色鏡檢。 將平板置 37培養(yǎng) , 每天應觀察 2次。平板上發(fā)現(xiàn)菌落 后 , 及時轉(zhuǎn) 種雙糖 管和作初 步鑒 定。雙糖管培養(yǎng) 24h, 觀察斜面 (- 、高層 (+ 有動 力、 H 2S (± ; 血清凝集 試驗 A F

17、多價凝集、 O 9、 V i 、 Hd 凝集 ; 生化試驗符合傷寒桿菌 特征即為陽性 , 如觀 察 4 6天仍無菌生長 , 可報告為陰性。2. 2常規(guī)培養(yǎng) 法 :采集血標本 5ml 注入肉湯增菌培養(yǎng) 瓶中 , 置 37培養(yǎng) , 逐日 觀察結(jié)果 , 如出現(xiàn)混濁 , 用血 平板進行分離培養(yǎng)。以下步驟同 L C 法。3實驗結(jié)果3. 1 兩種培養(yǎng)方法檢出結(jié)果的比較 :89份血液標本中 用 L C 法培養(yǎng)分離確定 傷寒桿菌的 40例 , 未分離出 ; 離確定為傷寒桿菌的 31例 , 未分離出傷寒桿菌的 58例 陽性率 34. 83%。兩種方法用配對卡方檢驗 X 2=4. 90, P <0. 05。

18、見表 1。表 1兩種培養(yǎng)方 法檢出結(jié)果的比較方法 陽性份數(shù) 陰性份數(shù) 陽性率 9% L C 法 404944. 94常規(guī)法 315834. 83 2<0. 053. 2兩培養(yǎng)方法結(jié)果符合率比較 :同一樣品同時用兩 種培養(yǎng)方法結(jié)果為陽性的有 30例 ; 均為陰性的 49例 , 符合率 88. 76%。表 2兩種培養(yǎng)方 法結(jié)果符合率比較常規(guī)法L C 法+-+(31 301-(58 9494討論L C 法的基 本原 理是血 液標 本中 的紅 細胞 被溶 血劑 溶解后 , 經(jīng)離心使 之碎片和血 液中的細 菌沉于管 底 , 棄去上清后 , 取沉淀物劃線接種血平板進行培養(yǎng)鑒 定。本文用 該法和常規(guī) 法對傷寒流 行疫區(qū)現(xiàn) 場和醫(yī)院 臨床疑 似傷寒病患 者血液標本 89份進 行了對比 試驗 , L C 法的檢出率高于常規(guī)法 , 用配對 X 2檢