(完整word版)紫外燈消毒效果驗證

1、傳遞窗紫外燈表面消毒效果驗證編 p Code：版本 Version:編寫 Prepared by:日期Date:審核 Checked by:日期Date:批準 Approved by:日期Date:生效日期 Date of Effective:傳遞窗紫外燈表面消毒效果驗證目錄1 、概述 22、實施日期及時間安排 33、驗證小組成員 34、儀器和設備 35、材料與試劑 36、驗證過程 47、驗證結果記錄 68、再驗證周期 69、相關 SOP 710 、 QA 職責 711 、修改事項 錯 誤！未定義書簽。12 、文檔 錯 誤！未定義書簽。1 、概述進入凈化車間的零配件或其它物品通過傳遞窗，進入微

2、生物室的物品通過傳遞窗，經(jīng)過紫外消毒后進入微生物室。為了確認傳遞窗紫外燈的消毒效果，特起草方案對其進行驗證。本驗證用于生產(chǎn)車間、微生物室、無菌室傳遞窗紫外燈表面消毒效果檢查。2、實施日期及時間安排2007年月日開始進行驗證。3、驗證小組成員張興雨負責驗證方案的批準王宇負責驗證方案、驗證報告的審核、組織驗證方案的 培訓和實施高江、張英負責驗證方案和驗證報告的起草 驗證方案的實施4、儀器和設備儀器名稱型號或規(guī)格凈化工作臺HS-1300-V 型菌落計數(shù)器紫外線強度測定儀穩(wěn)壓器220V細菌培養(yǎng)箱SHP-150 型霉菌培養(yǎng)箱GNP-9270 型5、器材5.1 滅菌刻度吸管(1ml, 10ml)5.2 滅

3、菌試管5.3 滅菌平皿5.4 酒精燈5.5 載體：(1.0X 1.0cm的玻片)6、材料與試劑6.1純化水6.3 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基6.4 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基6.5 改良馬丁培養(yǎng)基6.6 金黃色葡萄球菌CMCC （ B） 26 0036.7 枯草芽孢桿菌CMCC （ B） 63 5016.8 大腸桿菌CMCC （ B） 44 1026.9 白色念珠菌CMCC （ F） 98 0016.10 稀釋液（0.1 吐溫80， 0.1蛋白胨溶液）7、驗證過程7.1 試驗環(huán)境試驗在潔凈度10 000 級下的局部潔凈度100 級的單向流空氣區(qū)域內進行，全過程嚴格遵守無菌操作。單向流空氣區(qū)、工作臺面及環(huán)境定期按醫(yī)

4、藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法的現(xiàn)行國家標準進行潔凈度驗證。每次操作開始前，開紫外燈照射1 小時。7.2 培養(yǎng)基的制備7.2.1 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基養(yǎng)基配方：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉31.0g純化水1000ml配制：根據(jù)需要量稱取營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉置適宜容器中，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調pH至7.1 =0.2,分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌121c X15分鐘。7.2.2 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基配方：改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基粉42.0g純化水1000ml配制：6.2營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基第3頁共7頁根據(jù)需要量稱取改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調pH至6.4

5、=0.2,分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌115cx20分鐘。7.2.3 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基配方：營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基20g純化水1000ml配制：稱取營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基20 克，加 1000ml 純化水，加熱溶解，加熱至沸，冷卻至常溫，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌121cM 5分鐘。7.2.4 改良馬丁培養(yǎng)基配方：改良馬丁培養(yǎng)基粉28.0g純化水1000ml配制：根據(jù)需要量稱取改良馬丁培養(yǎng)基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調 pH至6.4 =0.2,分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌115cx20分鐘。7.4 方法驗證試驗7.4.1 輻照強度測定7.4.1.1 開啟紫外燈5min 后， 用中心

6、波長為253.7nm 的紫外線強度測定儀在燈管下方垂直1m的中心處測量其輻照度值（uW/cm 2） 。7.4.1.2 測量時，電壓應穩(wěn)定在220V。7.4.1.3 普通型或低臭氧型直管紫外線燈（30W） ，在燈管下方垂直1m 的中心處，新燈管的輻照度值應R 90 uW/cm2。使用中的燈管的輻照度值應R70 uW/cm 2，低于此值者應予更換。7.4.2 照射劑量表面消毒接受的照射劑量，應達殺滅目標微生物所需。對大腸桿菌，照射劑量應達到7.5 X103 uW- s/cm2,對金黃色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽抱桿菌應達到2.53 X104uVV- s/cm。照射劑量（uWs/cm2）=紫外燈管強

7、度（uW/cm2） x時間（s）7.4.3細菌及其芽抱和真菌殺滅效果的測定7.4.3.1 菌液的制備接種菌種名稱接種比加基培養(yǎng)條件金黃色葡萄球菌新鮮培養(yǎng)物營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基3035c培養(yǎng)1824小時大腸桿菌新鮮培養(yǎng)物枯草芽抱桿菌新鮮培養(yǎng)物白色念珠菌新鮮培養(yǎng)物改良馬丁培養(yǎng)基2328c2448小時金黃色葡萄球菌、枯草芽胞桿菌、大腸桿菌、白色念珠菌培養(yǎng)后，將菌液進行活菌計數(shù)。7.4.3.2 將滅菌載體平放于滅菌平皿內，每個載體滴注定量菌懸液，（載體回收菌量達5X1055X 106 cfu/片），涂勻，放37c培養(yǎng)箱烘干。開啟紫外燈 5min后，將16個染菌玻 片平放于滅菌平皿內，水平放于適當距離照射，于

8、4個不同間隔時間（15min、30 min、45 min、60 min）各取出4個染菌玻片，分別投入 4個盛有5ml洗脫液試管中，振打 80 次。7.4.3.3 經(jīng)適當稀釋后，取1ml洗脫液，作平板傾注，每個染菌玻片接種兩個，細菌放3035c培養(yǎng)48小時作活菌計數(shù)，真菌放 2328c培養(yǎng)72小時作活菌計數(shù)。7.4.3.4 陽性對照，除不做照射處理外， 取4個染菌玻片，分別投入4個盛有5ml洗脫液試管 中，振打80次。余按7.4.2.3同樣操作。7.4.3.5 計算殺滅率陽性對照回收菌數(shù)一試驗組回收菌數(shù)殺滅率（%） =X 100 %陽性對照回收菌數(shù)7.4.3.6 判定標準對指示菌殺滅率99.9%判為消毒合格。8、驗證結果記錄：附件1.試驗菌數(shù)量測定原始記錄8、再驗證周期傳遞窗構造或紫外燈管放置位置發(fā)生改變時。9、相關SOP文件編號文件名稱CK/ZY-059紫外燈、照明燈管理制度CK/ZY-012物料進入控制區(qū)程序和清潔管理規(guī)定CK/ZY-049r實驗室操作制度CK/ZY-068初始污染驗證方案020343培養(yǎng)基的配制020344細菌的接種、傳代和保存10、文檔所有的相關文檔都應該保留