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1、B 05DB23黑 龍 江 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB 23/T xxxx xxxx寒地水稻耐低氮品種篩選(報(bào)批稿)xxxx- x- x實(shí)施xxxx - yx -發(fā)布黑龍江省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局前言II1 范圍12 規(guī)范性引用文件 13 定義13.1 1抗氮脅迫指數(shù) 13.2 1隸屬函數(shù)值14 篩選方法14.1 液培法14.2 土培盆栽法34.3 本田小區(qū)法 35數(shù)據(jù)處理規(guī)則4本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由黑龍江省農(nóng)業(yè)委員會(huì)提出。本標(biāo)準(zhǔn)由黑龍江省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院佳木斯水稻研究所、黑龍江省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)檢測(cè)中心、黑龍江省標(biāo)準(zhǔn)化研究院

2、。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:周通、潘紹英、陸文靜、邢華銘、宋瑩、陳書(shū)強(qiáng)、趙海新、張淑華、關(guān)世武、 王翠。寒地水稻耐低氮品種篩選1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了寒地水稻對(duì)氮素營(yíng)養(yǎng)虧缺脅迫的抗性分級(jí)應(yīng)選擇的性狀指標(biāo)、試驗(yàn)方法、 統(tǒng)計(jì)分級(jí)的規(guī)則。本標(biāo)準(zhǔn)適用于北方寒地粳稻種質(zhì)材料對(duì)低氮脅迫抗性的分級(jí)和篩選。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T 1.1-2009標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫(xiě)GB/T 1250-1989?極限數(shù)值的表示方法和判定方法3定義3.1抗氮脅迫指數(shù)氮

3、脅迫處理某一性狀指標(biāo)值占足氮處理?xiàng)l件下該性狀指標(biāo)值的百分比。3.2隸屬函數(shù)值某一品種的某一性狀抗脅迫指數(shù)與所有參試品種該性狀的最小值之差除以所有參試品 種該性狀抗脅迫指數(shù)的極差。4篩選方法4.1 液培法4.1.1 營(yíng)養(yǎng)液配制氮營(yíng)養(yǎng)設(shè)2個(gè)濃度梯度,即正常濃度(1.44mM/L NH4NQ,氮脅迫處理設(shè)置為正常濃 度的1/6,其他營(yíng)養(yǎng)成分參照表 1表3。表1水稻幼苗液體培養(yǎng)缺氮營(yíng)養(yǎng)液配方丿元素營(yíng)養(yǎng)液的兀素濃度(mg/L)使用鹽類(lèi)鹽類(lèi)用量(mg/L)N0NH4NO30P10NaH2PO4辺H2O50.4K40K2SO489.3Ca57.1CaCb158.2Mg40MgSO4?7H2O405表2水稻幼

4、苗液體培養(yǎng)缺氮微量元素儲(chǔ)備液配方丿元素營(yíng)養(yǎng)液的兀素濃度(mg/L)使用鹽類(lèi)鹽類(lèi)用量(mg/L)Mn0.50MnCl 2?4H2O1500Mo0.05(NH 4)6MO7O24?2H2O74B0.20H3BO3934Zn0.01Zn SO4?7H2O35Cu0.01CuSO4?5H2O31注1:各種鹽分別溶解,再與50ml硫酸混勻,加蒸餾水稀釋至1L。使用時(shí)每4L營(yíng)養(yǎng)液添加微量元素儲(chǔ)備液 5ml。表3水稻幼苗液體培養(yǎng)缺氮其他要素儲(chǔ)備液配方兀素(鹽)營(yíng)養(yǎng)液兀素或鹽濃度 mg/L鹽類(lèi)用量Fe2.24取1L水,其中的大部分水加入7.45gEDTA-Na 2中(不溶),另一部分加入 5.57gFeSO4

5、?7H2O (溶解),然后把EDTA-Na2溶液放在電 爐上加熱至70 C后溶解,再緩緩加入 FeSO4?7H2O 溶液,一邊倒一邊攪,溶液變?yōu)樽攸S色,放入烘箱 70C保溫2小時(shí)。 用時(shí)每L營(yíng)養(yǎng)液需加Fe-EDTA 2.00mlSi56稱56.8g Na2SiO3?9H2O溶于1L水中制成母液, 用時(shí)每升營(yíng)養(yǎng)液加母液1ml。二氰胺(硝化抑制齊U)分子量84.085.89二氰胺5.89g溶于1L水中,制成母液,用時(shí)每升營(yíng)養(yǎng)液加母液1ml。幼苗的準(zhǔn)備水稻種子經(jīng)25%咪鮮胺乳油1500倍液于室溫下浸種催芽,破胸露白后播于盛有石英砂的育苗盤(pán)中,每個(gè)品種的育苗盤(pán)和石英砂重量相等,并且用等量滅菌蒸餾水濕潤(rùn)

6、,保證其生長(zhǎng)條件一致,在晝12h,光照強(qiáng)度為200卩mol/(m2.s ),溫度25C,夜18C的人工氣候室中培 養(yǎng),水稻出苗后幼苗長(zhǎng)到一葉一心時(shí),小心洗去根系附著的沙子,再用蒸餾水沖洗干凈備用。4.1.3 生物培養(yǎng)選取生長(zhǎng)一致的水稻秧苗,分別移于盛有40L的2個(gè)氮濃度梯度營(yíng)養(yǎng)液的黑色玻璃培養(yǎng)槽中(槽的長(zhǎng)70cm,寬38cm,高18cm,裝營(yíng)養(yǎng)液前用酒精滅菌),稻苗固定在打孔的吹塑板 上,每個(gè)槽上40孔,孔間的間距10cm, 1孔1苗,吹塑板漂浮在營(yíng)養(yǎng)液表面。為了防止生理 脫水,在一葉一心時(shí),兩個(gè)氮濃度培養(yǎng)液均使用1/4設(shè)計(jì)強(qiáng)度,二葉一心時(shí),兩個(gè)氮濃度培養(yǎng)液均使用1/2設(shè)計(jì)強(qiáng)度,三葉一心時(shí),兩

7、個(gè)氮濃度培養(yǎng)液均恢復(fù)到設(shè)計(jì)強(qiáng)度,每3d更換營(yíng)養(yǎng)液1次。4.1.4 采樣時(shí)期方法培養(yǎng)40d時(shí),每個(gè)品種處理組合隨機(jī)選取有代表性的樣株最少10株進(jìn)行相關(guān)性狀的調(diào)查。4.1.5 液培法調(diào)查項(xiàng)目單株分蘗數(shù)、單株綠葉數(shù)、株高、葉綠素含量。4.1.6 液培法篩選標(biāo)準(zhǔn)按單株分蘗數(shù)、單株綠葉數(shù)、株高、葉綠素含量這4個(gè)性狀隸屬函數(shù)值的平均值進(jìn)行篩選,平均隸屬函數(shù)值0.3的為抗氮脅迫能力弱,0.50.3之間為中,0.5為強(qiáng)。4.2 土培盆栽法4.2.1 盆栽法育秧將待篩選的不同水稻種質(zhì)材料分別選擇均勻一致的水稻種子經(jīng)自流水沖洗、蒸餾水洗 凈,裝入尼龍網(wǎng)袋,標(biāo)好標(biāo)簽,在1: 2000倍的50%咪錳多可濕性粉劑水溶液

8、中連續(xù)浸種7d,每天攪動(dòng)1-2次,7d后撈出種子,瀝凈水后不清洗,在溫室中直接播于土中進(jìn)行旱育苗,待3葉1心時(shí)備用。4.2.2 盆缽、土壤及施肥處理盆缽選用體積10L以上的陶瓷盆或塑料盆。在土壤肥力中等、 堿解氮含量在130mg/kg以下、pH6.07.5的水稻土上,取其20cm耕作 層土壤,風(fēng)干后過(guò)4mr篩,混拌均勻備用。施肥處理:試驗(yàn)設(shè)不施氮對(duì)照(C K)和施氮200mg/kg 2個(gè)處理水平,重復(fù)8次,氮肥分 三次施入土壤,第一次基肥施入占 40%第二次追肥施入占30%第三次追肥占30%追肥分 別于移栽后10d和40d施入土壤,兩個(gè)處理均以基肥形式施入等量的磷和鉀,其中施磷(P2O5)60

9、 mg/kg,施鉀(K2Q 75 mg/kg。4.2.3 盆栽法移栽及管理標(biāo)準(zhǔn)在秧苗3葉1心時(shí)每個(gè)品種選擇均勻一致的水稻秧苗分別移栽于上述2個(gè)處理的盆缽中,每個(gè)盆單插10株秧苗,10d后剔除最好和最差的幼苗,最后每盆留下6株均勻一致的幼苗。整 個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中,各處理間澆水量及其它管理?xiàng)l件保持一致。4.2.4 盆栽法采樣時(shí)期方法分蘗期:在插秧后19d進(jìn)行,?每個(gè)處理取3次重復(fù)進(jìn)行各性狀指標(biāo)調(diào)查。收獲期:在水稻的完熟期進(jìn)行收獲考種和性狀指標(biāo)的調(diào)查,每個(gè)處理不得少于4次重復(fù)。4.2.5 盆栽法調(diào)查項(xiàng)目分蘗期調(diào)查葉綠素含量、單株分蘗數(shù)、綠葉數(shù)、根干重、莖葉干重、生物產(chǎn)量、硝酸還 原酶活性、轉(zhuǎn)化酶活性、蛋

10、白含量;收獲期調(diào)查稻谷產(chǎn)量、稻草產(chǎn)量,有效穗數(shù),小穗數(shù),穗實(shí)粒數(shù),千粒重,谷草比。4.2.6 盆栽法篩選標(biāo)準(zhǔn)分蘗期(插秧后19d,按葉綠素含量、單株分蘗數(shù)、綠葉數(shù)、根干重、莖葉干重、生物 產(chǎn)量、硝酸還原酶活性、轉(zhuǎn)化酶活性、蛋白含量這9個(gè)性狀指標(biāo)隸屬函數(shù)值的平均值進(jìn)行篩選;在收獲期按稻谷產(chǎn)量、稻草產(chǎn)量,有效穗數(shù),小穗數(shù),穗實(shí)粒數(shù),千粒重,谷草比這7個(gè)性狀隸屬函數(shù)值的平均值進(jìn)行篩選,分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)同。4.3 本田小區(qū)法4.3.1 試驗(yàn)田準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)選擇地勢(shì)平坦、均一、土壤肥力中等,土壤堿解氮含量在130mg/kg以下,靠近排灌渠或上水頭的地塊,在試驗(yàn)的前1年須勻地種植水稻1年,各小區(qū)間的產(chǎn)量變異系數(shù)CV < 10%。4.3.2 小區(qū)設(shè)置及施肥小區(qū)設(shè)置:小區(qū)長(zhǎng)5m,寬1.2m,區(qū)內(nèi)設(shè)置插植行4行。試驗(yàn)田四周均設(shè)2m以上保護(hù)區(qū)。保 護(hù)行的品種為當(dāng)?shù)赝茝V品種。施肥:試驗(yàn)設(shè)施氮肥和無(wú)氮兩個(gè)處理,氮肥用量按氮(N) :200 kg/hm2,分別在泡田耙地時(shí)施入40%插秧后10d施入30%插秧后40d施入20%抽穗后10% 兩個(gè)處理均以磷(P2O5): 60 kg/hm2?,鉀(K2O):75 kg/hm2為底肥,在泡田耙地時(shí)施入。4.3.3 本田法育秧及移栽育秧:同。移栽:秧苗3葉1心期移栽到上述2種不同的施氮處理地塊中,插秧密度按照14cm X 30cm,每穴1株,整個(gè)試驗(yàn)

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