液相色譜儀的維護與常見故障

1、液相色譜儀的日常維護液相色譜儀的日常維護與常見故障排除與常見故障排除一 液相色譜儀的 日常維護儲液器和流動相 使用HPLC試劑做流動相，用前最好過0.45m 膜,除去微粒物質(zhì);更換流動相時, 應徹底清洗儲液器，防止交叉污染，更換不互溶流動相時，選擇好中間試劑。 流動相務必要脫氣，否則出現(xiàn)氣泡，引起輸液不暢，使噪聲漂移增大，影響檢測限。 儲液器和流動相 流動相的溫度不要與室溫相差太大，否則會產(chǎn)生氣泡，導致基線漂移不穩(wěn)。 使用緩沖鹽溶液做流動相時，最好現(xiàn)用現(xiàn)配，用前過濾，避免在陽光下暴曬。 定期清潔儲液器及附件，防止長微生物堵塞吸濾器。輸液泵 泵壓力不要太高,要適當調(diào)整壓力,一般壓力上限在10-2

2、0MPa，下限為0.5MPa，注意防止因泵堵塞造成壓力過高損壞柱塞桿或燒壞電機。 密封墊易損壞引起故障，每天實驗結束一定要認真沖洗泵,注意防止堵塞,使用緩沖鹽流動相時,更要小心。進樣器 樣品溶液進樣前應該用0.45m膜過濾，減少顆粒對進樣閥的磨損； 轉(zhuǎn)動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動相受阻，會使泵壓劇增，再轉(zhuǎn)到進樣位置時，過高的壓力會使柱頭受損； 進樣器 停機前一定沖洗干凈進樣器內(nèi)殘留的樣品或緩沖鹽，防止樣品和無機鹽沉積造成進樣閥轉(zhuǎn)子面磨損或堵塞。 注射器最好使用儀器自配尖頭、平頭針，不要用其它儀器的。進樣器 自動進樣器的清洗液，最好使用與流動相相同的溶液，若含鹽分，要出去鹽分

3、； 清洗液最好也脫氣使用，清洗液也要經(jīng)常更換，避免出現(xiàn)氣泡和沉淀。柱防止柱性能下降 1 溶劑的化學腐蝕性不能太強； 2 避免顆粒物在柱頭沉降； 3 柱壓不能太高，防止沖擊太 大； 4 流動相pH值小于7時，最好用 大粒度同種填料的予柱； 柱防止柱性能下降 5 柱頭加濾片（燒結不銹鋼), 需 要時加保護柱； 6 經(jīng)常用不同的溶劑清洗柱； 7 長時間不用時要保存好,一定要洗去緩沖鹽,加入大于10%有機溶劑，將柱兩端擰緊,保持柱填料濕潤。檢測器 保持檢測器清潔非常重要，每天用后與色譜柱一起反復清洗； 不定期用強溶劑反向沖洗檢測器； 沖洗時使用脫過氣的流動相，防止氣泡滯留在池內(nèi)； 檢測器光源（燈）有一

4、定壽命，不用時可以不開燈。記錄器數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 記錄儀: 熱敏式打印頭要注意記錄紙的質(zhì)量,開機前注意檢查走紙部件,不要卡紙. 色譜工作站: 防止網(wǎng)上病毒損壞軟件.二 常見故障的排除1、儲液器和流動相1） 噪聲大，出毛刺-脫氣不充分 超聲脫氣, 真空脫氣, 用He脫氣, 加熱回餾脫氣,(混合流動相不宜)1、儲液器2）流動相供給不暢，泵壓力不穩(wěn) 流動相接近用完 過濾器堵塞（有顆粒，長霉） 流速過高,阻力大,造成空化現(xiàn)象.解決的辦法是:降低流速;換大孔過濾器;加大管路內(nèi)徑;抬高儲液器.1、儲液器和流動相3）產(chǎn)生有規(guī)則的噪聲；基線上升，梯度洗脫出鬼峰；原因:儲液器或流動相被污染； 溶劑質(zhì)量差（含雜質(zhì)多）

5、； 配制流動相的玻璃器皿不清潔,有微 生物影響； 配制流動相的操作不當（過濾、脫 氣、攪拌)。2、輸液泵1）單向閥 a.球和閥座粘在一起，堵死，打不出溶劑，(特別是緩沖鹽流動相) 用高質(zhì)量（純度高、脫過氣）的不同極性的溶劑沖洗,如水、甲醇、異丙醇、二氯甲烷； 更換新單向閥。2、輸液泵 b.球和閥座密封不嚴，壓力不穩(wěn)，氣泡進入閥中，緊貼在閥體內(nèi)，使球難以返回閥座，引起倒流，壓力和流速變化大，可能有小晶體顆粒。 清除氣泡的辦法：打開排液閥，大流量沖洗，用脫過氣的甲醇沖洗，一般可解決問題。2、輸液泵2）泵墊圈磨損或破碎，高壓下壓力不穩(wěn)，從泵頭往外滲漏流動相，色譜峰的保留時間會改變。 解決辦法：更換新

6、墊圈。更換方法按維修說明書上的方法一步步操作。2、輸液泵注意： 輸液泵的墊圈要和流動相匹配協(xié)調(diào)。多數(shù)墊圈和流動相是協(xié)調(diào)的,但有的墊圈適用于甲醇、水、乙腈，在四氫呋喃中溶解、變粘、變軟。 需換墊圈時,應向廠商咨詢墊圈的規(guī)格型號。 色譜工作者一般應學會換密封墊圈。2、輸液泵3）柱塞桿故障 長期使用柱塞桿被磨損，漏液； 因使用不當被折斷； 柱塞桿被卡住，不能運動。 解決的辦法是更換新柱塞桿 請維修工程師幫助解決，或參照專門的操作手冊自己動手更換。3、進樣系統(tǒng)a. 滲漏 轉(zhuǎn)子密封墊圈松緊不合適； 墊圈不配套； 組裝不對。 手動進樣系統(tǒng)器3、進樣系統(tǒng) b. 堵塞, 樣品打不進去。 樣品管堵塞：環(huán)管用反沖

7、法或超 聲清洗排除（或換新管). 手動進樣系統(tǒng)3、進樣系統(tǒng)c. 注樣孔問題 1) 裝樣時針頭周圍滲漏：孔道堵塞，或者放空管和樣品管太細，阻力太大；針頭密封管規(guī)格不對，針頭太細。 手動進樣系統(tǒng)3、進樣系統(tǒng)c. 注樣孔問題 2)注射孔滲漏：放空管有虹吸現(xiàn)象，轉(zhuǎn)子密封面上孔之間有磨損。為防止虹吸,放空管末端應在放空 瓶液面以上,更換磨損的轉(zhuǎn)子. 手動進樣系統(tǒng)3、進樣系統(tǒng)c. 注樣孔問題 3)樣品滯留 閥在進樣位置停留時間不夠。 要求停留時間至少應讓流動相流過的體積是環(huán)體積的10-20倍。 (一般是在下一針進樣前才將閥扳到裝樣位置) 手動進樣系統(tǒng)3、進樣系統(tǒng)3)樣品滯留殘留樣品留在樣品環(huán)中或注射器中，

8、或從放空管中虹吸回來,污染下一個樣品.此時可用5-10倍的流動相或新樣品沖洗注射孔和注射器,若是虹吸,應加限制管。手動進樣系統(tǒng)3、進樣系統(tǒng)3)樣品滯留 管路接頭有死體積滯留樣品，很難沖洗干凈,此時應檢查裝配情況，確定是否需換新配件。手動進樣系統(tǒng)3、進樣系統(tǒng)a. 樣品瓶不配套 瓶小針彎、折斷 瓶大樣品少，抽不上樣 瓶破碎 更換合適的樣品瓶。 自動進樣系統(tǒng)3、進樣系統(tǒng)b. 更換樣品瓶隔墊，防止污染。c. 進樣器針頭堵塞（樣品、緩沖 鹽、隔墊碎片、針頭本身)， 可用溶劑清洗，金屬絲疏通， 或換新針頭。 自動進樣系統(tǒng)3、進樣系統(tǒng)d. 樣品滯留：空白溶劑出色譜峰. 加倍清洗，或調(diào)整樣品瓶順序，（從低濃度

9、開始，高濃度放后 面）或在樣品瓶前放清洗液瓶. 自動進樣系統(tǒng)4、色譜柱 1)塔板數(shù)下降 a.樣品處理不合適，選擇適當?shù)臉悠穬艋椒?，選擇合適流動相。 b.柱頭塌陷，填裝修補。 4、色譜柱2)峰形變壞，出現(xiàn)拖尾峰，分叉峰，非高斯峰, 與塔板數(shù)下降有關;峰形壞保留時間不變 可能是柱堵塞(篩板堵塞、緩沖鹽析出、強保留物累積)，或柱頭有空穴。 緩沖鹽、離子對試劑，可用甲醇-水沖洗， 強保留物累積，可用甲醇-乙腈沖洗， 篩板堵塞，可用甲醇-水反沖，更換篩板。4、色譜柱 3)柱壓突然增大 樣品沉積在柱內(nèi),用能溶解樣品的 溶劑沖洗（將檢測器和柱斷開）可正 向沖，反向沖。 柱內(nèi)硬件有問題：濾片堵塞，換新濾片;

10、柱頭塌陷,用相同填料填充、修補。4、色譜柱 4)保留時間改變 不同柱保留時間的變化,主要是填料差異造成的,不同牌號柱出峰順序不變，保留時間有小的變化。 若峰順序變化，保留時間變化較大，應考慮換柱或優(yōu)化分離條件。 對專門的分析最好用同一批號的柱子。由色譜柱引起的故障故故 障障現(xiàn)現(xiàn) 象象解決辦法解決辦法過濾片堵塞過濾片堵塞 壓力增高、壓力增高、N下下 降、峰形差降、峰形差倒柱沖洗或換過濾倒柱沖洗或換過濾片片柱頭塌陷柱頭塌陷峰分叉、峰分叉、N下降下降修補柱頭修補柱頭健合相流失健合相流失保留值改變、峰形保留值改變、峰形差、差、N下降下降換柱換柱樣品堵塞樣品堵塞壓力高壓力高用能溶解樣品的溶用能溶解樣品的

11、溶劑沖洗劑沖洗強吸收樣品強吸收樣品 N下降、保留值小下降、保留值小強溶劑反沖強溶劑反沖5、檢測器a. 基線噪聲大,靈敏度低, 燈（光源）的故障； 氘燈壽命:1000h 汞燈和鎢燈壽命:2000h 一般使用6個月以上可能接近壽命期限,可以考慮更換新燈. 紫外可見光檢測器5、檢測器b. 流動池內(nèi)有氣泡 用脫氣甲醇，不同流量沖洗。c. 池堵塞（入口、出口、池內(nèi)） 用可溶堵塞物的溶劑沖洗（緩沖鹽用水沖洗),d. 池污染 用異丙醇、二氯甲烷、 6mol/L HNO3 沖洗. 紫外可見光檢測器5、檢測器e.測量池和參比池失配 UV以空氣為參比，一般不扣流動相 本底，若用有紫外吸收的流動相， 參比信號不為零

12、，會出現(xiàn)倒峰和偽 峰,此時，選擇合適的流動相。 紫外可見光檢測器5、檢測器f.時間常數(shù)選擇(過濾噪聲） 有的儀器有固定的時間常數(shù)，有的需設置時間常數(shù)。時間常數(shù)太小, 噪聲增大;時間常數(shù)太大,出現(xiàn)寬峰、拖尾或矮峰。 時間常數(shù)的設置一般根據(jù)經(jīng)驗估計，小顆粒柱常數(shù)小，可選最窄峰寬的1/10作為時間常數(shù),對4.6(150-250)mm，5um柱，可選0.5s or1s 紫外可見光檢測器5 檢測器 紫外可見光檢測器 g.非線性響應 樣品量太大,超出線性范圍； 檢測器的衰減超出了其線性動力學范圍； 流動相的紫外吸收比較強。 5 檢測器 溫度影響 環(huán)境溫度變化引起基線漂移。 溫度變化引起流動相折射率改 變，紫外光傳導變化。 柱溫變化引起基線漂移。5 檢測器 信號線故障 記錄儀和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)信號線插接不緊,接觸不良，信號很弱，出現(xiàn)不需要的噪音,此時按說明書檢查線路連接。 地線對儀器很重要