檢驗操作規(guī)程

1、目錄目錄 第一節(jié) 環(huán)氧乙烷殘留量分析方法 第二節(jié) 持粘性檢驗操作規(guī)范 第三節(jié) 剝離強度檢驗操作規(guī)范 第四節(jié) 無菌檢驗操作規(guī)程第五節(jié) pH 值測定操作規(guī)程 . 第六節(jié)電導率檢查法操作規(guī)程第七節(jié)酸堿度試驗方法第八節(jié)蒸發(fā)殘渣試驗方法第九節(jié)沉降菌檢測方法第十節(jié)敷料中甲殼素含量測定第十一節(jié) 醫(yī)用高分子夾板檢測項目及操作步驟151822242528293030第十二節(jié) 純化水檢測附錄：原材料及產(chǎn)品的檢驗規(guī)程第一節(jié) 環(huán)氧乙烷殘留量分析方法一、比色分析1 、原理 ： 環(huán)氧乙烷在酸性條件下水解成乙二醇，乙二醇經(jīng)高碘酸氧化生成 甲醛，甲醛與品紅一亞硫酸試液反應產(chǎn)生紫紅色化合物，通過比色分析可求得 環(huán)氧乙烷的含量。

2、2、試劑的配制0. Imol/L 鹽酸：取9m1鹽酸稀釋至1000m1無水亞硫酸鈉，溶解后稀釋至 100m1。品紅，加入120 m1熱水溶解，冷卻后加入置于暗處。試液應無色，若發(fā)現(xiàn)有微紅色，0. 5% 高碘酸溶液 ： 稱取高碘酸 0. 5g 稀釋至 100m1。 硫代硫酸鈉溶液：稱取硫代硫酸鈉1g,釋至100m1a 10%亞硫酸鈉溶液 ： 稱取 10. 0g 品紅一亞硫酸試液 ： 稱取 0. 1 g10%亞硫酸鈉溶液20m1,鹽酸2m1,應重新配制。乙二醇標準貯備液：取一外部干燥、清潔的50m1容量瓶，加水約30m1,精 確稱重。移取 0. 5m1 乙二醇，迅速加入瓶中，搖勻，精密稱取重量。兩

3、次稱重 之差即為溶液年所含乙二醇的重量，加水至刻度，混勻，按式計算其濃度 ：C=(W/50)X 1000式中:C乙二醇標準貯備液濃度，g/L W 溶液中乙二醇重量， g乙二醇標準溶液(濃度C1=C X 10-3:精確移取標準貯備液1. OmI， 用水稀釋至 1000m1。3 、試液制備 試液制備應在取樣后立即進行，否則應將試樣封存?zhèn)溆?。將樣品截?mn長碎塊，稱取2. 0g置于具塞的玻璃容器中，加入 0. Imol/L鹽酸10m1密塞，室溫放置1小時。4 、試驗步驟 ：a 、標準曲線的制備 ： 取五支納氏比色管，精密加入 0. lmol/L 鹽酸 2m1，再精確加入 0.5m1, 1.0 ml

4、, 1.5 ml, 2.0 ml. 2.5 ml、乙二醇標準溶液。另一支納氏比色管，精確加入 0. lmol/L 鹽酸 2 ml 作為空白對照。于上述各管中分加盟加入 0. 5%高碘酸溶液 0. 4 ml ，放置 1 小時。然而， 分別滴加硫代硫酸鈉溶液至出現(xiàn)的黃色恰好消失。再分別加入品紅一亞硫酸試 液0. 2m1，用蒸餾水稀釋至lOmI，室溫放置1小時，于560nm波長處以空白液 作為參比，測定吸光度。繪制吸光度一體積標準曲線。b 、樣品測定 : 精確移取試液 2. Oml 于納氏比色管中，按標準曲線項下方 法同法試驗，以測得吸光度并從標準曲線上查得試液相應的體積。5 、結果計算環(huán)氧乙烷殘留

5、量用絕對含量或相對含量表示。按下式計算樣品中環(huán)氧乙烷的絕對含量 :E0=1.775 vl.cl.m式中WO單位產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷絕對含量， mg（即每個樣品中乙二醇的含量）V1Cl標準曲線上找出的試液相應的體積， mI 乙二醇標準溶液濃度， g/L 一單位產(chǎn)品的質量， g.按下式計算樣品中環(huán)氧乙烷的相含量 :E0=1.775 vl.cl.mEO單位產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷相對含量，mg/kgV1Cl標準曲線上找出的試液相應的體積， ml乙二醇標準溶液濃度， g/Lo第二節(jié) 持粘性檢驗操作規(guī)范1. 目的2. 范圍3. 責任規(guī)范持粘性檢驗的操作標準。 適用于本公司生產(chǎn)的無菌敷料貼類產(chǎn)品出廠檢驗。 技術質量部QC

6、負責實施。4. 內容1）使用儀器： 高溫老化試驗箱 不銹鋼板 滾子 儀器狀態(tài)：工作正常2)試驗方法：2.124h。試驗前將粘貼膠帶卷或粘貼膠帶片進行狀態(tài)調節(jié)2.1.1 對于條狀試樣，試驗前將粘貼膠帶卷以約 30cm/s 的速度展開，裁 取60mn長的試片后立即試驗。如果供試材料寬度大于 25mm則在25mn的試樣寬度上進行 ;2.1.2 對于片狀試樣，試驗前去除保護物，裁取相應尺寸的試樣后立即進 行試驗 ;2.1.3 試驗期間注意不弄臟粘貼表面。2.2 將備好的試樣一端粘貼與不銹鋼板的清潔表面接觸，使試樣的端部的整個寬度與距鋼板端面25mm處對齊，使試樣兩邊平等于鋼板的長邊,試樣未粘 貼端懸于

7、鋼板該端面以外。注：粘貼試樣時，要確保試樣與鋼板之間沒有氣泡。2.3用滾子向試樣粘貼部分施加壓力，以約 60cm/min 的速度沿試樣長 度方向滾壓四次，并使其在標準大氣壓下停放 10min。2.4在試樣端線部做一標記線，在試樣的懸掛端按每厘米0.8N（ 80g）貼一重物，施力要均勻分布與整個帶寬上。2.5 將鋼板懸掛于36C38C熱空氣烘箱內30min,使鋼板與垂直呈2 傾斜。以防止試樣與鋼板剝離，并能使重物懸掛。對另外 4 個試樣重復這一步驟。2.6 對于彈性很大的產(chǎn)品，在所施加的重力與試樣之間貼一段相同寬度的 無伸展性的粘貼帶。2.7如果供試材料的寬度是25mm需在試樣上貼一段非彈性的粘

8、貼膠帶 （長約60mm寬度與試樣相同），使膠帶的未粘貼部分懸掛于不銹鋼板的端 部，使其懸掛生物時受力均勻。檢測結果:編號項目12345678不合格數(shù)持粘性標準要求。單項結論：經(jīng)檢測第三節(jié) 剝離強度檢驗操作規(guī)范1. 目的2. 范圍3. 責任規(guī)范剝離強度檢驗的操作標準。 適用于本公司生產(chǎn)的無菌敷料貼類產(chǎn)品出廠檢驗。 技術質量部QC負責實施。4. 內容1)使用儀器：數(shù)顯拉力計 高溫老化試驗箱 不銹鋼板 滾子 儀器狀態(tài)：工作正常2)試驗方法：2.124h。試驗前將粘貼膠帶卷或粘貼膠帶片進行狀態(tài)調節(jié)2.1.1 對于條狀試樣，試驗前將粘貼膠帶卷以約 30cm/s 的速度展開，裁 取400mn長的試片后立即

9、試驗。如果供試材料寬度不足25mm則用整個寬度。如果供試材料寬度大于25mm則在25mm勺試樣寬度上進行；2.1.2 對于片狀試樣，試驗前去除保護物，裁取相應尺寸的試樣后立即進 行試驗 ；2.1.3 試驗期間注意不弄臟粘貼表面。2.2 將試樣貼于不銹鋼板的清潔表面的中央，使試樣的兩邊平行于鋼板的 兩個長邊。2.3用滾子向試樣粘貼部分施加壓力，以約 60cm/min 的速度沿試樣長 度方向滾壓四次，并使其在標準大氣壓下停放10min。2.4 用力值讀數(shù)在滿量程的 15%至 85%之間的適宜的測力儀器，測定從鋼板剝離試樣所需的力(施加角為 180,剝離速度為270mm/min-330mm/min。

10、2.5觀測第一個25mn長度處施加的作用力，每30mn觀測一次作用力，取 六個讀數(shù)的平均值。2.6 對另外 4 個試樣重復進行試驗，計算 5 個試樣的平均值。檢測結果:單位N項目12345第一次計數(shù)第二次計數(shù)第三次計數(shù)第四次計數(shù)第五次計數(shù)第六次計數(shù)剝離強度（寬1cm剝離強度（寬1cm修約值不合格數(shù)單項結論：經(jīng)檢測標準要求。1目的第四節(jié) 無菌檢驗操作規(guī)程通過無菌檢驗，確保滅菌后產(chǎn)品能夠達到無菌的要求。適用范圍適用于滅菌后醫(yī)療器械產(chǎn)品的無菌檢驗。檢驗依據(jù)本廠企業(yè)注冊標準中國藥典 二部（ 2010年版）GB14233.2-2005 醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗方法 第 2 部分：生物學 試驗方法4

11、儀器、設備百級層流超凈工作臺、電熱干燥箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、壓力蒸汽滅菌器、集菌儀（器）、電子天平、PH計、冰箱、恒溫水浴鍋、酒精燈、三角燒瓶，接種環(huán)、無菌棉簽、鑷子，試管架，大試管若干等。5 無菌檢驗室的環(huán)境要求5.1 無菌檢驗應在環(huán)境潔凈度 10000 級下的局部百級的單向流空氣區(qū)域內 進行。5.2 緩沖區(qū)與外界環(huán)境、無菌檢驗室與緩沖區(qū)之間空氣應保持正壓，陽性 對照室與緩沖區(qū)之間空氣應保持負壓。無菌檢驗室與室外大氣之間靜壓差應大 于10Pa。無菌檢驗室的室溫應保持 1826 C,相對濕度：4565%5.3 無菌檢驗室的單向流空氣區(qū)、工作臺面及環(huán)境應定期按醫(yī)藥工業(yè)潔 凈室（區(qū)）懸浮

12、粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法的現(xiàn)行國家標準進行懸浮 粒子、沉降菌的監(jiān)測。每季度至少檢測一次。5.4 無菌檢驗過程中應同時檢查超凈工作臺單向流空氣中的菌落數(shù)：每次 操作時在層流空氣所及臺面的左中右置 3個營養(yǎng)瓊脂平板，暴露30min,于 3035C培養(yǎng)48小時，菌落數(shù)平均應不超過1CFU平板。6 無菌檢驗前的準備6.1 器具滅菌、消毒6.1.1 滅菌：試驗過程中與供試品接觸的所有器具必須采用可靠方法滅 菌?？山?jīng)電熱干燥箱180C以上干烤2小時，或置壓力蒸汽滅菌器內121C蒸汽滅菌 30 分鐘后使用（根據(jù)滅菌效果驗證決定滅菌參數(shù)）。所有的滅菌物品不應 超過 2 周即用畢，否則應重新滅菌。6.1.

13、2 消毒：凡檢驗中使用的器材無法滅菌處理的，使用前必須經(jīng)消毒處 理。如無菌檢驗室的試管架、電子天平、工作臺面、工作人員的手、橡膠吸頭 等?？刹捎孟緞┙莼虿潦?。消毒劑應每月更換，以防止產(chǎn)生耐藥菌株。6.1.3 標識：器具的滅菌、消毒后必須做好標識，標明滅菌、消毒時間和 使用有效期。6.2 人員、物料進入無菌檢驗室6.2.1 開啟紫外線燈或臭氧發(fā)生器進行空間滅菌處理，消毒時間不得少于30min。6.2.2 物料進入無菌檢驗室流程6.2.2.1 脫包：進入無菌檢驗室的物品若有雙重包裝的，需將外包裝在傳 遞窗/ 緩沖間拆除后，傳入試驗室。6.2.2.2 消毒：進入無菌操作室的所有培養(yǎng)基、供試品等的

14、外表都應采用 適用的方法進行消毒處理，以避免將外包裝污染的微生物帶入無菌檢驗室。6.2.2.3 傳遞：查看所有進入無菌檢驗室的器具上的滅菌、消毒標識，是 否在有效期內。符合要求的經(jīng)傳遞窗傳入無菌檢驗室。6.2.3 人員進入無菌檢驗室流程6.2.3.1 更鞋脫衣：在一更區(qū)脫去一般區(qū)工作鞋，穿上無菌檢驗室工作 鞋；脫去一般區(qū)工作服。6.2.3.2 洗手：首先用肥皂或洗手液在手上揉擦出泡沫，再用流水連續(xù)沖 洗 20 秒，洗凈泡沫。6.2.3.3 更衣：在二更區(qū)按照從上到下的順序穿戴無菌工作服（包括衣、 帽、口罩等），要求褲子掖在上衣里，口罩掩住口鼻，帽子包裹所有頭發(fā)。6.2.3.4 手消毒：用消毒液

15、浸泡雙手 5 秒以上或用浸過消毒液的棉球擦拭 雙手。消毒液可用洗必泰、新潔爾滅、碘伏、 75%酒精等。6.2.3.5 人員進入：經(jīng)緩沖間進入無菌檢驗室。6.2.4 人員進入無菌檢驗室后，進一步用消毒液擦拭工作臺面，戴無菌手 套。7 無菌檢驗操作要求7.1 全過程必須嚴格執(zhí)行無菌操作，防止微生物污染。7.2 使用玻璃器皿應輕取輕放，避免破損，以防培養(yǎng)物擴散。7.3 所有操作均應在近火焰區(qū)進行，且不得有大幅度或快速動作，以免攪 動空氣中的塵埃微粒。7.47.5使用金屬接種器具時，用前、用后均需灼燒滅菌。 在接種培養(yǎng)物時，動作應輕、準，防止培養(yǎng)物濺出，產(chǎn)生汽溶膠，造 成污染。7.6操作過程中所有的帶

16、菌物品，用后均應作消毒、滅菌處理。可在檢驗 過程中隨用隨時放入消毒液缸內浸泡或消毒桶內，或在檢驗完成后經(jīng)傳遞窗傳 至一般區(qū)，立即用壓力蒸汽滅菌鍋121 E滅菌30分鐘。8 培養(yǎng)基制備8.1 需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基（硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基）的制備8.1.1 所用試劑酪胨（胰酶水解） 15.0g 葡萄糖 5.0gL- 胱氨酸 0.5g硫乙醇酸鈉 0.5g （或硫乙醇酸）（ 0.3ml ） 酵母浸出粉 5.0g氯化鈉 2.5g新配制的 0.1%刃天青溶液 1.0ml瓊脂 0.75g 水 1000mlpH為弱堿0.2。1/5 ，否剛8.1.2 制備 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微溫溶解，調節(jié)性

17、，煮沸，濾清，加入葡萄糖和刃天青溶液，搖勻，調節(jié)pH為7.18.1.3 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)劑氧化層的顏色要求 在供試品接種前，培養(yǎng)基氧化層的高度不得超過培養(yǎng)基深度的需經(jīng)100C水浴加熱到粉紅色消失（不超過 20分鐘）迅速冷卻，只限加熱一 次，并應防止被污染。8.2 霉菌培養(yǎng)基（改良馬丁培養(yǎng)基）的制備8.2.1 所用試劑 胨 5.0g 酵母浸出粉 2.0g 葡萄糖 20.0g 磷酸二氫鉀 1.0g 硫酸鎂 0.5g水 1000 m8.2.2 制備除葡萄糖外，取上述成分混和，微溫溶解，調節(jié)pH值約為6.8，煮沸，加葡萄糖溶解后，搖勻，濾清，調節(jié) pH為6.4 0.2。8.3 還可使用按處方生產(chǎn)的符

18、合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基，按照使用說明書配制。8.4 培養(yǎng)基配制后應盡快滅菌，避免微生物繁殖。一般采用高壓蒸汽121 r滅菌30分鐘。8.5制備好的培養(yǎng)基應在225C保存，在3周內使用。8.6 培養(yǎng)基的無菌性檢查 每批配制的培養(yǎng)基均應進行無菌性檢查（可與產(chǎn)品無菌檢驗同步進行）。檢查時，每批培養(yǎng)基隨機取不少于 5支（瓶）培養(yǎng) 14天，應無菌生長。9 稀釋液、沖洗液的制備9.1 0.1% 蛋白胨水溶液取蛋白胨1.0g，加水1000ml，微溫溶解，濾清，分裝后置入壓力蒸汽滅菌 器內，12ir滅菌30分鐘后，于4C保存?zhèn)溆?分裝后置入壓力蒸汽滅菌器 內，12ir滅菌30分鐘后，于4C保存?zhèn)溆?.2 pH7.

19、0 氯化鈉-蛋白胨緩沖液取磷酸二氫鉀3.56g、磷酸氫二鉀7.23g、氯化鈉4.30g、蛋白胨1.0g，加 水1000ml。微溫溶解，濾清，分裝后置入壓力蒸汽滅菌器內， 121 r滅菌30分 鐘后，于4 r保存?zhèn)溆谩?.3 浸提介質： 9g/L 無菌氯化鈉溶液，可直接從有證單位采購大輸液。10 對照菌液制備10.1 無菌檢驗所用的菌株傳代次數(shù)不得超過 5代。10.2 取金黃色葡萄球的普通瓊脂斜面培養(yǎng)物，接種一白金耳至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基內，在3035C培養(yǎng)1824h后備用，同時制備0.9%氯化鈉溶液加入在6 支小試管內，每支試管內加9.0ml的0.9%氯化鈉溶液，在壓力鍋內經(jīng)121C滅 菌30min

20、備用。將已配好的金黃色葡萄球菌培養(yǎng)菌液取 1.0ml加入第一支小試管內，稀釋成濃度 1:10 的菌液；取第一支試管內 1.0m l 菌液加入第二支小試 管內，稀釋成濃度1:100的菌液，同法稀釋成濃度1:106 （每ml含菌量W100CFU 即可）。10.3 采用平皿計數(shù)法測定活菌數(shù)。11 無菌檢驗培養(yǎng)溫度硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，置 3035C培養(yǎng)。 改良馬丁培養(yǎng)基，置2328C培養(yǎng)。12 無菌檢驗12.1 如產(chǎn)品注冊標準中明確“產(chǎn)品應經(jīng)過一個確認過的滅菌過程”，則執(zhí) 行 12.1 項下各項。12.1.1 放樣每個滅菌批次按已驗證的滅菌工藝，在滅菌柜內相應的位置放置適量菌 片，滅菌后對菌片進行無

21、菌檢驗。12.1.2 菌片貯存滅菌前、后菌片應按菌片說明書規(guī)定條件保存。（REVE公司菌貯存溫度 為 15 27C)12.1.3 接種開啟超凈工作臺單向層流，在此環(huán)境下，分別將滅菌后的菌片成對放入已 滅菌的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中。同時以未滅菌的菌片作陽性對照，以未接種 的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和未接種的改良馬丁培養(yǎng)基作為陰性對照。12.1.4 培養(yǎng)陽性對照管于3035C細菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)4872小時。其余硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基于 3035C培養(yǎng)7天。改良馬丁培養(yǎng)基于2328 C培養(yǎng)7天。12.1.5 結果判定培養(yǎng)后，陽性對照應有菌生長，陰性對照和被檢樣品未見需氣菌、厭氣菌 和霉菌生長的為合格。12.2

22、 如產(chǎn)品注冊標準中明確產(chǎn)品應進行無菌檢驗，則執(zhí)行 12.2.112.2.5 。12.2.1 抽樣 根據(jù)各自的產(chǎn)品注冊標準和相應產(chǎn)品出廠檢驗規(guī)程的規(guī)定，對成品庫內的產(chǎn)品進行抽樣。一般同一個滅菌批產(chǎn)品檢驗311個單位供試品。12.2.2 供試液準備優(yōu)先采用將供試品或其有代表性的各部分直接投放入培養(yǎng)基內培養(yǎng)的方 法，如供試品不適宜直接投放，可按下列方法制備供試液，應使浸提介質充分 洗提供試品的浸提表面，供試液制備應按無菌操作法進行，在制備后 2小時內 使用。根據(jù)供試品具體特性選擇下列方法：a）管類器具：按管內表面積每10cm2流過管內腔1ml浸提介質，流量約為 10ml/min ，收集到無菌的容器內

23、。b）容器類器具：按容器內表面積每10cm2加入浸提介質1ml的比例，振搖 數(shù)次。c）實體類器具：實體類器具按表面及每 10cm2加入浸提介質1ml，振搖數(shù) 次。收集上述沖洗液或浸提介質于無菌容器中。12.2.3 接種12.2.3.1 薄膜過濾法：優(yōu)先采用封閉式薄膜過濾器（集菌器），也可使用 開放式薄膜過濾器。濾膜孔經(jīng)不大于 0.45卩m。濾器和濾膜使用前應采用適宜的方法滅菌，或直接采用無菌集菌器。a、如采用封閉式薄膜過濾器，取一副三聯(lián)式集菌器，將供試液通過集菌儀過濾，使通過每只培養(yǎng)管的量基本均勻。然后通過集菌儀一只加120ml改良馬丁培養(yǎng)基，另兩只分別加入120ml硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基（其中一只

24、做陽性對照，內加金黃色葡萄球菌液1ml）。另取一副二聯(lián)集菌器，用同批的沖洗液或浸提 介質120ml通過集菌儀過濾（每只約50ml），同法一只加硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基 120ml，另一只加改良馬丁培養(yǎng)基120ml分別作陰性對照。b、 如用一般薄膜過濾器，將供試液過濾后取出濾膜，將其剪成3等份，分 別置于含 50ml 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基的容器中，其中兩份作 檢驗，一份作陽性對照。12.2.3.2 直接接種法：適用于一次性使用的各種無菌敷料產(chǎn)品。a、敷料供試品：取規(guī)定數(shù)量，每個包裝以無菌操作拆開，于不同部位剪取約120mg或1cmx 3cm的供試品，接種于各管足以浸沒供試品的適量培養(yǎng)基中

25、。b、無菌小型器具：直接投入含15ml以上硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬 丁培養(yǎng)基的容器中。C、一次性使用的材料：拆散或切成小碎斷，接種于各管足以浸沒供試品的 適量培養(yǎng)基中。供試品按規(guī)定量分別接種至各含硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基 的容器中，其中一份作陽性對照。 每個容器中培養(yǎng)基的用量應符合：接種的供試品體積不得大于培養(yǎng)基體積 的 10%，或培養(yǎng)基的裝量足以浸沒供試品。每管培養(yǎng)基的最低用量硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基每管裝量不少于 15ml， 改良馬丁培養(yǎng)基每管裝量不少于 10 ml.12.2.4 培養(yǎng)、觀察上述含培養(yǎng)基的容器分別置規(guī)定溫度的恒溫培養(yǎng)箱中，除陽性對照管培養(yǎng)4872小時外，其余管培

26、養(yǎng)14天。培養(yǎng)期間應逐日觀察并記錄是否有菌生 長。如在加入供試品后、或在培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁，培養(yǎng) 14天后，不 能從外觀上判斷有無微生物生產(chǎn)，可取該培養(yǎng)液適量轉種至同種新鮮培養(yǎng)基中 或劃線接種于斜面培養(yǎng)基上，細菌培養(yǎng) 2 天，真菌培養(yǎng) 3 天，觀察是否再出現(xiàn) 渾濁或斜面有無菌生長；或取培養(yǎng)液涂片，染色，鏡檢，判斷是否有菌。12.2.5 結果判斷 培養(yǎng)結束后，陽性對照管應有菌生長，陰性對管應澄清。否則，就判結果 無效。所有供試品管均澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確證無菌生長，判供試品符合規(guī)定。若供試品管中任何 1 管顯渾濁并確證有菌生長判供試品不符合規(guī)定。 以一次檢出為準，不得復試。當符合下列至少

27、一個條件時，可判試驗結果無效；1）無菌檢驗所用的設備及環(huán)境的微生物監(jiān)控結果不符合無菌檢驗法的要 求；2）回顧無菌實驗過程，發(fā)現(xiàn)有可能引起微生物污染的因素；3）陰性對照管有菌生長；4）供試品管中生長的微生物經(jīng)鑒定后，確證是因無菌檢驗中所使用的物品 和（或）無菌操作技術不當引起的；13 質量記錄附件： 1、產(chǎn)品無菌檢驗操作規(guī)程2、無菌檢驗原始記錄菌種外購、轉種記錄培養(yǎng)基制備記錄 實驗中廢棄的帶菌物品滅菌處理記錄 實驗用稀釋液、沖洗液、緩沖液制備記錄 濃菌液制備使用記錄 潔凈區(qū)域凈化系統(tǒng)運行記錄第五節(jié)pH值測定操作規(guī)程1. 目的2. 范圍3. 責任建立pH值測定操作規(guī)程，以達到對該項目檢查操作規(guī)范，

28、結果可靠。 本規(guī)程適用于樣品pH值的測定。QC負責執(zhí)行本規(guī)程的實施。4. 內容4.1除另有規(guī)定外，水溶液的pH值應以玻璃電極為指示電極，用酸度計進 行測定。酸度計應定期檢定，使精密度和準確度符合要求。4.2儀器校正用的標準緩沖液：應使用標準緩沖物質配制，配制方法如下 4.2.1鄰苯二甲酸氫鉀標準緩沖液：將鄰苯二甲酸氫鉀標準緩沖液塑料袋 剪開，將粉末倒入250ml容量瓶中，少量物二氧化碳蒸餾水沖洗塑料袋內 壁，并稀釋到刻度搖勻，即得到鄰苯二甲酸氫鉀標準緩沖液。4.2.2混合磷酸鹽標準緩沖液：將混合磷酸鹽標準緩沖液塑料袋剪開，將粉 末倒入250ml容量瓶中，少量物二氧化碳蒸餾水沖洗塑料袋內壁，并稀

29、釋 到刻度搖勻，即得到混合磷酸鹽標準緩沖液。4.2.3四硼酸鈉標準緩沖液：將四硼酸鈉標準緩沖液塑料袋剪開，將粉末 倒入250ml容量瓶中，少量物二氧化碳蒸餾水沖洗塑料袋內壁，并稀釋到 刻度搖勻，即得到四硼酸鈉標準緩沖液。不同溫度時標準緩沖液的pH值如下頁表。溫度鄰苯二甲酸氫鉀標準緩沖液 0.5M混合磷酸鹽標準緩沖液 0.025M四硼酸鈉標準緩沖液 0.01M1015202530354045504.004.004.004.004.014.024.034.044.066.926.906.886.866.856.846.846.836.839.339.289.239.189.149.109.079.

30、049.02注：測定pH值時，應嚴格按儀器的使用說明書操作，并注意下列事項。4.3 注意事項：4.3.1 測定前，按各品種項下的規(guī)定，選擇二種標準緩沖液，使供試液的 pH值處于二者之間。432取與供試液pH值較接近的第一種標準緩沖液對儀器進行校正（定 位），使儀器示值與表列數(shù)值一致。4.3.3 儀器定位后，再用第二種標準緩沖液的表列數(shù)值相符。重復上述定 位與斜率調節(jié)操作，至儀器示值與標準緩沖液的規(guī)定數(shù)值相差不大于 0.02pH 單位。否則，須檢查儀器或更換電極后，再行校正至符合要求。4.3.4 每次更換標準緩沖液或供試液前，應用純化水充分洗滌電極，然后將 水吸盡，也可用所換的標準緩沖液或供試液

31、洗滌。435在測定高pH值的供試品時，應注意堿誤差的問題，必要時選用適當 的玻璃電極測定。4.3.6對弱緩沖液（如水）的pH值測定，先用鄰苯二甲酸氫鉀標準緩沖液 校正儀器后測定供試液，并重取供試液再測，直至pH值的讀數(shù)在1分鐘內改變不超過 0.05 為止；然后再用四硼酸鈉標準緩沖液校正儀器，再如上法測定； 二次pH值的讀數(shù)相差應不超過0.1，取二次讀數(shù)的平均值為其pH值。4.3.7 配制標準緩沖液與溶解供試品的水，應是新沸過的冷蒸餾水，其 pH 值應為5.57.0。4.3.8 標準緩沖液一般可保存 23個月，但發(fā)現(xiàn)有渾濁、發(fā)霉或沉淀等現(xiàn) 象時，不能繼續(xù)使用。5. pH試紙測定pH值：5.1 檢

32、測方法：取一小塊試紙在表面皿或玻璃片上，用沾有待測液的玻璃 棒或膠頭滴管點于試紙的中部，觀察顏色的變化，判斷溶液的性質。5.2 注意：5.2.1 試紙不可直接伸入溶液。5.2.2 試紙不可接觸試管口、瓶口、導管口等。5.2.3 測定溶液的 pH 時，試紙不可事先用蒸餾水潤濕，因為潤濕試紙相當于稀釋被檢驗的溶液，這會導致測量不準確。正確的方法是用蘸有待測溶液的玻璃棒點滴在試紙的中部，待試紙變色后，再與標準比色卡比較來確定溶液的5.2.4 取出試紙后，應將盛放試紙的容器蓋嚴，以免被實驗室的一些氣體 沾污。1. 目的2. 范圍3. 責任4. 內容第六節(jié) 電導率檢查法操作規(guī)程建立電導率檢查法操作規(guī)程，

33、達到該項目檢查操作規(guī)范，結果可靠。本標準適用于對本公司工藝用水電導率的檢查。QC負責執(zhí)行本規(guī)程。4.1當空氣中的二氧從而使水的電導另外，水的電導本法是用于檢查制藥用水的電導率進而控制水中電解質總量的一種測 定方法。4.1.1 電導率是表征物體導電能力的物理量，其值為物體電阻率的倒數(shù)， 單位是 S/cm(Siemens)或卩 S/cm。4.1.2 純水中的水分子也會發(fā)生某種程度的電離而產(chǎn)生氫離子與氫氧根離 子，所以純水的導電能力盡管很弱，但也具有可測定的電導率。水的電導率與 水的純度密切相關，水的純度越高，電導率越小，反之亦然。化碳等氣體溶于水并與水相互作用后，便可形成相應的離子， 率增高。水中

34、含有其它雜質離子時，也會使水的電導率增高。率還與水的PH值與溫度有關。4.2 儀器和操作參數(shù) 測定水的電導率必須使用精密的并經(jīng)校正的電導率儀，電導率儀的電導池包括兩個平行電極，這兩個電極通常由玻璃管保護，也 可以使用其他形式的電導池。根據(jù)儀器設計功能和使用程度，應對電導率儀定 期進行校正，電導池常數(shù)可使用電導標準溶液直接校正，或間接進行儀器比 對，電導池常數(shù)必須在儀器規(guī)定數(shù)值的 2%范圍內。進行儀器校正時，電導率 儀的每個量程都需要進行單獨校正。儀器最小分辨率應達到0.1卩s/cm，儀器精度應達到 0.1卩s/cm。4.2.1 溫度對樣品的電導率測定值有較大影響，電導率儀可根據(jù)測定樣品 的溫度

35、自動補償測定值并顯示補償后讀數(shù)。水的電導率采用溫度修正的計算方 法所得數(shù)值誤差較大，因此本法采用非溫度補償模式，溫度測量的精確度應在 2C以內。4.3 測定法4.3.1 純化水可使用在線或離線電導率儀，記錄測定溫度。在表 1中，測定溫度對應的 電導率即為限度值。如測定溫度未在表 1中列出，則判為符合規(guī)定；如測定的 電導率值大于限度值，則判為不符合規(guī)定。表1溫度和電導率的限度（純化水）溫度/ r電導率/卩S/cm溫度/ r電導率02.4608.1103.6709.1204.3759.7255.1809.7305.4909.7406.510010.2507.1卩 S/cm內插法的計算公式為：T T

36、oK ） （ki k0） k0Ti T 0式中k為測定溫度下的電導率限度值；K為表1中高于測定溫度的最接近溫度對應的電導率限度值；Ko為表1中低于測定溫度的最接近溫度對應的電導率限度值；T為測定溫度；T1為表1中高于測定溫度的最接近溫度；To為表1中低于測定溫度的最接近溫度；4.4注射用水441可使用在線或離線電導率儀。在表 2中，不大于測定溫度的最接近 溫度值，對應的電導率值即為限度值。如測定的電導率值不大于限度值，則判 為符合規(guī)定；如測定的電導率值大于限度值，則繼續(xù)按442進行下一步測定4.4.2取足夠量的水樣（不少于100ml），置適當容器中，攪拌，調節(jié)溫度至 25r，劇烈攪拌，每隔5分

37、鐘測定電導率，當電導率值的變化小于 0.1卩s/cm 時，記錄電導率值。如測定的電導率不大于2.1卩s/cm，則判定符合規(guī)定。；如測定的電導率大于2.1卩s/cm，繼續(xù)按4.4.3進行下一步測定。表3 PH值和電導率的限度L度 / C電導率/卩S/cm溫度/ C電導率/卩00.6552.150.8602.2100.9652.4151.0702.5201.1752.7251.3802.7301.4852.7351.5902.7401.7952.9451.81003.0501.9443應在上一步測定后5分鐘內進行，調節(jié)溫度至25C，在同一水樣中 加入飽和氯化鉀溶液（每100ml水樣中加入0.3ml

38、）,測定PH值，精確值 0.1 PH單位（附錄W H），在表3中找到對應的電導率限度，并與 442中測 得的電導率值比較。如4.4.2中測得的電導率值不大于該限度值，則判為符合 規(guī)定；如442中測得的電導率值超出該限度值或 PH值不在5.07.0范圍內, 則判為不符合規(guī)定。4.5滅菌注射用水調節(jié)溫度至25C，使用離線電導率儀進行測定。標示裝量為10ml或10ml以下時，電導率限度為5卩s/cm。測定的電導率值不大于限度值，貝U判為符合 規(guī)定；如測定的電導率值大于限度值，則判為不符合規(guī)定。)H值電導率/ yS/cmPH值電導率/ y5.04.76.12.45.14.16.22.55.23.66.

39、32.45.33.36. 42.35.43.06.52.25.52.86.62.15.62.66.72.65.72.56.83.15.82.46.93.85.92.47.04.66.02.411第七節(jié)酸堿度試驗方法方法一1.儀器酸度計：應符合測定精度要求。2. 溶液的配制標準緩沖溶液(校正酸度計用)：按照使用說明書的方法配制。3. 供試溶液制備按產(chǎn)品標準要求的方法制備供試溶液。4.試驗步驟按酸度計的使用說明書校準酸度計。取供試溶液及空白對照液分別測定其 pH值，計算兩者之差。注對于pH值難以穩(wěn)定的供試溶液，通常采取在相同時間內分別測定空白對照 液和供試液。方法二1. 儀器分析天平：精度為O.l

40、mg。2. 溶液的配制a) c(NaOH)=0.1 mol/L 氫氧化鈉標準溶液：配制：稱取110g氫氧化鈉，溶于100mL無二氧化碳的水中，搖勻，注入聚 乙烯容器中，密閉放置至溶液清亮。用塑料管量取上層清液 5.4mL,用無二氧 化碳的水稀釋至1000mL搖勻。標定：稱取于105C110C電烘箱中干燥至恒重的工作基準試劑鄰苯二甲 酸氫鉀0.75g，精確稱重，加無二氧化碳的水 50mL溶解，加2滴酚酞指示液 (10g/L)，用配制好的氫氧化鈉溶液滴定至溶液呈粉紅色，并保持30s。同時做空白試驗。c(NaOH) m 1000計算：氫氧化鈉標準滴定溶液的濃度以 mol/L表示，按照下式計算。(V1

41、 V2)M式中：m鄰苯二甲酸氫鉀的準確稱取質量，g;V1 氫氧化鈉溶液的體積，mLV2 空白試驗氫氧化鈉溶液的體積，mLM 鄰苯二甲酸氫鉀的摩爾質量，克每摩爾(g/mol) M (KHC8H4O4=204.22。b) c(NaOH)=0.01 mol/L氫氧化鈉標準溶液：臨用前精確移取a)氫氧化鈉標準溶液加水準確稀釋10倍。c) c(HCl)=0.1 mol/L鹽酸標準溶液：配制：量取9mL鹽酸，溶于1000mL水中，搖勻。標定：稱取于270C300C高溫爐中灼燒至恒重的工作基準試劑無水碳酸鈉0.2g，用水50mL溶解，加10滴溴甲酚綠-甲基紅指示液，用配制好的鹽酸溶液 滴定至溶液由綠色變?yōu)榘?/p>

42、紅色，煮沸 2分鐘，冷卻后繼續(xù)滴定至溶液再呈暗紅 色。同時做空白試驗。計算：鹽酸標準滴定溶液的濃度以 mol/L表示，按照下式計算。m 1000c M V2)M式中：m無水碳酸鈉的準確稱取質量，g；V1 鹽酸溶液的體積，mLV2 空白試驗鹽酸溶液的體積，mLM 無水碳酸鈉的摩爾質量，克每摩爾(g/mol) M (Na2CO)=52.994。d) c(HCI)=0.01 mol/L鹽酸標準溶液：臨用前精確移取 c )鹽酸標準溶液適量，加水準確稀釋10倍。e) Tashiro 指示劑：溶解0.2g甲基紅和0.1g亞甲基藍于100mL95的(V/V)乙 醇中3. 供試溶液制備按產(chǎn)品標準要求的方法制備

43、供試溶液。4. 檢驗步驟將O.ImL Tashiro指示劑加入內有20mL供試溶液的錐形瓶中，如果溶液顏色呈 紫色，則用0.01 mol/L的氫氧化鈉標準溶液滴定；如果呈綠色，則用0.01mol/L的鹽酸標準溶液滴定，直至顯灰色。以消耗0.01 mol/L氫氧化鈉標準溶液或0.01 mol/L鹽酸標準溶液的體積(以毫升為單位)作為檢驗結果。第八節(jié) 蒸發(fā)殘渣試驗方法1. 儀器 分析天平：精度為 0.1mg。2. 供試溶液制備按產(chǎn)品標準要求的方法制備供試溶液。3. 試驗步驟將潔凈的蒸發(fā)皿預先在(105 1) C干燥箱中烘至恒重。加入產(chǎn)品標準中規(guī) 定體積的供試溶液，置于水浴上蒸干。將蒸發(fā)皿再次放入(

44、105 1) C干燥箱中0.5mg。烘至恒重。同法處理空白對照液，空白對照液的蒸發(fā)殘渣應不超過 4. 結果計算按下列公式計算：m (W12 W11) (W02 W01) 1000式中：V蒸發(fā)殘渣的質量，mg 未加入供試溶液的蒸發(fā)皿質量， 加入供試溶液的蒸發(fā)皿質量， 未加入空白液的蒸發(fā)皿質量， 加入空白液的蒸發(fā)皿質量，W11W12W01W02g。g；g；g；第九節(jié)沉降菌檢測方法1內容1.1質量檢驗人員按規(guī)定對車間潔凈區(qū)沉降菌定期進行檢驗，按下表1確定好采樣點數(shù)，每個采樣點需做2個培養(yǎng)皿。表1米樣點數(shù)面積(rf)潔凈度300.000 級100級10000級100.000 級 10 20 40 100 200 400 0.5 卩 m 5卩m浮游菌/立方米沉降菌/皿100級350005110.000 級35000020001003100.000 級35000002000050010300.000 級105000006000015第十節(jié)敷料中甲殼素含量測定1溶液的配制 0.167mo1/L乙酸溶液的配制：稱取乙酸1g用蒸餾水定容至I 00m l o溟甲酚綠(BCG)儲備液的配制：稱取BCG分析純，MW=720. 02) 1.8