選修一基礎(chǔ)知識

1、生物選修1知識點(diǎn)專題一：傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 一、果酒制作的原理(1)、酵母菌類型：_，具有成形的細(xì)胞核。繁殖方式：出芽生殖和孢子生殖。溫度低時形成孢子，進(jìn)入休眠狀態(tài)；溫度適宜時，進(jìn)行_，繁殖速度快。代謝類型：異養(yǎng)兼性厭氧微生物。(2)、制作原理在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行_，大量_，反應(yīng)式為：C6H12O66O26CO26H2O在無氧條件下，酵母菌進(jìn)行_，反應(yīng)式為：C6H12O62C2H5OH2CO2(3)、影響酒精發(fā)酵的環(huán)境條件有_。發(fā)酵溫度控制在_范圍內(nèi)。在_的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。酵母菌生長的最適pH為_。二、果醋制作的原理(1)、醋酸

2、菌：又名醋酸桿菌。類型：_。繁殖方式：_。代謝類型：_。(2)、果醋制作的原理在氧氣充足時，能分別把_兩種反應(yīng)物轉(zhuǎn)化為_。當(dāng)缺少_時可將乙醇轉(zhuǎn)變成乙醛，并進(jìn)一步轉(zhuǎn)變成醋酸。反應(yīng)式：C2H5OHO2CH3COOHH2O(3)、影響醋酸菌發(fā)酵的條件醋酸菌最適生長溫度為_。醋酸菌屬于需氧型微生物，發(fā)酵過程中需要_。最適pH為_。（4）、酵母菌和醋酸菌的比較 酵母菌 醋酸菌 生物學(xué)分類 代謝方式 生長繁殖的最適宜的溫度 主要繁殖方式 生活、生產(chǎn)應(yīng)用 三、腐乳的制作原理1、主要微生物(1)生物學(xué)特征：腐乳制作過程中發(fā)揮作用的微生物主要是_，屬于_，同化作用類型是_。(2)毛霉的作用：毛霉等微生物產(chǎn)生的_

3、酶等能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的_和_；產(chǎn)生的_酶能將豆腐中的脂肪水解為_和_。 2、發(fā)酵機(jī)理制作腐乳的過程主要是豆腐所含的蛋白質(zhì)發(fā)生生物化學(xué)反應(yīng)的過程。釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進(jìn)行_和_。(1)、前期發(fā)酵主要變化：毛霉在豆腐(白坯)上的生長。條件：發(fā)酵溫度為_。作用：a.使豆腐表面由一層菌膜包住，形成_。b.毛霉分泌以_為主的各種酶，有利于將豆腐所含有的蛋白質(zhì)水解為小分子的_。(2)、后期發(fā)酵實(shí)質(zhì)：酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過程。主要變化 3、實(shí)驗(yàn)流程4、具體操作(1)讓豆腐上長出毛霉選材：所用豆腐的含水量為_左右最適宜，水分過多腐乳不易成形，過少則不利于毛霉的生長。切塊：將所選

4、擇的豆腐切成3 cm×3 cm×1 cm的小塊，若切的過小_，過大則中間部分很難形成腐乳。接種：將切好的豆腐塊等距離排放，周圍留有一定空隙，并將溫度控制在_。該溫度下_生長迅速，_等其他微生物生長較緩慢。為了提高毛霉的純度，也可以將優(yōu)良毛霉菌種直接接種在豆腐上。(2)加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層加鹽，加鹽量要隨著層數(shù)的加高而_，近瓶口的表層要_。加鹽的目的是使_，利于后期制作時成形；同時鹽也能_的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。長滿毛霉的豆腐塊與鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為_。(3)加鹵湯裝瓶：鹵湯中酒精的含量應(yīng)控制在_左右，它能_微生物的生長，同時與腐乳獨(dú)特的_形成有關(guān)。香辛料可以調(diào)制

5、腐乳的_，也具有_的作用。(4)密封腌制：將用鹽腌制好的豆腐塊迅速小心地裝入洗刷干凈并用沸水消毒的玻璃瓶中，并整齊擺放，然后加入鹵湯。將瓶口通過酒精燈的火焰后，用膠條將瓶口密封。在此過程中時刻注意防止雜菌污染。5、影響腐乳品質(zhì)的因素(1)鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味鹵湯是由_和_配制而成的。鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在_。加酒可以_，同時能使腐乳具有獨(dú)特的香味。香辛料種類很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等，香辛料可以調(diào)制腐乳的_，也具有_的作用。(2)控制好材料的用量用鹽腌制時，若鹽的濃度過低，不足以抑制微生物生長，可能導(dǎo)致_；若鹽的濃度過高，會影響_

6、。鹵湯中酒的含量應(yīng)控制在12%左右。酒精含量過高，腐乳成熟的時間會延長；酒精含量過低，不足以抑制微生物生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。(3)掌握好發(fā)酵溫度和時間毛霉的最適生長溫度為1518，保持其生長適宜溫度，可縮短發(fā)酵時間。溫度過低或過高會影響毛霉的_和_，從而影響發(fā)酵的進(jìn)程和發(fā)酵質(zhì)量；時間過短，發(fā)酵不充分；時間過長，豆腐會軟化不易成形，從而影響_。6、影響腐乳品質(zhì)的條件：(1)、鹽： (2)、酒的用量：(3)、發(fā)酵的溫度：四、泡菜的制作1、乳酸菌(1)、生物學(xué)特征乳酸菌是由原核細(xì)胞構(gòu)成的_；繁殖方式是分裂生殖；新陳代謝類型是_，有氧時發(fā)酵(無氧呼吸)受到抑制。(2)、乳酸菌的作用在_條件下，乳酸菌

7、可將_分解成_。反應(yīng)式：C6H12O62C3H6O3(乳酸)2、泡菜壇的選擇標(biāo)準(zhǔn)是_、_、_、_、_，否則容易引起蔬菜腐爛。3、實(shí)驗(yàn)流程4、操作步驟(1)、將新鮮蔬菜預(yù)先處理成_。(2)、泡菜鹽水按清水和鹽的質(zhì)量比為_的比例配制，_備用。(3)、預(yù)處理的新鮮蔬菜裝至半壇時放入蒜瓣、生姜、香辛料等佐料，并繼續(xù)裝至八成滿。(4)、倒入配制好的_，使鹽水浸沒全部菜料。(5)、蓋上泡菜壇蓋子，并用水_。發(fā)酵時間長短受室內(nèi)溫度的影響。5、腌制的條件(1)、在泡菜的腌制過程中，需要控制的條件包括腌制的_、_和_的用量。(2)、溫度過高、食鹽用量不足10%、腌制時間過短，容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增

8、加。6、泡菜腌制過程中乳酸菌和乳酸的變化泡菜發(fā)酵可分為三個階段：(1)、發(fā)酵初期：以不產(chǎn)酸的_和_活動為主，同時還有一部分_活動。該時期利用了氧氣，產(chǎn)生了缺氧環(huán)境，乳酸菌才開始活動。乳酸菌和乳酸的量都比較少。(2)、發(fā)酵中期：由于乳酸菌產(chǎn)生了大量乳酸，其他細(xì)菌活動受到抑制，只有乳酸菌活動強(qiáng)烈。此時期_數(shù)量達(dá)到高峰，_的量繼續(xù)積累。(3)、發(fā)酵后期：由于乳酸的積累，酸度繼續(xù)增長，乳酸菌活動也受到抑制，乳酸菌數(shù)量下降。乳酸菌和乳酸在整個發(fā)酵過程中的含量變化趨勢為：專題2：微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用一、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)（一）、培養(yǎng)基1.概念：人們按照微生物對 的不同需求，配制出供其 的營養(yǎng)物質(zhì)。2.分類方

9、式分類標(biāo)準(zhǔn)類型備注培養(yǎng)基的 培養(yǎng)基、 培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入凝固劑（有瓊脂、明膠、硅膠等）即為 培養(yǎng)基。 培養(yǎng)基是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物的種類細(xì)菌培養(yǎng)基、 培養(yǎng)基、 培養(yǎng)基和霉菌培養(yǎng)培養(yǎng)基的特殊用途基礎(chǔ)培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基：允許特定種類的微生物生長，同時 其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。 培養(yǎng)基：是在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，使培養(yǎng)后會發(fā)生某種變化，從而 不同類型的微生物。如鑒別大腸桿菌的 培養(yǎng)基，鑒別纖維素分解菌的 培養(yǎng)基。3.培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括 四類營養(yǎng)成分。除此之外，培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對 、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及 的要求。（二）、無菌

10、技術(shù)1.關(guān)鍵 防止 的入侵。2. 無菌技術(shù)包括：（1）對實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行 ；（2）將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行 ；（3）為避免周圍微生物污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 旁進(jìn)行；（4）避免已滅菌處理的材料用具與 相接觸。消毒滅菌概念用較 的物理或化學(xué)方法殺死物體 的部分微生物（不包括芽孢和孢子）用較 的理化因素殺死物體 微生物（包括芽孢和孢子）常用方法 消毒法（ 消毒法） 消毒法、紫外線消毒法灼燒滅菌、 滅菌、 滅菌適用對象操作空間、液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等3.比較消毒和滅菌（三）、 實(shí)驗(yàn)操作（大腸桿菌的純化培養(yǎng)）1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基計(jì)算：根據(jù) 比

11、例，計(jì)算100mL培養(yǎng)基各成分用量。稱量：牛肉膏較黏稠，可用玻棒挑取，同 一同稱量。稱取牛肉膏和蛋白胨時動作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空氣中水分。.溶化：加水加熱熔化牛肉膏與稱量紙取出稱量紙加入蛋白胨和氯化鈉繼續(xù)加熱加入 用蒸餾水定容到100mL（整個過程不斷用玻棒攪拌，目的是防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂）。.滅菌：將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，加塞包扎后用 滅菌鍋滅菌；所用培養(yǎng)皿用報(bào)紙包扎后用 箱滅菌。.倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至 左右時在 附近操作進(jìn)行。其過程是：二分解纖維素的微生物的分離(一)、纖維素與纖維素酶1纖維素的化學(xué)組成： 三種元素，是一種 糖。2纖維素的分布： 是自然界中纖維素含

12、量最高的天然產(chǎn)物，此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。3纖維素酶的作用：纖維素酶是一種 ，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即 酶、 酶 酶，前兩種酶使纖維素分解成 ，第三種酶將纖維二糖分解成 。（二）、纖維素分解菌的篩選 1篩選方法： 染色法。2篩選原理：剛果紅可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成 ，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)，當(dāng)纖維素被 分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以 為中心的 ，我們可以通過 來篩選纖維素分解菌。三、試驗(yàn)設(shè)計(jì)流程 、 、 、 、 。1土壤取樣：采集土樣時，應(yīng)選擇富含 的環(huán)境。 2選擇培養(yǎng)： 閱讀資料二“選擇培養(yǎng)基”，回答以下問題：若設(shè)置一個對照實(shí)驗(yàn)說明選擇培養(yǎng)

13、(1)、目的：增加纖維素分解菌的 ，以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。(2)、制備選擇培養(yǎng)基：參照課本旁欄中的比例配制。(3)、選擇培養(yǎng)：稱取土樣20 g，在無菌條件下加入裝有30mL培養(yǎng)基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在 上，在一定溫度下振蕩培養(yǎng)12 d，直至培養(yǎng)液變 。也可重復(fù)選擇培養(yǎng)。（4）、梯度稀釋： 依次將培養(yǎng)液稀釋101107倍。思考是如何操作的？(5)、將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上<1>制備培養(yǎng)基：參照課本旁欄中的比例。 <2>倒平板操作。<3>涂布平板：將稀釋度為104106的菌懸液各取01 mL涂布在平板培養(yǎng)基上，30倒置培養(yǎng)。(

14、6)、剛果紅染色法：挑選產(chǎn)生 的菌落，一般即為分解纖維素的菌落。剛果紅染色法：常用的剛果紅染色法有兩種即 .三、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)1篩選菌株(1)實(shí)驗(yàn)室中微生物篩選的原理：人為提供有利于 生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時 或 其他微生物生長。 (2)選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，將允許 種類的微生物生長，同時 或 其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。（3）配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。例如，培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng) 微生物；培養(yǎng)基中不加入氮元素，可以選擇培養(yǎng) 的微生物，加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球

15、菌等。2統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目（1）測定微生物數(shù)量的常用方法有 和 。（2）稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目的原理當(dāng)樣品的 足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個 。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。3設(shè)置對照設(shè)置對照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中 對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的 。例如：為了排除培養(yǎng)基是否被雜菌污染了，需以培養(yǎng) 的培養(yǎng)基作為空白對照。4、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)關(guān)于土壤中某細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)操作步驟如下： 取樣：從肥沃、濕潤的土壤中取樣。應(yīng)先 3 cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的 中。制備 ：準(zhǔn)備

16、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基組織類型細(xì)胞來源細(xì)胞形態(tài)細(xì)胞結(jié)構(gòu)細(xì)胞排列細(xì)胞去向根尖分生組織愈傷組織相同點(diǎn)將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯 選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可以作為 ，用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用。樣品的 和微生物的 與觀察 將10g土樣加入盛有90 mL無菌生理鹽水的錐形瓶中(體積為250 mL)，充分搖勻，吸取上清液 ml，轉(zhuǎn)移至盛有 ml的生理鹽水的無菌大試管中，將土樣以1、101、102 依次等比稀釋至107稀釋度，并按照由107103稀釋度的順序分別吸取 ml進(jìn)行平板涂布操作。每個稀釋度下需要3個選擇培養(yǎng)基、1個牛肉膏

17、蛋白胨培養(yǎng)基。 將涂布好的培養(yǎng)皿放在30溫度下培養(yǎng)，及時觀察和記錄。 挑選選擇培養(yǎng)基中不同形態(tài)的菌落接入含 培養(yǎng)基的斜面中，觀察能否產(chǎn)生如教材中圖2-lO的顏色反應(yīng)。細(xì)菌的計(jì)數(shù)當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時，選取菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在同一稀釋度下，至少對3個平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出 ，并根據(jù)平板所對應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。專題三 植物組織培養(yǎng)技術(shù)一植物組織培養(yǎng)的基本過程 (1)細(xì)胞全能性的表達(dá)：_的植物組織或細(xì)胞，在一定的_、_和_的作用下，發(fā)育成完整植株的過程。(2)細(xì)胞分化：在植物的_過程中，細(xì)胞在_、_和_上都會出現(xiàn)_的差異，形成這些差異的過程叫做細(xì)胞分化。(3)植物組織培養(yǎng)的基本過

18、程離體的植物器官、組織或細(xì)胞(又叫_)愈傷組織胚狀體、叢芽等新個體愈傷組織的特點(diǎn)：細(xì)胞_，是一群_的呈_的薄壁細(xì)胞。脫分化(去分化)：由_的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生_的過程。再分化：由_重新分化成根或芽等器官的過程。(4)條件：_的植物組織或細(xì)胞，在一定的_、_和其他外界條件的作用下就可能表現(xiàn)出全能性，發(fā)育成完整植株。離體的植物組織或細(xì)胞叫做_。二影響植物組織培養(yǎng)的因素(1)培養(yǎng)材料的影響：不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度_。對于同一種植物材料，材料的_、_等也會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇_的莖_部_的側(cè)枝。(2)營養(yǎng)物質(zhì)的影響：常用的_培養(yǎng)基，主要成分包括_、_、_以及蔗糖等。其中_

19、和_提供植物細(xì)胞所必需的無機(jī)鹽；_提供碳源，維持細(xì)胞滲透壓。(3)植物激素的影響：MS培養(yǎng)基常需添加植物激素。其中_和_是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，這兩種激素的_、_以及_等，都會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(4)環(huán)境因素的影響：_、_、_等條件也能影響植物組織培養(yǎng)。三愈傷組織與根尖分生區(qū)組織的比較四、實(shí)驗(yàn)操作流程1、制備MS培養(yǎng)基A.配制各種母液：配制母液時， 元素濃縮10倍， 元素濃縮100倍， 以及用量較小的有機(jī)物一般可按 的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液。B.配制磁頭基的步驟是 C.滅菌的方法： 2、外植體消毒：先用 消毒，再用 消毒，最后用無菌水清洗。3、接種：所有的接種操作都必須在 旁進(jìn)

20、行，對接種工具在使用前和使用后都要進(jìn)行 滅菌。4、培養(yǎng)：培養(yǎng)期間應(yīng)定期消毒，培養(yǎng)溫度控制在 ，并且每日用日光燈光照 。5、移栽：先在培養(yǎng)間生長幾日，再移栽到土壤中。6、栽培五基礎(chǔ)知識1被子植物的花粉是在 中由 經(jīng)過 分裂形成的。2結(jié)合教材內(nèi)容填下列示意圖：小孢子母細(xì)胞（2n）（ ）時期（n）單核（ ）期（n）雙核期（ ）細(xì)胞核（n）（ ）細(xì)胞核（n）（ ）細(xì)胞（n）（ ）細(xì)胞（n）（ ）個精子(n)（ ）分裂（ ）分裂單核（ ）期（n）（ ）分裂3產(chǎn)生花粉植株（即單倍體植株）的兩種途徑：一是花粉通過 階段發(fā)育為植株，二是通過 階段發(fā)育為植株。這兩種途徑的區(qū)別主要取決于培養(yǎng)基中 的種類及其 度

21、的配比。4填寫培育花粉植株的途徑圖解：（ ）花藥中的花粉（ ）（胚狀體）（愈傷組織）（ ）叢芽生根移栽3胚狀體的結(jié)構(gòu)及其發(fā)育過程與種子相似，所以把胚狀體到從芽的過程稱為 ，而把從愈傷組織到從芽的過程稱為 。 5影響花粉植株的主要因素： 和 等。6材料的選擇：從花藥來看，應(yīng)當(dāng)選擇 的花藥；從花粉來看，應(yīng)當(dāng)選擇 的花粉；從花蕾來看，應(yīng)當(dāng)選擇 的花蕾。7選擇花藥時一般通過 確定花粉發(fā)育時期，此時需要對花粉細(xì)胞核進(jìn)行染色，最常用的染色劑是 和 焙花青 ，它們分別可以將細(xì)胞核染成 色和 色。8在使用焙花青鉻釩溶液時，需要首先將花藥用 處理20min。該試劑的配制方法是將 按體積比為 的比例混合均勻。9、

22、填寫下列流程圖：花蕾（ ）大約30s（ ）清洗（ ）吸干水分（ ）24min（ ）沖洗10剝?nèi)』ㄋ帲合竞蟮幕ɡ?，要?條件下除去花萼、花瓣。11接種花藥：剝?nèi)〉幕ㄋ幰⒖探臃N到 上。每個培養(yǎng)瓶接種 個花藥。12培養(yǎng)：花藥培養(yǎng)利用的培養(yǎng)基是 培養(yǎng)基，pH為 ，溫度為 ，幼苗形成之前（需要、不需要）光照。13培養(yǎng)2030d后，花藥開裂，長出 或釋放出 。前者還要轉(zhuǎn)移到 上進(jìn)行分化培養(yǎng)成再生植株；后者要盡快 并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上。14通過愈傷組織形成的植株，常常會出現(xiàn) 的變化，因而需要鑒定和篩選。專題四 酶的應(yīng)用與研究一、果膠與果膠酶 1果膠  （1）作用：果膠是植物

23、_和_的主要組成成分 （2）成分：由_聚合而成的一種高分子化合物。 （3）特點(diǎn)：_ ，影響果汁的出汁率和澄清度 2果膠酶 （1）作用：瓦解植物的細(xì)胞壁和胞間層，提高果汁的出汁率和澄清度。 （2） 組成：果膠酶是分解果膠的一類酶總稱，包括_等。 3、酶的活性與影響酶活性的因素 （1）酶的活性：酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。 （2）酶活性的高低可用在一定的條件下，酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的_來表示，即單位時間內(nèi)、單位體積中_或_來表示。 （3）影響酶活性的因素包括：_、_和_等。（4）實(shí)驗(yàn)中的變量包括：_

24、、_、_；實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循的原則：_、_、_。二、探討加酶洗衣粉的洗滌效果1酶絕大多數(shù)是蛋白質(zhì)酶，少數(shù)為_；酶具有生物_；酶具有_性、_性的特點(diǎn)，但易_ 、 _、表面活性劑等因素的影響。2加酶洗衣粉是指含 的洗衣粉，目前常用的酶制劑有 、 、淀粉酶和纖維素酶四類。3脂肪酶可以將脂肪分解成 和 ，蛋白酶可以將蛋白質(zhì)分解成 ，然后在 作用下分解成氨基酸。三、酵母細(xì)胞的固定化（一）、固定化酶的應(yīng)用實(shí)例高果糖漿是指 能將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖的酶是 。使用固定化酶技術(shù)，將這種酶固定在一種 上，再將這些酶顆粒裝到一個 內(nèi)，柱子底端裝上分布著許多小孔的 。酶顆粒 ，而 。生產(chǎn)過程中，將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的上端注入，使

25、葡萄糖溶液流過反應(yīng)柱，與 接觸，轉(zhuǎn)化成果糖，從反應(yīng)柱的下端流出。反應(yīng)柱能連續(xù)使用半年，大大降低了生產(chǎn)成本，提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。（二）、固定化細(xì)胞技術(shù)固定化酶和固定化細(xì)胞是利用 或 方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括 、 和 法。一般來說，酶更適合采用 和 法固定，而細(xì)胞多采用 法固定化。這是因?yàn)榧?xì)胞個大，而酶分子很?。粋€大的難以被 或 ，而個小的酶容易從 中漏出。包埋法法固定化細(xì)胞即將微生物細(xì)胞 包埋在不溶于水的 中。常用的載體有 、 、 、 和 等。專題五 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)一、DNA的粗提取與鑒定1提取DNA的方法提取生物大分子的基本思路是 。對于DNA的粗提取而言，就是要利用

26、 、 等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取DNA，去除其他成分。1）DNA的溶解性 DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的 中溶解度不同，利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使 充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的。請繪制曲線圖 ：此外，DNA不溶于 溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。2）DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性 蛋白酶能水解 ，但是對 沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080oC的高溫，而DNA在 以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解 ，但對DNA沒有影響。3）DNA的鑒定 在 條件下，DNA遇 會被染成 色，因此二苯胺可以作為鑒定D

27、NA的試劑。2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1）實(shí)驗(yàn)材料的選取 凡是含有 的生物材料都可以考慮，但是使用 的生物組織，成功的可能性更大。在下面的生物材料中選取適合的實(shí)驗(yàn)材料：魚卵、豬肝、菜花（花椰菜）、香蕉、雞血、哺乳動物的紅細(xì)胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基的大腸桿菌思考：哺乳動物的紅細(xì)胞的特點(diǎn)？2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液 動物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的 ，同時用 攪拌，過濾后收集濾液即可。如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用 溶解細(xì)胞膜。例如，提取洋蔥的DNA時，在切碎的洋蔥中加入一定的 和 ，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液。思考：為什么加入蒸餾水能使雞血

28、細(xì)胞破裂？ 加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？ 如果研磨不充分，會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響? 此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細(xì)胞成分？ 3）去除濾液中的雜質(zhì) 閱讀課本的三個方案。思考：為什么反復(fù)地溶解與析出DNA，能夠去除雜質(zhì)？方案二與方案三的原理有什么不同？4）DNA的析出與鑒定 將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積 、冷卻的 ，靜置 ，溶液中會出現(xiàn) ，這就是粗提取的DNA。用玻璃棒 攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為 的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4ml的 。混合均勻后，

29、將試管置于 中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變 。3操作提示以血液為實(shí)驗(yàn)材料時，每100ml血液中需要加入3g ，防止 。加入洗滌劑后，動作要 、 ，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時，動作要 ，以免 ，導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。二苯胺試劑要 ，否則會影響鑒定的效果。4結(jié)果分析與評價(jià)二、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段1、 蛋白質(zhì)的提取和分離蛋白質(zhì)的提取分離一般分為四步： 、 、 、 。 2、 樣品處理（1）紅細(xì)胞的洗滌：洗滌的目的是： ，采集的血樣藥及時采用 分離紅細(xì)胞，然后用膠頭吸管吸上層透明的 ，將

30、下層暗紅色的 倒入燒杯中，再加入 ，緩慢攪拌 ，低速短時間離心，如此重復(fù)洗滌三次直到 ，表面紅細(xì)胞已洗干凈。（2）血紅蛋白的釋放：在 和 的作用下，紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白（3）分離血紅蛋白溶液：將攪拌好的混合溶液離心后，試管中的液體分4層，第1層為無色透明的 ，第2層為白色薄層固體是 ，第3層為紅色透明液體這是 ，第4層為其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀。將試管中的液體用濾紙過濾，除去脂溶性沉淀層，于分液漏斗中靜置片刻后，分出下層的紅色透明液體。（4）透析：取1ml血紅蛋白溶液裝入 中，將透析袋放入盛有300ml 20mmol/L的 中，透析12h。透析可以去除樣品中的 雜質(zhì)或用于更換樣品的 3、凝膠色

31、譜操作首先要制作 ；第二步是 ，因?yàn)?，所以裝柱前要根據(jù)色譜柱的體積計(jì)算所需要的凝膠量。在填充凝膠柱時，不得有 存在，避免降低分離效果；第三步是 。（一） 血液的組成成分 水分 無機(jī)鹽、葡萄糖等 血液 白細(xì)胞 血細(xì)胞 血小板 兩個 鏈 紅細(xì)胞 血紅蛋白 兩個 鏈 最多 四個 基團(tuán)三、血紅蛋白的提取和分離 凝膠色譜法（分配色譜法）：1、概念：根據(jù)被分離蛋白質(zhì)的 ，利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠的分子篩作用，來分離蛋白質(zhì)的有效方法。2、原理：當(dāng)不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對 的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程 ，移動速度 ，而 的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在 移動，路程 ，移動速度 ，相對分子質(zhì)量

32、不同的蛋白質(zhì)因此得以分離。3、具體過程：凝膠顆粒相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)（1）（2）（3）（4）（5）BA多孔板A. 的蛋白質(zhì)由于 作用進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部而被滯留； 的蛋白質(zhì)被排阻在凝膠顆粒外面，在了里之間迅速通過。B.（1） 混合物上柱；（2）洗脫開始， 的蛋白質(zhì)擴(kuò)散進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)； 的蛋白質(zhì)被排阻于凝膠顆粒之外；（3） 的蛋白質(zhì)被滯留； 的蛋白質(zhì)被向下移動。（4） 不同的蛋白質(zhì)分子完全分開；（5） 的蛋白質(zhì)行程較短，已從 中洗脫出來， 的蛋白質(zhì)還在行進(jìn)中。 緩沖溶液：1、概念：在一定的范圍內(nèi)，能對抗外來少量強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或稍加稀釋不引起溶液PH發(fā)生明顯變化的作用叫做緩沖作

33、用，具有緩沖作用的溶液叫做緩沖溶液。2、作用：能夠抵制 的對溶液的 的影響，維持PH基本不變。3、緩沖溶液的配制通常由 種緩沖劑溶解于水中配制而成。調(diào)節(jié)緩沖劑的 就可以制得 使用的緩沖液。電泳：1、概念：指 發(fā)生遷移的過程。2、原理：許多重要的生物大分子，如 等都具有 在 下，這些基團(tuán)會帶上 。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其 移動。電泳利用了待分離樣品中各種分子 以及分子本身 、 的不同使帶電分子產(chǎn)生不同的 ，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。3、分類： 電泳 電泳。蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶靜電荷的多少以及分子的大小等因素。為了消除靜電荷對遷移率的影響可以在凝膠中加入

34、。SDS能使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性。由幾條肽鏈組成的蛋白質(zhì)復(fù)合體在SDS的作用下會解聚成單條肽鏈，因此測定的結(jié)果只是 。SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物，SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有電荷量。因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于 。四 實(shí)驗(yàn)操作蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理粗分離純化純度鑒定1.樣品處理 (1)紅細(xì)胞的洗滌目的：去除 方法： 離心（速度越高和時間越長會使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等一同沉淀達(dá)不到分離的效果），然后用膠頭吸管吸出上層透明的 ，將下層 的紅細(xì)胞液體倒入 再加入用 的 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9的氯化鈉溶液洗滌低速離心（低速短時間）重復(fù)4、5步驟 次，直至上清液中已沒有 ，表明洗滌干