專題222動(dòng)物細(xì)胞工程222動(dòng)物細(xì)胞融合與單克(精)

1、尊婁知識(shí)產(chǎn)權(quán)*手受正Rfi品JB理解教材新知2.2.2把握熱點(diǎn)考向應(yīng)用創(chuàng)新演練尊婁知識(shí)產(chǎn)權(quán)*手受正Rfi品JB2. 2. 2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體尊童知識(shí)產(chǎn)權(quán)手受正KS品質(zhì)動(dòng)物細(xì)胞工程尊童知識(shí)產(chǎn)權(quán)手受正KS品質(zhì)返回1.1. 動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè) 或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過 程。2.2. 動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二 醇(PEG)(PEG)、滅活的病毒、電激等。3 3 動(dòng)物細(xì)胞融合的主要用途是制備單克隆抗體。4 4 雜交瘤細(xì)胞是由經(jīng)免疫的 B B 淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成的，具有既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的能力。5 5 單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度

2、高，并能大量制備。6 6 單克隆抗體的主要用途有：作為診斷試劑、用于治療疾病和返回運(yùn)載藥物。返回關(guān)鍵語(yǔ)句自養(yǎng)就材務(wù)晁舷1 1 概念兩個(gè)或 多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程,也稱細(xì) 胞雜交。尊婁知坦產(chǎn)權(quán)*亭受正Rfi品質(zhì)3.3.意義(1)(1) 突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。(2)(2) 為制備單克隆抗體 開辟了新途徑。：思考探究1.1. 動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合所用的誘導(dǎo)方法有 何不同？提示：動(dòng)物細(xì)胞融合可用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)。2.2. 細(xì)胞融合技術(shù)與有性雜交相比有哪些優(yōu)點(diǎn)？提示：有性雜交有著十分嚴(yán)格的時(shí)空關(guān)系和種族界限。動(dòng) 物細(xì)胞融合則不同，它通過人工的方法克服了存在

3、于物種之間 的遺傳屏障，從而能夠按照人們的意愿，把不同物種的不同組 織類型的細(xì)胞融合在一起。.r尊重知識(shí)產(chǎn)權(quán)*芋受正Rfi品JB1.1.細(xì)胞融合的過程分析滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面細(xì)胞膜被刑壽顆粒穿通細(xì)胞融合的過程包括細(xì)胞膜融合、細(xì)胞質(zhì)融合和細(xì)胞核融合，其中細(xì)胞膜融合是細(xì)胞融合的先導(dǎo)，在細(xì)胞膜融合中體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。尊重知識(shí)產(chǎn)權(quán)*芋受正Rfi品JB2.2.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞 A A、B B細(xì)胞膜的流動(dòng)性過程J J 去壁 原生質(zhì)體 A A、B Bj j 融合 融合的原生質(zhì)體雜種細(xì)胞J J 植物組，織培養(yǎng)雜

4、種植株細(xì)胞 A A、B B J J 融合 雜交細(xì)胞J J 有絲分裂 多個(gè)相同雜交細(xì)胞(1)尊婁知識(shí)產(chǎn)權(quán)芋受正Rfi品JB植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合相關(guān)酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶融合方物理法：離心、電激、振動(dòng)；除物理法和化學(xué)法外還法化學(xué)法：聚乙一醇等試劑誘導(dǎo)可以用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果雜種植株雜交細(xì)胞意義克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性， 獲得雜種植株突破了有性雜交方法的 局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能特別提醒(1)(1)動(dòng)物細(xì)胞核融合發(fā)生在雜種細(xì)胞的有絲分裂過程中。(2)(2)滅活的病毒只適用于動(dòng)物細(xì)胞融合。返回尊婁知識(shí)產(chǎn)權(quán)芋受正Rfi品JB霸知識(shí)點(diǎn)二單克隆抗體的制備V自孩截材務(wù)基減1.1.傳統(tǒng)抗體

5、的制備向動(dòng)物體內(nèi)注射丸區(qū)，使之產(chǎn)生抗體 方法 G GI I 從動(dòng)物血清中分離抗體缺點(diǎn)：產(chǎn)量低、純度低、特異性差。2.2.單克隆抗體的制備過程返回(3)(3)制備過程:(4)(4)單克隆抗體的特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備。單克隆拡僂的應(yīng)用：1.1. 為什么要對(duì)小鼠注射抗原？提示：以獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的 B B 淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)。2.2. 根據(jù)單克隆抗體制備過程思考下列問題：(1)(1)制備單克隆抗體時(shí)，為什么要選用 B B 淋巴細(xì)胞和骨髓瘤 細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞？(2)B(2)B 淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)聚乙二醇處理后，培養(yǎng)液中 存在哪幾種細(xì)胞？尊重知識(shí)產(chǎn)權(quán)*(2)(2)解決思驕霍黨

6、罷蠶嬲高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。： !思考探究(3)(3)選擇雜交瘤細(xì)胞的兩步篩選的目的各是什么?尊重知識(shí)產(chǎn)權(quán)*芋受正Rfi品JB提示：(1)(1)每一個(gè) B B 淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體，但 不能無(wú)限增殖；骨髓瘤細(xì)胞可大量快速增殖，卻不能產(chǎn)生抗體。 若將兩種細(xì)胞融合在一起，既能產(chǎn)生一種特異性抗體又能快速 增殖。未融合的 B B 淋巴細(xì)胞、未融合的骨髓瘤細(xì)胞、B-BB-B 融 合細(xì)胞、瘤一瘤融合細(xì)胞、B B瘤融合細(xì)胞。(3)(3)第一步篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞；第二步篩選的 目的是獲得能產(chǎn)生所需單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。緣St名轉(zhuǎn)MM.4J1-1-血清抗體與單克隆抗體的比較尊重知識(shí)產(chǎn)權(quán)*返回

7、名稱產(chǎn)生特點(diǎn)血清抗體由 B B淋巴一般從血清中分離，產(chǎn)量低、純度低、特異性差單克隆抗體由雜交瘤特異性強(qiáng)、大量返回2.2.制備單克隆抗體過程中兩次篩選的目的不同(1)(1)第一次篩選是將未融合的 B B 淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞以及B BB B 融合、瘤一瘤融合的細(xì)胞通過選擇培養(yǎng)基淘汰，篩選出雜 交瘤細(xì)胞。(2)(2)第二次篩選是將產(chǎn)生特定抗體的B B瘤細(xì)胞通過細(xì)胞培 養(yǎng)用相應(yīng)抗原檢測(cè)的辦法篩選出來(lái)。因?yàn)閺捏w內(nèi)取免疫過的 B B 淋巴細(xì)胞時(shí)會(huì)取出很多種，形成的雜交瘤細(xì)胞有很多種，所以需篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。尊童知識(shí)產(chǎn)權(quán)正Rf品質(zhì)尊童知識(shí)產(chǎn)權(quán)正Rf品質(zhì)尊霎知1R產(chǎn)權(quán)*手受正Rfi品質(zhì)細(xì)胞融合

8、【例 1J1J 下列對(duì)植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較,描述正確的是( )A.A.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同, 誘導(dǎo)融合的方法也完全相同B.B.兩者都可以跨越種屬間的生殖隔離，突破有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能C.C.利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù)，為試管嬰兒的誕生開辟了新途徑精講精析A A 項(xiàng)中動(dòng)物細(xì)胞融合可用滅活的病毒誘導(dǎo)， 而植物原生質(zhì)體是不能的；C C 項(xiàng)中雜交瘤技術(shù)是細(xì)胞工程技術(shù), 而試管嬰兒則是胚胎工程內(nèi)容；D D 項(xiàng)生物性狀的體現(xiàn)是基因型 與環(huán)境共同作用的結(jié)果，“超級(jí)植物”具有兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì), 但性狀不一定能全部表達(dá)。答案B B考向一D

9、.D.目前科得到了同時(shí)具有兩個(gè)物種遺傳物質(zhì)的超級(jí)植物，并使它們的性思路點(diǎn)撥返回尊重知識(shí)產(chǎn)權(quán)*芋受正 h 品JB動(dòng)、植物細(xì)胞融合技術(shù)的比較動(dòng)、 植物細(xì)胞融合技術(shù)基本原理相同， 都是細(xì)胞膜的流動(dòng) 性；誘導(dǎo)融合的方法基本類似。不同點(diǎn)是：植物細(xì)胞融合前 需先去掉細(xì)胞壁；動(dòng)物細(xì)胞融合除物理法、化學(xué)法外，還用 到生物方法，即滅活病毒；培養(yǎng)基成分不同，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 是用液體培養(yǎng)基，其成分中有動(dòng)物血清。另外還有培養(yǎng)目的和 結(jié)果等方面的區(qū)別。返回尊重知識(shí)產(chǎn)權(quán)*芋受正 h 品JB考向二V單克隆抗體的制備例 2 2下圖是制備分泌抗 X X（H1N1H1N1 流感病毒）抗體的過程,刪鍛鷲常臨牒挪.歸納拓展根據(jù)圖解I祀

10、玄外給界塔中只 有雜交生長(zhǎng)5?銃搜|返回(1)(1) 給力、鼠注射抗原的目的是_ O O(2)(2) 在單克隆抗體制備過程中之所以選用 B B 淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有_ 的特性。由曲g g 中可看出，單克隆抗體制備過程運(yùn)用了和_ 的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段。(4)(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī) 鹽、維生素等，與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是還含有(5)(5)在動(dòng)物細(xì)胞融合過程中，需要將所選取的組織細(xì)胞分散開，以利于細(xì)胞融合，可用_ 處理離體組織細(xì)胞使之分散。(6)(6) 圖中有兩次篩選過程，其中步驟的目的是篩選出步驟的目的是篩選出_o o(7)(

11、7) 請(qǐng)根據(jù)以下信息，設(shè)計(jì)一方法(不考慮機(jī)械方法)，從培 養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細(xì)胞。已知細(xì)胞合成 DNADNA 有 D D 和 S S 兩條途 徑，其中 D D 途徑能被氨基嚓吟阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種 DNADNA 的合成途徑，但一般不分裂增殖；鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管只 有 D D 途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合， 加入聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。方法：_o尊童知識(shí)產(chǎn)權(quán)*亭受正返回原理：_O O尊童知坯產(chǎn)權(quán)*手受正Rfi品質(zhì)思路點(diǎn)撥精講精析】(1)(1)根據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理，用特定 抗原刺激，小鼠體內(nèi)便可產(chǎn)生能產(chǎn)生特定抗體的漿細(xì)胞，即可 獲得相應(yīng)的 B B 淋巴細(xì)胞。(

12、2)(2)雜交瘤細(xì)胞具有兩種細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，既能產(chǎn)生特定的抗體，又能無(wú)限增殖。(3)(3)從圖中看出，單克隆抗體技術(shù)實(shí)際是應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞融 合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。返回尊童知坯產(chǎn)權(quán)*手受正Rfi品質(zhì)(5)(5) 細(xì)胞融合時(shí)是單個(gè)細(xì)胞和單個(gè)細(xì)胞的融合， 為將細(xì) 胞從動(dòng)物組織中離散，可用胰蛋白酶處理。(6)(6)在單克隆抗體制備過程中，由于從小鼠體內(nèi)提取的 B B 淋巴細(xì)胞可能有多種，以及細(xì)胞融合方式有多種，從而產(chǎn)生 多種融合細(xì)胞以及多種雜交瘤細(xì)胞，因此需多次篩選。從圖中可看出，是用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，是篩 選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。(7)(7)據(jù)題干信息可知，可在培養(yǎng)液中加入氨基嚓吟

13、，使 D D合成途徑阻斷，僅有 D D 合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞不能增殖，而 B B 淋巴細(xì)胞一般不增殖，但人淋巴細(xì)胞 和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的 S S 途返回徑合成 DNADNA 而增殖。返回答案(1)(1)獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的 B B 淋巴細(xì)胞(2)(2) 既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體(3)(3) 動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(4)(4) 動(dòng)物血清 胰蛋白酶(6)(6) 雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞(7)(7) 方法：培養(yǎng)液中加入氨基嚓吟，收集增殖的細(xì)胞途徑的骨髓瘤細(xì)胞及使其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人的淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用 B B 淋巴細(xì)胞/拓農(nóng)軻修單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和 B B 淋巴細(xì)胞融合 后，要用特定的培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上 不能存活增殖的細(xì)胞是()B B 淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B B 淋巴細(xì)胞自身融 合細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞A.A.B.B.尊重知識(shí)產(chǎn)權(quán)原理:加入氨基嚓吟后,使 D D 合成途徑阻斷，僅有 D D 合成中的尊重知識(shí)產(chǎn)權(quán)返回C.C.D.