水質(zhì)檢測(cè)操作過(guò)程最新修訂版

1、 水質(zhì)檢測(cè)操作過(guò)程 版） （最新修訂 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法-水化學(xué) 項(xiàng)目分析時(shí)間順序 實(shí)驗(yàn)室觀測(cè)指標(biāo)（按時(shí)間順序）： 1 氨氮 2磷酸鹽 3硝酸鹽 4亞硝酸鹽 5高錳酸鹽指數(shù) 6生化耗氧量 AAE 7懸浮物 8總氮、總磷 9總硬度 10溶氧 11硅酸鹽 另附：12磷含量測(cè)定 現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定水樣的溫度，透明度。 測(cè)定過(guò)程： 1透明度一塞氏盤(pán)法 參考文獻(xiàn)： 魏復(fù)盛水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法（第四版）M.北京：中國(guó)環(huán)境科學(xué)出版社，2002.101. A. 方法原理 透明度反映水體澄清程度。潔凈的水是透明的，當(dāng)水中存在懸浮物和膠體物質(zhì)時(shí)透明 度降低。地下水的透明度通常較高，但由于供水和環(huán)境條件不同，透

2、明度可能不斷變化。 與濁度相反， 水中懸浮物越多透明度越低。利用塞氏盤(pán)（ Scheii disc）法測(cè)定透明度的定 義是：將一個(gè)黑白圓盤(pán)沉入水中，岡 H 剛觀察不到該圓盤(pán)的深度即為水體的透明度（ Scheii depth）。 B. 儀器 透明度盤(pán)（塞氏盤(pán)）：直徑為200mm的圓板（通常用較厚的白鐵片剪成），圓板的上 面從中心平分為四部分，以黑漆和白漆相間涂布。圓板正中心開(kāi)小孔，下面加 1鉛錘，上 面系小繩， 繩上每10cm處用有色絲線或漆做深度標(biāo)記。 C. 步驟 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 在背光處將透明度盤(pán)平放入水中，逐漸下沉至恰恰不能看見(jiàn)盤(pán)面的白色時(shí)，測(cè)量盤(pán)面 所在深度，

3、即得透明度（ cm）。 注意：（1）背光讀取透明度數(shù)值，需反復(fù)觀察 3 次，取平均值。 （2） 透明度盤(pán)長(zhǎng)期使用后盤(pán)面白漆顏色會(huì)變黃， 必須重新涂漆。 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)分析項(xiàng)目（按分析時(shí)間順序排列） 1 氨氮 納氏試劑法 A. 方法原理 氨氮（ NH 3-N ）包括游離態(tài)氨（ NH 3）或銨鹽（ NH 4+），兩者在水中的比例取決于水 溫和pH。當(dāng)pH高時(shí)，NH3的比例較高；反之NH4+的比例較高。水溫對(duì)NH3-N組成的影 響與 pH 相反。 碘化汞和碘化鉀（ KI ）的堿性溶液與 NH3-N 反應(yīng)生成淡紅棕色膠態(tài)化合物，此顏色 在較寬的波長(zhǎng)內(nèi)（通常測(cè)量用波長(zhǎng)在 410425nm）具有強(qiáng)烈吸收。 方法

4、精密度和準(zhǔn)確度：三個(gè)實(shí)驗(yàn)室分析含 1.141.16mg/L NH3-N的加標(biāo)水樣，單個(gè)實(shí) 驗(yàn)室的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不超過(guò) 9.5%；加標(biāo)回收率范圍為 95%104%。四個(gè)實(shí)驗(yàn)室分析含 1.813.06mg/L氨氮的加標(biāo)水樣，單個(gè)實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不超過(guò) 4.4% ;加標(biāo)回收率范 圍為 94%96% 。 B. 儀器和試劑 722 分光光度計(jì)（波長(zhǎng) 460 nm -760 nm） 無(wú)氨水： 每升蒸餾水中加0.1ml H2SO4,在玻璃蒸餾器中蒸餾，棄去50ml初餾液，接取 其余餾出液于具塞磨口玻璃瓶中，密塞保存。 注：無(wú)氨水不能長(zhǎng)期保存。 納氏試劑： 稱取20g KI，溶于約100ml水中，邊攪拌邊分

5、次少量加入二氯化汞（HgC結(jié)晶粉 末（約10g）,至出現(xiàn)不易溶解朱紅色沉淀。 另外稱取60g氫氧化鉀（KOH ），溶于水并稀釋至250ml，充分冷卻至室溫后，將上 述氯化汞和碘化鉀（ KI ）溶液在攪拌狀態(tài)下， 徐徐注入 KOH 溶液中，用水稀釋至 400ml， 混勻。靜置過(guò)夜。 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 將上清液（納氏試劑）移入聚乙烯瓶中，密塞保存。 酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6 4H2O）溶液：稱取酒石酸鉀鈉 50g,溶于100ml水中，加熱 煮沸以去除氨，冷卻后定容至 100ml。 銨標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：稱取3.8佃g在100C下干燥過(guò)的優(yōu)級(jí)純氯化銨（NH4CI），溶于水

6、中， 移入1000ml容量瓶中，定容。此溶液每毫升含 1.00mg NH3-N。 銨標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：移取 5.00ml銨標(biāo)準(zhǔn)貯備液到500ml容量瓶中，定容。此溶液每毫升 含 0.010mg NH3-N。 C. 測(cè)定步驟 （1） NH3-N 標(biāo)準(zhǔn)曲線 移取0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00ml銨標(biāo)準(zhǔn)使用液于 50ml比色管中，力卩 無(wú)氨水定容至標(biāo)線。向比色管中加入1.0ml酒石酸鉀鈉溶液，混勻。加入1.5ml納氏試劑， 混勻。 放置10min后， 在波長(zhǎng)420nm處，用光程20mm比色皿，以無(wú)氨水為參比，測(cè)量 吸光度。根據(jù)吸光度（x）和NH3-N含量（y: mg/L

7、）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，建立回歸方程：y=ax+b， 其中 a、 b 為常數(shù)。 注：（ 1）比色皿使用前需要進(jìn)行空白校正，樣品皿吸光度空白值 =樣品皿盛無(wú)氨水時(shí)的吸 光度 -參比皿盛無(wú)氨水時(shí)的吸光度。測(cè)量時(shí)以吸光度最低的比色皿做參比皿，以吸光度較 高的比色皿做樣品皿，樣品吸光度 =樣品皿吸光度 -參比皿吸光度 -樣品皿吸光度空白值。 （2）水樣NH3-N濃度受空氣中NH3影響很大，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不能存放氨水；另外，由于 水樣NH3-N濃度測(cè)定結(jié)果受環(huán)境影響較大，每次測(cè)定都應(yīng)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。 （ 2）水樣測(cè)定 將水樣搖勻，經(jīng)0.45 m濾膜過(guò)濾（過(guò)濾前先用水樣潤(rùn)洗過(guò)濾裝置，濾膜用前用無(wú)氨 水浸泡）后，取50ml水

8、樣于50ml比色管（用無(wú)氨水洗滌并避免空氣中 NH3溶入）定容 至標(biāo)線，加1.0 ml酒石酸鉀鈉溶液，加入1.5ml納氏試劑，放置10min后，在波長(zhǎng)420nm 處，用光程20 mm比色皿，以無(wú)氨水為參比，測(cè)量吸光度（步驟同標(biāo)準(zhǔn)曲線） （3）計(jì)算 將水樣吸光值（A）代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程y=ax+b計(jì)算出水樣的NH3-N濃度。 NH3-N（N： mg/L）=aA+b 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 2 磷酸鹽 磷酸鹽的測(cè)定鉬銻抗分光光度法 方法原理 在酸性條件下，正磷酸鹽與鉬酸銨，酒石酸銻氧鉀反應(yīng)，生成磷鉬雜多酸，被還原劑抗壞 血酸還原，則變成藍(lán)色絡(luò)合物，通常稱磷鉬藍(lán)。 儀器和化學(xué)試劑

9、 1. 分光光度計(jì) 2. （ 1+1）硫酸 3. 10% 抗壞血酸溶液： 溶解13g鉬酸銨 （ （NH4） 6MoO24 4H2O ） 于100ml水中。溶解0.35g酒石酸銻氧鉀 （K （SbO） C4H4O6 1/2H2O ）于 100ml 水中。 在不斷攪拌下， 將鉬酸銨溶液徐徐加到 300ml （1+1）硫酸中，加酒石酸銻氧鉀溶液并 且混合均勻。貯存在棕色玻璃瓶中約 4 C保存。 至少穩(wěn)定兩個(gè)月。 4. 濁度-色度補(bǔ)償液：混合兩份體積的（ 1+1）硫酸和一份體積的 10%抗壞血酸溶液。此 溶液當(dāng)天配制。 5. 磷酸鹽貯備液溶液： 將優(yōu)級(jí)純磷酸二氫鉀 （KH2PO4 ）于110 C干燥2

10、h,在干燥器中 放冷。稱取0.2197g溶于水，移入1000ml容量瓶中。加（1+1）硫酸5ml，用水稀釋至標(biāo) 線。此溶液每毫升含50.0ug磷（以P計(jì)）。 6. 磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液：吸取10.00ml磷酸鹽貯備液于250ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。 此 溶液每毫升含2.00ug磷。臨用時(shí)現(xiàn)配。 C 步驟 1. 校準(zhǔn)曲線的繪制 取數(shù)支 50ml 具賽比色管， 分別加入磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液 0， 0.50， 1.00， 3.00， 5.00， 10.0， 15.0ml，加水至 50ml。 顯色：向比色管中加入1ml 10%抗壞血酸溶液，混勻。30s后加2ml鉬酸鹽溶液充分混勻， 放置 15min。 測(cè)

11、量：用10mm或30mm比色皿，于700nm波長(zhǎng)處，以零濃度溶液為參比，測(cè)量吸光度。 2樣品測(cè)定： 分取適量經(jīng)濾膜過(guò)濾或消解的水樣（使含磷量不超過(guò) 30ug）加入50ml比色管中，用 水稀釋至標(biāo)線。以下按繪制校準(zhǔn)曲線的步驟進(jìn)行顯色和測(cè)量。減去空白實(shí)驗(yàn)的吸光度，并 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 從校準(zhǔn)曲線上查出含磷量。 計(jì)算 磷酸鹽（ P， mg/L）=m/V 式中 m 由校準(zhǔn)曲線查得的磷量（ ug）； V 水樣體積（ ml）。 D 注意事項(xiàng) 1. 如試樣中色度影響測(cè)量吸光度，需做補(bǔ)償校正。在 50ml 比色管中，分取與樣品測(cè)定相 同量的水樣，定容后加入 3ml 濁度補(bǔ)償液，測(cè)量

12、吸光度，然后從水樣的吸光度中減去校正 吸光度。 2. 室溫低于 13C 時(shí)，可在 20-30C 水浴中顯色 15min。 3. 操作所用的玻璃器皿，可用（1+5）鹽酸浸泡2h,或用不含磷酸鹽的洗滌劑刷洗。 4. 比色皿用后應(yīng)以稀硝酸或鉻酸洗液浸泡片刻， 以除去吸附的鉬藍(lán)有色物。 3 硝酸鹽銅鎘柱還原法 A. 方法原理 當(dāng)水樣通過(guò)一個(gè)鍍銅的鎘屑柱時(shí)， 海水中的硝酸鹽定量地被還原成亞硝酸鹽。生成的亞硝 酸鹽和對(duì)氨基苯磺酰胺重氮化并與 N（ 1萘基）乙二胺偶聯(lián)而形成一種深色能用分 光光度法測(cè)量的偶氮染料。用該法測(cè)定硝酸鹽時(shí)必須校正樣品中的亞硝酸鹽含量。 B. 儀器和化學(xué)試劑 722 分光光度計(jì) 50

13、ml具塞比色管 硝酸鹽還原柱：鎘-銅屑：將純金屬鎘銼成細(xì)屑，鎘屑應(yīng)能通過(guò)2mm篩孔而不通過(guò)0.5mm 篩孔。 將約100g銼屑（足夠兩個(gè)還原柱用）加入 500ml 2% （重量/體積）的硫酸銅 （CuSO4 5H2O）溶液，攪拌至溶液的藍(lán)色消失。將一小團(tuán)細(xì)銅絲（旋屑）置于還原柱底 部，將稀氯化銨溶液注入還原柱。注入漿糊狀鎘 -銅屑并緩慢地裝填至柱高約 30厘米。裝 柱時(shí)鎘-銅屑應(yīng)一直浸泡在稀氯化銨溶液中，不應(yīng)干涸。裝柱后在柱的頂端塞一小團(tuán)細(xì)銅 絲。用稀氯化銨溶液充分沖洗還原柱并輕敲柱壁來(lái)調(diào)節(jié)流速， 正常流速應(yīng) 100ml/8-12min， 若流速低于該值則需重新裝柱。 注：鎘-銅屑使用一段時(shí)間

14、后需活化：從柱中取出鎘 -銅屑，用 5% （體積/體積）鹽酸清洗， 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 然后用蒸餾水沖洗直至傾出液 pH5 。按上述方法用硫酸銅將鎘屑活化，裝柱。 濃氯化銨溶液： 將125g分析純氯化銨溶于500ml蒸餾水中。此溶液貯存在玻璃或塑料 瓶中。 稀氯化銨溶液：用蒸餾水將50ml濃氯化銨溶液稀釋至2000ml。此溶液貯存在玻璃或塑 料瓶中。 顯色劑： 在500ml燒杯中加入250ml水和50ml磷酸，加入20.0g對(duì)-氨基苯磺酰胺，將 1.00g N- （1-萘基）-乙二胺二鹽酸鹽 （C10H7NHC2H4NH2 2HCI ）溶于上述溶液中，轉(zhuǎn)移 至500m

15、l容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，混勻。此溶液貯于棕色瓶中，在 25C下保存，至 少可穩(wěn)定一個(gè)月。 注意：顯色劑有毒，避免與皮膚接觸或攝入體內(nèi)。 硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取在 105110C烘4h后的KNO30.7218g，加水溶解后稀釋至 1000ml （貯備液：氮濃度100用/ml）。取10ml貯備液，準(zhǔn)確稀釋至100ml （使用液：氮濃 度 10g/ml）o 50ml量筒等玻璃儀器。 C. 步驟 （1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制： 向6個(gè)50ml具塞比色管內(nèi)分別加入 0、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00ml硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使 用液，加水至標(biāo)線，混勻（硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的氮濃度分別為 0、 0.05

16、0、 0.100、 0.200、 0.300、0.400mg/L）。分別向每個(gè)比色管中加入1.0ml濃氯化銨溶液，搖勻。 將比色管內(nèi)的溶液加入還原柱中，先加入約 5ml，使其通過(guò)還原柱，然后將剩余的溶液 加入柱中并用空比色管收集還原柱流出的液體，將最初收集的約 10ml 液體棄去，再收集 25mlo將還原柱內(nèi)多余液體排放盡后再加下一個(gè)樣品。 注意：過(guò)還原柱時(shí)液面不能低于銅絲，且測(cè)定的空白和標(biāo)準(zhǔn)樣品應(yīng)用同一個(gè)還原柱，過(guò)柱 流速應(yīng)一致。 在收集的經(jīng)過(guò)還原柱的溶液中分別加入 0.5ml顯色劑，密塞，混勻。靜置20min后，在 2h內(nèi)以水為參比，測(cè)量吸光度（波長(zhǎng)543nm，比色皿光程10mm），繪制校

17、準(zhǔn)曲線：y=ax+b， 其中 a、 b 為常數(shù)。 注：測(cè)定前先對(duì)比色皿進(jìn)行校正。 （ 2）水樣測(cè)定： 將水樣搖勻后經(jīng)0.45 m濾膜過(guò)濾 （濾器使用前先用水樣潤(rùn)洗一遍），取50ml過(guò)濾水樣于 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 50ml 比色管中（水樣中硝酸鹽含量較高，則進(jìn)行適度稀釋） ， 每個(gè)比色管中分別加 1.0ml 濃氯化銨溶液，搖勻。過(guò)還原柱，測(cè)定吸光度。 （3）計(jì)算 將水樣的吸光值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，求出總亞硝酸鹽氮含量，用總亞硝酸鹽含量減去水樣 中的亞硝酸鹽氮含量即得硝酸鹽氮含量。計(jì)算方法如下： （ NO3-N+ NO2-N ）（ N：mg/L）=aA+b NO3-N（N：

18、mg/L）=（NO3-N+ NO2-N ）- NO2-N 4 亞硝酸鹽 N（ 1萘基）乙二胺光度法 A. 方法原理 在磷酸介質(zhì)中（pH=1.80.3），亞硝酸鹽與對(duì)-氨基苯磺酰胺反應(yīng)生成重氮鹽， 再與N （1萘基）乙二胺偶聯(lián)生成紅色染料。在 540nm波長(zhǎng)處有最大吸收。 方法的精密度和準(zhǔn)確度：三個(gè)實(shí)驗(yàn)室分析含0.02570.0816 mg/L亞硝酸鹽氮加標(biāo)水樣， 單個(gè)實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不超過(guò) 9.3%；加標(biāo)回收率為 90%114%。 五個(gè)實(shí)驗(yàn)室分析含 0.0830.18mg/L 亞硝酸鹽氮加標(biāo)水樣，單個(gè)實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不超過(guò) 2.8%；加標(biāo)回 收率為 96%102%。 B. 儀器和化學(xué)試

19、劑 722 分光光度計(jì) 去亞硝酸鹽水： （ 1）在蒸餾水中加入少許高錳酸鉀晶體（呈紅色） ，再加氫氧化鋇（或 氫氧化鈣）使呈堿性。在玻璃蒸餾器內(nèi)蒸餾，棄去 50ml 初蒸液，收集中間約 70%不含錳 的餾出液?；颍?）在每升蒸餾水中加1ml濃硫酸和0.2ml硫酸錳溶液（每100ml水中含 36.4gMnSO4 H2O）,加入13ml0.04%高錳酸鉀溶液至呈紅色，重蒸餾。 磷酸 （1.70g/ml） 顯色劑：在500ml燒杯中加入250ml水和50ml磷酸，加入20.0g對(duì)-氨基苯磺酰胺，將 1.00g N- （1-萘基）-乙二胺二鹽酸鹽（C10H7NHC2H4NH2 2HCI ）溶于上述溶液

20、中，轉(zhuǎn)移至 500ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，混勻。此溶液貯于棕色瓶中，在 25C下保存，至少 可穩(wěn)定一個(gè)月。 注意：顯色劑有毒，避免與皮膚接觸或攝入體內(nèi)。 高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液（1/5KMnO 4） =0.050mol/L:溶解1.6g高錳酸鉀于1200ml水中，煮 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 沸0.51h,使體積減少到1000ml左右， 放置過(guò)夜。 用 G-3號(hào)玻璃砂芯濾器過(guò)濾后，濾液 貯存于棕色試劑瓶中避光保存，并進(jìn)行標(biāo)定。 草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（1/2Na2C2O4）=0.0500mol/L:溶解經(jīng)105C烘干2h的優(yōu)級(jí)純無(wú)水草酸 鈉3.350g于750ml水中，移入1000

21、ml容量瓶定容。 亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液：稱取1.232g 亞硝酸鈉（NaN02），溶于150ml水中，轉(zhuǎn)移至1000ml 容量瓶中，定容至標(biāo)線（貯備液）。每毫升貯備液約含0.25mg亞硝酸鹽氮。貯備液亞硝酸 鹽氮濃度需要標(biāo)定。標(biāo)定方法如下： 在300ml具塞錐形瓶中加入 50.00ml 0.050mol/L的高錳酸鉀溶液，5ml濃硫酸，用50ml 移液管加入 50.00ml 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液（移液時(shí)移液管下端插入高錳酸鉀溶液液面下） ， 輕輕搖勻。在水浴中加熱至 7080C，用移液管加入草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液（每次加入 10.00ml, 直至紅色褪去），記錄草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量（V2）。用高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)

22、溶液滴定過(guò)量草酸鈉 至溶液呈微紅色，記錄高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液總用量（ W）。用50ml水代替亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯 備液，重復(fù)上述操作。 高錳酸鉀的濃度（C1）用草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定： C1 （1/5KMnO 4） =0.0500 V4/V3 標(biāo)準(zhǔn)貯備液中亞硝酸鹽氮濃度按下式計(jì)算： NO2-N （N : mg/L） = （V1C1-0.0500 V2）X7.00 M000/50.00 =140 V1C1-7.00 V2 式中：C1高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（mol/L）; V1滴定亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液時(shí)加入高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液總量（ml）; V2滴定亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液時(shí)加入草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液總量（ml）； V3滴定水

23、時(shí)加入高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液總量 （ml） ； V4滴定空白時(shí)加入草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液總量 （ml） ； 7.00 亞硝酸鹽氮 （1/2N） 的摩爾質(zhì)量 （g/mol）; 50.00亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液取用量（ ml）； 0.0500草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（ 1/2Na2C2O4， mol/L）。 亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)中間液：取 50.00ml亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液 （含 12.5ml亞硝酸鹽氮）， 準(zhǔn)確稀釋至250ml容量瓶中。每毫升中間液中含 50.0曲亞硝酸鹽氮。 注：中間液貯于棕色瓶?jī)?nèi)，在 25C保存，可穩(wěn)定一周。 亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液： 取10.00ml亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)中間液,置于500ml容量瓶中定容。 水

24、產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 每毫升使用液含1.00 亞硝酸鹽氮。 使用液使用當(dāng)天配置。 C. 步驟 （1） 繪制曲線：在 6支50ml比色管中，分別加入 0、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00ml 亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液，用不含亞硝酸鹽的水稀釋至標(biāo)線。加入 1.0ml顯色劑，加塞，混 勻。靜置20min。在2h內(nèi)以水為參比，測(cè)量吸光度（波長(zhǎng) 540nm，比色皿光程10mm）， 繪制校準(zhǔn)曲線：y=ax+b，其中a、b為常數(shù)。 注：測(cè)定前先對(duì)比色皿進(jìn)行校正。 （2） 水樣測(cè)定： 將水樣搖勻后經(jīng) 0.45 m濾膜過(guò)濾 （濾器使用前先用水樣潤(rùn)洗一遍） ， 取 50ml 過(guò)

25、濾水樣于 50ml 比色管中 （水樣中硝酸鹽含量較高， 則進(jìn)行適度稀釋） ，每個(gè)比色 管中分別加1.0ml顯色劑， 搖勻。 靜置20min。在2h內(nèi)以水為參比，測(cè)量吸光度。 （ 3）計(jì)算 將水樣的吸光值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，求出亞硝酸鹽氮含量。計(jì)算方法如下： NO2-N（ N： mg/L） =aA+b 5 高錳酸鹽指數(shù) 酸性高錳酸鉀法 A. 方法原理 加入硫酸使水樣呈酸性后加入一定量的高錳酸鉀溶液， 在沸水浴中加熱反應(yīng)一定的時(shí) 間，利用高錳酸鉀氧化水樣中有機(jī)物。加入過(guò)量草酸鈉溶液還原剩余的高錳酸鉀，用高錳 酸鉀溶液回滴過(guò)量的草酸鈉，計(jì)算求出高錳酸鹽指數(shù)。高錳酸鉀指數(shù)是一個(gè)相對(duì)的條件性 指標(biāo)，其測(cè)定

26、結(jié)果與溶液的酸度、高錳酸鹽濃度、加熱溫度和時(shí)間有關(guān)。因此測(cè)定時(shí)必須 嚴(yán)格控制條件以使結(jié)果具有可比性。 方法的適用范圍： 適用于氯離子含量不超過(guò) 300mg/L 的水樣。當(dāng)水樣的高錳酸鹽指數(shù) 值超過(guò)10mg/L時(shí)則酌情分取少量試樣， 并用水稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。 方法的精密度和準(zhǔn)確度：五個(gè)實(shí)驗(yàn)室分析高錳酸鹽指數(shù)為4.0mg/L的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液， 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 4.2%； 實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 5.2%。 B. 儀器與化學(xué)試劑 50ml酸式滴定管 250ml錐形瓶 沸水浴、調(diào)溫電爐 定時(shí)鐘 10 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 高錳酸鉀貯備液(1/5KMnO4 =0.1mol

27、/L):溶解3.2g高錳酸鉀于1200ml水中，煮沸0.51h, 使體積減少到 1000ml 左右，放置過(guò)夜。用 G-3 號(hào)玻璃砂芯濾器過(guò)濾，濾液貯存于棕色試 劑瓶中避光保存(貯備液)。貯備液使用前用0.1000mol/L的草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)定濃度。 高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(1/5KMnO 4=0.01mol/L)：吸取100ml的高錳酸鉀貯備液， 用水稀釋 至1000ml (標(biāo)準(zhǔn)溶液)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為0.01mol/L，貯于棕色瓶中，使用當(dāng)天標(biāo)定。 草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液(1/2Na2C2O4=0.1000mol/L):在10511OC烘優(yōu)級(jí)純無(wú)水草酸鈉 1h 后冷卻，準(zhǔn)確稱取0.6705g,溶于水中，在1

28、00ml容量瓶中定容(貯備液)。 草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液(1/2Na2C2O4=0.0100mol/L):吸取10.00ml草酸鈉貯備液于 100ml 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。 ( 1+3)硫酸：按體積比配制，趁熱滴加高錳酸鉀溶液至呈微紅色。 C. 步驟 (1) 將水樣搖勻，取100ml水樣(如高錳酸鉀指數(shù)高于10mg/L，則應(yīng)進(jìn)行稀釋)于250ml 的錐形瓶中。 注 水樣有機(jī)質(zhì)較多時(shí)，如稀釋倍數(shù)太小，加熱后溶液可能失去淡紅色(高錳酸鉀被消耗 完)， 這時(shí)無(wú)法繼續(xù)測(cè)定。 (2) 加入5ml (1 + 3)硫酸，混勻。 (3) 加入10.00ml 0.01mol/L高錳酸鉀溶液，搖勻，立即放入沸水浴

29、中加熱 30min (沸水 浴液面要高于反應(yīng)溶液的液面，從水樣沸騰起計(jì)時(shí)) 。 注 在水浴中加熱完畢后水樣應(yīng)保持淡紅色，如顏色變淺或全部褪去說(shuō)明高錳酸鉀用量不 夠。此時(shí)，應(yīng)將水樣稀釋倍數(shù)加大后再測(cè)定，使加熱氧化后殘留的高錳酸鉀應(yīng)為其加入量 的 1/21/3。 (4) 取下錐形瓶， 趁熱加入10.00ml 0.0100mol/L草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，搖勻。立即用0.01mol/L 高錳酸鉀溶液滴定水樣至微紅色，記錄高錳酸鉀溶液消耗量。 注：(1)在酸性條件下，草酸鈉和高錳酸鉀的反應(yīng)溫度應(yīng)保持在 6080C，所以滴定操作 必須趁熱進(jìn)行，若溶液溫度過(guò)低，需適當(dāng)加熱。 (2) 用0.01mol/L高錳酸鉀溶

30、液滴定水樣時(shí)顏色突變不很明顯，因此要特別注意顏色 變化。 (5) 高錳酸鉀溶液濃度標(biāo)定：將已滴完的水樣溶液加熱至約 70C，準(zhǔn)確加入10.00ml草 酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.0100mol/L)，再用0.01mol/L高錳酸鉀溶液滴定至顯微紅色，記錄高錳 酸鉀溶液的消耗量，按下式求得高錳酸鉀溶液的校正系數(shù)( K) 11 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) K= 10.001V 式中： V 高錳酸鉀溶液消耗量（ ml） 若水樣需要稀釋時(shí)，應(yīng)取 100ml 水作為空白，空白測(cè)定步驟與水樣測(cè)定步驟相同。 注：高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液視水樣有機(jī)物含量而定，高錳酸鉀溶液的濃度不能太高或太低。 （6）計(jì)算 水

31、樣不經(jīng)過(guò)稀釋時(shí)： 高錳酸鹽指數(shù) （02, mg/L） = （10+Vi）K-10 MK$XI000/100 式中：Vi滴定水樣時(shí)，高錳酸鉀溶液的消耗量（ml）; K校正系數(shù)； M 草酸鈉溶液濃度（ mol/L）； 8氧（1/20）摩爾質(zhì)量。 水樣經(jīng)過(guò)稀釋時(shí)： 高錳酸 鹽指數(shù) （02 , mg/L） = （10+Vi）K-10 -（10+ Vo） K -10 M X8X1000/ V2 式中：Vo - 空白試驗(yàn)中高錳酸鉀溶液的消耗量（ml）; V2 分取水樣量 （ml）； C稀釋的水樣中含水的比值，例如，10.0ml水樣，加90ml水稀釋至100ml，則 C=0.90。 6 生化耗氧量 稀釋接種

32、法 A. 方法原理 生化需氧量（BOD）指在規(guī)定條件下（20CC培養(yǎng)5d）,微生物分解水中的某些可 氧化物質(zhì)，特別是有機(jī)物所進(jìn)行的生物化學(xué)過(guò)程中消耗溶解氧的量。此生物氧化全過(guò)程進(jìn) 行的時(shí)間很長(zhǎng)， 如在 20C下培養(yǎng)時(shí)完成此過(guò)程需 100多天。目前國(guó)內(nèi)外普遍規(guī)定是在 20CC下培養(yǎng)5d,分別測(cè)定樣品培養(yǎng)前后的溶解氧，二者之差即為BOD5 （毫克氧/升） B. 儀器和試劑 恒溫培養(yǎng)箱（20C C） 520L 細(xì)口玻璃瓶 10002000ml 量筒 玻璃攪棒： 棒底端固定一個(gè)直徑比量筒底小， 并帶有幾個(gè)小孔的硬橡膠板，棒長(zhǎng)度應(yīng)比 所用量筒高度長(zhǎng) 200mm。 250300m l溶氧瓶： 帶有磨口玻璃

33、塞并具有供水封用的鐘形口 12 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 虹吸管，供分取水樣和添加稀釋水用。 （15）稀釋水： 向520L玻璃瓶?jī)?nèi)加入一定量的稀釋水，控制水溫 20C左右， 用無(wú)油空氣壓 縮機(jī)或薄膜泵將吸入的空氣先后經(jīng)活性碳吸附管及水洗滌管后，導(dǎo)入稀釋水內(nèi)曝氣 28h （曝氣亦可導(dǎo)入適量純氧） ，使稀釋水中溶氧近飽和。稀釋水的 pH 值應(yīng)為 7.2， BOD5 應(yīng) 小于0.2mg/L。將瓶口蓋兩層洗滌晾干的紗布，置于 20C培養(yǎng)箱中放置數(shù)小時(shí)，使水中溶 氧含量達(dá) 8mg/L 左右。 C. 步驟 （1） 水樣預(yù)處理 水樣 pH 若超出 6.57.5時(shí)，可用稀鹽酸或氫氧化鈉溶液

34、調(diào)節(jié) pH 近 7，但鹽酸或氫 氧化鈉溶液用量不要超過(guò)水樣體積的 0.5%。若水樣的酸度或堿度很高，可改用高濃度的 堿或酸液進(jìn)行中和。 從水溫較低的水域或富營(yíng)養(yǎng)化湖泊中采集的水樣，可能含過(guò)飽和溶氧，此時(shí)應(yīng)將水 樣迅速升溫至20T左右，在不滿瓶的情況下充分振搖，并時(shí)時(shí)開(kāi)塞放氣，以趕出過(guò)飽和的 溶氧。從水溫較高的水域或廢水排放口取得的水樣， 應(yīng)迅速使其冷卻至20r左右并充分振 搖，使與空氣中氧分壓接近平衡。 （2） 水樣不需稀釋時(shí)測(cè)定 BOD： 溶解氧較高、有機(jī)物含量較少的地表水，可不經(jīng)稀釋而直接以虹吸法將約 20r的混 勻水樣轉(zhuǎn)入兩個(gè)溶氧瓶?jī)?nèi)，轉(zhuǎn)移過(guò)程中應(yīng)注意不產(chǎn)生氣泡。以同樣的操作使兩個(gè)溶氧瓶

35、充 滿水樣后溢出少許，加塞。瓶?jī)?nèi)不應(yīng)產(chǎn)生氣泡。 其中1瓶隨即測(cè)定溶氧，另2瓶的瓶口水封后放入培養(yǎng)箱中，在 20CC培養(yǎng)5 天。培養(yǎng)過(guò)程中注意添加封口水。 從開(kāi)始放入培養(yǎng)箱起算，經(jīng)過(guò) 5晝夜后，棄去封口水，測(cè)定溶氧瓶?jī)?nèi)的溶氧。 （3） 水樣需稀釋時(shí)測(cè)定 BOD： 稀釋倍數(shù)的確定：根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)提出下述計(jì)算方法，供稀釋時(shí)參考。 稀釋操作： 直接稀釋法：直接稀釋法是在溶解氧瓶?jī)?nèi)直接稀釋。 在已知兩個(gè)容積相同（其差1ml） 的溶解氧瓶?jī)?nèi)，用虹吸法加入部分稀釋水（或接種稀釋水）使剛好充滿，加塞，勿留氣泡 于瓶?jī)?nèi)。其余操作與上述一般稀釋法相同。 （ 4）計(jì)算 不經(jīng)稀釋直接培養(yǎng)的水樣： BOD5（mg/L）

36、= C1-C2 13 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 式中： C1 水樣在培養(yǎng)前的溶解氧濃度（ mg/L）； C2水樣經(jīng)5d培養(yǎng)后，剩余溶解氧濃度（mg/L）。 經(jīng)稀釋后培養(yǎng)的水樣： BOD5（mg/L） =（C1-C2）-（B1-B2）f1 /f2 式中： Bi稀釋水（或接種稀釋水）在培養(yǎng)前的溶解氧濃度（ mg/L）; B2稀釋水（或接種稀釋水）經(jīng)培養(yǎng)后的溶解氧濃度（ mg/L）； fi - 稀釋水（或接種稀釋水）在培養(yǎng)液中所占比例； f2水樣在培養(yǎng)液中所占比例。 注：fi, f2的計(jì)算：例如培養(yǎng)液的稀釋比為 3%，即3份水樣，97份稀釋水，則fi =0.97, f2=0.03

37、 。 注意事項(xiàng)： 玻璃器皿應(yīng)徹底洗凈：先用洗滌劑浸泡，然后用稀鹽酸浸泡，最后依次用自來(lái)水、蒸餾 水洗凈。 在兩個(gè)或三個(gè)稀釋比的樣品中， 凡消耗溶氧大于2mg/L和剩余溶氧大于img/L，計(jì)算結(jié) 果時(shí)，應(yīng)取平均值。若剩余溶氧小于 img/L，甚至為零時(shí)，應(yīng)加大稀釋比。溶氧消耗量小 于2mg/L，有兩種可能，一是稀釋倍數(shù)過(guò)大；另一種可能是微生物菌種不適應(yīng)，活性差， 或含毒物質(zhì)濃度過(guò)大。 這時(shí)可能出現(xiàn)在幾個(gè)稀釋比中稀釋倍數(shù)較大的消耗溶氧反而較多的 現(xiàn)象。 水樣稀釋倍數(shù)超過(guò)100倍時(shí)，應(yīng)預(yù)先在容量瓶中用水初步稀釋后，再取適量進(jìn)行最后稀 釋培養(yǎng)。 7 懸浮物 濾膜法 A. 方法原理 懸浮物即不可濾殘?jiān)?/p>

38、指水樣中不能通過(guò)濾器的物質(zhì)。測(cè)定懸浮物的方法是將水樣用 0.45 m濾膜過(guò)濾，將截留在濾器上的殘?jiān)?103105C下烘干2h至恒重時(shí)的含量。 B. 儀器 0.45 m孔徑的濾膜及相應(yīng)的濾器。 稱量瓶。 C. 步驟 14 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) (1)將0.45 m濾膜置稱量瓶中， 開(kāi)蓋在103105C下烘2h,蓋上蓋子放冷稱重，按以下 操作再烘干、稱重，直至恒重(兩次稱出的重量相差不超過(guò) 0.005mg)。 ( 2)將水樣除去樹(shù)枝、草、葉及其它明顯的漂浮異物，搖勻。分取適量水樣(使不可過(guò) 濾殘?jiān)笥?.5mg),用已恒重的濾膜過(guò)濾， 用純水沖洗3次，如果殘?jiān)嫌杏椭?，?/p>

39、石油 醚沖洗 23次。 (3) 將濾有殘?jiān)臑V膜小心取下，放入原稱量瓶中，按( 1)烘干、稱重，直至恒重。 (4) 計(jì)算： 懸浮物(mg/L) =(A-B) 106/V 式中： A殘?jiān)V膜及稱量瓶總重量(g); B濾膜及稱量瓶重(g); V取樣體積(ml)。 8 總氮、 總磷 過(guò)硫酸鹽氧化法 總氮總磷測(cè)定(操作簡(jiǎn)易版本實(shí)驗(yàn)操作按照此步驟) 該法 佃83年日本公布為測(cè)TN，TP的測(cè)定方法，Junko等人又做了改進(jìn)。 參考文獻(xiàn)： Junko Etina et al.， Water Res.， 17(21),1721,1983. 1 ) 原理： 60C 2K2S2O8+2H2O - 4KHSO4+

40、02 ? 1mol K2S2O8與1mol NaOH混合，初pH=12.57，反應(yīng)后pH=2.12，該法較凱氏法提 高效率 27 倍。 2) 試劑： a20g K2S2O8+3g NaOH， 1L 蒸餾水溶解。 b. 硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯液：0.7218g KNO4 1L容量瓶中定容，濃度：100 mg/L NO3N。 使用液：10ml貯液一 100ml容量瓶， 濃度10mg/L， 現(xiàn)用現(xiàn)配。 c. 磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯液：0.4394g KH2PO金1L容量瓶，加1： 1H2SO4后定容。濃度： 100 mg/L PO4P。 使用液：10ml貯液一 100ml容量瓶，濃度：10mg/L，現(xiàn)用現(xiàn)配。 d. 混

41、合試劑：12.5g (NH4) 6Mo7O24?4H2G 溶于 125ml 蒸餾水。 0.5gK (SbO) C4H4O6 (常 1/2 H2O 或無(wú)水)20ml 蒸餾水 15 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法-水化學(xué) 將鉬酸鹽溶液溶于350ml H2SO4中（4.5M ）,不斷攪拌，再加入酒石酸溶液混勻，貯 于玻璃瓶中，可穩(wěn)定數(shù)月。 e. 4.5M H2SO4 : 250ml濃H2S04750ml蒸餾水中，冷卻后定容至 1L。 f. 酸性抗壞血酸：10g抗壞血酸（C6H8O6） 50ml蒸餾水中，加4.5M H2SO4 50ml， 貯于冰箱中，穩(wěn)定一周，試劑無(wú)需重配。 3）測(cè)定步驟： a.按

42、下步驟依次取N，P標(biāo)準(zhǔn)液，加入50ml比色管中，用蒸餾水稀釋至25ml，再加 25ml氧化劑，加蓋搖勻，放入高壓鍋中與水樣一同消化。 1 2 3 4 5 6 7 氮使用 0 1 2 4 6 8 1 液 .0 .0 .0 .0 .0 0.0 濃度 0 0 0 0 1 1 2 (mgN/L) .2 .4 .8 .2 .6 .0 磷使用 0 0 0 1 2 3 4 液 .25 .50 .00 .00 .00 .00 濃度 0 0 0 0 0 0 0 (mgN/L) .05 .1 .2 .4 .6 .8 b. 吸取搖勻水樣25ml加25ml氧化劑高壓鍋中消化（115 C消化30分鐘），冷 卻后取出測(cè)定

43、。 c. 總N :以1cm石英比色皿，在 200-220nm （取入=210nm）處測(cè)吸光度。 d. 總P:取消化后樣品25ml，加1ml抗壞血酸，搖勻。1分鐘后，加混合試劑1ml 搖勻，20-40CF顯色30分鐘，在721 （710nm）處測(cè)吸光度。 （下述詳細(xì)步驟僅供參考） B.儀器與化學(xué)試劑 751型紫外-可見(jiàn)光分光光度計(jì) 50ml具塞比色管 16 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 高壓蒸汽滅菌器（可控溫120C, 9.814.7 N/cm2壓力）或一般民用壓力鍋 氧化劑：稱取20gK2S2O8和3gNaOH，溶于水中并稀釋至1000ml。 氮標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.7218g K

44、N03（ 105110C 4h）,加水溶解后稀釋至1000ml （貯備液）， 貯備液中含100yg/ml的氮。取貯備液10ml稀釋至100ml （氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液），使用液中 含10pg/ml的氮。 磷標(biāo)準(zhǔn)溶液： 準(zhǔn)確稱取 0.4394g經(jīng)105110C干燥的磷酸二氫鉀，溶于水后，加入 1ml （ 1+1 ） H2SO4 溶液，再用水稀釋定容至1000ml （磷貯備液），磷貯備液含100g/ml的磷。 用時(shí)取此磷磷 貯備液10ml準(zhǔn)確稀釋至100ml （磷標(biāo)準(zhǔn)溶液） ， 磷標(biāo)準(zhǔn)溶液中含10 pg/ml的磷。 硫酸一鉬酸銨氧銻鉀貯備液：量取 佃4.6ml濃硫酸，在連續(xù)攪拌下緩緩加到 405ml蒸餾

45、 水中，冷卻。稱取鉬酸銨（NH4MO7O24 4H2O）20g溶于300ml蒸餾水中。將上述硫酸溶液 在 連續(xù) 攪 拌條件下緩 緩加 入鉬 酸 銨溶 液中 ， 加入 100ml 0.5%的 酒石酸銻 鉀 K（SbO）C4H4O6 1/2H2O溶液，搖勻（硫酸一鉬酸銨氧銻鉀貯備液），保存于棕色瓶中。 顯色劑：量取100m l硫酸一鉬酸銨氧銻鉀貯備液，加入 1.5g抗壞血酸，溶解（顯色劑）。 顯色劑穩(wěn)定 4h 左右，使用前配制。 C. 步驟 （1） 氮、磷標(biāo)準(zhǔn)溶液：在7個(gè)50ml具塞比色管中，分別加入磷標(biāo)準(zhǔn)溶液（10pg/ml） 0、 1.0、 2.0、 3.0、 4.0、 5.0、 6.0ml

46、和氮標(biāo)準(zhǔn)溶液（ 10pg/ml） 0、 2.0、 4.0、 6.0、 8.0、 10.0、 12.0ml，加水至標(biāo)線，搖勻，此標(biāo)準(zhǔn)系列中磷含量分別為 1、4、8、12、16、20、24 pg； 氮含量為1、8、16、24、32、40、48 g。從上述每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液中分別吸取 20ml加入另外 準(zhǔn)備7個(gè)50ml具塞比色管，然后每個(gè)比色管中加入 20ml氧化劑溶液， 立即加蓋、 搖勻。 注： 消化用玻璃器皿要洗凈 （不含氮、磷） ，新比色管應(yīng)先用氧化劑溶液清洗一次，不要 用含磷洗衣粉及洗滌劑洗滌玻璃儀器。 （2） 吸取搖勻后的水樣20ml于50ml比色管中， 加入20ml氧化劑溶液， 立即加蓋搖勻。

47、 注： 氧化劑中K2S2O8和NaOH濃度分別為0.074mol/L和0.075mol/L,這是根據(jù)氧化原理 并經(jīng)過(guò)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)計(jì)算和反復(fù)試驗(yàn)得出的最佳濃度。 如果氧化劑中 NaOH 濃度增加， 磷的 氧化不完全；反之，如果 NaOH 濃度減少，則氮的氧化不完全。 （ 3）將上述盛有標(biāo)準(zhǔn)系列和水樣的比色管加塞，管口包一小塊紗布并用線扎緊（以免加 熱時(shí)玻璃塞沖出），放入高壓滅菌器中，加熱，放氣幾分鐘后關(guān)上氣閥，在 120C和 10.78N/cm2下氧化30min （達(dá)到指定溫度和壓力時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)），停止加熱，待壓力表指針 17 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 降至零后取出比色管，冷卻至

48、室溫。 注：（1） 一般民用壓力鍋在加熱至頂壓閥出氣孔冒氣時(shí)鍋內(nèi)溫度為 120C（ 1.1kg/ cm2）。 水樣與標(biāo)準(zhǔn)系列在120C下高壓氧化時(shí)，應(yīng)在達(dá)到預(yù)定溫度、壓力時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，以保證氧 化完全。一定要待高壓滅菌器冷卻至室溫后再慢慢開(kāi)蓋取出比色管，以免溶液沖開(kāi)瓶塞濺 出。 （ 2）所有用水均為無(wú)氨蒸餾水。 （ 3） 必要時(shí)所用過(guò)硫酸鉀需精制 （否則空白值高） ；精制過(guò)硫酸鉀時(shí)，往往需要溶解 再結(jié)晶兩次才能達(dá)到純度要求。 （ 4）每次測(cè)定水樣時(shí)要做標(biāo)準(zhǔn)曲線。 （4）總磷測(cè)定：分別取氧化過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)系列和水樣上清液 10ml于50ml的具塞比色管中， 加入 1 滴二硝基酚指示劑，用飽和碳酸鈉溶液和

49、 1mol/L 硫酸調(diào)至溶液呈淺黃色， 準(zhǔn)確加 入顯色劑2.5ml,加水至25mI刻度后搖勻， 置于2040C溫度下還原顯色 30min,在700nm 波長(zhǎng)處用3cm比色皿在分光光度計(jì)上以無(wú)氨水為參比測(cè)定吸光度（用空白作對(duì)照） 。 （ 5）總氮測(cè)定：由于氧化后水樣及標(biāo)準(zhǔn)系列的 pH 值均在 2 左右，所以可直接取出上清 液（少數(shù)不清潔水樣氧化后有少許沉淀產(chǎn)生），用在波長(zhǎng)200210nm處用1cm的石英比色 皿進(jìn)行總氮的測(cè)定（用空白作對(duì)照） 。 （6） 分別根據(jù)氮、 磷 （） 標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度繪制氮、磷標(biāo)準(zhǔn)曲線。 注：本方法如用751、721型光度計(jì)分別測(cè)定氮、磷，在氮含量達(dá)3.5mg/L,磷含

50、量達(dá)15mg/L 時(shí)，均在儀器測(cè)定范圍內(nèi)且回收率很好，一般湖泊水很少超過(guò)此測(cè)定范圍，如氮含量超過(guò) 3.5mg/L而小于20mg/L，磷含量超過(guò)3.5mg/L時(shí)，可以用空白適當(dāng)稀釋氧化液后再進(jìn)行測(cè) 定，先稀釋后氧化與先氧化后稀釋測(cè)定的結(jié)果一致。 （7） 計(jì)算：用水樣的吸光值代入所得的校準(zhǔn)曲線方程直接求水樣的磷營(yíng)養(yǎng)鹽濃度?；虬?以下公式計(jì)算： 總氮（ N， mg/L） =m1/20 總磷（ P， mg/L） =m2/20 式中： m1從氮校準(zhǔn)曲線上查得的總氮量（ ）； m2從磷校準(zhǔn)曲線上查得的總磷量（ ）； 20取樣體積（ ml）。 9 總硬度 EDTA 滴定法 18 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)

51、方法 - 水化學(xué) A. 方法原理 在pH=10條件下，用EDTA溶液絡(luò)合Ca2+和Mg2+。以鉻黑T為指示劑，鉻黑T與 Ca2+和Mg2+形成紫紅色或紫色溶液。滴定中，游離 Ca2+和Mg2+首先與EDTA反應(yīng)，然后 與鉻黑T結(jié)合的Ca2+和Mg2+與EDTA反應(yīng)，達(dá)到滴定終點(diǎn)時(shí)溶液顏色由紫色變?yōu)樘焖{(lán)色。 本方法適用于測(cè)定地下水和地表水中 Ca2+和Mg2+總量，但不適用海水等含鹽量高的 水。測(cè)定Ca2+和Mg2+最低濃度為0.05mmol/L。 本方法的重復(fù)性偏差為） .04mmol/L， 約相當(dāng)于2滴EDTA二鈉溶液。 B. 儀器和化學(xué)試劑 50ml酸式滴定管，分刻度至0.10ml 250

52、ml錐形瓶 氨性緩沖液：先稱取16.9g氯化銨，溶于143ml氨水， 再稱取0.78g硫酸鎂 （MgS04 7出0） 和1.179gEDTA二鈉二水合物（CioHi4N208Na2 2H2O）溶于50ml水，加入2ml配好的氯 化銨+氨水溶液和0.2g左右鉻黑T指示劑干粉，此時(shí)溶液應(yīng)顯紫紅色，如出現(xiàn)天藍(lán)色，應(yīng) 加入極少量硫酸鎂使變?yōu)樽霞t色。逐滴加入 EDTA 二鈉溶液直至溶液由紫紅變?yōu)樘焖{(lán)色 （切勿過(guò)量）。將兩溶液合并，加蒸餾水定容至 250ml （如合并后溶液又轉(zhuǎn)為紫色，在計(jì) 算結(jié)果時(shí)應(yīng)減去試劑空白） 。 EDTA二鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（10mmol/L）:將EDTA二鈉二水合物在 80C干燥2h,放

53、入干 燥器中冷卻至室溫，稱取 3.725g溶于水，在容量瓶中定容至 1000ml。標(biāo)準(zhǔn)溶液盛在聚乙 烯瓶中，定期標(biāo)定濃度。 EDTA 二鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定：用鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定。取 20.00ml 鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋至 50ml 后用 EDTA二鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。EDTA二鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 0（ mol/L）用下式計(jì)算： C1=C2 V2/V1 式中：C2鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mmol/L）; V2鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（ml）; V1標(biāo)定中消耗的EDTA二鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積（ml）。 10mmol/L鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液：將碳酸鈣（CaCOs）在150C干燥2h,取出，放在干燥器中冷 至室溫，稱取1.000g碳酸鈣于50ml錐形

54、瓶中，用水潤(rùn)濕，逐滴加入 4mol/L鹽酸至碳酸 鈣全部溶解（避免酸過(guò)量） 。加 200ml 水，煮沸數(shù)分鐘驅(qū)除二氧化碳，冷至室溫，加入數(shù) 滴甲基紅指示劑溶液（0.1g溶于100ml60%乙醇），逐滴加入3mol/L氨水至變?yōu)槌壬?，?容量瓶中定容至1000ml。此溶液1.00ml含0.4008mg （0.01mmol/L）鈣。 19 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 鉻黑T指示劑：將0.5g鉻黑T溶于100ml三乙醇胺（最多可用25ml乙醇代替三乙醇胺 以減少溶液粘性） ，盛放在棕色瓶中。 或者配成鉻黑T指示劑干粉： 稱取0.5g鉻黑T與100g 氯化鈉（ NaCl ） ，充分混

55、合，研磨后通過(guò) 4050目篩，盛放在塞緊的棕色瓶中。 三乙醇胺（CH2CH2OH）3） C. 步驟 （1）用量筒量取50.0ml水樣于250ml錐形瓶中，加4ml緩沖液和3滴鉻黑T指示劑溶液 （或約50100mg鉻黑T指示劑干粉），此時(shí)溶液應(yīng)呈紫紅或紫色，pH值應(yīng)為10.0 .1。 （ 2）在不斷振搖下（防止產(chǎn)生沉淀）滴加 EDTA 二鈉溶液，開(kāi)始時(shí)滴定速度宜稍快，接 近終點(diǎn)時(shí)稍慢（每滴間隔時(shí)間最好為 23S），溶液顏色由紫紅或紫色逐漸轉(zhuǎn)為藍(lán)色（最后 一點(diǎn)紫色調(diào)消失剛出現(xiàn)天藍(lán)色時(shí)即為終點(diǎn)） 。整個(gè)滴定過(guò)程應(yīng)在 5min 內(nèi)完成。 注：滴定結(jié)果與緩沖液有很大的關(guān)系，緩沖液的配制一定要符合要求。通

56、過(guò)標(biāo)準(zhǔn)鈣溶液檢 驗(yàn)指示劑及緩沖液是否符合要求。 （3）計(jì)算：鈣和鎂的總量 C（ mmol/L）用下式計(jì)算： C=C1 V1/V0 式中： C1 EDTA 二鈉溶液的濃度（ mmol/L）； V1滴定中消耗EDTA二鈉溶液的體積（ml）; Vo試樣體積（ml）。 如試樣經(jīng)過(guò)稀釋，采用稀釋因子 F 修正計(jì)算。 1mmol/L的鈣鎂總量相當(dāng)于100.1mg/L以CaCO3表示的硬度。1德國(guó)硬度相當(dāng)于CaO 含量為 10mg/L 或?yàn)?0.178mmol/L。 10溶氧一碘量法 參考文獻(xiàn)： 魏復(fù)盛冰和廢水監(jiān)測(cè)分析方法（第四版）M.北京：中國(guó)環(huán)境科學(xué)出版社,2002.201-202. A 方法原理 水樣

57、中加入硫酸錳和堿性 KI ， 水中溶氧將低價(jià)錳氧化成高價(jià)錳， 生成四價(jià)錳的氫氧化 物棕色沉淀。加酸后氫氧化物沉淀溶解并與碘離子反應(yīng)釋放出游離碘。以淀粉作指示劑， 用硫代硫酸鈉滴定釋放出的碘，計(jì)算溶氧含量。 B. 儀器與化學(xué)試劑 250300ml溶氧瓶 20 水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法 - 水化學(xué) 硫酸錳溶液： 稱取 480g硫酸錳(MnSO4 4H2O)或364g (MnSO4 H2O)溶于水，用水 稀釋至1000ml。此溶液加至酸化過(guò)的碘化鉀溶液中，遇淀粉不得產(chǎn)生藍(lán)色。 堿性碘化鉀溶液：稱取 500g氫氧化鈉溶于300400ml水中，另稱取150g碘化鉀溶于 200ml水中，待氫氧化鈉

58、溶液冷卻后將兩溶液合并， 混勻，用水稀釋至1000ml。如有沉淀, 則放置過(guò)夜后，傾出上清液。貯于棕色瓶中，用橡皮塞塞緊，避光保存。此溶液酸化后， 遇淀粉不應(yīng)呈藍(lán)色。 1+3)硫酸溶液 1%淀粉溶液：稱取1g可溶性淀粉，用少量水調(diào)成糊狀，再用剛煮沸的水沖稀至100ml 冷卻后加入 0.1g 水楊酸或 0.4g 氯化鋅防腐。 重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液 C (1/6K262O7) 0.0250mol/L:稱取10511OC烘干2h并冷卻的優(yōu) 級(jí)純重鉻酸鉀1.2258g,溶于水， 移入1000ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻。 硫代硫酸鈉溶液：稱取 3.2g硫代硫酸鈉(Na2S2O3 5H2O)溶于煮沸放

59、冷的水中，加入 0.2g碳酸鈉，用水稀釋至1000ml。貯于棕色瓶中，使用前用0.0250mol/L重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶 液標(biāo)定， 標(biāo)定方法如下：于 250ml 碘量瓶中，加入 100ml 水和 1g 碘化鉀，加入 10.00ml0.0250mol/L重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液、5ml (1+5)硫酸溶液，密塞，搖勻。于暗處?kù)o置 5min 后，用硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈淡黃色，加入 1ml 淀粉溶液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色 剛好褪去為止，記錄用量。 M=10.00 O0250/V 式中：M硫代硫酸鈉的濃度(mol/L); V滴定時(shí)消耗硫代硫酸鈉溶液的體積(ml )。 C. 步驟 ( 1)取水樣：在取樣現(xiàn)場(chǎng)將采水器出

60、水管插入溶氧瓶近瓶底處，緩緩放入水樣，待水樣 溢出溶氧瓶約 2-3倍體積后，在保持流水的狀態(tài)下，慢慢將水管提出，迅速蓋上瓶蓋。 注意：溶氧瓶?jī)?nèi)不能出現(xiàn)氣泡。 (2)固定：用吸管插入溶氧瓶的液面下，加入 1ml 硫酸錳溶液、 2ml 堿性碘化鉀溶液， 蓋好瓶塞(溶氧瓶?jī)?nèi)不能有氣泡) ，顛倒混合數(shù)次，靜置。待棕色沉淀物降至瓶?jī)?nèi)一半時(shí)， 再顛倒混合一次，待沉淀物下降到瓶底。 ( 3)析出碘：輕輕打開(kāi)瓶塞，立即用吸管插入液面下加入 2.0ml 硫酸。小心蓋好瓶塞， 顛倒混合搖勻至沉淀物全部溶解，放置暗處 5min。 (4) 滴定：移取100.0ml上述溶液于250ml錐形瓶中，用硫代硫酸鈉溶液滴定至溶